氯胺酮对成年小鼠海马神经元P—ERK1／2表达和学习记忆能力的影响

目的研究氯胺酮对成年小鼠海马神经元P—ERK1／2表达和学习记忆能力的影响。方法成年雄性昆明小鼠分为生理盐水组（16ml／kg）、氯胺酮K1组（50mg／kg）、氯胺酮K2组（100mg／kg）和氯胺酮K3组（200mg／kg）。氯胺酮K3组又分为K3a组（6h）、K3b组（12h）和K3c组（24h）,每组各10只,每组连续腹腔注射不同剂量氯胺酮7天,每天1次。采用Y迷宫进行记忆能力测试;提取海马组织总蛋白,免疫印迹检测P—ERK1／2表达。结果与生理盐水组相比,K1组和K2组成年小鼠学习记忆保持率、P—ERK1／2表达的差异无统计学意义（P〉0．05）,而K3组成年小鼠学习记忆保持率、P—ERK1／2表达均低于生理盐水组、K1组和K2组（P〈0．05）。结论过量氯胺酮可能通过抑制成年小鼠海马神经元P—ERK1／2表达损害其学习记忆能力。     

睡眠剥夺对大鼠学习记忆和海马区p-ERK表达的影响

目的 分析睡眠剥夺对大鼠学习记忆和海马区p-ERK1/2蛋白表达的影响.方法 将60只雄性SD大鼠随机分为对照组和睡眠剥夺组,采用多平台水环境法建立睡眠剥夺模型.采用Morris水迷宫检测对照组和睡眠剥夺组大鼠定位航行和空间搜索能力的变化,采用蛋白免疫印迹法检测海马区p-ERK1/2蛋白表达的变化.结果 与对照组相比,...     

电磁辐射对大鼠学习记忆能力和海马神经元形态的影响

目的:观察电磁辐射对大鼠学习记忆能力和海马神经元形态的影响.方法:48只Wistar大鼠随机分为8组(n=6):辐射组(6个)、假辐射组(1个)、空白对照组(1个).辐射组大鼠头部接受频率为900MHz、功率密度为2000μW/cm2的近场辐射,连续辐射30d后以Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,硫堇染色观察海马神经元的形态变化.结果:与空白对照组大鼠相比,假辐射组的学习记忆能力无明显变化(P>0.05),各辐射组大鼠的学习记忆能力明显下降(P<0.05).硫堇染色结果显示,空白对照组和假辐射组大鼠海马神经元形态与数目均无明显变化;各辐射组大鼠海马CA1区和CA3区锥体细胞层变薄,细胞排列紊乱、疏松,胞浆尼氏体较减少,并出现大量神经元缺失.结论:900MHz微波电磁辐射可导致大鼠的空间学习记忆功能下降.     

芬太尼和氯胺酮合用对小鼠学习记忆的影响

目的 观察芬太尼与氯胺酮合用对小鼠学习记忆的影响.方法 将小鼠分为3组:芬太尼组(F组)、氯胺酮组(K组)和芬太尼 氯胺酮组(FK组),每组10只.用跳台实验(step-down test)和避暗实验(stepthrough test)分别观察芬太尼、氯胺酮单用或合用对小鼠学习记忆的影响.结果 在跳台实验和避暗实验中,FK组用药后第1天错误次数均明显多于F组和K组(P＜0.01),潜伏期均明显短于F组和K组(P＜0.01);用药后第2天,各组错误次数、潜伏期的差异均无显著性(P＞0.05).结论 芬太尼和氯胺酮合用当天抑制小鼠学习记忆呈协同作用,但用药后第2天协同作用消失,提示可能不会造成持久的学习记忆障碍.     

盐酸多奈哌齐对血管性痴呆小鼠学习记忆及海马ERK1、p-ERK表达变化的影响

目的 探讨盐酸多奈哌齐对血管性痴呆(VD)小鼠学习记忆及海马中细胞外信号调节激酶(ERK1、p-ERK)表达变化的影响.方法 采用双侧颈总动脉反复缺血-再灌注法制备小鼠VD模型.将小鼠随机分为假手术组、模型组及药物组,药物组给予盐酸多奈哌齐灌胃治疗.术后第29,30天,经跳台试验和水迷宫试验对各组小鼠进行行为学成绩测试,用免疫组化方法观察各组小鼠海马CA1区ERK1及海马CA3区p-ERK的表达变化.结果 盐酸多奈哌齐显著改善了VD小鼠学习、记忆成绩[ (34.90±9.56)s vs (62.81±10.70)s;(158.20±26.57)s vs (92.81±19.44)s;(76.65±9.46)s vs (122.15±11.96)s;(98.55±6.45)s vs (127.69±8.84)s; P ＜0.05].同时,模型组海马CA1区ERK1的阳性细胞数较假手术组减少[ (16.50±1.95) vs (22.67±1.12) ; P ＜0.05 ]、阳性细胞平均光密度值亦较假手术组降低[ (0.2111±0.0049) vs (0.2700 ±0.0066) ; P ＜0.05 ];CA3区p-ERK阳性部位平均光密度值较假手术组降低[ (0.1867±0.0084) vs (0.2717±0.0122) ; P ＜0.05 ].而治疗组与假手术组间上述指标差异无显著性(P ＞0.05).结论 盐酸多奈哌齐通过抑制乙酰胆碱酯酶的活性,从而增加大脑乙酰胆碱含量,后者作用于M乙酰胆碱受体激活ERK,有助于改善学习和记忆功能.     

APP5肽对糖尿病小鼠学习记忆功能与海马神经元蛋白表达的影响

目的 研究APP5肽对糖尿病模型小鼠学习记忆能力及海马神经元蛋白表达的影响.方法用链脲佐菌素诱发小鼠糖尿病模型,应用APP5肽(0.0014 mg/kg)皮下注射治疗,5周后进行Morris水迷宫试验;小鼠脑组织海马做Akt、PI3K、P-CREB、Bcl-2、Bax、CytoC免疫组织化学染色;另一部分鼠脑海马,做Bcl-2、Bax抗体蛋白免疫印记.结果(1)水迷宫试验:糖尿病模型小鼠到达站台游动时间比正常对照组延长(P<0.01);而APP5肽皮下注射治疗组较DM组动物分别缩短(P<0.01).(2) 神经免疫组织化学实验和Western blot:给予APP5肽糖尿病小鼠与对照组小鼠海马组织内神经元表达细胞存活相关蛋白及抗凋亡相关蛋白PI3K、Akt、P-CREB、Bcl-2阳性细胞数相似,明显高于糖尿病小鼠(P<0.01); APP5肽给予糖尿病小鼠与对照组小鼠表达凋亡蛋白Bax、cytoC阳性细胞数相似,明显少于糖尿病小鼠 (P<0.01).Western blot 结果相同.结论糖尿病小鼠海马神经元表达细胞存活相关蛋白下降,神经元表达细胞凋亡相关蛋白增加,导致其学习记忆能力下降.APP5肽应用可以使上述蛋白恢复到接近正常,从而改善糖尿病小鼠学习记忆能力.     

过表达海马LINGO-1对小鼠学习和记忆能力及海马各亚区Spinophilin+树突棘的影响

目的 脑立体定位注射腺相关病毒特异性过表达海马LINGO-1,探讨其对小鼠空间学习和记忆能力以及海马各亚区体积和Spinophilin+树突棘的影响.方法 将7月龄雄性C57小鼠按照简单随机法分为对照组和LINGO-1过表达组,对照组小鼠海马立体定位注射携带绿色荧光的空载腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV),LINGO-1过表达组小鼠海马立体定位注射同时携带绿色荧光和LINGO-1过表达载体的AAV.运用Morris水迷宫评估小鼠的空间学习和记忆能力,荧光定量PCR及免疫荧光染色方法分别检测小鼠海马内LINGO-1基因表达水平和各亚区荧光强度,体视学三维定量小鼠海马各亚区体积及Spinophilin+树突棘总数.结果 对照组和LINGO-1过表达组病毒注射前后体质量差异无统计学意义;LINGO-1过表达诱导小鼠海马LINGO-1的mRNA水平升高、荧光强度增强(P<0.01);与对照组相比,LINGO-1过表达组小鼠在Morris水迷宫实验中的表现明显更差(P<0.05);LINGO-1过表达诱导小鼠海马各亚区体积显著下降(P<0.05,P<0.01),Spinophilin+树突棘密度显著降低(P<0.01,P<0.05),Spinophilin+树突棘数量显著减少(P<0.05).结论 海马立体定位注射过表达LINGO-1腺相关病毒能够特异性上调小鼠海马内LINGO-1水平,海马LINGO-1的异常高表达可导致小鼠海马体积减小及Spinophilin+树突棘突触丢失,并在一定程度上损伤其空间学习与记忆能力.     

D-半乳糖对成年小鼠海马神经元P—ERK1／2

目的研究D-半乳糖对成年小鼠海马神经元p-ERK1／2表达和学习记忆能力的影响。方法20只健康成年昆明种小鼠,雌雄各半,分为2组。颈背部皮下注射D-半乳糖注射液,每天125mg／kg body weight,连续35d,建立小鼠衰老模型。对照组注射生理盐水。其间观察小鼠一般状况,实验的最后1周分别进行跳台实验、Morris水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力;实验结束后处死动物,提取海马组织总蛋白,免疫印迹检测p-ERK1／2表达量。结果与对照组比较,D-半乳糖组小鼠跳台试验潜伏时间减少和电击次数增加（P〈0．01）;Morris水迷宫实验航行逃避潜伏期明显大于对照组小鼠（P〈0．01）;D-半乳糖组p-ERK1／2表达量显著低于正常对照组（P〈0．01）,且雄性比雌性效果显著。结论D-半乳糖可能通过抑制成年小鼠海马神经元p-ERK1／2表达而损害其学习记忆能力。     

七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力及海马pERK1/2表达的影响

目的探讨七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力及海马p ERK1/2表达的影响。方法出生后14 d SD幼鼠54只,随机分为对照组(C组)、七氟醚5%组(Sevo组)、假手术组(Sham组)各18只。C组不做任何处理,Sevo组幼鼠暴露于5%的七氟醚4 h,Sham组幼鼠吸入氧气4 h,1周、3周、6周后于上午8:00~11:00应用Morris水迷宫对幼鼠进行7 d的行为学观察,记录逃避潜伏期,行为学结束后随即取出6只幼鼠用免疫组化法测定海马CA1区神经元p ERK1/2的表达。结果与Sham组比较,Sevo组逃避潜伏期和探索时间明显延长(P<0.01),Sevo组海马CA1区神经元p ERK1/2的表达明显减少(P<0.01);Sham组与C组逃避潜伏期时间差异无统计学意义,海马CA1区神经元p ERK1/2的表达之间差异无统计学意义。结论七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力的影响与抑制海马p ERK1/2表达有关。     

膳食锌缺乏对成年APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠学习记忆能力的影响

目的研究膳食锌缺乏对成年APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠学习记忆能力的影响。方法应用跳台试验观察膳食锌缺乏喂养50 d后,缺锌喂养组（zinc deficiency group,ZD）小鼠与阳性对照组（positive controlgroup,PG）和阴性对照组（negative control group,NC）小鼠学习记忆能力的差异。结果缺锌喂养50 d后,ZD组潜伏期由（126.30±106.43）s明显延长至（226.30±101.35）s,差异有显著性（P＆lt;0.05）。ZD组与NC组潜伏期分别为（226.30±101.35）s和（253.80±81.05）s,均明显较PC组（61.00±53.96）s长,差异有显著性意义（P＆lt;0.01）。ZD组与NC组5min错误次数分别为（1.4±1.9）次、（0.5±0.7）次,均低于PC组（3.8±2.9）次,差异有显著性（P＆lt;0.05）。结论缺锌喂养可能在一定程度上可以延缓成年APPswe/PSEN1dE9转基因小鼠学习记忆能力的下降。     

姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠海马神经元ChAT表达的影响

目的观察淀粉样前体蛋白/早老素1（APP/PS1）双转基因小鼠海马CA1区神经元胆碱乙酰转移酶（ChAT）表达,评价姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆的影响。方法将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、罗格列酮组及姜黄素大、中、小剂量组,并以同月龄遗传背景相同的C57BL/6J小鼠作为正常对照组。各治疗组每天灌胃给药1次,连续灌胃3个月。应用跳台实验、免疫组织化学和蛋白质印迹（Western-blot）检测学习记忆能力和海马神经元ChAT的变化。结果与正常组小鼠相比,模型组小鼠潜伏时间显著缩短（P<0.01）,与模型组小鼠相比,姜黄素各剂量组小鼠潜伏时间增加（P<0.05或P<0.01）。免疫组化检测,模型组小鼠海马CA1区ChAT阳性细胞较正常对照组明显减少（P<0.01）,而姜黄素干预组可以使其不同程度地恢复。Westernblot检测,模型组小鼠海马ChAT的蛋白表达条带比正常组小鼠明显变细、颜色变浅（P<0.01）;姜黄素干预组小鼠海马ChAT的蛋白表达条带均明显增粗、颜色加深（P<0.05或P<0.01）。结论姜黄素能通过增加ChAT的蛋白表达,促进阿尔茨海默（AD）模型动物神经传导障碍,进而改善APP/PS1双转基因小鼠的学习记忆能力。     

穹窿海马伞损伤对成年鼠学习记忆和海马GFAP阳性细胞的影响

目的:探讨穹窿海马伞(ＦＦ)损伤鼠学习记忆能力与海马胶质纤维性蛋白(ＧＦＡＰ)阳性细胞之间的关系。方法:切断ＳＤ成年大鼠左侧ＦＦ,用Ｙ迷宫和免疫组化结合图像分析系统测试大鼠学习记忆能力和海马ＧＦＡＰ阳性细胞的变化情况及相互关系。结果:损伤２周后,损伤组损伤侧海马ＣＡ１区辐射层和齿状回分子层ＧＦＡＰ阳性细胞数密度(Ｎｖ)较正常组分别增多３０．２９%和３０．１５%(均Ｐ＜０．０１),胞体面积分别增加１６．０４%和１９．４２%(均Ｐ＜０．０１),齿状回分子层体密度(ＶｃｖＢ)增大１９．４０%(Ｐ＜０．０５)。经相关分析,大鼠学习记忆能力与海马ＣＡ１区ＧＦＡＰ阳性细胞Ｎｖ呈负相关(ｒ＝－０．８３６,Ｐ＜０．０１),与齿状回Ｎｖ呈负相关(ｒ＝－０．７９２,Ｐ＜０．０１)。结论:海马星形胶质细胞可能参与学习记忆过程。     

缺血再灌注对大鼠学习记忆及海马神经元Glu、NR1和NR2B表达的影响

目的观察脑缺血再灌注对大鼠学习记忆能力及海马神经元谷氨酸（Glu）、NR1、NR2B表达的影响，探讨脑缺血损伤与Glu兴奋性毒性的关系。方法采用PULLINSIN-4VO改良法制备血管性痴呆动物模型，MORRIS水迷宫检测其空间学习记忆能力，苏木精-伊红染色显示海马组织结构变化，免疫组织化学SABC法显示海马神经元Glu及NR1、NR2B的表达。结果缺血15min再灌注损伤48h后，海马神经元大量坏死损伤，大鼠学习记忆能力明显下降，海马内Glu、NR1和NR2B表达显著增加（F=22．063～1368．839，q=3．453～5．342，P〈0．01）。结论缺血再灌注使大鼠学习记忆能力下降，其机制与海马神经元Glu、NR1和NR2B的表达增加有关。     

谷氨酸钠对小鼠学习记忆能力及海马CA1区细胞数的影响

目的　观察谷氨酸钠 (MSG)对小鼠学习与记忆能力及海马CA1区细胞数的影响。方法　刚断乳 3周龄小鼠灌胃给予MSG溶液 ,每天 2次 ,连续 35d ,d3早灌胃 30min后对小鼠进行迷宫学习训练 ,2 4h后对其进行迷宫记忆检测 ;行为学检测结束后 ,处死动物 ,取出全脑 ,固定切片进行形态学观察。结果　MSG对小鼠的学习与记忆能力均有一定程度的影响 ,并与MSG溶液的浓度存在量效关系 ;对与学习记忆有关的小鼠海马CA1区的细胞数也有一定的影响。结论　过量MSG对小鼠海马CA1区神经细胞有损伤作用 ,从而影响小鼠学习与记忆能力。     

氯胺酮对幼年小鼠空间学习记忆功能及海马脑区 TSPO 蛋白的影响

目的观察幼年小鼠连续多次接受氯胺酮麻醉后学习记忆认知功能及海马脑区内TSPO蛋白的表达情况。方法出生21 d的幼年小鼠24只随机分为对照组(n=12)和氯胺酮组(n=12),每天1次分别经腹腔注射生理盐水和氯胺酮,连续7 d。然后进行Morris水迷宫实验,包括4 d的适应性训练和1 d的空间探索实验,观察小鼠的学习记忆功能的改变。水迷宫行为学测试后处死小鼠,取双侧的海马脑区,采用Western blotting技术和免疫荧光双标技术检测小鼠海马内小胶质细胞的变化和TSPO表达水平。结果训练期3~4 d,氯胺酮组小鼠潜伏期明显长于对照组(P<0.05)。探索实验显示,与对照组比较,氯胺酮组小鼠在平台所在象限滞留时间和经过次数明显减少(P<0.05);Western blotting分析结果表明,氯胺酮组幼年小鼠海马小胶质细胞标记物Iba-1和TSPO蛋白表达明显增多;免疫荧光双重标记技术显示,氯胺酮组小鼠海马小胶质细胞发生了形态学的改变,TSPO蛋白的表达增强。结论氯胺酮组小鼠海马脑区内小胶质细胞被激活,与之共同表达的TSPO蛋白的表达增高,学习记忆等认知功能减退。     

益智健脑颗粒对AD模型大鼠学习记忆能力及海马神经元BDNF表达的影响

目的 探讨益智健脑颗粒对Aβ1-40诱导的AD模型大鼠学习记忆能力及海马CA1区神经元BDNF表达的影响.方法 右侧海马微量注射Aβ1-40建立AD动物模型,并用益智健脑颗粒对其进行干预,Y迷宫检测各组大鼠学习和记忆能力,免疫组织化学方法检测海马CA1区神经元BDNF表达.结果 Aβ1-40能够导致大鼠学会躲避电击所需的尝试次数明显增加[(25.36±3.48)次vs(15.41±2.89)次],海马CA1区BDNF灰度值较对照组明显增大[(139.13±7.55)次vs(128.36±8.45)次],差异有显著性.应用益智健脑颗粒后,尝试次数明显减少[(17.12±3.51)次vs(25.36±3.48)次]、海马CA1区BDNF灰度值明显减小[(129.98±7.86)次vs(139.13±7.55)次].结论 益智健脑颗粒可以改善AD模型鼠的学习记忆能力,可以作为临床治疗AD的试验用药.     

氯胺酮对SD幼鼠海马神经元细胞凋亡和突触素表达的影响

目的观察氯胺酮对7d龄SD幼鼠海马神经元细胞凋亡和突触素(P38)表达的影响。方法7d龄SD幼鼠共30只,随机分成3组,分别注射氯胺酮25mg/kg(K1组)、50mg/kg(K2组),对照组注射生理盐水50ml/kg(K0组),24h后取材,采用Tunel法检测神经元细胞凋亡,免疫组化染色和Westernblot技术检测SD幼鼠海马突触素的表达,进行图像分析。结果注射氯胺酮后24h,海马神经元细胞凋亡计数K0组(5.3±1.7)、K1组(9.5±4.2)、K2组(23.4±7.6),免疫组化染色突触素灰度值:K0组为(174.11±4.68),K1组为(181.36±4.17),K2组为(198.25±3.06)。Westernblot突触素蛋白电泳条带积分光密度值K0组为(4007±758),K1组为(2621±465),K2组为(987±183)。结论注射氯胺酮后24h,SD大鼠海马神经元细胞大量凋亡,突触素表达减少可能和氯胺酮神经毒性有关。     

银杏内酯B对癫痫模型大鼠学习记忆能力和海马神经元病变的影响

目的探讨银杏内酯B（GB）对癫痫模型大鼠学习记忆能力和海马神经元病变的影响。方法将180只雄性SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组、模型组、GB低、中、高剂量组（2.5、5、10mg/kg）和丙戊酸钠（VPA）组（300mg/kg）,每组30只。除空白对照组外,其余各组采用氯化锂-匹罗卡品诱导制备癫痫大鼠模型;注射匹罗卡品前30min,GB低、中、高剂量组分别腹腔注射浓度为0.5、1、2mg/ml的GB溶液5ml/kg;VPA组腹腔注射浓度为60mg/ml的VPA溶液5ml/kg;模型组和空白对照组腹腔注射0.9%氯化钠注射液5ml/kg。记录各组大鼠癫痫发作潜伏期、发作持续时间并采用Racine评分评估癫痫发作程度;Morris水迷宫实验测定大鼠学习记忆能力;HE染色进行海马神经元病理学检查;黄嘌呤氧化法和钼酸铵法分别检测超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活力、硫代巴比妥酸法检测丙二醛（MDA）水平;ELISA检测海马组织TNF-α、IL-1β、IL-6水平。结果与模型组比较,GB中、高剂量组和VPA组大鼠癫痫发作潜伏期延长、发作持续时间缩短、发作程度降低（均P＜0.01）;逃避潜伏期缩短且穿越平台次数增多（P＜0.05或0.01）;海马神经元病变明显改善;海马组织SOD、CAT活性升高且MDA水平降低（P＜0.05或0.01）;TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低（均P＜0.01）。与VPA组比较,GB高剂量组大鼠癫痫发作潜伏期延长,发作持续时间缩短,发作程度降低,逃避潜伏期缩短且穿越平台次数增多,SOD活性升高且MDA水平降低,TNF-α、IL-6水平降低（P＜0.05或0.01）。结论GB能够延长癫痫模型大鼠癫痫发作潜伏期,缩短发作持续时间、降低发作强度,改善癫痫大鼠学习记忆能力,其机制可能与GB通过抑制氧化应激和炎症反应而保护海马神经元有关。