肠出血性大肠埃希菌O157:H7疫苗的研究进展

O157:H7是肠出血性大肠埃希菌(EHEC)最常见的血清型.目前国内外尚无EHEC O157:H7疫苗问世,因此疫苗研究对防治EHEC O157:H7有着重大意义.外膜蛋白A(OmpA)作为抗EHEC O157:H7基础疫苗为疫苗研究提供了新的思路,此文对EHEC O157:H7疫苗研究的有关进展作了综述.     

濮阳市市售食品O157:H7污染状况调查分析

O157:H7是肠出血性大肠艾希氏菌 (EHEC)的一个常见血清型。自 1982年美国首次发生由O157:H7大肠杆菌引起的食物中毒爆发以来 ,欧美各国、日本相继有该菌所致疫情爆发的报道。我国也从猪、鸡、鸭、羊、鸽、猪肉及钻板、市售鸡肉、蔬菜、熟肉中检出O157:H7[2～ 4] ;2 0 0 0年河南省濉县发生EHECO157:H7爆发 ,发生可疑病例 35例 ,血清学确诊 8例。肠出血性大肠希氏菌 (EHEC)污染食品后对人民的身体健康存在着潜在威胁。为了解我市O157:H7在食品中的污染情况 ,防止O157:H7病例在我市的发生 ,1998年 11月在我市城区进行了预实验。2 0 0…     

湖北省首次分离出肠出血性大肠埃希菌O157∶H7

目的为了解肠出血性大肠埃希菌O157∶H7(EHEC O157∶H7)在我省的动物宿主种类和菌型特征,制定相应流行病防治对策.方法采用传统方法,在6～10月份肠道传染病高发季节,对武汉市3大养殖场、屠宰场的肉猪、奶牛及武汉7大城区的农贸商场的水产品进行调查采样,共采集811份样品,进行EHEC O157∶H7检测.结果341份猪粪样品中检出1株EHEC O157∶H7,阳性率为0.29%;255份奶牛粪便样品中检出7株EHEC O157∶H7,阳性率为2.75%;其他类标本中未检出.分离的这8株阳性菌株与传统的EHEC O157∶H7存在许多不同之处,它们均发酵山梨醇,大部分菌株不分解棉子糖,也存在不分解卫茅醇的菌株,而β-葡萄糖醛酸酶试验均为阳性.在致病因子上,检测现有的几种毒力基因均为阴性.结论在我省首次检出8株EHEC O157∶H7,说明其普遍存在于动物体内,对环境、食品构成较大威胁.     

EHEC O157:H7胶体金快速诊断试剂盒在病原监测中的作用

在EHEC O157:H7的监测中,采用EHEC O157:H7胶体金快速诊断试剂盒(下称金卡)能起到良好的筛选作用,对提高EHEC O157:H7的检出率及减轻实验者的工作量是非常好的检测技术与检测试剂.在过去的2年中,我们采用该试剂盒在监测现场取得良好效果,现报告如下.     

湖北省首次分离出肠出血性大肠埃希菌O157：H7

目的：为了解肠出血性大肠埃希菌O157:H7（EHEC O157:H7）在我省的动物宿主种类和菌型特征，制定相应流行病防治对策。方法：采用传统方法，在6～10月份肠道传染病高发季节，对武汉市3大养殖场、屠宰场的肉猪、奶牛及武汉7大城区的农贸商场的水产品进行调查采样，共采集811份样品，进行EHEC O157:H7检测。结果：341份猪粪样品中检出1株EHEC O157:H7，阳性率为0.29%；255份奶牛粪便样品中检出7株EHEC O157:H7，阳性率为2.75%；其他类标本中未检出。分离的这8株阳性菌株与传统的EHEC O157:H7存在许多不同之处，他们均发酵山梨醇，大部分菌株不分解棉子糖，也存在不分解卫茅醇的菌株，而β-葡萄糖醛酸酶试验为阳性，在致病因子上，检测现有的几种毒力基因均为阴性。结论：在我省首次检出8株EHEC O157:H7，说明其普遍存在于动物体内，对环境、食品构成较大威胁。     

蚌埠市2000～2004年肠出血性大肠杆菌 O157:H7监测研究

目的了解蚌埠市腹泻病人、动物宿主携带肠出血性大肠杆菌O157H7(EHEC O157H7)情况,为防治工作提供决策依据.方法采集我市市区和怀远县部分乡镇的现症腹泻病人和动物宿主(牛、羊、猪等)的粪便标本,用免疫磁珠法和血清学等方法检测EHEC O157H7.结果5年间共采集各种标本2 502份,经检测检出9株EHEC O157H7,检出率为0.36%.结论蚌埠市部分腹泻病人和动物存在着EHEC O157H7感染.     

环介导等温扩增技术快速检测肠出血型大肠杆菌O157:H7

肠出血型大肠杆菌(enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)主要包括O157:H7、O26:H11和O111等几种血清型,其中O157:H7是典型菌株,对人有很强的致病力.有研究表明O157:H7导致的感染占EHEC感染的50%～80%,它能引起出血性结肠炎、阑尾炎、食管狭窄和结肠穿孔等严重胃肠道并发症.     

交叉引物等温扩增技术在肠出血性大肠杆菌O157:H7快速检测中的应用

目的建立一种快速、敏感、特异的肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7的交叉引物等温扩增(Cross Priming Amplification,CPA)检测方法。方法根据EHEC O157:H7 stx1基因特征性保守序列(Gen Bank83460),设计交叉引物、剥离引物和检测探针,建立了EHEC O157:H7的CPA检测技术。用该方法检测19株细菌常见的食源性细菌,以验证其特异性;并用菌液浓度梯度稀释的方法对该方法的检测灵敏度进行评价。并通过60份食品模拟样品验证其在实际应用中的可性行,该检测结果与经典的细菌分离培养鉴定方法及常用的荧光定量PCR法进行比较。结果在检测的19株细菌中,只有EHEC O157:H7菌株的检测结果为阳性。其它菌株检测结果均为阴性,证明其特异性良好;通过浓度梯度稀释证明该方法检测的灵敏度可达l02cfu/m L;与分离培养鉴定法及荧光定量PCR法比较,其检测的灵敏度均为96.77%和96.67%、特异度分别为93.10%和90%、准确性分别为95%和93.33%。结论用于EHEC O157:H7的CPA检测体系具有简便、快速、灵敏、特异的优点,可用于进出境口岸现场及食品EHEC O157:H7的快速检测。     

2005～2006年秦皇岛市食源性疾病病原菌污染状况调查

目的：了解秦皇岛市食品中沙门菌、EHEC O157：H7、单增李斯特菌、副溶血性弧菌、空场弯曲菌、金黄色葡萄球菌的污染状况,确定可能污染上述菌的高危食品,为食源性疾病的预防提供科学依据。方法：依据国标方法,采用进口显色培养基和生化鉴定试纸,对样品分别进行沙门菌、EHEC O157：H7、单增李斯特菌、副溶血性弧菌、空场弯曲菌、金黄色葡萄球菌的分离、生化及血清学鉴定。结果：检测生肉、动物性水产品、散装熟肉制品、生食蔬菜、速冻米面食品、非发酵豆制品6类共240份样品,共检出病原菌37株,总检出率15.8%,副溶血性弧菌检出12株,检出率最高,为30%,沙门菌检出11株,EHEC O157：H7检出8株,单增李斯特菌检出6株,6类食品中动物性水产品病原菌阳性率最高,为30%,其次为生肉类,病原菌阳性率为28.8%。结论：秦皇岛市居民消费食品中存在食源性疾病病原菌污染,其中水产品和生肉是主要污染食品品种,副溶血性弧菌和沙门菌是污染食品的主要病原菌。     

吉林省2000-2009年食源性致病菌污染状况分析

目的了解吉林省食品中沙门菌、单增李斯特菌、肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157:H7、金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、空肠弯曲菌的污染状况,确定可能污染上述致病菌的高危食品,为食源性疾病监测提供科学依据。方法依据国标方法,并采用显色培养基,对样品分别进行沙门菌、单增李斯特菌、EHEC O157:H7、金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、空肠弯曲菌分离、生化及血清学鉴定。结果检测生畜肉、生禽肉、熟肉制品、动物性水产品、生食蔬菜、乳及乳制品、速冻面米食品、非发酵豆制品等样品共4 238件,检出致病菌772株,总检出率18.22%。其中单增李斯特菌检出360株,检出率最高8.49%;其次为沙门菌检出328株,检出率7.74%;金黄色葡萄球菌检出30株,检出率2.88%;副溶血弧菌检出23株,检出率5%;EHEC O157:H7检出31株,检出率0.73%;未检出空肠弯曲菌。8类样品中致病菌阳性率最高的为生禽肉,占42.89%;其次为生畜肉,占40.95%;速冻面米食品,占22.22%;动物性水产品,占20.92%;生食蔬菜,占14.69%;非发酵豆制品,占11.83%;熟肉制品,占9.38%;乳及乳制品,占0.70%。结论吉林省居民主要消费食品存在食源性致病菌污染,其中生猪肉、生鸡肉、速冻面米食品是主要受污染的食品品种。     

利用CRISPR/Cas9基因编辑技术抑制肠出血性大肠埃希菌O157∶H7 StxⅡ基因表达

目的利用CRISPR/Cas9基因编辑技术抑制肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157∶H7StxⅡ基因表达,并评价其对细菌生长的影响及细胞毒性。方法针对EHEC O157∶H7StxⅡ基因设计引物,构建CRISPR/Cas9表达质粒pdCas9-StxⅡ并转化EHEC O157∶H7感受态细胞,采用RT-PCR及胶体金法检测StxⅡ基因表达情况,绘制菌株生长曲线,将菌株培养上清液接种Vero细胞观察细胞病变情况。结果测序分析显示pdCas9-StxⅡ表达质粒被成功构建;转化EHEC O157∶H7(00G097)感受态细胞后,StxⅡ基因mRNA、蛋白表达均受抑制,EHEC O157∶H7生长曲线未受影响(P值均0.05)。pdCas9-StxⅡ-00G097菌株培养上清液对细胞的毒性效应(CPE为30%)显著低于对照菌株00G097和pdCas9-00G097(CPE均80%)。结论成功构建的pdCas9-StxⅡ表达质粒能特异抑制EHEC O157∶H7StxⅡ基因表达、降低细胞毒性,为进一步研究志贺毒素StxⅡ在EHEC O157∶H7致病机理和基因工程减毒活菌苗奠定了基础。     

2002-2007年吉林省食品中食源性致病菌监测结果分析

目的:了解吉林省食品中沙门菌、单增李斯特菌、肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157:H7、金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、空肠弯曲菌的污染状况,确定可能污染上述致病菌的高危食品,为食源性疾病监测提供科学依据.方法:依据国标方法,并采用显色培养基,对样品分别进行沙门菌、单增李斯特菌、EHEC O157:H7、金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、空肠弯曲菌分离、生化及血清学鉴定.结果:检测生猪肉、生牛肉、生羊肉、生鸡肉、熟肉制品、动物性水产品、生食蔬菜、乳及乳制品、速冻面米食品、非发酵豆制品10类样品共2625件,检出致病菌592株,总检出率22.55%.其中单增李斯特菌检出275株,检出率最高10.48%;其次为沙门菌检出260株.检出率9.90%;金黄色葡萄球菌检出22株,检出率2.45%;副溶血弧菌检出8株,检出率2.16%;EHEC O157:H7检出27株,检出率1.03%;未检出空肠弯曲菌.10类样品中致病菌阳性率最高的为生猪肉,占48.80%;其次为生鸡肉,占46.65%;速冻面米食品,占24.15%;生牛肉,占23.72%;生羊肉,占21.98%;动物性水产品,占14.32%;生食蔬菜,占12.42%;非发酵豆制品,占12.06%;熟肉制品,占11.91%;乳及乳制品,占1.18%.结论:吉林省居民主要消费食品存在食源性致病菌污染,其中生猪肉、生鸡肉、速冻面米食品是主要受污染的食品品种.建议政府加大对动物宰杀行业及食品销售渠道的严格管理,尽量减少食源性致病菌的交叉污染,同时做好卫生知识的宣传教育工作,防止食源性疾病的发生.     

漳州市首次检出O157∶H7大肠杆菌

[目的] 建立食品污染微生物监测点,调查O157∶H7大肠杆菌在生肉类食品中污染状况. [方法]采用 E.Coli O157∶H7检测卡对样品初筛,对阳性样品再进行分离培养鉴定. [结果] 从生猪肉和生羊肉中分离出2株O157∶H7 大肠杆菌,生肉类食品检出率3.7%. [结论] 首次证实了漳州市有O157∶H7大肠杆菌的存在,动物性食品是该菌感染人类的主要来源,应引起有关部门高度重视.     

大肠埃希菌O157:H7在8种食品中存活力观察

目的　探讨肠出血性大肠埃希菌 (EHEC)O157:H7在不同食品中的存活力。方法　采用EHECO157:H7933第 5代菌株人工污染 8种食品 ,染菌量为 7log10cfu/ml·g ;对该菌在 4、2 5℃条件下的存活力进行实验观察。 结果　EHECO157:H7在全奶、奶粉、鱼肉香肠及猪肉松 4种动物性食品中存活较长时间 ( 70d以上 ) ,且存活菌量呈先升后降的变化趋势 ,在 2种温度条件下均能增殖 1～ 2log10cfu/ (ml·g) ,到达高峰后呈对数衰减趋势 ,4 2d后仍有 3～ 6log10cfu/ml·g活菌量 ;在橙汁汽水和乳酸菌饮料中存活时间相对较短 ,分别为 2～ 5d和 10～ 2 7d ,4℃橙汁汽水和 2 5℃乳酸菌饮料在衰减至 4log10cfu/ (ml·g)后急剧下降 :在草莓酱和苹果酱中 ,两种温度条件下EHECO157:H7均呈间断性检出。结论　EHECO157:H7在常见食品中的存活能力强。加强食品特别是动物性食品及饮料的卫生管理是预防和控制该菌感染的重要措施     

志贺毒素2防治研究进展

肠出血性大肠埃希菌（EHEC）O157∶H7于1975年被首次分离,为革兰阴性杆菌,对酸耐受性强,在pH值为3～5条件下,可长期生存,能产生致死性志贺毒素（shiga toxin,Stx）,自EHEC O157∶H7于1982年被确认为致病菌以来,     

市售肉制品中检出四川省首例有动力O157:H7

目的通过对2009-2011年市辖区内食源性致病菌监测数据的统计,及时发现EHEC O157:H7并分析原因。方法按照国家相关标准方法进行检测。结果检出四川省首例有动力O157:H7。结论四川省已存在EHEC O157:H7引起食物中毒的危险性。各级食品安全监管及检验部门对此应高度重视,预防该菌在四川省的传播和食物中毒的暴发。     

河南省新发传染病EHEC O157:H7监测研究

[目的]了解河南省肠出血性大肠杆菌(EHEC)感染性腹泻的发病情况、宿主带菌状况、食品污染程度及志贺毒素(stx)基因型,为制订有效的防治对策提供依据。[方法]采集河南省监测点腹泻病人、家畜、家禽粪便,水和肉食品等标本分离EHEC菌株,应用分子生物学技术检测分析菌株rfbO157、rfbO111、hlyA、eaeA、stx2和stx1等毒力基因和突变基因。[结果](1)从腹泻病人、家畜、家禽、食品、水、蜣螂和苍蝇中均分离出EHEC菌株共275株,总分离率7.88%;其中O157︰H7菌株为232株(84.36%),携带stx2基因EHECO157︰H7菌株88株(37.93%);非O157︰H7菌株43株(15.64%)。(2)宿主动物中羊带菌率最高(6.96%),是河南省EHEC最主要宿主动物;多重PCR检测出8种不同毒力基因组合型,主要为rfbO157 、hlyA 、eaeA 、stx2 组合。stx2变种毒素GK探针检测出3种毒素变种杂交带型,其中stx2原毒素 stx2vha型占7.4%,stx2vha型的占72.2%,未知新杂交带型占20.4%。(3)EHECO157︰H7菌株可分为9个PFGE型,自羊、牛、鸡和蜣螂和腹泻病患者中分离的携带stx2vha菌株同属一个PFGE型。(4)144株不携带志贺毒素的O157菌株中发现O157︰H38、O157︰H42和O157︰Hund(未确定型)新菌株。[结论]河南省家禽、家畜中普遍携带EHECO157︰H7大肠杆菌,羊是最主要的宿主动物;EHECO157︰H7为我省优势菌型,其毒素基因型为stx2-eaeA-hlyA并以stx2vha亚型为主。EHEC在外环境中污染严重并可在人与人、动物与人之间传播,家畜、家禽携带stx2 EHECO157︰H7率的高低与EHEC人群感染发病呈相关关系。     

2002～2004年广西食品中肠出血性大肠杆菌O157:H7的监测分析

目的了解广西食品中肠出血性大肠杆菌O157：H7污染状况,为构建食品污染物数据库和防范食源性疾病提供依据.方法在广西南宁等6个市建立监测点,定期无菌采样,检验方法按照中国疾病预防控制中心营养与食品安全所统一的肠出血性大肠杆菌O157：H7检验方法进行.结果在6个监测市对6类食品共计1276份食品进行了监测检验,结果在南宁、柳州2个市的生肉中检出3株O157：H7,总检出率为0.24%,而生肉O157：H7污染率为0.46%.结论在广西首次证实生肉受到O157：H7污染,要高度警惕和防范肠出血性大肠杆菌O157：H7所致食源性疾病的发生.     

VIDAS-VITEK法快速检验食品中大肠杆菌O157的研究

大肠杆菌0157：H7出血性肠炎是近年引起世界广泛关注的肠道传染病。自1983年美国Riley等首次报道大肠杆菌O157：H7出血性肠炎以来，相继在英国、加拿大、13本等国出现爆发性流行病例。大肠杆菌O157：H7是肠出血性大肠杆菌（EHEC）的一个主要血清型，牛、羊、猪等家畜是其主要宿主，人类由于食用被大肠杆菌O157：H7污染的食品而致病。研究表明人感染10个活菌即可致病，     

肠出血大肠埃希菌O157∶H7与食品安全

肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)主要包括O157∶H7和O26:H11,其中O157∶H7是出血性肠炎的主要致病菌,自1982年由美国首次报道了肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157∶H7引起的出血性肠炎的爆发以来,EHEC的感染已经成为世界性问题[1]。世界卫生组织已将O157∶H7列为新的食源性疾病病原菌。尽管EHEC已被研究了近20年,但对由该菌引起的致命的溶血性尿毒综合症(HUS)和血小板减少性紫癜(TTP)仍没有有效的治疗方案。研究发现,反刍动物是EHEC的主要宿主,人的感染方式主要为食源性或与带菌动物接触。自1986…