中国汉族人群Diego血型基因频率调查研究

目的调查研究中国汉族人群的Diego血型基因频率分布。方法用血型血清学方法对1577例非相关的献血者进行Diego血型的筛选鉴定,并对部分标本进行基因分型和基因测序。结果1577例标本Diego血型血清学鉴定结果,Dia+b-1例,Dia+b+47例,Dia-b+1529例。结论汉族人群DI1基因频率为0.0155,DI2基因频率为0.9845。     

Mur血型分子诊断方法的建立与应用

目的建立Mur血型的分子生物学诊断方法。方法根据Mur血型的分子背景,设计特异性引物,采用PCR-SSP技术,优化反应体系及扩增参数,建立Mur血型分子检测方法;同时采用标准抗血清、标准细胞,用血清学方法予以验证并初步应用于献血者Mur血型的检测。结果建立了Mur血型PCR-SSP检测方法,用以检测14份已知抗-Mur阳性或阴性的献血者标本,同时用血清学方法平行检测:抗-Mur阳性11/11、抗-Mur阴性3/3,结果完全一致;用本法对随机抽取的107名献血者血样检测,检出2例阳性,同时采用标准抗血清用血清学方法所做的复核结果也完全一致。结论所建立的Mur血型PCR-SSP检测方法可以准确地检出Mur抗原,弥补了Mur血型血清学检测方法的局限性,有助于Mur血型检测方法的标准化、规范化。     

辽宁地区汉族献血人群Diego血型基因频率调查及稀有血型库的建立

目的对辽宁地区汉族献血人群Diego血型基因频率调查,建立辽宁地区稀有血型资料库。方法根据Diego血型的基因序列结构设计引物,优化PCR-SSP基因分型的实验方法,对1 298例辽宁地区汉族献血者血液标本进行Diego血型基因分型,并对其中55例标本进行血清学方法检测加以验证。结果应用已优化的PCR-SSP基因分型方法对1 298例辽宁地区汉族献血人群进行Diego血型的基因分型,其中Di~aDi~a检出1例,占0.08%,Di~aDi~b检出67例,占5.16%,Di~bDi~b检出1 230例,占94.76%。经计算,Di~a基因频率0.026 6,Di~b基因频率0.973 4,χ~2=0.009 8,P0.05,符合Hardy-Weinberg平衡定律,其中55例标本经血清学方法检测结果完全一致,并由此建立了辽宁地区Diego稀有血型资料库。结论应用PCR-SSP基因分型方法,调查了辽宁地区汉族献血人群Diego血型基因频率,具有本地区本民族的分布特点。建立了辽宁地区Diego稀有血型资料库,进一步保障输血安全。     

筛选试剂红细胞的血型基因分型方法建立和应用

目的建立重要的红细胞血型的基因分型技术用于筛选抗原谱合理的试剂红细胞。方法首先建立检测红细胞血型系统Rh CE、Kidd、MNS、Duffy、Diego、Lutheran、Colton、Lutheran和Kell等的聚合酶链式反应-序列特异性引物(PCR-SSP)分型技术;对于无法获得相关血型试剂的Diego和Colton血型系统,采用测序方法验证该技术检测血型的准确性,其他6个血型系统则用血清学方法验证该技术检测血型的准确性;最后应用该方法对82名O型固定献血者的8个血型系统做基因分型。结果血型基因PCR-SSP分型技术的结果,与血清学和测序检测结果比较,完全一致。所建立的血型基因分型技术对82名O型献血者8种红细胞血型检测,筛选出13位可能适合提供试剂红细胞的献血者。结论成功建立了分型准确、方便、经济的红细胞血型基因PCR-SSP技术,用于从大量献血者中筛选出抗原谱合理的试剂红细胞。     

江西地区汉族人群Diego和Dombrock血型基因频率调查

目的调查200名江西地区汉族随机献血者的Diego(Di)和Dombrock(Do)2个稀有血型系统,取得相应基因频率资料,为临床输血提供相应资料。方法采集200名江西地区汉族随机献血者,应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)法检测Di和Do 2个血型系统。结果 200名随机献血者中Di血型查出2种基因表现型,分别为Dia-b+196例、Dia+b+4例,Dia+b-及Dia-b-未检出;Dia基因频率为0.01,Dib基因频率为0.99。Do血型查出3种基因表现型,分别为Doa+b-2例,Doa+b+16例,Doa-b+182例;Doa基因频率为0.05,Dob基因频率为0.95。结论本地区Di血型系统的表现型多数为Dia-b+、少数为Dia+b+,Dia+b-及Dia-b-未见;Do血型系统的表现型多数为Doa-b+、少数为Doa+b+和Doa+b-。     

中国南京地区汉族人群Colton血型等4个血型系统稀有血型的初步调查

目的:调查和分析中国南京地区部分汉族人群Colton、Diego、Kell、Yt等4个稀有血型抗原的分布情况,以解决稀有血型病人的临床用血问题,并进一步充实国家稀有血型献血者资料库。方法:随机选择南京地区符合《献血者健康检查要求》的2 015名无偿献血者全血标本,提取DNA,采用PCR及多重PCR的方法检测Kell系统的K+和Kpc+、Yt系统的Ytb+、Colton系统的Cob+以及Diego系统的Dia+b+、Dia+b-血型抗原基因。结果:在2005例献血者中筛选出K+基因1例;在2 015例献血者中筛选出Ytb+8例和Dia+b+100例、Dia+b-2例,未筛查出Kpc+与Cob+。结论:中国南京地区汉族人群中K+、Ytb+和Dia+、Dib+基因频率分别为0.0003、0.0013和0.0258、0.9742,在现有筛查人群中未发现Kpc+与Cob+抗原存在。     

Diego血型基因分型技术的研究及应用

传统的Dia和Dib相应的ISBT符号为DI1和DI2,这是Diego血型系统中最具有临床意义的一对抗原.Diego血型系统抗原相应的抗-Dia可以引起新生儿溶血病,也可以破坏输入的Dia抗原红细胞,抗-Dib非常罕见,但同样能引起新生儿溶血病(HDN)和溶血性输血反应,具有临床意义,Dia和Dib抗原可以用血清学方法鉴定,但试剂较为昂贵,特别是抗-Dib定型试剂,市场上更是难以购买,且临床因产生抗-Dib所引起的输血问题,寻找相合的血源是非常困难的,我国随机人群中调查DI1基因频率为0.0357,DI2基因频率为0.9643,Di(a+b-)表现型的人低于千分之一[1],因此,笔者建立了Diego血型基因分型技术,并用于临床Diego血型的鉴定,以及Di(a+b-)献血员的筛检.     

幼儿罕见Ax14亚型血清学及基因检测结果分析

目的对ABO正反定型不符的幼儿标本进行血清学鉴定和基因检测分析。方法常规血清学检测,PCR-SSP进行ABO基因初步分型,再使用ABO血型-A亚型基因分型试剂盒进行A亚型分型鉴定。结果血清学结果显示标本正定型为A型(抗A:1+~W),反定为O型(Ac2+,Bc4+);PCR-SSP A亚型分型鉴定结果显示标本基因型为Ax14/O2型。结论疑难血型鉴定有时需要结合血清学和分子生物学方法才能准确定型,此例血清学正反定型不符标本表型为Ax,其基因型为Ax14/O2。     

Diego血型基因分型方法的建立及西安地区多态性分布研究

目的建立降落PCR技术检测Diego血型基因的方法,并对西安地区献血者Diego血型基因多态性分布进行分析研究,同时建立Diego稀有血型库。方法建立了降落PCR检测Diego血型基因的方法,并采用抗-Dia和商品化基因分型试剂盒进行验证,以及基因测序做进一步确认。对西安地区1068名献血者提取基因组DNA,进行Diego血型基因分型。结果建立了检测Diego血型基因的降落PCR方法,用此方法共检测到Di(a+b-)1例,Di(a+b+)52例,Di(a-b+)1 015例,未检测到Di(a-b-)样本。献血者中Dia抗原的表达频率为0.049 63,Dib抗原的表达频率为0.999 06。结论本研究成功建立了降落PCR技术检测Diego血型基因的方法,并对西安地区献血者的Diego血型进行筛查和分析,获得其多态性分布数据。     

深圳献血人群Duffy血型基因多态性的研究

目的建立Duffy血型的分子生物学检测方法,研究深圳献血人群Duffy血型基因多态性。方法在2011年8～11月本中心900名无血源关系献血者标本中,用卡式微柱凝胶抗球蛋白方法鉴定Duffy血型表现型,建立Duffy血型的基因分型方法 PCR-SSP法及PCR产物直接测序法,对900例标本DNA进行PCR-SSP法检测,其中50例做Duffy血型基因编码区域序列测定。结果血清学结果为Fy(a+b-)855例,Fy(a+b+)43例,Fy(a-b+)2例,Fy(a-b-)0例。900例Duffy血型PCR-SSP法基因分型结果与血清学表现型完全一致。50例FY基因编码序列部分测序结果与血清学、PCR-SSP法吻合,表现型FY(a+b-)标本测序结果可见FY基因第2外显子第125位核苷酸碱基为纯合子G;表现型FY(a-b+)标本测序结果为第125位核苷酸碱基为纯合子A。结论 Duffy血型PCR-SSP基因分型方法及PCR产物直接测序法可以正确地鉴定Duffy基因型,适用于Duffy血型基因多态性的研究。深圳地区Fya的基因频率为0.973 9,Fyb的基因频率为0.026 1。     

四川地区彝族ABO等8个血型的分子遗传学研究

目的了解四川地区彝族人群ABO、Duffy、Kidd、MNs、Diego、Lutheran、Dombrock、Colton血型的分子遗传背景及其基因频率的分布规律。方法采集四川省凉山彝族自治州布拖市和冕宁县共120名彝族无血缘关系健康者血样,对ABO基因第6、7外显子作测序分析;对Duffy等另外7个血型系统采用聚合酶链式反应-序列特异性引物(PCR-SSP)作基因分型。结果 120例四川凉山彝族无血缘关系标本中,共检测出5种常见ABO等位基因:A101[0.020 8(5/240)]、A102[0.166 6(40/240)]、B101[0.245 8(59/240)]、O01[0.304 2(73/240)]和O02[0.2625(63/240)]。其他7个血型的基因频率依次为M=0.683 3(164/240)、N=0.316 7(76/240)、S=0.091 7(22/240)和s=0.908 3(218/240);Lua=0(0/240)、Lub=1(240/240);Fya=0.945 8(227/240)、Fyb=0.029 2(7/240)、FyES=0.025 0(6/240);Jka=0.525 0(126/240)、Jkb=0.475 0(114/240);Dia=0.016 7(4/240)Dib=0.983 3(236/240);Doa=0.120 8(29/240)、Dob=0.879 2(211/240);Coa=1(240/240)、Cob=0(0/240)(经χ2检验,均符合Hardy-Weinberg平衡)。结论四川凉山地区彝族人的红细胞血型系统具有一定的分子遗传学特征:等位基因M频率>0.6,Dia频率<0.05,这均符合中国南方人的血型分布特点;FyES等位基因存在一定的分布(Jka>Jkb),Doa频率稍微偏高,显示出该民族一定的特异性。     

上海地区汉族人群红细胞稀有血型系统抗原基因的多态性研究

目的研究上海地区汉族临床输血人群8个红细胞稀有血型系统19种抗原基因多态性分布,提高配合性输注的能力。方法应用PCR-SSP方法进行血型抗原基因分型。结果Diego,Dombrock,Duffy血型系统抗原基因频率分别为：Di^a=0.0351,Di^b=0.9649;Do^a=0.0614,Do^b=0.9386;Fy^a=0.9649,Fy^b=0.0351,Fy=0;均具有多态性。而Kell,Yt,Scianna,L-W,Colton血型系统抗原基因频率分布为单态性。经χ2检验,均符合Hardy-weinberg遗传定律。结论上海地区汉族临床输血人群Diego、Dombrock、Duffy血型系统抗原基因频率具有多态性,随机临床输血抗原不合率分别是0.0654、0.1086、0.0654,应引起高度重视。     

3种指标联合检测对ICU脓毒症患者早期诊断的应用研究

目的探讨联合检测血清降钙素原(PCT)、白细胞介素-6(IL-6)和C反应蛋白(CRP)在重症监护病房(ICU)脓毒症患者早期诊断中的应用。方法选择ICU病区明确诊断的早期脓毒症患者89例(脓毒症组),发热高峰期且未使用抗菌药物时,采血送血培养并检测PCT、IL-6、CRP水平,同时选择同时期来本院健康体检者132例(健康对照组),采血检测PCT、IL-6、CRP水平。PCT、IL-6的检测为电化学发光法,CRP的检测为免疫透射比浊法。结果 ICU脓毒症患者PCT、IL-6、CRP检测值明显高于健康对照组,且差异具有统计学意义(P0.01);联合检测的敏感性和特异性明显高于单独检测,PCT+IL-6、PCT+CRP、PCT+IL-6+CRP 3种联合检测组合的敏感性分别为91.3%、90.5%和91.9%,特异性分别为89.5%、88.3%和89.4%,准确度分别为85.5%、85.3%和85.6%。结论联合检测PCT+IL-6+CRP、PCT+IL-6或PCT+CRP,有助于临床识别早期脓毒症。     

不同类型标本血电解质及葡萄糖测定结果的比较分析

目的探讨动脉血浆、静脉血浆、动脉血清、静脉血清之间电解质、葡萄糖结果的差异及其原因。方法采集54例患者动静脉抗凝血、动静脉凝集血各1管,分离出相应的血浆和血清,用强生VITROS 5600自动干式生化分析仪对K~+、Na~+、Cl~-、血糖的浓度进行测定,并应用统计学方法对检测结果进行比较分析。结果当标本类型为血清时,动脉血与静脉血之间Na~+、Cl~-、血糖和血清K~+浓度的测定值差异有统计学意义(P0.05);当标本类型为血浆时,动脉血与静脉血之间Na~+、Cl~-、血糖浓度的测定值差异有统计学意义(P0.05),但K~+浓度差异无统计学意义(P0.05)。另外,动脉的血浆和血清之间血糖和血K~+的测定值差异有统计学意义(P0.05),而Na~+、Cl~-测定值的差异无统计学意义(P0.05);同样的,静脉的血浆和血清之间血糖和血K~+的测定值差异有统计学意义(P0.05),而Na~+、Cl~-测定值的差异无统计学意义(P0.05)。结论同一检测系统检测电解质、葡萄糖,动脉血浆、静脉血浆、动脉血清、静脉血清之间测定值存在一定差异,临床上应注意区别对待不同类型标本的测定值,建立、选择合适的参考范围。     

血清β人绒毛膜促性腺激素和孕酮联合测定在异位妊娠早期的临床应用

目的了解血清β人绒毛膜促性腺激素(-βHCG)和孕酮联合测定在异位妊娠早期的临床应用价值。方法选取35例异位妊娠患者作为观察组,另选取35例同期健康妊娠妇女作为对照组,两组同时检测-βHCG和孕酮,比较两组之间的差异。结果异位妊娠患者血清-βHCG和孕酮均明显低于同期健康妊娠妇女,两组之间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论血清-βHCG和孕酮联合测定在判断异位妊娠中具有良好的作用,提示临床中多选用此指标,以观察和治疗异位妊娠患者,确保妇女健康生活。     

Studies of the Diego blood group among Mexican-Americans

Dia occurs with a frequency of 8.2 to 14.7 percent in Mexican-Americans living in three Texas communities. Of 4225 blood samples tested, only six (0.14%) were Di(a+b-), and none of 2540 samples was Di(a-b-). In other studies, 1 of 525 random white blood donors was Di(a+), and Dib was well developed in 100 random umbilical cord blood samples.     

五种血脂检测系统测定结果的可比性调查

目的 通过比较5个常用的不同血脂检测系统在使用参考方法赋值新鲜血清校准前后的结果可比性,探讨实现血脂检测一致化的方法。方法采用室内质控总变异(CV%)评价5个血脂检测系统的不精密度。参考美国临床及实验室标准化委员会(CLSI)EP 9A2方案,比对54份新鲜患者血清在5个临床常用的总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)检测系统上的结果,并将不同检测系统结果与均值进行偏倚评估。其中8份样本采用参考方法定值,并评估不同系统的偏倚。尝试采用参考方法赋值的新鲜冰冻血清校准以上检测系统,并使用相同的54份患者新鲜血清再次进行比对及偏倚评估。比对校准前后54份样本在不同检测系统测定的变异。结果 5个检测系统TG总不精密度在3.76%～23.65%之间,TC在2.19%～23.43%之间。各系统结果相关良好,TG和TC的r值分别在0.996 7～0.999 6和0.956 2～0.996 7之间,但系统间结果存在较明显的偏差,各系统最大百分偏差TG在14.72%～34.21%,TC在3.11%～14.57%。用参考方法赋值的血清对不同系统进行校准之后系统间偏差和变异均明显降低。结论用参考方法赋值的新鲜血清校准不同的血脂检测系统,可以有效地提高测定结果的一致性。