转录调节因子Ets-1在血管平滑肌细胞增殖与凋亡中的作用

目的　研究转录调节因子Ets 1对血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖与凋亡的影响及其可能的机制。方法　采用定量细胞DNA片段的方法观察转染质粒Ets 1后VSMC增殖与凋亡情况 ,观察共转染Ets 1和反义P2 1WAF1 CIP1对细胞增殖与凋亡的干预作用。应用Western印迹法研究转染质粒Ets 1后磷酸化视网膜母细胞瘤 (RB P)蛋白表达情况。结果　定量细胞质DNA片段方法发现Ets 1抑制VSMC凋亡。反义P2 1WAF1 CIP1能够阻断Ets 1的抗凋亡作用 ,并抑制Ets 1诱导的VSMC增殖。Western印迹法发现Ets 1能够上调RB P蛋白表达 ,反义P2 1WAF1 CIP1可以阻断视网膜母细胞瘤 (RB)蛋白磷酸化。结论　在VSMC中 ,Ets 1通过P2 1WAF1 CIP1旁路发挥抑制凋亡和促进增殖作用     

气管下段平滑肌瘤1例

1病例报告 患者女，65岁。因反复咳嗽，咳白痰伴气喘6个月，加重1个月来我院就诊。患者有明确被动吸烟史。查体：左下肺语颤稍减弱、叩诊音浊、呼吸音稍减弱。辅助检查：白细胞计数5．99×10^9／L，中性粒细胞51．7％，红细胞计数4．37×10^11／L，血红蛋白143g／L，血小板计数285×10^9／L。血沉：8mm／h，神经元特异烯醇化酶（NSE）45．98μg／L。心电图提示窦性心律，ST-T改变。胃镜结果提示：慢性浅表性胃炎，十二指场球炎。     

气管平滑肌细胞钾通道与麻醉药

气管平滑肌(airway smooth muscle,ASM)上主要分布有4种钾通道:钙激活性钾通道、电压依赖性钾通道、内向整流钾通道、ATP敏感性钾通道。钾通道参与调节ASM细胞的膜电位水平和兴奋性以及ASM的张力、气道反应性等多种生理功能。在手术麻醉期间可因病人的气道高反应性及麻醉药物等因素影响气道平滑肌(ASM)的钾通道,从而对ASM的舒缩功能带来严重干扰。本文对ASM上的钾通道的基本特性及相关联的信号传导通路,麻醉药对钾通道的作用进行综述。     

肿瘤坏死因子对气道上皮细胞及平滑肌细胞分泌内皮素—1的影响

为进一步探索肿瘤坏死因子－Ａｌｐｈａ（ＴＮＦ－α）与内皮素－１（Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎｔ－１）之间的关系，用ＴＮＦ－α刺激离体培养的气道上皮细胞、平滑肌细胞，测定其分泌ＥＴ－１的变化。结果发现气道上皮细胞本身可分泌ＥＴ－１，在ＴＮＦ－α的刺激下ＦＴ－１的分泌释放量增加；气道平滑肌细胞无分泌（或分泌微量）ＥＴ－１，在ＴＮＦ－α刺激＊后可分泌释放Ｅｔ－１。此方法可能对气道高反应的形成和气道重建有一定的意义。     

内皮素-1在不同月龄大鼠神经细胞中的表达

目的研究内皮素-1(endothelin-1,ET-1)在不同月龄大鼠神经细胞中表达变化,为探讨纹状体易卒中机制、揭示脑血管病发病机制提供参考资料。方法应用链霉亲和素-生物素复合物免疫组化染色法观测1~2个月龄、6~7个月龄及>24个月龄3组共36只Wistar大鼠神经细胞ET-1的表达。结果随大鼠月龄增加,ET-1在纹状体、颞叶皮质、海马区表达增加,>24个月龄组纹状体、颞叶皮质、海马区ET-1阳性反应强度与其他2组比较差异有统计学意义(P<0.01),同月龄组纹状体、颞叶皮质、海马区的ET-1表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论ET 1在神经系统的表达,可能与老年人易发生脑血管病有关。     

强压力波对血管内皮细胞,血管平滑肌细胞释放内皮素,一氧化氮的 …

目的 探讨强压力波对血管内皮细胞及血管平滑肌细胞释放内皮素（ＥＴ）、一氧化氮（ＮＯ）的影响。方法 １５只犬高速投射物致伤，检测致伤前后血浆ＥＴ、ＮＯ浓度，并用肠系膜血管内皮细胞（ＶＥＣ）、血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）联合培养，体外检测强压力波致伤前后培养上清中的ＥＴ－１、ＮＯ浓度。结果 高速投射物致伤犬后血浆中的ＥＴ、ＮＯ浓度显著升高。联合培养血管内皮细胞、平滑肌细胞致伤后ＥＴ、ＮＯ浓度在致伤后１０     

干扰素-γ对动脉损伤后平滑肌细胞增殖和迁移的作用

目的　探讨干扰素 γ(IFN γ)对动脉损伤后平滑肌细胞 (SMC)增殖和迁移的作用及其作用机制。方法　建立兔髂动脉球囊损伤动物模型 ,培养损伤后动脉SMC ,实验分四组 :对照组、转化生长因子 β1(TGF β1)组、IFN γ组、TGF β1+IFN γ组。每组细胞加培养液或加入 10ng/mlTGF β1或 /和5 0 0U/mlIFN γ刺激 72h ,细胞计数和四甲基偶氮唑盐 (MTT)法测定各组SMC的增殖 ,同时测定SMC迁移。明胶酶谱分析SMC中MMP 2的活力。结果　与对照组比较 [细胞数 (2 .875± 0 .32 3)× 10 5个 /ml,迁移距离 (2 79.9± 8.12 9) μm],72h后TGF β1组细胞数 (4 .188± 0 .2 39)× 10 5个 /ml,(P <0 .0 1)和迁移距离 (36 5 .8± 9.6 86 ) μm ,(P <0 .0 1)增加 ,MTTA值检测细胞增殖抑制率为 - 19.4 % ;IFN γ组细胞数 (1.938± 0 .2 4 9× 10 5个 /ml,P <0 .0 1)和迁移距离 (2 34.4± 9.72 2 μm ,P <0 .0 1)减少 ,细胞增殖抑制率为 15 .8% ;TGF β1+IFN γ组细胞数 (3.12 5± 0 .2 5 4× 10 5个 /ml,P <0 .0 1)和迁移距离(32 3.1± 8.4 81) μm ,(P <0 .0 1)低于TGF β1组 ,细胞增殖抑制率为 - 9.1%。明胶酶谱分析显示各组细胞均可检测到基质金属蛋白酶 2 (matrixmetalloproteinase 2 ,MMP 2 6 6× 10 3 u) ,TGF β1组还可检     

半胱氨酸对人血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的观察半胱氨酸（Cys）对人血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖和凋亡的影响。方法采用组织贴块法体外培养人VSMCs,用不同浓度的Cys培养液孵育细胞24h,用MTT法检测VSMCs增殖,流式细胞术检测VSMCs凋亡,RT-PCR法检测bax mRNA的表达。结果体外培养的人VSMCs在终浓度为100、200、500和1000μmol/LCys的培养液中孵育24h后的吸光度（A）值均高于对照组（P〈0.05）,表明Cys可诱导人VSMCs增殖;但同时,VSMCs凋亡细胞数明显高于对照组（P〈0.05）,bax的表达增强,表明Cys亦诱导了人VSMCs凋亡。结论浓度较高时半胱氨酸可同时诱导VSMCs增殖和凋亡。     

离体气管法实验对理解平滑肌生理特性的作用与意义

目的 通过离体气管的不同制备方法，分析其各自的特点，选择适用于学生实验的最佳制备方法。方法 取健康豚鼠的离体气管，分别制备成：气管片、气管连环和气管螺旋条，分别观察它们对相关生理活性物质的反应。结果 气管螺旋条和气管连环因药物引起的收缩、舒张作用明显，气管螺旋条作用最强，而气管片的反应弱。结论 气管螺旋条制备法适用于学生生理机能实验。     

内皮素-1对肺组织成纤维细胞上内皮素受体基因表达的影响

 目的 探讨肺组织成纤维细胞中内皮素-1对内皮素受体A-mRNA的表达的影响.方法 用内皮素-1刺激培养的肺组织成纤维细胞,利用反转录PER的方法测定其受体A-raRNA的表达.结果 发现ET-1刺激后出现受体表达下调现象.结论 此现象可能是机体本身自我调节的代偿机制.     

肌微管素相关蛋白7在小鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移中的作用及机制

目的 探究肌微管素相关蛋白7（Mtmr7）在小鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖和迁移中的作用及其机制。方法 培养小鼠主动脉平滑肌细胞系（MOVAS）,用30 ng/ml血小板源性生长因子BB（PDGF-BB）诱导小鼠VSMCs体外增殖和迁移,采用q RT-PCR和Western blotting分别检测PDGF-BB干预后Mtmr7 m RNA和蛋白表达水平的变化。为探究Mtmr7对小鼠VSMCs增殖和迁移的作用,用Mtmr7基因过表达腺病毒（Ad-Mtmr7）感染VSMCs促使Mtmr7过表达,将MOVA S分为对照组、Ad-Mtmr7组、PDGF-BB组、Ad-Mtmr7+PDGF-BB组4组,采用Ki-67细胞免疫荧光染色、CCK-8法检测VSMCs增殖能力,划痕实验检测VSMCs迁移能力,Western blotting检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1（mTORC1）下游靶标蛋白水平。用5 mg/L胰岛素（insulin）恢复mTORC1活性,将MOVA S分为PDGF-BB组、Ad-Mtmr7+PD GF-BB组、Ad-Mtmr7+PD GF-BB+insulin组3组,...     

新型内皮素受体拮抗剂ETP-508对低氧培养大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨新型内皮素受体拮抗剂ETP-508对低氧培养大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响。方法贴壁原代培养的PASMCs分为4组:常氧组(氧浓度21%),低氧组(氧浓度2%),低氧 BQ-485组(BQ-485的终浓度分别为10-6、10-7、10-8、10-9mol/L),低氧 ETP-508组(ETP-508的终浓度分别为10-6、10-7、10-8、10-9mol/L)。4组细胞均分别培养24、48、72h后,采用MTT法(波长492nm)检测BQ-485和ETP-508对PASMCs增殖的影响。按上述分组培养细胞48h,采用流式细胞仪测定细胞周期;放免法测定培养上清液中内皮素-1(ET-1)的含量。结果24h时各实验组A值差异不明显;48h时低氧组A值明显增加(P<0.01),低氧 BQ-485组、低氧 ETP-508组在10-8、10-7、10-6mol/L时A值下降,与低氧组比较有统计学意义(P<0.01);72h时低氧组A值仍高于常氧组,但较48h时略下降(P<0.05)。48h时低氧组G2、S期细胞比率、DNA合成增加,与常氧组比较有统计学意义(P<0.01,P<0.05);与低氧组比较,低氧 BQ-485组、低氧 ETP-508组G2、S期细胞比率下降(P<0.05),G1期细胞增多(P<0.05),DNA合成减少。48h时低氧组ET-1水平增高(P<0.01),给予BQ-485、ETP-508后ET-1水平降低,10-7mol/L BQ-485、10-9mol/L ETP-508可明显降低ET-1水平(P<0.01)。结论ETP-508作为一种新型内皮素受体拮抗剂能抑制低氧培养PASMCs的增殖,减少ET-1的生成,且其作用较BQ-485强。     

高压氧对脑梗塞患者血浆一氧化氮、内皮素-1含量的影响

目的观察脑梗塞患者血浆一氧化氮（NO）、内皮素-1（ET-1）含量的变化以及高压氧（HBO）对其影响。方法选取脑梗塞患者60例，每日1次给予HBO治疗，用硝酸还原酶法、放免分析法测定治疗前后观察组及对照组NO、ET-1含量的变化。结果HBO治疗前脑梗塞患者血浆ET-1的含量较对照组明显升高，而NO的含量则显著降低（P〈0．01），高压氧治疗3个疗程后，ET-1明显下降（P〈0．01），NO升高（P〈0．01）。结论HBO对脑梗塞患者血浆ET-1、NO含量的调节，有利于受损血管内皮的修复，从而改善血管的舒缩功能，有利于脑梗塞患者康复。     

内皮素在疾病发生中的作用

内皮素 (ＥｎｄｏｔｈｅｌｉｎＥＴ)是 1988年由日本学者Ｙａｎａｇ ｉｓａｗａ等[1] 从猪的主动脉内皮细胞中分离纯化出的一种由2 1个氨基酸组成的具有强烈缩血管作用的血管活性肽 ,包括三种类型 :ＥＴ 1,ＥＴ 2和ＥＴ 3。ＥＴ是迄今所知体内作用最强和效应最持久的缩血管物质之一。ＥＴ是通过特异的ＥＴ受体 (ＥＴＲ)而发挥其作用 ,并参与许多疾病的病理生理过程 ,且在某些疾病的发生中起着重要作用。1　ＥＴ的结构及受体特点1 1　ＥＴ的结构特点　目前发现人及哺乳动物体内有ＥＴ 1,ＥＴ 2 ,ＥＴ 3,它们的结构及功能有很多相似之处 ,但不…     

TH1/TH2在慢性乙型肝炎发病机制中的作用

目的：研究Th1/Th2变化在慢性乙型肝炎发病机制中的作用。方法：采用双抗体酶联分析法检测了20例正常人，30例慢性乙型肝炎患者血清中的IFN－γ，IL－2，IL－4和IL－6的水平。结果：慢性乙型肝炎组Th2类细胞因子（IL－4，IL－6）水平明显高于正常对照组（P＜0．05）,Th1类细胞因子IL－2水平较正常组也增高（P＜0．05），IFN－γ水平轻度增加，但无统计学差异（P＞0．05），结论:Th2类细胞因子水平增高以及由此引起的Th1/Th2比值下降可能与慢性乙型肝炎的病程持续有关。     

内皮素1在肺癌组织中的表达

目的：研究内皮素1（ET-1）在肺癌组织中的表达与肺癌分型及分级的关系。方法：采用免疫组织化学ABC染色及图像分析技术测定ET—1阳性率及含量。结果：104例肺癌组织ET—1阳性表达主要分布在胞浆内。腺癌、鳞癌和大细胞肺癌ET—1表达较高，表达阳性率分别为71．4％（20／28）、57．1％（16／68）及40．0％（8／20）。小细胞肺癌表达最低，表达阳性率为21．4％（6／28）。腺癌、鳞癌阳性表达的图像分析表明，肿瘤分化程度越低ET—1含量越高，肿瘤分化程度越高ET—1含量越低。结论：ET—1普遍存在于肺癌细胞中。腺癌和鳞癌高表达，ET—1含量可能与肿瘤分化程度有一定关系。ET—1有望作为肺腺癌、鳞癌的一个检测指标。     

急性脊髓损伤后脊髓组织内皮素-1mRNA表达的实验研究

探讨内皮素－１在急性脊髓损伤中的表达及其作用机制。方法应用３ｇ负荷压迫大鼠胸段脊髓（Ｔ８－９）５ｍｉｎ,造成大鼠胸段脊髓急性中度损伤;借助原位杂交组织化学方法,定位,定量研究大鼠急性脊髓损伤后早期ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达的时间和空间分布特征。结果脊髓压迫伤后３０ｍｉｎＥＴ－１ｍＲＮＡ表达明显增多,４ｈ达最高峰,一直持续至７２ｈ恢复至正常水平。ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达阳性细胞主要是神经细胞,高表达区在脊髓前     

诱生型一氧化氮合酶和内皮素-1在内毒素休克家兔血管反应性变化中的作用

目的了解诱生型-氧化氮合酶（iNOS）和内皮素-1（ET-1）在内毒素休克后家兔血管反应性变化中的作用。方法家兔128只,随机分为3组：脂多糖（LPS）对照组（n=48）,氨基胍（AG）＋LPS组（n=40）,PD-142893＋LPS组（n=40）。LPS对照组再分为6亚组：正常对照组、给LPS后0．5、1、2、4、6小时组（n=8）,测各组肠系膜上动脉（SMA）、腹腔动脉（CA）和左肾动脉（LRA）的血管反应性及组织iNOS、ET-1mRNA水平。AG＋LPS组和PD-142893＋LPS组均再分为5亚组：正常对照组、给LPS后1、2、4、6小时组（n：8）,测各组SMA、CA、LRA的血管反应性。结果内毒素休克早期CA的血管收缩和舒张反应性增加要多于SMA和LRA,且CA组织iNOSmRNA水平升高明显高于SMA和LRA,而3根血管ET-1mRNA水平均无明显变化;休克晚期SMA和LRA的血管收缩和舒张反应性的丢失均要多于CA,且SMA和LRA血管组织中iNOS和ET—1mRNA水平升高要高于CA。使用AG和PD．142893抑制iNOS和ET-1后各血管的反应性得到明显恢复。结论内毒素休克后iNOS和ET-1在各器官血管的差异表达可能参与了血管低反应性器官差异的形成。