原位注射法建立人胰腺癌SW1990裸鼠种植瘤模型及高频内镜超声探头对其的监测

目的 建立裸小鼠人胰腺癌原位种植瘤模型,探索监测种植瘤生长的方法.方法 将对数生长期的人胰腺癌细胞株SW1990制备成细胞悬液,原位注射于Balb/c-nu裸小鼠胰腺尾部包膜下,利用高频内镜超声(EUS)探头体表观察肿瘤结节的生长及声像图像.结果 20只裸小鼠均接种成功,1只裸鼠于接种后25 d时死亡.接种后14 d,EUS检查的瘤体大小为(8.09±2.61)mm3,肿瘤结节呈均质低回声,边界清楚,周边有包膜及声晕,形态规则,30%的肿瘤结节周边可见低速环绕彩色血流信号;接种后28 d,瘤体增大至(12.40±3.51)mm3,70%的肿瘤结节呈不规则形,部分为分叶状,肿块呈低回声,不均质,未见液化坏死区,70%的肿瘤结节周边可见低速环绕彩色血流信号.结论 原位注射法是建立裸小鼠人胰腺癌原位种植瘤模型较理想的方法,操作简便,成瘤率高;高频内镜超声显像是可靠的监测胰腺原位种植瘤的手段.     

胰腺癌的MRI表现

目的总结胰腺癌的MRI征象，并比较不同序列对胰腺癌诊断的价值．方法70例经临床与手术证实的胰腺癌患者均采用1．5T超导MR机扫描，除常规的T1WI，T2WI序列外，还采用RT1WI、造影增强后FMPSPGR和延迟T1WI及MRCP扫描．对各序列的图象进行质和量分析．结果FT1WI对肿块的显示最明显，72．22％为明显的低信号，尤其对无明显轮廓改变的小胰腺癌显示更敏感；胰、胆管扩张以造影增强后T1WI及FMPSPGR显示最可靠；胰周血管包绕、浸润以造影后FMPSPGR显示最清楚；腹膜后淋巴结转移以T1WI显示最好；肝脏转移灶以T2WI序列最敏感．MRCP形成类似ERCP的影像，对胆管的梗阻部位和形态的显示有很大的帮助。结论MRI多种扫描序列的应用对胰腺癌的诊断是很有价值的．     

人胰腺癌细胞株PANC1裸鼠原位模型的建立及磁共振监测

目的 建立一种稳定的人胰腺癌裸小鼠原位移植瘤模型,并探讨无创的磁共振(MRI)对其监测的应用价值.方法 人胰腺癌细胞株PANC1体外常规传代后建立裸鼠皮下种植瘤模型,将皮下种植瘤制成细胞悬液,植入20只BALB/C-nn裸鼠的胰腺包膜下构建人胰腺癌原位移植模型;通过MRI检查监测模型的成瘤率、成瘤时间、肿瘤生长速度、肿瘤形态、信号变化等特征,于第7周末取肿瘤组织行病理学检查.结果 接种后15 d,7只(35%)荷瘤鼠在MRI上显示成瘤,至接种后27 d,成瘤率为100%.肿瘤信号与邻近组织相比,90%(18/20)病灶T1WI呈均匀稍低信号,10%(2/20)呈等信号;75%(15/20)在T2WI呈均匀高信号.移植后2、3、4、5、6、7周经MRI测量的移植瘤体积分别为(12.6±2.4)mm3、(94.3±11.2)mm3、(175.9±82.5)mm3、(395.8±126.6)mm3、(1290.2±167.2)mm3、(1583.4±87.4)mm3.病理学检查确诊为胰腺低分化腺癌,并保持原发瘤的生物学特征.结论 人胰腺癌细胞株PANC1移植瘤制成的细胞悬液种植裸小鼠胰腺包膜下制备胰腺癌模型符合人胰腺癌的特征,且易于无创监测,为临床研究提供了一个有效、稳定的体内实验体系.     

人胰腺癌原位移植模型MRI增强扫描特征及病理对照研究

目的 探讨人胰腺癌原位移植瘤模型的MRI影像学表现及其病理基础.方法 应用3.0T磁共振成像仪及临床型乳腺线圈对30只胰腺癌裸鼠原位模型行冠状位及横断位TSE-T1 WI/T2 WI平扫,经腹腔注射钆喷酸葡胺(Gd-DTPA)行连续动态增强扫描,测量平扫和增强扫描各时相肿瘤信号强度,计算强化率,分析MR图像特征并与病理对照.结果 30只裸鼠荷瘤接种成功率为100%,组织学检查符合胰腺低分化腺癌.与邻近组织信号相比,90%(27/30)肿瘤T1 WI呈均匀稍低信号,10%(3/30)信号欠均匀;80%(24/30)肿瘤T2 WI呈不均匀高信号、内见斑片状更高或等信号区,20%(6/30)呈均匀等高信号.平扫肿瘤信号强度为228.35±11.71,增强扫描后1.5、3、6,9、12 min的肿瘤信号强度分别为258.20±11.17、301.75±17.09、358.65±25.13、480.05±19.01、558.35±40.49,均明显高于平扫(P值均<0.01);各时相强化率分别为0.13±0.04、0.35±0.11、0.56±0.10、1.10±0.10、1.45±0.18,各时相间差异均有统计学意义(P值均<0.01).MR强化明显区为供血丰富的肿瘤生长活跃区域,中央无强化区为坏死组织和(或)肿瘤细胞致密且毛细血管较少区域.结论 经腹腔注射对比剂后可获得清晰的移植瘤MRI图像,与病理检查结果具有很好的一致性.     

微囊化人胰腺癌细胞建立裸鼠胰腺癌模型研究

目的研究微囊化人胰腺癌细胞建立裸鼠胰腺癌模型效果,以期建立稳定的更为理想的胰腺癌动物模型.方法 分别以人胰腺癌细胞悬液和微囊化人胰腺癌细胞悬液建立皮下移植瘤模型,定期监测皮下肿瘤大小,绘制生长曲线并进行比较.分别以人胰腺癌细胞悬液和微囊化人胰腺癌细胞建立原位移植瘤模型,分别于模型建立后第4周和第8周进行正电子发射计算机...     

不同转移潜能食管癌细胞株裸鼠模型的建立

背景：食管癌的转移率较高,是导致患者死亡的主要原因,但其机制仍不完全清楚。目的：建立具有不同转移潜能的高侵袭能力食管癌细胞株亚系裸鼠模型。方法：应用Transwell侵袭小室从食管癌细胞株Eca-109中筛选出高侵袭能力的食管癌细胞株亚系。观察母系和亚系细胞形态,MTT法检测细胞增殖能力的变化,划痕法检测细胞迁移能力。将食管癌Eca-109细胞及其亚系Eca-109 T4细胞分别皮下注射于裸鼠体内诱导移植瘤模型,观察成瘤率、成瘤时间、肿瘤生长情况。结果：成功从食管癌Eca-109细胞株中筛选出高侵袭能力的食管癌细胞株亚系Eca-109 T4,两者细胞形态无明显差异。与Eca-109细胞相比,Eca-109 T4细胞增殖能力和划痕愈合能力均明显增强。Eca-109组和Eca-109 T4组裸鼠成瘤率均为100%,与Eca-109组相比,Eca-109 T4组裸鼠成瘤时间更早且瘤体生长更快。结论：成功建立了不同转移潜能的高侵袭能力食管癌细胞株亚系裸鼠成瘤模型,为食管癌转移的进一步研究提供了理想模型。     

硼替佐米对胰腺癌细胞BxPC3、SW1990生长抑制作用的体外研究

目的 观察硼替佐米对胰腺癌细胞BxPC3、SW1990增殖、凋亡的影响,探讨硼替佐米杀伤癌细胞的可能机制.方法 应用1、10、50、100、500 nmol/L及1、10 μmol/L的硼替佐米干预BxPC3、SW1990细胞,以硼替佐米未干预的细胞作为对照组.采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞的增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;RT-PCR法检测Bak、Bax、Bcl-2、Bcl-xl、survivin mRNA表达;蛋白质印迹法检测pro-caspase-3、cleaved-caspase-3、Bax、Bcl-2、surviving蛋白表达.结果 大于50 nmol/L的硼替佐米干预胰腺癌BxPC3、SW1990细胞时,呈浓度及时间依赖性抑制细胞的增殖,其中硼替佐米对BxPC3细胞的生长抑制作用显著大于对SW1990细胞的作用,两者差异有统计学意义（P值均＜0.05）.100 nmol/L硼替佐米干预组BxPC3和SW1990细胞凋亡率分别为（22.56±4.23）％和（（12.71±2.23）％,显著高于对照组的（2.15±0.47）％和（2.32±0.54）％（P值均＜0.05）,且BxPC3细胞的凋亡率显著高于SW1990细胞（P＜0.05）.100 nmol/L硼替佐米干预48 h后BxPC3和SW1990细胞的Bak mRNA表达无显著变化,Bax mRNA及蛋白表达显著增加（P值均＜0.05）,Bcl-2 mRNA和蛋白表达及Bcl-xl mRNA表达均减少（P值均＜0.05）.survivin mRNA和蛋白表达在BxPC3细胞中均减少,而在SW1990细胞中均增加（P值均＜0.05）.2株细胞的pro-caspase-3蛋白表达减少,而cleaved-caspase-3蛋白表达增加（P值均＜0.05）.结论 硼替佐米可抑制胰腺癌细胞BxPC3、SW1990的增殖、诱导凋亡,对BxPC3细胞的作用高于对SW1990细胞,其机制可能与激活线粒体内源性凋亡途径及survivin参与的肿瘤耐药相关.     

人胰腺癌鸡胚模型的建立及其肿瘤生物学观察

目的建立人胰腺癌鸡胚移植模型,为临床胰腺癌研究提供一种简便实用的工具.方法将人胰腺癌细胞系SW1990细胞接种到鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)上,动态观察移植瘤的形态及肿瘤生物学特性,分析影响移植瘤成活的因素,并对瘤组织行组织学检查.结果成功建立了人胰腺癌鸡胚移植模型,移植瘤组织学结构与人胰腺癌相似;接种癌细胞数量影响接种成瘤率,接种癌细胞数量越大,成瘤率越高;移植瘤可诱发血管生成并向肿瘤呈放射状集中.结论将SW1990细胞接种到鸡胚上建立鸡胚移植胰腺癌是可行的,本模型可动态观察胰腺癌生长,模拟其在体内生长情况,为胰腺癌研究提供一种简便实用的工具.     

STAT3基因沉默对人胰腺癌SW1990细胞的裸鼠移植瘤生长的影响

目的 观察信号转导与转录激活因子3（STAT3）基因表达沉默后对人胰腺癌SW1990细胞的裸鼠移植瘤生长的影响,探讨其机制.方法 构建靶向STAT3短发卡RNA（shRNA）表达载体,稳定转染胰腺癌SW1990细胞（SW1990-RNAi组）,以转染阴性对照shRNA表达载体细胞（SW1990-Con组）及亲本SW1990细胞（SW1990组）作为对照.应用蛋白质印迹法检测各组细胞STAT3、血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）蛋白的表达.建立各组细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,观察移植瘤的生长,应用免疫组化法检测移植瘤的CD34表达,计算肿瘤的微血管密度（MVD）.结果 SW1990组、SW1990-Con组、SW1990-RNAi组细胞的STAT3蛋白表达量分别为84.69±9.31、82.00±7.76、7.93±1.24,VEGF蛋白表达量分别为82.94±8.97、80.86±10.28、39.04±6.23,MMP-2蛋白表达量分别为40.88±5.09、38.26±5.71、12.54±2.15,SW1990-RNAi组均显著低于其他两组（P值均＜0.05）,而SW1990-Con组与SW1990组细胞的3种蛋白表达量差异均无统计学意义.SW1990组、SW1990-Con组、SW1990-RNAi组裸鼠移植瘤的重量分别为（2.2±0.4）、（2.2±0.3）、（0.5±0.3）g,瘤组织的MVD分别为每高倍视野（20.35±2.41）、（18.79±1.94）、（9.62±1.06）个,SW1990-RNAi组均显著低于其他两组（P值＜0.05或＜0.01）,而SW1990组与SW1990-Con组间的差异均无统计学意义.结论 STAT3基因表达被抑制后SW1990细胞的裸鼠移植瘤生长减缓,其机制可能是通过下调VEGF及MMP-2的表达、抑制肿瘤血管形成所致.     

MMI-166对人胰腺癌细胞株SW1990体外增殖及凋亡的影响

目的 探讨基质金属蛋白酶抑制剂MMI-166对人胰腺癌SW1990细胞增殖和凋亡的影响.方法 应用不同浓度(25、50、100μg/ml)的MMI-166处理人胰腺癌SW1990细胞24、48 h.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率;采用Annexin V-PI法检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 25、50、100μg/ml MMI-166处理细胞24h后,细胞生长抑制率分别为(34.23±3.87)％、(44.81±2.01)％、(53.91±1.74)％;48 h的抑制率为(39.95±1.83)％、(52.26±3.46)％、(63.20±2.48)％,呈浓度及时间依赖性.24h的细胞凋亡率分别为(4.17±0.55)％、(8.22±0.70)％、( 14.10±0.44)％;48 h的细胞凋亡率为(11.19±0.47)％、(23.01±0.53)％、(28.10±0.52)％,均显著高于对照组的(0.09±0.12)％(P＜0.05).结论 MMI-166以浓度和时间依赖性抑制胰腺癌SW1990细胞增殖,诱导细胞凋亡.     

小鼠高尿酸血症模型探讨

目的通过比较酵母膏与酵母膏+乙胺丁醇灌胃致小鼠血清尿酸水平的变化,探讨建立小鼠高尿酸血症模型新方法。方法 52只雄性昆明小鼠,完全随机分为对照组、酵母膏组、酵母膏+乙胺丁醇组及别嘌呤醇组4组,分别采用蒸馏水、酵母膏、酵母膏+乙胺丁醇、酵母膏+乙胺丁醇+别嘌呤醇片灌胃,3周后取血测定小鼠血清尿酸水平。结果连续灌胃3周后,各组小鼠血清尿酸水平分别为:酵母膏组(247±61)μmoL/L,酵母膏+乙胺丁醇组(30l±53)肛mol/L、对照组小鼠血清尿酸为(235±34)肛moL/L,别嘌呤醇组血清尿酸(114.67±49.74)μmoL/L。结论酵母膏+乙胺丁醇灌胃可建立相对持久稳定的小鼠高尿酸血症模型,同时升高的血清尿酸可以被阳性药物别嘌呤醇片有效降低。     

三种胰腺癌细胞株Mesothelin的表达及成瘤速度的比较

目的 比较3种人胰腺癌细胞株在体外和裸鼠体内Mesothelin的表达及裸鼠皮下种植瘤生长速度的差异.方法 培养人胰腺癌细胞株SW1990、BxPC3、PANC1,取对数生长期分别注射于裸鼠左腋窝皮下,每周测量裸鼠皮下种植瘤的长、短径,计算体积,SW1990、BxPC3组裸鼠观察3周,PANC1组裸鼠观察5周;用蛋白质印迹法分别检测3种细胞及裸鼠皮下种植瘤组织中的Mesothelin表达,用免疫组化染色检测3种裸鼠皮下种植瘤组织中Mesothelin表达.结果 人胰腺癌细胞株体外Mesothelin表达的强弱顺序是BxPC3＞ PANC1＞ SW1990,体内种植瘤组织表达的强弱顺序是SW1990＞ BxPC3＞ PANC1.3种人胰腺癌细胞种植于裸鼠皮下的成瘤率均为100％,各组肿瘤的生长速度顺序为SW1990＞ BxPC3＞ PANC1.结论 不同人胰腺癌细胞株Mesothelin的表达量不同,裸鼠皮下种植瘤的生长速度亦不同,两者无相关性.     

抗抑郁药对胰腺癌移植瘤模型的进食及肿瘤生长的影响

目的 探讨米氮平和氟西汀对胰腺癌皮下移植瘤裸鼠进食量、体重和肿瘤生长的影响.方法 建立21只人胰腺癌细胞SW1990的裸鼠皮下移植瘤动物模型,按完全随机法分为对照组、米氮平组和氟西汀组,各7只.建模后1 d开始分别给各组生理盐水、米氮平10mg·kg-1·d-1和氟西汀1Omg·kg-1·d-1灌胃,每天1次,持续42 d.比较3组裸鼠进食量、体重和肿瘤体积的变化.结果 3组胰腺癌移植瘤体积无明显差异.第2周米氮平组进食量为(5.03±0.16)g,显著较其他2组多,第4周体重为(16.00±1.41)g,较其他2组下降少(P<0.05);氟西汀组从第3周起进食量较对照组显著减少,第6周的体重也较对照组显著下降(P<0.05).在第6周,对照组、米氮平组和氟西汀组的日进食量分别为(3.54±0.13)g、(4.19±0.16)g和(3.34±0.13)g,体重分别为(13.71±1.11)g、(14.86±1.68)g和(12.57±1.51)g.结论 米氮平在改善荷瘤裸鼠进食量和减缓体重下降方面优于氟西汀,但两者对肿瘤生长均无明显影响.     

小鼠非酒精性脂肪性肝病模型的建立与评价

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）疾病谱包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎及肝硬化等多种类型。建立一个稳定可靠的、疾病谱完整的NAFLD动物模型，对研究NAFLD的发病机制及治疗方法有重要的意义。本研究采用胆碱和蛋氨酸缺乏的饲料喂养小鼠，旨在建立NAFLD的小鼠模型。[第一段]     

MRI对胰腺囊性肿瘤的诊断价值

目的探讨MRI对胰腺囊性肿瘤的诊断价值。方法回顾分析23例经手术病理证实的胰腺囊性肿瘤资料,总结其影像表现。结果黏液性囊性肿瘤10例,囊性肿块较大,肿块平均直径超过10 cm,由较厚的纤维壁分隔成多房囊肿,外壁光滑,边界清楚。浆液性囊腺瘤6例,病灶较小,囊内有分隔而呈放射状排列,中心瘢痕为其特征性表现。胰腺囊性转移瘤3例,均有肿瘤病史,表现不典型,需结合肿瘤病史定性。胰胚细胞瘤2例,幼儿发病,肿块巨大,肿瘤坏死囊变,形成假-假性囊肿。胰腺乳头状囊实性肿瘤1例,表现为边界清楚的囊实性肿块,囊壁上有壁结节。胰腺毛细血管瘤1例,表现与浆液性囊腺瘤相似,难以术前诊断。结论MRI对胰腺囊性肿瘤具有高度敏感性,不同病变有一定的特征性表现, 对术前定性极有价值。