RDP1258对人外周血单核细胞增殖能力及HO-1活性的影响

目的观察一种新型HLA衍生肽(RDP1258)针对人外周血单核细胞由丝裂原以及同种异体抗原刺激导致的增殖能力的影响,并探讨其机制.方法人工固相合成RDP1258, 3H-TdR掺入法观察其在体外对人外周单核细胞增殖反应的影响,以酶化学法观察其对淋巴细胞血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1, HO-1)活性的影响.结果 RDP1258可显著抑制人外周血单核细胞的转化及MLR增殖反应;该肽体外降低HO-1活性呈现出剂量依赖性.结论 RDP1258能够显著抑制人外周单核细胞经丝裂原或同种抗原刺激引起的增殖反应,这种作用可能是通过影响HO-1活性而达到的.     

HLA衍生肽对大鼠脾细胞增殖功能及HO-1活性的影响

目的观察一种新型组织相容性白细胞抗原(histocompatibility leukocyte antigen, HLA)衍生肽(RDP1258)的免疫抑制功能并探讨其机制.方法人工固相合成一种HLA衍生肽(RDP1258),用 3 H-TdR法观察其在体外对大鼠脾细胞增殖反应的影响,以酶化学法观察其对脾细胞血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1, HO-1)活性的影响.结果 RDP1258可显著抑制淋巴细胞转化及MLR的增殖反应;该肽体外降低HO活性呈现出剂量依赖性.结论 RDP1258能够显著抑制大鼠脾细胞经丝裂原或同种抗原刺激引起的增殖反应,这种作用可能是通过影响HO-1活性而达到的.     

腺病毒介导HO-1基因转染肾小管上皮细胞及对PBMC增殖影响的实验研究

目的 观察Ad-HO-1感染对HK-2细胞存活率的影响,探讨表达目的蛋白血红素氧化酶-1(HO-1)的HK-2细胞能否有效降低外周血单个核细胞(peripheral blood monoeuclear cell,PBMC)增殖反应活性.方法 Ad-HO-1按感染强度(multiplicity of infection,MOI)100、200和400分别转染人肾小管上皮细胞株(HK-2)3 h,转染2 d后观察绿色荧光蛋白的表达,转染2、4 d后进行活细胞计数(台盼蓝染色法).激光共聚焦法检测HO-1和GFP蛋白在HK-2中的表达,Western Blot检测HK-2细胞HO-1蛋白表达,3H-TdR法检测HK-2转染后抑制PBMC增殖能力.结果 重组腺病毒Ad-HO-1(MOI200)感染HK-2细胞2 d后90%的细胞表达绿色荧光,2、4 d时活细胞百分率与对照组无显著差异.激光共聚焦检测表达GFP的细胞均表达HO-1蛋白,位置分布基本一致.Western blot检测显示HK-2感染Ad-HO-1后有能与HO-1单抗特异性结合的蛋白免疫印迹条带,对PBMC增殖能力有显著抑制作用.结论 Ad-HO-1能介导HO-1目的蛋白的表达,具有抑制PBMC增殖的生物学活性.     

IL-10与HO-1在大鼠酒精性脂肪肝模型中的表达

目的 探讨IL-10和HO-1在酒精性脂肪肝模型中的作用和意义.方法 建立大鼠酒精性脂肪肝动物模型,检测大鼠血清IL-10以及TNF-α,肝匀浆中MDA、GSH以及SOD相关指标的变化;此外采用RT-PCR方法检测IL-10和HO-1 mRNA的表达.结果 随着肝脏损伤程度的加深,TNF-α的水平明显增加而IL-10却逐渐降低;肝匀浆中GSH和SOD的活性明显下降,但MDA却呈上升趋势;IL-10和HO-1mRNA表达也随着肝脏损伤程度的加深而减弱.结论 IL-10与HO-1的表达随着肝损伤程度的加重而逐渐降低,且构成一个新的抗炎途径参与了酒精性肝病的过程,从而为今后的酒精性肝病的临床治疗和药物研发提供新的思路.     

溴氰菊酯对大鼠脑血红素氧化酶-1的影响

目的：研究溴氰菊酯（DM）对大鼠脑皮质及海马血红素氧化酶-1（HO-1）mRNA及蛋白表达的影响。方法：健康SD雄性大鼠36只,随机分为对照组（腹腔注射色拉油）、低剂量DM组（腹腔注射1.25mg/kg DM）、高剂量DM组（腹腔注射12.5mg/kg DM）,连续染毒5d,末次染毒24h后以原位杂交法测定皮质及海马HO-1 mRNA的表达,以免疫组化法测定HO-1蛋白表达。结果：与正常对照组相比,高剂量DM组HO-1 mRNA表达阳性细胞数明显增多（P〈0.05）;而HO-1蛋白表达阳性细胞数则在低剂量DM组、高剂量DM组大鼠均明显增高（P〈0.05）,并随着染毒剂量的增加表达明显增强（P〈0.05）。结论：溴氰菊酯可诱导大鼠脑皮质及海马HO-1表达增加,发挥一定保护作用。     

ＨＯ-１持续高表达对ＤＡ到Ｌｅｗｉｓ大鼠肝移植急性排斥反应的影响

目的:探讨血红素氧化酶-1(hemeoxygenage-1,HO-1)在DA到Lewis大鼠肝移植中对急性排斥反应的影响及其机制.方法:建立DA到Lewis大鼠肝移植急性排斥模型,实验分3组,各12对.A组供体术前24 h阴茎背静脉注射5ml/kg生理盐水作为对照;B组供体术前24 h阴茎背经脉注射HO-1诱导剂钴原卟啉(CoPP),C组供体给予HO-1抑制剂锌原卟啉(ZnPP),移植后持续予相同处理直至受体死亡.术后7天,各组处死6只,取外周血及肝脏标本,测定血清ALT,DBIL水平,组织病理观察排斥反应程度,RT-PCR及Western blot法测定移植物内HO-1 mRNA,Foxp3 mRNA及其蛋白表达情况,余观察生存期.结果:术后7天,B组血ALT,TBIL水平与A组,c组相比,差异有统计学意义(P＜0.01);病理示B组移植肝排斥反应程度轻于A,C组;B组HO-1和Foxp3 mRNA及其蛋白的表达均强于A,C组;B组受体存活时间(29.83±1.40)天较A组(13.00±0.52)天与C组(11.67±0.42)天显著延长(P＜0.01),而A,C组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论:诱导移植肝HO-1持续高表达,可通过促进移植物内Foxp3表达增强,发挥免疫抑制作用,减轻移植肝急性排斥反应.     

血红素氧化酶HO-1在鼻咽癌中表达与放疗敏感性的相关性研究

明确鼻咽癌中血红素氧化酶-1(HO-1)的表达情况及其与放疗敏感性的关系.     

缺氧诱导因子-1α在糖尿病肾病大鼠肾组织的表达及意义

目的探索缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血红素氧化酶-1（HO-1）在糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达情况,及其与糖尿病肾脏微血管病变的关系。方法用链脲佐菌素（STZ）制作糖尿病肾病大鼠模型,在制模成功后2、4、8、12、16周取肾脏组织,以年龄匹配正常大鼠作为对照组,采用免疫组织化学sP方法结合图像分析检测糖尿病肾病大鼠石蜡切片中HIF—1α与HO-1的表达量。结果免疫组化显示HIF—1α在两组均有表达,但两组比较有差异（P〈0．01）。HO—1在对照组无明显表达,但模型组有明显表达,两组比较有差异（P〈0．01）。模型组HIF—1α和HO-1表达量均于8周时达高峰。模型组肾小管上皮细胞胞浆中HIF-1α和HO-1表达量呈正相关。结论糖尿病肾病存在HIF—1α和HO-1的表达上调,糖尿病肾脏存在缺氧状态,其缺氧状态可能与其微血管结构的改变有关,并参与了糖尿病肾病的发生发展。     

大鼠心肌细胞低氧预处理与低氧后处理血红素氧化酶-1水平的比较

目的比较低氧预处理和低氧后处理对大鼠心肌细胞血红素氧化酶-1水平的影响。方法将培养的心肌细胞分为四组:对照组、低氧预处理组、低氧后处理组和联合组。分别测定各时间段细胞上清液中LDH水平和HO-1水平。结果低氧预处理组和低氧后处理组LDH的水平明显低于对照组(均P<0.01),HO-1水平明显高于对照组(均P<0.05)。联合组LDH的水平及HO-1水平与低氧预处理组、低氧后处理组差异没有显著性(均P>0.05)。结论该研究结果提示低氧预处理和低氧后处理对心肌细胞的保护作用部分是通过HO-1水平增加来实现的,同时也说明二者很可能是通过同一传导通路来实现心肌细胞的保护作用。     

微波照射预处理对诱导兔肝血红素氧化酶-1的实验研究

目的:观察微波照射预处理对家兔肝脏缺血再灌注损伤中的肝功能指标(ALT、AST、LDH)及血红素氧化酶-1(HO—1)活力影响,探讨其保护机制。方法:32只新西兰大白兔被随机分为A、B、C、D共4组。各组于缺血再灌注后2小时、4小时抽血查ALT、AST、LDH。实验结束处死获取肝脏标本,肝脏组织行HO—1免疫组织化学染色,并行HE染色,观察各组病理组织学变化。结果:B、C、D三组的ALT、AST、LDH显著高于A组。用免疫组织化学染色观察发现HO—1在A组和D组中无明显表达,B组和C组的肝细胞胞浆内有较多棕黄色颗粒表达。C组病理改变明显轻于D组。结论:适宜条件的微波照射预处理能明显改善缺血再灌注损伤的肝功能,减轻肝细胞损伤,肝功能的改善与肝脏中被诱导的HO—1的表达有显著关联,表明HO—1可能对肝脏缺血再灌注损伤起着重要的保护作用。     

结核分枝杆菌抗原Rv1258c、Rv1410c及Rv3425的HLA限制性CTL表位预测

目的:预测结核分枝杆菌(MTB)相关抗原Rv1258c、Rv1410c及Rv3425的HLA限制性细胞毒性T细胞(CTL)表位.方法:通过NCBI数据库获取各蛋白的氨基酸序列,利用BLAST分析其与人类蛋白质的同源性,利用SYFPEITHI、BIMAS和NetCTL数据库预测分析MTB相关抗原的HLA-A2与HLA-A...     

黄芪多糖对小鼠免疫功能的影响

目的探讨黄芪多糖对小鼠免疫功能的影响。方法60只小鼠随机分为正常对照组(生理盐水20ml·kg-1)、低剂量多糖组(200mg·kg-1)、高剂量多糖组(400mg·kg-1)、环磷酰胺(CTX,40mg·kg-1)组、CTX(40mg·kg-1)+低剂量多糖组、CTX(40mg·kg-1)+高剂量多糖组,每日1次,连续14d,14d后检测多糖对小鼠免疫器官的影响、巨噬细胞吞噬功能、T淋巴细胞增殖情况。结果CTX对小鼠的免疫功能有明显的抑制作用(P<0.05),黄芪多糖不经仅能有效对抗免疫抑制(P<0.05),对正常小鼠也有免疫增强作用。结论黄芪多糖对小鼠特别是免疫抑制小鼠免疫功能有增强作用。     

一种红树林链霉菌的胞外多糖免疫功能研究

目的:对一种分离自海南红树林链霉菌的胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)进行了免疫调节活性研究。方法:以小鼠迟发型过敏反应、血清溶血素测定以及巨噬细胞吞噬实验探讨EPS的免疫调节活性,并以流式细胞仪测定脾脏淋巴细胞亚群。结果:EPS对小鼠免疫应答多项指标具有一定的正向调节作用(P﹤0.05);CD4+T细胞数量、CD4+/CD8+比率明显高于正常对照组。结论:此种产自链霉菌的EPS具有一定的免疫调节活性。     

黄芪多糖对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的调节作用研究

目的:研究黄芪多糖(APS)增强巨噬细胞的免疫作用,探讨其调节机体免疫功能的机理。方法:在体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞中加入不同浓度的APS后,观察其对巨噬细胞一氧化氮(NO)合成及对肿瘤细胞杀伤活性的影响。结果:APS能促进巨噬细胞NO合成,并能显著增强小鼠腹腔巨噬细胞对黑色素瘤细胞的杀伤作用。结论:APS能增强小鼠腹腔巨噬细胞的免疫作用,可能是其抗肿瘤作用的机理之一。     

扶正胶囊提取物对环磷酰胺诱导的免疫低下小鼠免疫调节作用研究

[目的] 探讨扶正胶囊提取物对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用。[方法] 将60只昆明小鼠进行随机分组,每组10只,分为空白组、模型组、阳性对照组以及扶正胶囊提取物低、中、高剂量组。采用环磷酰胺腹腔注射建立小鼠免疫功能低下模型,检测各组小鼠的胸腺指数和脾脏指数、单核细胞吞噬能力、血清中白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素10（IL-10）、白细胞介素-17（IL-17）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）水平和脾T淋巴细胞亚群CD3⁺T淋巴细胞（CD3⁺）、CD4⁺T淋巴细胞（CD4⁺）、CD8⁺T淋巴细胞（CD8⁺）的分布与比例。[结果] 扶正胶囊提取物能提升由环磷酰胺诱导的免疫低下小鼠的胸腺指数和脾脏指数,增强单核细胞吞噬功能,显著提高小鼠细胞免疫因子IL-4、IL-10、IFN-γ含量,降低IL-17、TNF-α含量,上调脾淋巴细胞亚群CD3⁺CD4⁺的表达程度和提升CD3⁺CD4⁺/CD3⁺CD8⁺比值。[结论] 扶正胶囊提取物能够提升环磷酰胺所致的免疫抑制小鼠的免疫功能。     

广西甜茶提取物体内抗肿瘤实验研究初探

目的探讨广西甜茶对小鼠肉瘤S180与肝癌H22移植性肿瘤的作用。方法广西甜茶以50%的乙醇提取制得提取物。分别考察提取物对小鼠肉瘤S180和小鼠肝癌H22移植瘤的作用。取肉瘤S180细胞/肝癌H22细胞分别接种于小鼠右前肢腋皮下,随机分为模型对照组、环磷酰胺(CTX)组及甜茶提取物低、中、高(1、3、9 g.kg-1.d-1)3个剂量组。CTX组按20 mg.kg-1.d-1腹腔注射给药,其余各组均灌胃给药,连续给药10 d后,剥离瘤体并称质量,计算抑瘤率,观察体质量、脾脏及胸腺的变化。结果甜茶提取物低、中、高剂量组均对小鼠肉瘤S180或肝癌H22移植瘤有不同程度的抑制作用,其中高剂量组对2种瘤体的抑制作用均显著(P<0.01),且对小鼠体质量、脾脏及胸腺质量均无明显影响。结论广西甜茶提取物对小鼠肉瘤S180与肝癌H22有较明显的体内抑制作用。     

迷迭香总二萜酚的体内抗氧化作用研究

目的：探讨迷迭香提取物的体内抗氧化作用及其物质基础。方法：通过建立小鼠运动性氧化损伤模型，测定并比较给药组（迷迭香总二萜酚组）与对照组的血清、心、肝、脑及股四头肌等组织内的丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性。结果：给予迷迭香总二萜酚提取物的中、高剂量（分别为250和500mg/kg体重）组的小鼠除脑外其他各组织内的MDA含量都有明显降低，SOD和GSH-Px活性都有明显升高。结论：迷迭香提取物具有较好的体内抗氧化作用，其中的二萜酚类化合物可能是其抗氧化作用的物质基础。     

免疫调节剂治疗多发性骨髓瘤的抗血管生成及免疫调节作用机制

多发性骨髓瘤是一种多进程疾病,不同疾病进程对化疗和放疗的敏感性不同,敏感性减低可造成疾病复发或成为难治性多发性骨髓瘤。骨髓瘤细胞的生长、凋亡的抑制及耐药性依赖于参与免疫调节的细胞因子和血管生成的生长因子,如IL-6、VEGF等。沙利度胺既具有抗血管生成作用,又具有免疫调节功能,是治疗多发性骨髓瘤的有效药物之一,但长期服用沙利度胺可引起深静脉血栓等严重并发症,使与沙利度胺结构相似但比其更安全、高效的免疫调节类药物(immunomodulatory drugs, IMiDs)的探讨成为热点。IMiDs具有抗新生血管形成作用,同时可共刺激T细胞亚群,诱导细胞因子产生并提升NK细胞数量与功能,通过增强抗体依赖细胞介导的细胞毒性杀伤肿瘤细胞。本文简述IMiDs治疗多发性骨髓瘤的机制及其初步临床试验结果。     

间充质干细胞在急性肾损伤中免疫调节作用的研究进展

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)为干细胞家族重要成员之一,可从骨髓、脂肪、脐带、外周血等多种组织中分离获得,具有强大的免疫调节作用,可广泛调节先天和适应性免疫系统.在急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)中,MSCs可通过调节免疫、抑制全身及局灶炎症反应,减轻肾损伤、促进组织再生.本文回顾MSCs在AKI中发挥的免疫调节作用机制及其近年来的研究进展,旨在为AKI的临床治疗提供新的思路和方向.