理冲汤对子宫肌瘤模型大鼠血清激素水平及组织病理改变的影响

目的观察理冲汤对子宫肌瘤模型大鼠血清激素水平和病理改变的影响,探讨理冲汤治疗子宫肌瘤的可能机制。方法采用雌、孕激素共同注射的方法建立大鼠子宫肌瘤模型。将大鼠分为正常对照组、模型对照组、理冲汤大剂量组,理冲汤小剂组、两药对照组。各组灌胃给药4周后心脏取血,采用放射免疫法检测血清性激素水平,HE染色镜下观察大鼠子宫平滑肌病理改变。结果模型对照组大鼠血清E2、P、LH水平较正常对照组显著升高;灌胃给药后,理冲汤大剂量组、理冲汤小剂量组E2、P、LH水平明显降低;但理冲汤对血清FSH水平的影响各组间比较无显著性差异。光学显微镜下观察模型对照组大鼠子宫平滑肌增生、肌层增厚,肌细胞排列紊乱。理冲汤大剂组平滑肌层较厚,肌细胞排列整齐,胞核呈长梭形或杆状,核仁不清。理冲汤小剂组平滑肌层较薄,肌细胞排列整齐,胞核呈长梭形或杆状,核仁不清。结论理冲汤能明显降低E2、P、LH水平,并能改善子宫平滑肌的病理状态,提示理冲汤治疗子宫肌瘤的作用机制可能与调节内分泌、改善子宫平滑肌的病理状态有关。     

从细胞外基质成分变化研究理冲汤对子宫肌瘤模型大鼠的影响

目的从细胞外基质成分变化研究理冲汤对子宫肌瘤模型大鼠的影响。方法采用雌孕激素双重造模法,制备大鼠子宫肌瘤模型。以放免法、SP免疫组化法和蛋白印迹技术,观察理冲汤对子宫肌瘤模型大鼠细胞外基质成分的影响。结果与正常对照组比较,模型对照组子宫肌瘤大鼠血清层粘连蛋白(laminin,LN)含量明显升高,子宫肌瘤组织细胞外基质主要成分Ⅳ型胶原表达明显增多(P0.05)。与模型对照组比较,理冲汤高低剂量组血清LN含量、子宫组织Ⅳ型胶原表达显著减少(P0.05)。结论子宫肌瘤的发生与细胞外基质代谢异常有关,理冲汤通过调控血清LN含量和子宫组织Ⅳ型胶原的表达,进而抑制肌瘤的生长。     

理冲汤对子宫肌瘤大鼠细胞超微结构的影响

目的:探讨理冲汤对大鼠实验性子宫肌瘤的防治作用。方法:采用雌孕激素双重造模法,复制大鼠子宫肌瘤模型。造模成功后,将实验大鼠连续灌胃4周。观察大鼠子宫大体形态,统计分析比较子宫系数和子宫横径;透射电镜下观察子宫细胞超微结构的改变。结果:理冲汤灌胃能显著降低子宫肌瘤大鼠的子宫重量,减小子宫系数,缩小宫颈和宫体处最大直径。透射电镜观察显示,理冲汤能有效的改善雌、孕激素负荷大鼠子宫的细胞超微结构病变,抑制平滑肌细胞的异常增殖。结论:经理冲汤治疗后,实验性大鼠子宫体积缩小,改善子宫肌瘤细胞的超微结构,使其接近正常细胞结构,进而起到治疗作用。     

加味圣愈汤调经作用及机制研究

目的:探讨加味圣愈汤的调经作用及其机制。方法:大鼠去卵巢模型、雄激素致无排卵大鼠(ASR)模型灌胃加味圣愈汤1.06、0.53、0.265g/kg分别连续5周和8周,测定子宫、卵巢湿重并行HE染色观察组织形态学变化,放射免疫法测定去卵巢大鼠血清E2、P水平和ASR大鼠血清FSH、LH、E2、P水平;子宫平滑肌试验观察加味圣愈汤含药血清对大鼠离体子宫平滑肌收缩活动和加味圣愈汤十二指肠给药对家兔大体子宫平滑肌活动的影响,BL-420E生物机能系统记录活动曲线。结果:去卵巢大鼠和ASR大鼠子宫、卵巢湿重和系数均下降,两个模型大鼠子宫均有萎缩现象,且ASR大鼠卵巢卵泡发育迟缓,去卵巢大鼠血清E2、P水平及ASR大鼠血清E2、P、FSH水平均明显低于假手术组或溶剂对照组。与模型对照组比较,加味圣愈汤0.53、1.06g/kg能增加两个模型大鼠的子宫、卵巢湿重或脏器系数,1.06g/kg对子宫萎缩和ASR大鼠的卵巢卵泡发育抑制有改善作用;1.06g/kg能升高去卵巢大鼠血清E2水平及ASR大鼠血清LH水平,3个剂量对ASR大鼠血清FSH水平均有明显升高作用;50、100μl含药血清对大鼠离体子宫平滑肌收缩和加味圣愈汤1.06g/kg经十二指肠给药对家兔在体子宫平滑肌收缩均有促进作用,可提高其收缩频率、强度及活动力,与催产素无明显协同作用。结论:加味圣愈汤具有调经作用,灌胃模型大鼠0.265g/kg即起效,在0.265～1.06g/kg内呈较好的量-效正相关;作用机制与调节下丘脑-垂体-卵巢轴内分泌功能和雌激素样作用有关。     

妇科再造丸对雌、孕激素负荷诱导实验性大鼠子宫肌瘤的实验研究

目的:观察妇科再造丸(FKW)对实验性大鼠子宫肌瘤的作用,并探讨其可能的作用机制。方法:以己烯雌酚和黄体酮诱导实验性大鼠子宫肌瘤模型,观察FKW对子宫、卵巢系数、子宫横径及子宫平滑肌厚度的影响;放射免疫法分析FKW对血清雌激素(E2)、孕激素(P)、促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)水平的影响。结果:FKW可降低子宫系数,减小子宫横径及子宫平滑肌厚度,与模型组比较,差异显著(P<0.05,P<0.01);FKW可显著降低大鼠血清中的E2、P水平,提高FSH、LH的水平。结论:FKW对E2、P负荷诱导的实验性大鼠子宫肌瘤有显著的抑制作用。其作用可能与改善性腺轴的功能状态相关。     

消积冲剂治疗子宫肌瘤模型大鼠实验研究

目的 观察消积冲剂对大鼠子宫肌瘤的治疗作用.方法 将72只雌性大鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组及消积冲剂高、中、低剂量6个组,除空白组外各组均采用雌孕激素协同诱导法制备子宫肌瘤模型,第9周给予药物干预,16周后测定血清E2、P、FSH、LH,测量并计算子宫、卵巢系数,同时用免疫组化法观察子宫组织雌、孕激素受体表达.结果 消积冲剂的干预能够降低子宫肌瘤模型大鼠血清雌激素水平,抑制子宫平滑肌细胞ER表达.结论 消积冲剂对子宫肌瘤有一定的防治作用.     

大黄虫对药对雌孕激素负荷大鼠子宫肌瘤模型雌激素及其受体的影响

目的:研究大黄、虫对大鼠子宫肌瘤模型雌激素(E)及其受体(ER)的影响。方法:将70只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、大黄虫小剂量组、大黄虫中剂量组、大黄虫大剂量组、大黄虫丸组、桂枝茯苓胶囊组,采用雌孕激素负荷法建立大鼠子宫肌瘤模型,放射免疫法测定各组大鼠血清E水平,免疫组化观察大鼠子宫平滑肌细胞ER的表达。结果:与模型组相比,各治疗组血清E含量及子宫ER均下降(P<0.05),大黄虫可降低血清中E水平,抑制平滑肌细胞ER的表达。结论:大黄虫对药通过调节E、ER抑制子宫肌瘤生长。     

补肾调经汤对多囊卵巢综合症大鼠模型性激素水平的影响

目的:观察补肾调经汤对多囊卵巢综合征大鼠模型血清T、LH、FSH、E2等激素水平的影响,探讨补肾调经汤改善多囊卵巢综合征大鼠模型高雄激素血症的作用机制。方法:采用Poresky法进行造模,将50只雌性大鼠随机分为正常对照组、模型组、中药组、西药组及联合用药组,观察治疗后大鼠血清T、LH、FSH、E2激素含量水平的变化。结果:补肾调经汤能显著降低PCOS大鼠模型血清T、LH含量,改善LH/FSH(P<0.05)。结论:补肾调经汤可调节LH/FSH,控制LH异常增高,改善多囊卵巢综合征高雄激素血症。     

基于免疫相关细胞因子研究理冲汤对子宫肌瘤细胞凋亡和增殖的影响

目的：从免疫相关细胞因子表达情况研究理冲汤对子宫肌瘤细胞凋亡和增殖的影响。方法：用异种移植法建立子宫肌瘤小鼠模型,随机分为正常组、模型组、理冲汤组和阳性药组,每组6只,连续药物干预4周;通过透射电子显微镜观察子宫平滑肌细胞的超微结构;采用免疫组织化学染色检测促进细胞凋亡因子胱天蛋白酶3(Caspase-3)、抑制细胞增殖因子Ki67的表达情况;采用MSD电化学发光技术检测白细胞介素-12p70(IL-12p70)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤生长相关基因(GRO/KC)的表达情况。结果：与模型组比较,理冲汤组子宫平滑肌细胞超微结构改善明显,细胞排列紊乱和细胞膜增厚现象均有所减轻;子宫组织中Caspase-3表达升高(P<0.01),Ki67表达降低(P<0.01);血清中IL-12p70表达升高(P<0.05),IL-1β、IL-6、GRO/KC表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论：理冲汤具有促进子宫肌瘤细胞凋亡、抑制细胞增殖的作用,其分子机制与调控免疫相关细胞因子表达有关。     

自拟抑囊助孕汤对先兆流产大鼠模型子宫蜕膜组织病理形态与血清孕酮及人绒毛膜促性腺激素含量影响

目的:探讨自拟抑囊助孕汤对先兆流产大鼠模型子宫蜕膜组织病理形态与血清孕酮及人绒毛膜促性腺激素(Human Chorionic Gonadotropin,HCG)含量的影响。方法:选取无特定病原体级SD雌性大鼠40只为研究对象,将受孕后大鼠随机分为四组,每组10只大鼠,分别为空白对照组、模型组、自拟抑囊助孕汤低剂量组(低剂量组)和自拟抑囊助孕汤高剂量组(高剂量组),造模成功后,模型组和对照组灌胃蒸馏水,高低剂量组灌胃自拟抑囊助孕汤,HE染色子宫切片,使用光学显微镜观察子宫蜕膜组织病理形态,采用酶联免疫吸附法检测血清孕酮和HCG水平。结果:模型组大鼠子宫蜕膜组织大部分蜕膜细胞排列、形态、血管数量、细胞核等形态差于对照组(P0.05),高低剂量组大鼠子宫蜕膜组织大部分蜕膜细胞排列、形态、血管数量、细胞核等形态优于模型组(P0.05),高剂量组子宫蜕膜组织形态优于低剂量组(P0.05);模型组大鼠血清孕酮和HCG水平均明显低于对照组,流产率高于对照组,高剂量组、低剂量组大鼠血清孕酮和HCG水平均明显高于模型组,流产率低于模型组,高剂量组大鼠血清孕酮和HCG水平高于低剂量组,流产率低于低剂量组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:自拟抑囊助孕汤可明显改善先兆流产大鼠模型子宫蜕膜组织病理形态,升高血清孕酮和HCG水平,降低流产率。     

理冲汤对体外培养人子宫肌瘤细胞 p53信号通路基因表达谱的影响

目的:研究理冲汤对体外培养人子宫肌瘤细胞p53信号通路基因表达谱的影响。方法:体外原代培养子宫肌瘤细胞并传代后,加入理冲汤含药血清,继续培养。选用功能分类PCR p53信号通路基因芯片(PCR p53 Signaling PathwayMicroarray),从空白对照组、理冲汤组子宫肌瘤细胞中进行样品的RNA抽提及纯化,采用紫外吸收测定法及变性琼脂糖凝胶电泳进行RNA质量检测,合成cDNA,最后进行实时定量PCR。结果:所采用的PCR p53信号通路基因芯片共检测96条基因,理冲汤组与空白对照组比较,共17条(17.7%)基因表达发生明显变化,其中10条基因表达量明显下降(Fold Down-Regulation<-2),7条基因表达量上升(Fold Up-Regulation>2)。按功能将其进行大体分类,涉及到细胞凋亡、细胞周期、细胞生长增殖和分化、DNA修复等多方面。结论:理冲汤对子宫肌瘤p53信号通路的细胞凋亡、细胞周期、细胞生长增殖和分化、DNA修复等相关基因均有调节作用,提示细胞内外的信号传导是子宫肌瘤发病的关键环节,理冲汤对子宫肌瘤p53信号通路相关基因表达具有调控作用。     

桃红消癥散对子宫肌瘤模型大鼠雌、孕激素受体表达的影响

目的:研究桃红消癓散对子宫肌瘤模型大鼠雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。方法:采用雌孕激素负荷法建立大鼠子宫肌瘤动物模型,通过放免法检测血清雌孕激素水平,观察子宫组织病理改变,免疫组化法观察大鼠子宫平滑肌细胞ER,PR及PCNA的表达。结果:模型大鼠较正常大鼠子宫明显增大,血清性激素水平升高,子宫平滑肌细胞ER,PR及PCNA的表达明显高于正常大鼠。与模型对照组比较,桃红消癓散可降低血清性激素水平,改善子宫组织结构,抑制平滑肌细胞ER,PR及PCNA的表达。结论:桃红消癓散有治疗子宫肌瘤的作用,其机制可能与调节血中雌孕激素水平,抑制子宫平滑肌细胞ER,PR及PCNA的表达有关。     

Lichong decoction reduces Matrix Metalloproteinases-2 expression but increases Tissue Inhibitors of Matrix Metalloproteinases-2 expression in a rat model of uterine leiomyoma

OBJECTIVE:To study the effect of Lichong decoction(LD) on expression of matrix metalloproteinase-2(MMP-2) and metalloproteinase-2(TIMP-2) in a rat model of uterine leiomyoma(UL).METHODS:UL was induced in rats using exogenous estrogen and progesterone.LD was administered(p.o.) for 4 weeks,and mifepristone(RU-486)used as a control.To observe the effect of LD on the uterine coefficient and uterine transverse diameter,a radioimmunoassay method was used to detect serum levels of sex hormones.Light microscopic analyses of pathologic changes in the tissues of UL rats were evaluated.Expression of the proteins of matrix metalloproteinases(MMPs) and tissue inhibitors of metalloproteinases(TIMPs) in uterine tissues was assessed by immunohistochemical staining and western blotting.RESULTS:A UL model in rats was established successfully.LD reduced uterine weight,uterine coefficient,and uterine transverse diameter compared with untreated controls.LD reduced levels of estradiol,progesterone,follicle-stimulating hormone,and luteinizing hormone in our UL models.LD improved the pathologic condition of uterine muscle.Expression of MMP-2 protein decreased to varying extents in LD-treated groups,but TIMP-2 levels were enhanced.LD appears to reduce MMP-2 expression and increase TIMP-2 expression in UL tissue.CONCLUSION:These data suggest that the mechanism of action of LD on ULs may involve reduction of MMP-2 expression and increase in TIMP-2 expression in rats.     

Effect of Lichong Decoction on expression of IGF-I and proliferating cell nuclear antigen mRNA in rat model of uterine leiomyoma

Objective

To study the effect of Lichong Decoction (Lichong Decoction for strengthening anti-pathogenic Qi and eliminating blood stasis) on the expression of insulin-like growth factor-l (IGF-I) and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) mRNA in a rat model of uterine leiomyoma.

Methods

Fifty female Wistar rats were randomized into a normal control group, model group, Lichong Decoction group, Guizhifuling Capsule (Capsule containing Cassia Twig and Poria) group, and Mifepristone group. The uterine leiomyoma model was established by peritoneal injections of exogenous estrogen and progesterone hormone. The ultrastructural changes in cells of rat uterine tissues were observed with transmission electron microscopy, and the expression of IGF-I and PCNA mRNA was detected by real-time fluorescent quantitative PCR.

Results

Following treatment, cells in the Lichong Decoction group appeared to be arranged normally, the cellular morphology were almost in a normal state, hyperplasia and hypertrophy of the chondrio-some was reduced, collagen fibers were arranged in a regular manner, without obvious hyperplasia, and the expression of IGF-I and PCNA mRNA was significantly decreased compared with the model group (P<0.01).

Conclusions

The effect of Lichong Decoction on uterine leiomyoma is related to its function in reducing the expression of IGF-I and PCNA mRNA.     

益肾健脾汤对慢性萎缩性胃炎伴骨质疏松大鼠血清性激素的影响

目的:探讨益肾健脾汤对慢性萎缩性胃炎大鼠骨密度及血清性激素的影响。方法:大鼠以饮用0.1%氨水建立慢性萎缩性胃炎(CAG)模型,分组治疗90天后,应用双能X线吸收法(DEXA)检测大鼠股骨骨密度,应用放免法检测血清雌二醇(E2)、促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)含量。结果:与正常对照组比较,造模后各组大鼠股骨骨密度值及骨矿含量显著降低(P0.05);血清雌二醇含量降低(P0.05);血清促卵泡生成素、促黄体生成素均升高(P0.05)。与模型组比较,中药干预3组均有明显改善骨质疏松作用,可增强骨密度与骨矿含量,提高血清E2水平(P0.05)。结论:益肾健脾汤对慢性萎缩性胃炎伴骨质疏松症模型大鼠有良好的治疗作用,能通过提高雌二醇水平,改善骨质疏松。     

通络方剂对1型糖尿病大鼠模型肾脏保护作用的形态学研究

目的观察通络方剂对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病大鼠肾脏病理改变的影响。方法SD大鼠给予STZ以50 mg/kg腹腔注射建立1型糖尿病大鼠模型,随机分成糖尿病组、通络方剂治疗组。另选9只大鼠作为正常对照组。通络方剂治疗组给予通络方剂1.0 g/(kg.d)灌胃,其余大鼠予以等量蒸馏水灌胃,3组大鼠在相同环境条件下饲养。6周后处死,取肾脏行HE染色以及透射电镜观察肾皮质组织病理改变。结果糖尿病组大鼠与正常对照组大鼠相比,光镜及电镜下已出现糖尿病肾病病理改变,而通络方剂组肾皮质病理病变较轻。结论通络方剂对STZ诱导的1型糖尿病大鼠肾脏具有一定的保护作用。     

补肾调冲方对去卵巢大鼠性激素水平及下丘脑雌激素受体α、雌激素受体β mRNA表达的影响

[目的]探讨补肾调冲方对去卵巢大鼠血清性激素水平及下丘脑雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)mRNA表达的影响。[方法]以假手术组为对照,将去卵巢大鼠随机分为去卵巢空白组,补肾调冲方高、中、低剂量组,已烯雌酚组。采用放射免疫分析法测定血清雌二醇(E2)、促卵泡生成激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)水平,采用逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)检测下丘脑ERα、ERβmRNA表达。[结果]去卵巢大鼠血清FSH、LH水平升高,E2及下丘脑ERα、ERβmRNA水平降低,补肾调冲方大鼠血清E2有升高趋势,FSH有降低趋势,补肾调冲方能降低去卵巢大鼠血清LH水平,升高下丘脑ERα、βmRNA的表达。[结论]补肾调冲方在改善去卵巢大鼠性激素水平同时,可能通过影响ERα、ERβmRNA的表达,提高ER的生物效应,从而降低更年期综合征的发生。     

延经丸对围绝经期大鼠血清激素水平及子宫、卵巢系数的影响

目的：观察延经丸对围绝经期大鼠子宫系数、子宫微循环及血清雌激素（E2）、卵泡刺激素（FSH）和黄体生成素（LH）含量的变化,验证经验方“延经丸”调节围绝经期神经内分泌的作用.方法：采用18月龄自然衰老大鼠,随机分为4组：正常组、乙烯雌酚组、延经丸高剂量组、延经丸低剂量组.青年组大鼠作为对照组.各组给予相应剂量的药物灌胃处理,连续21天.于末次给药后2h取血,测定给药前后血清中性激素含量;用医学图像分析系统观察子宫微血管血流,之后摘取子宫和卵巢,称重量并计算子宫和卵巢系数.结果：延经丸能降低衰老大鼠血清FSH、LH的含量,升高E2的含量,提高大鼠子宫体质量指数,增加子宫毛细血管的开放数,加速血流,尤以高剂量组作用显著.结论：延经丸明显改善围绝经期大鼠的症状,其作用机理可能与提高体内雌激素水平,改善子宫微循环,增加子宫和卵巢的重量有关.     

探讨防风通圣散对多囊卵巢综合征大鼠血清激素及卵巢组织学影响

目的探讨防风通圣散对于多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠的血清激素及卵巢组织形态的影响及其原理。方法选用36只雌性SD大鼠,随机分为空白组、模型组、中药组,每组12只,对模型组和中药组建立PCOS大鼠模型。造模成功后(每组剩余10只)观察各组大鼠灌胃前后血清激素水平及卵巢组织形态变化。结果中药组黄体生成素(luteinizing hormone,LH)水平、LH/FSH水平、睾酮(testostertone,T)水平低于PCOS模型组(P<0.05),中药组T水平低于空白组(P<0.05),中药组促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)水平、LH水平、LH/FSH水平与空白组差异无统计学意义。中药组大鼠发育中卵泡和黄体数量较模型组略有增加,囊性扩张卵泡明显减少,颗粒细胞层增厚,排列较紧密。结论防风通圣散可明显降低多囊卵巢综合征大鼠的T水平,对改善PCOS大鼠LH水平、FSH水平以及LH/FSH水平有明显的作用,并可有效改善多囊卵巢综合征大鼠的卵巢卵泡生长状态。