脐带血干细胞体外扩增研究进展

脐带血干细胞移植目前绝大多数应用于儿童，由于其数量有限而使成人应用受到限制。解决此矛盾的可能方法之一是进行体外干细胞扩增以满足成人移植所需要数量。近年来国内外学者对此做了较多研究，并通过动物等对扩增后细胞进行了综合评价。     

脐血造血干/祖细胞研究进展

脐血和骨髓均富含造血干/祖细胞,但二者在造血干/祖细胞的含量上存在差别。脐血中各CD34~+细胞亚群有着独特的免疫表型。脐血造血干/祖细胞能在体外扩增,扩增后的CD34~+细胞能在SCID小鼠体内重建造血。由脐血CD34~+细胞可以生成淋巴细胞和内皮细胞。脐血造血干/祖细胞移植与骨髓造血干/祖细胞移植在患者的生存率、复发率及移植免疫排斥等方面均具有可比性,有着极大的潜在价值。     

体外扩增小鼠造血干/祖细胞及重建造血功能的研究

目的 探讨体内中性粒细胞的快速植入及长期重建造血的能力。方法 分离经氟尿嘧啶处理的雄性BDF1小鼠骨髓单个核细胞，以MoFlo细胞分选系统分离纯化CD34^ /c-kit^ 造血干，祖细胞，体外应用骨髓间充质干细胞共培养和阶段扩增结合的方法分别对分离的单个核细胞和CD34^ /c-kit^ 细胞进行体外扩增，并将扩增的有核细胞移植给经亚致死剂量照射的雌性小鼠。结果 以骨髓间充质干细胞为培养基质细胞，结合分阶段扩增方法，有效提高了各种细胞的扩增倍数，其中单个核细胞扩增的总有核细胞、CD34^ 细胞、GM-CFC和HPP-CFC扩增倍数分别为10．8，4．8，65．9和38．8，CD34^ /c-kit^ 细胞扩增的以上4种细胞扩增倍数分别为76．1，2．9，71．7和51．8；扩增细胞移植后可快速产生体内中性粒细胞的植入，并在2个月后的移植小鼠中仍可检测到移植的造血细胞。结论 与骨髓间充质干细胞的共培养，为造血干，祖细胞的有效扩增提供了良好的环境，分阶段扩增法加快了体外造血干，祖细胞的扩增和成熟，为移植后体内中性粒细胞的快速植入创造了条件。     

脐血造血干／祖细胞研究进展

脐血和骨髓均富含造血干／祖细胞，但二者在造血干／祖细胞的含量上存在差别。脐血中各CD34^ 细胞亚群有着独特的免疫表型。脐血造血干／祖细胞能在体外扩增，扩增后的CD34^ 细胞能在SCID小鼠体内造血，由脐血CD34^ 细胞可以生成淋巴细胞和内皮细胞。脐血造血干／祖细胞移植与骨髓造血干／祖细胞移植在患者的生存率、复发率及移植免疫排斥等方面均具有可比性，有着极大的潜在价值。     

脐带血干细胞体外扩增研究进展

脐带血干细胞移植目前绝大多数应用于儿童 ,由于其数量有限而使成人应用受到限制。解决此矛盾的可能方法之一是进行体外干细胞扩增以满足成人移植所需数量。近年来国内外学者对此做了较多研究 ,并通过动物实验等对扩增后细胞进行了综合评价。     

造血干、祖细胞分离纯化与体外扩增

造血干细胞被公认为具有自我更新能力,并可向各系血细胞分化的细胞群。分离纯化造血干、祖细胞有十分重要的理论和应用价值。然而以往对造血细胞的认识主要是依赖CFU-GM等造血祖细胞的体外增殖特性,而对造血干、祖细胞的定量、定性等都缺乏可靠的检测手段和认识。80年代以来,参与造血调控的各种生长因子及受体相继被发现和克隆,使造血增殖与分化的研究有了长足的进步,然而,其调控的靶细胞却难以分离纯化,各种血     

脐带血中造血干/祖细胞的体外扩增研究与临床应用进展

脐带血因具有来源广泛、采集方便、免疫配型要求低、移植后移植物抗宿主病(GVHD)发生率低等优点,为造血干细胞(HSC)的重要来源之一,为需要接受异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)的患者提供1种可靠的HSC来源.然而,脐带血干细胞移植(UCBT)亦存在一定的缺陷,由于脐带血的体积小、细胞数量极有限,其所含的造血干/祖细胞(HS/PC)数量有限,往往不能满足高体重儿童及成年患者allo-HSCT的需要,从而限制了UCBT在临床上的广泛应用.HS/PC体外扩增方法为解决上述难题的关键,笔者拟就HS/PC体外扩增方法的相关研究与临床应用进展进行综述.     

人外周血造血干／祖细胞的纯化及扩增

人外周血造血干／祖细胞的纯化及扩增张新民综述沈德诚审校造血干细胞是研究造血调控，治疗血液病、癌症、免疫缺陷症和遗传性疾病的关键。而外周血造血干细胞是干细胞他的重要组成部分，对它们进行研究有助于全面了解造血细胞的发育及调控过程。但是进行这些研究的先决条...     

TAT-HOXB4蛋白扩增造血干/祖细胞及其临床应用前景

同源盒基因(HOX)家族中的HOXB4是造血细胞分化早期的重要调控因子,对调节造血干/祖细胞(HSPC)自我更新与分化间的平衡发挥重要作用。利用基因工程技术生产的TAT-HOXB4蛋白同样能有效扩增HSPC数量,并保留其在体内的分化潜能和长期再生潜能。本文对TAT-HOXB4蛋白是否会诱发白血病及其临床应用前景作一综述,讨论的问题包括HOX基因及HOXB4基因的结构特征,HOXB4在HSPC增殖分化中的作用,HOX基因与白血病、TAT-HOXB4蛋白等。     

IL-6和sIL-6R对造血干/祖细胞扩增作用的研究进展

SCF、Flk2/Flt3配体(FL)及TPO均可刺激造血细胞增殖,而IL-6受体(IL-6R)的可溶性形式(sIL-6R)与以上因子有协同增殖作用.本文就sIL-6R的特性及其作用机制,IL-6-sIL-6R复合物协同造血因子对造血干/祖细胞、SRC的扩增作用作一综述.     

造血干细胞的生物特性及其体外扩增培养研究

造血干细胞在含有造血生长的体外培养体系中可以增殖。利用此特点可用小剂量骨髓、外周血或脐血分离获得的造血干细胞在体外扩增进行造血干细胞移植，也可用于肿瘤病人化疗、放疗的骨髓支持以及基因治疗等，具有潜在的临床应用价值。     

脐血造血干/祖细胞体外扩增及移植动物模型分析

目的　探讨脐血造血干 /祖细胞体外扩增和体内重建造血的潜能。方法　利用造血干 /祖细胞培养、体外扩增、移植动物模型等技术 ,研究不同比密ficoll分离液分离的脐血造血干 /祖细胞的造血活性。结果　比密 1.0 6 4 g/ml分离液分离的 10 5个脐血MNC中 ,CFU GM集落数为 373± 2 89,BFU E为 12 1± 70。在G3(GM CSF和IL 3融合蛋白 )、IL 6、TPO(thrombopoietin)作用下 ,1.0 6 4 g/ml分离液分离的脐血造血干 /祖细胞在体外扩增 14d ,CFU GM扩增 5 2 .2倍。给经 8.5Gy致死剂量照射的小鼠输注 1.0 6 4 g/ml分离液分离的脐血造血干 /祖细胞 ,体内产生的脾结节 (CFU S)是输注 1.0 77g/ml分离液分离细胞的 2 .2倍。结论　比密 1.0 6 4 g/ml分离液分离的脐血造血干 /祖细胞 ,在体外具有较高的增殖、持续造血的能力及较强的体内造血重建潜能     

干细胞体外诱导生成红细胞的研究进展

输血是目前临床上1种重要的治疗方法和手段,尤其对于存在严重贫血或外科大出血的患者,红细胞输注对于其生命的维持尤显重要。然而,随着血液供应短缺成为困扰全世界各国的1个重大公共卫生问题,为临床寻找人红细胞的替代品也成为再生医学中1项重要课题。目前,替代红细胞的研究主要集中在干细胞诱导方向,并已取得一定的进展;但在体外诱导红细胞过程中仍面临着许多障碍,特别是像干细胞增殖、珠蛋白以及成熟红细胞的低去核率等亟待解决的困难问题。本文回顾了干细胞诱导生成红细胞过程中所面临的主要瓶颈问题,并对目前可能涉及红细胞去核机制的各种研究作了讨论,为同行了解该研究的现状和下一步的方向勾勒图景、指点路径。     

IL—6和sIL—6R对造血干／祖细胞扩增作用的研究进展

SCF、Flk2/Flt3配体（FL）及TPO均可刺激造血细胞增殖，而IL-6受体（IL-5R）的可溶性形式（sIL-6R)与以上因子有协同增殖作用，本文就sIL-6R的特性及其作用机制，IL-6-sIL-6R复合物协同造血因子对造血干/祖细胞，SRC的扩增作用作一综述。     

微囊微环境体外扩增人脐血造血干/祖细胞

背景:由于单份脐血所含的造血细胞数量有限,目前只能用于儿童或低体质量成人血液病和急性辐射损伤等疾病患者,有效扩增脐血造血干,祖细胞已成为研究热点.目的:观察微囊微环境对脐血造血干,祖细胞扩增的影响,以及此过程中可否使造血干,祖细胞在扩增的同时仍维持其未分化状态.设计、时间及地点:单一样本观察,于2006-06/2007-09在中国科学院大连化学物理研究所完成.材料:正常足月产新生儿脐带血由大连市妇产医院提供,提供者知情同意.方法:Ficoll法梯度分离人脐血单个核细胞,采用静电液滴法在生理条件下进行微囊化包封和体外培养.以同条件平面培养的脐血单个核细胞作为对照.主要观察指标:观察微囊化脐血细胞的生长特点及脐血细胞总数的变化;流式细胞仪检测培养过程中CD34+细胞扩增情况:应用甲基纤维素半固体培养法观察扩增细胞的集落形成能力.结果:脐血细胞在微胶囊内持续增殖,并以聚集成团的三维方式生长,两种培养方式对脐血细胞总数均无明显影响(P>0.05).对比CD34+细胞扩增和细胞集落的生成发现,微囊化培养脐血细胞的CD34+细胞数量和集落密度均在培养第6天达到高峰,明显高于平面培养3 d时所达到的峰值:之后逐渐下降,至12 d后平面培养细胞的CD34+细胞和集落形成能力几乎检测不到,而此时微囊化培养的CD34+细胞数量和集落密度仍与平面培养的扩增高峰相近.结论:微囊化培养能有效扩增人脐血造血干/祖细胞,并显著减缓造血干/祖细胞的分化进程,维持其多分化潜能,提示微囊为造血干/祖细胞维持未分化状态的扩增提供了特殊的微环境.     

自身造血干细胞体外扩增移植二例报告

1　临床资料例 1,女 ,4 3岁 ,干部 ,1993年 6月诊断为乳腺癌 ,行双乳切除及广泛淋巴结清扫 ,并行局部照射及全身化疗。 1997年3月病情复发 ,经放化疗一年多 ,效果差。遂于 1999年 4月入我院行自身外周血造血干细胞移植治疗。 2 0 0 0年 6月患者感左髋及右膝关节疼痛 ,局部Ｘ线片及γ 骨扫描未发现异常 ,同年 9月疼痛加重 ,影响活动再次入院。检查发现左胸壁包块 ,左股骨下段及胫骨上段叩击痛阳性。Ｘ线示左侧第四前肋、股骨下段及胫骨上段有占位性病变。Ｂ超示胰腺肿大 ,腹腔淋巴结肿大。ＣＴ示胰腺体积增大 ,呈分叶状 ,密度不均。γ 骨扫描…     

巨核系祖细胞的体外扩增及应用研究

如何缩短造血干细胞(hematopoieticstemcells,HSC)移植术后血小板减少的时间,促进血小板恢复,减少出血,是目前造血干细胞移植面临的难题。在巨核细胞系的发育过程中,有多种细胞因子,如血小板生成素(TPO)、巨核细胞生长发育因子(megokaryocytegrowthanddevelopmentfactor,MGDF)、白介素(interleukin,IL)-1、IL-3、IL-6、IL-11、血小板源性生长因子(PDGF)、5-羟色胺(serotonin,5-HT)等发挥了重要作用。近年来巨核祖细胞(MKPC)的体外培养、扩增等研究取得了较大进展,发现通过体外有效扩增巨核祖细胞并移植给患者,可以加快血小板恢复,因此其在HSC移植中有十分重要的意义及良好的应用前景。本文将重点就各种细胞因子对巨核系造血作用和MKPC体外扩增及临床应用进行综述。单独以TPO培养扩增,结果产生的CD41+CD61+细胞比例增高,但细胞总数较低。当加入IL-1β,IL-3,IL-6,Flt-3L时,结果显示CFU-MK扩增400倍,CD34+细胞扩增5-22倍。在包括TPO、IL-1β、IL-3、IL-6和Flt-3L的各种细胞因子组合条件下,加入PDGF的扩增效果最好,且PDGF促进各种细胞包括CD34+、CD41+CD61+、CFU-MK的扩增。PDGF对脐血巨核祖细胞数量的扩增起一定作用,且对脐血MK的成熟没有影响。反映PDGF作用于MKPC的增殖。PDGF可能是促进MKPC体外扩增的合适细胞因子。动物实验显示体外扩增产物在NOD/SCID小鼠中植活并分化。在临床可行性研究中,进行自体PBPC移植的10名癌症患者(8名乳癌和2名非霍奇金氏淋巴瘤患者),接受未处理过的PBPC的同时输注了体外扩增的MK-PC(1-21×105/kgCD61+细胞)。8名患者接受同一供者的异基因血小板输注,4名输注最高数量培养后MKPC的患者中有2名不需要输注血小板,而回顾性对照组14名患者均需输注血小板。总之,巨核祖细胞能在体外扩增并安全输注予自体移植受者。     

间充质干细胞和内皮祖细胞对脐血造血干/祖细胞体外扩增效力的影响

目的比较脐带来源的间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)和内皮祖细胞(Endothelial progeni-tor cells,EPCs)对脐血造血干/祖细胞(Hematopoietic stem/progenitor cells,HSCs/HPCs)的体外扩增效力。方法正常人脐血中分离单个核细胞(Mononuclear cells,MNCs),流式细胞术检测其中HSCs/HPCs所占比例,将MNCs分别接种于处理后的MSCs或EPCs或仅接种于培养液中,比较不同培养条件对HSCs/HPCs扩增能力、表面抗原CD34的表达以及集落形成能力的影响。结果共培养过程中,MSC组和EPC组的MNCs扩增倍数均明显高于对照组,且EPC组更为显著。扩增7天后,对照组、MSC组和EPC组的HSCs/HPCs CD34的表达均较扩增前下降,其中EPC组下降的最为显著,MSC组最不显著。共培养4天后,MSC组的HSCs/HPCs集落形成总数为EPC组的2.47倍(**,P<0.01),共培养7天后,MSC组的HSCs/HPCs集落形成总数为EPC组的3.45倍(**,P<0.01);EPC组与对照组的HSCs/HPCs集落形成总数无显著性差异。结论 MSC和EPC均可为HSCs/HPCs的体外扩增提供适宜的微环境,MSC可抑制HSCs/HPCs的分化,有助于维持其表面抗原CD34的表达,并保持其造血重建潜能和归巢能力;而EPC则可有效促进HSCs/HPCs的分化。