缺氧预处理心肌凝集素和琥珀酸脱氢酶的电镜细胞化学

目的：探讨缺氧预处理对缺血再灌注大鼠心肌的保护作用。方法：采用SD雄性大鼠，通过生物素化凝集素-刀豆素和麦芽素分别检测缺血再灌注、缺血预处理及缺氧预处理大鼠心肌细胞膜糖基的变化和琥珀酸脱氢酶(SDH)细胞化学变化。结果：正常组刀豆素和麦芽素对大鼠心肌细胞染色强阳性，电镜下细胞结构完好，SDH酶活性高；缺血再灌注组刀豆素和麦芽素染色弱阳性，电镜下细胞结构损伤明显，SDH酶活性明显降低；缺血预处理组、缺氧预处理组刀豆素和麦芽素染色处于上述二者之间，电镜下细胞结构保护完好，SDH酶的活性没有明显降低。结论：缺氧预处理和缺血预处理对缺血再灌注大鼠心肌有相似的保护作用。     

实验性心肌损伤对大鼠房室结区脱氢酶的影响

目的：观察心肌损伤对房室结区脱氢酶的影响，探讨心肌损伤引起心律失常的机制。方法：SD大鼠分为心肌损伤多个时相实验组，皮下注射异丙肾上腺素5mg／kg。硝基四氮唑蓝(NBT)法染色显示SDH、LDH。测量房室结各部组化反应的平均灰度值。结果：房室结区各部SDH、LDH的染色均比普通心肌弱。心肌损伤时，房室结区各部SDH的活性短时间内(0．5h)明显下降；LDH的活性则为短时间内迅速上升。从后向前，房室结各部的SDH、LDH的染色逐渐增强。结论：房室结区的有氧代谢、无氧代谢均比普通心肌低；房室结区各部的代谢不均衡；心肌损伤早期对大鼠房室结区的脱氢酶有较明显的影响。     

急性桐油中毒导致大鼠心肌损伤的酶组织化学及超微结构观察

目的：探讨急性桐油中毒对心肌的损伤机制。方法：模拟人体桐油中毒方式灌喂大鼠,复制大鼠急性桐油中毒模型。采用光镜、电镜及组织化学方法,观察急性桐油中毒对大鼠心肌的影响。结果：急性桐油中毒心肌明显受损,光镜下细胞及间质水肿,电镜下心肌线粒体肿胀,空泡样变,并有髓样小体形成。组化观察心肌琥珀酸脱氢酶（SDH）活性显著下降,乳酸脱氢酶（LDH）活性有增强趋势。结论：急性桐油中毒通过对心肌细胞线粒体的直接损伤以及对能量代谢的影响而引起心脏功能的明显损害。     

棉酚对雄猴心肌及心肌乳酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶影响的电子显微镜观察

本文报道了口服醋酸棉酚(4毫克/公斤/日)两年的成年雄性恒河猴3只及对照猴2只的心肌超微结构、心肌 LDH 和 SDH 的电镜组化的观察,初步结果如下:1.猴心肌肌原纤维Ⅰ带 Z 线两侧各出现一条由电子密度较大的颗粒组成的细线,称 N线。服棉酚后 N 线的电子密度较对照组为低,同时Ⅰ带的宽度相应加大,提示棉酚有加深心肌纤维松弛状态的可能性。其它超微结构的改变如溶酶体数量增多,内质网扩张,局部地区的线粒体异常堆集、排列紊乱、数量明显增多,部分线粒体呈现轻度肿胀。2.组化方面,定位于心肌细胞线粒体和内质网中与心肌无氧糖酵解有关的 LDH 以及定位于线粒体的 SDH 活性均于服棉酚后增强。我们初步分析和讨论了以上结果与心肌纤维的松弛和收缩可能有关。     

失血性休克时心肌细胞的细微结构及酶活性变化的观察

本文以34只家兔对失血性休克2小时心肌进行了组织学及组织化学观察。实验分三组:正常组、实验对照组和休克组。结果表明:失血性休克时,心肌细胞形态和线粒体定位发生很大变化,细胞肿胀,线粒体移位并且积聚脱失相混杂。经显微分光光度计定量分析表明,乳酸脱氢酶(LDH)活性有所提高,但与对照组比无显著差异,而琥珀酸脱氢酶(SDH)活性显著下降(P<0.05)。因此本文认为,能量产生减少,能源危机可能是失血性休克死亡的主要因素之一。     

氧反常心肌线粒体呼吸功能变化及丹参酮Ⅱ_A磺酸钠的影响

健康雄性新西兰家兔28只,随机分为四组:正常对照组,缺氧组、氧反常组、DS-201氧反常组。离体心脏灌流造成心肌缺氧、氧反常模型。分离心肌线粒体,分光光度法测定线粒体内膜呼吸酶——琥珀酸脱氢酶(SDH)和细胞色素氧化酶(CCO)活力;氧电极法测定线粒体呼吸耗氧量,呼吸底物分别采用谷氨酸加苹果酸或琥珀酸。     

人参果皂甙对失血性休克犬心肌的保护作用

用杂种犬16只分为失血性休克组(HS)和失血性休克人参果皂甙组(HSG)。HS组动物由一侧颈总动脉放血至血压40mmHg(5.33kPa),放血后4h内采用放血和输血的方法维持血压。HSG组动物于放血前30min静脉注射人参果皂甙,HS组动物静脉注射等量的生理盐水,其它实验过程同HS组。两组动物存活时间,处死前血压和终失血量均存在显著性差异(P<0.005,P<0.05,P<0.001)。动物死亡后观察心肌细胞内某些酶的含量变化,HSG组动物心肌磷酸肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)和细胞色素氧化酶(CCO)的含量明显高于HS组。电镜观察:HS组动物心肌细胞的肌膜、核膜和线粒体均有不同程度的损伤,而HSG组动物心肌细胞的肌膜、核膜和线粒体基本正常。以上结果表明:人参果皂甙具有抗休克和保护心肌的作用。     

血清心肌酶及心肌肌钙蛋白测定在新生儿HIE中的应用

目的探讨血清心肌酶活性及心肌肌钙蛋白在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)中的意义,观察心肌肌钙蛋白与心肌酶之间的关系.方法设对照组(32例)和新生儿缺氧缺血性脑病组(60例),分别测定血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同功酶(CK-MB)活性及心肌肌钙蛋白(CTn-I),并作对比分析.结果 HIE组心肌酶的活性及心肌肌钙蛋白较对照组明显升高(P<0.05),且重度HIE组与轻度HIE组也有显著差异(P<0.01).结论血清中CK-MB及CTn-I可作为HIE脑损害程度的敏感指标,且CTn-I比CK-MB特异性更高.     

星形胶质细胞条件培养液对缺氧损伤神经元的保护作用

为了探讨星形胶质细胞条件培养液(ACM)对缺氧损伤神经元的保护作用,本实验将新生的KM小鼠的皮层星形胶质细胞分离、纯化并传代培养第三代第5d后,将星形胶质细胞(Ast)条件培养液,加入到缺氧损伤的神经元细胞培养液中,观测其对缺氧神经元的存活及其合成和释放一氧化氮(NO)、乳酸脱氢酶(LDH)和胞膜ATP酶(ATPase)的影响。结果显示:10%和20%ACM对神经元存活有明显促进作用;与对照组相比,20%ACM还有效地减少了缺氧神经元NO、LDH的生成和分泌,保护和提高了ATPase的活性。以上结果提示ACM促进缺氧神经元的存活,其机制可能与减少NO、LDH合成释放及保护细胞膜上ATPase的活性有关。     

Balb/c小鼠附睾分段的光镜组织化学观察

本研究以Balb/c小鼠为对象,应用组织化学方法,观察了附睾近侧端的酸性磷酸酶(AcP)、碱性磷酸酶(AIP)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、三磷酸腺苷酶(ATPase)的反应活性和用PAS反应显示的附睾管糖蛋白。依组织学和酶学分析,附睾近侧端可分为七段,第1段为附睾的输出小管段,第2～5段组成附睾头,第6、7段形成附睾体。酶反应结果显示:附睾管的起始段(即第2段),上皮细胞AlP,SDH,LDH酶反应活性低,ATPase反应在上皮细胞核上区及游离缘处活性较强,AcP反应活性较强,其阳性颗粒分布于整个上皮     

不同浓度缺氧预适应小鼠脑匀浆提取液对PC12细胞缺氧耐受性的影响

目的： 探讨缺氧预适应小鼠脑匀浆提取液(HP extract)对PC12细胞缺氧耐受性的影响。方法: 复制小鼠急性重复缺氧模型，制备HP extract。在培养PC12细胞中加入HP extract使其终浓度分别为0.2、0.8、3.2、6.4、12.8 g/L(HP组)。以同浓度正常小鼠脑匀浆提取液(N extract)作为对照组(N组)。缺氧(2%O2) 培养24、48、72 h后, 采用四唑盐（MTT）比色法检测各组细胞活力 (A570值)并检测缺氧24、48、72 h乳酸脱氢酶（LDH）透出率、缺氧24 h早期凋亡率(Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测)、缺氧72 h晚期凋亡率(Hoechst33258染色荧光显微镜检测)。结果: HP extract浓度低于6.4 g/L(包括6.4 g/L), 缺氧培养24 h时, HP组A570值显著高于同浓度N组, 其 LDH透出率显著低于同浓度N组。随缺氧时间延长, 高浓度HP extract逐渐失去细胞保护作用。至72 h时浓度高于6.4 g/L(包括6.4 g/L)HP extract有促细胞凋亡作用, 此时HP组A570值显著低于同浓度N组, 其LDH透出率和晚期凋亡率均显著高于同浓度N组。结论: 缺氧预适应小鼠脑匀浆提取液对PC12细胞缺氧耐受性的影响呈浓度依赖性和时间依赖性。     

大鼠海马CA1区酶组织化学研究

本文用组织化学方法,选择能反映神经组织糖代谢三个途径的关键酸及碱性磷酸酶,对正常SD系大鼠海马酶活性进行半定量研究.结果CA1区锥体层琥珀酸脱氢酶(SDH)及细胞色素氧化酶(CCO)呈轻度反应,葡萄糖-6一磷酸脱氢酶(G—6—PD)及乳酸脱氢酶(LDH)呈强阳性.腔隙分子层LDH、G—6—PD呈轻度活性,CCO、SDH呈强阳性.CA1区锥体层碱性磷酸酶(AKP)活性最弱.讨论了酶活性不同与记忆的关系及临床意义.     

力竭性游泳对大鼠房室结糖原和酶组织化学的影响

目的:探讨力竭性游泳对大鼠房室结(AVN)糖原和酶组织化学的影响。方法:建立大鼠力竭性游泳模型,运用组织化学技术,结合数字图像分析方法,观测房室结糖原(Gly)含量和乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、单胺氧化酶(MAO)和乙酰胆碱脂酶(ACHE)分布与含量的变化。结果:与对照组相比,1次力竭性游泳后房室结的Gly含量下降,LDH活性增强,SDH、MAO和ACHE的活性均减弱;与1次力竭组相比,1周力竭后Gly含量上升,LDH、SDH和MAO活性均减弱,ACHE活性增强。结论:力竭性游泳对房室结的糖原和酶组织化学的影响较为明显,这可能是造成房室结功能改变的因素之一。     

MicroRNA-126-5p在阿霉素所致损伤心肌中的表达及作用

目的:探讨微小RNA-126-5p(microRNA-126-5p)在阿霉素诱导的小鼠损伤心肌中的表达及在心肌细胞损伤中的作用。方法:采用BALB/c小鼠腹腔注射阿霉素的方法制备小鼠急、慢性阿霉素心肌损伤模型,苏木精-伊红(HE)染色检测小鼠心肌形态学改变,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定小鼠血清中的LDH活性,应用PowerLab数据采集分析系统检测小鼠心肌损伤情况。采用real-time PCR法检测阿霉素刺激大鼠心肌细胞株H9c2后micro RNA-126-5p的表达情况;转染microRNA-126-5p模拟物或抑制物,检测microRNA-126-5p模拟物及抑制物对阿霉素刺激后H9c2细胞microRNA-12-5p表达水平、LDH释放及caspase-3活化情况的影响。结果:在小鼠急、慢性阿霉素心肌损伤模型中,HE染色发现小鼠心肌纤维排列紊乱,肌原纤维溶解,局部有炎症细胞浸润;血清LDH释放增多(P0.05);左心室等容舒张期压力下降最大速率(-dp/dtmax)及左心室等容收缩期压力上升最大速率(+dp/dtmax)下降;real-time PCR检测发现小鼠心肌中microRNA-126-5p的表达显著上调。阿霉素所致H9c2心肌细胞损伤中也伴有microRNA-126-5p表达明显上调;进一步采用micro RNA-126-5p模拟物与抑制物转染H9c2细胞,发现与单纯阿霉素处理组相比,microRNA-126-5p模拟物组LDH的释放增加,caspase-3活性升高,而microRNA-126-5p抑制物组结果则与之相反。结论:阿霉素可诱导小鼠心肌细胞microRNA-126-5p的表达明显升高,进而降低心肌细胞活性,促进心肌细胞凋亡,发挥促心肌损伤作用。     

川芎嗪对缺血再灌注损伤心肌重要呼吸酶的影响

目的:观察川芎嗪对大鼠缺血再灌注损伤心肌线粒体中琥珀酸脱氢酶(SDH)和细胞色素氧化酶(CCO)的影响及可能机制。方法:结扎冠状动脉30 min后再灌20 min,复制缺血再灌注模型。测定心肌线粒体中SDH、CCO、SOD和GSH·PX活力及MDA和细胞色素含量。结果:缺血再灌组(IR)SDH和CCO活力显著低于假手术对照组;缺血再灌加川芎嗪组(IR+L)的SDH和CCO活力显著高于缺血再灌组(P＜0.01),MDA含量明显降低,SOD及GSH·PX活力也明显升高。结论:川芎嗪对缺血再灌注损伤心肌中SDH和CCO活力降低有显著的拮抗作用,其机理可能是通过提高对氧自由基的清除及抑制脂质过氧化     

蜂花粉对小鼠腹腔巨噬细胞乳酸脱氢酶活性及其同工酶谱的影响

用蜂花粉和生理盐水分别给实验组和对照组小鼠灌胃,持续28天后,灌洗和培养两组小鼠的腹腔巨噬细胞,并用速率法测定细胞内的乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果实验组小鼠腹腔巨噬细胞内的LDH活性显著高于对照组;进一步用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析LDH同工酶谱,结果发现实验组小鼠腹腔巨噬细胞内LDH_(3-4)有显著的升高。提示蜂花粉通过激活、增加LDH_(3-4)以激活巨噬细胞,提高其吞噬功能,增强免疫力。     

缩醛基毛冬青提取化合物R4对缺氧/复氧大鼠心肌细胞的保护作用

目的: 探讨缩醛基毛冬青提取化合物R4对缺氧/复氧损伤心肌细胞的保护作用及其机制。方法: 采用原代培养的新生大鼠心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,实验分为正常细胞培养组和缺氧/复氧损伤模型组、缺氧/复氧损伤+缩醛基毛冬青提取化合物R4(5、10、20 μmol/L)组和缺氧/复氧损伤+ verapamil(5 μmol/L)组。用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)的活性,硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛(MDA)含量,MTT染色法测定线粒体脱氢酶活性改变,化学比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性变化, Griess法测定一氧化氮(NO)的含量。结果: 缩醛基毛冬青提取化合物R4可显著提高缺氧/复氧损伤心肌细胞内SOD的活性及细胞内线粒体脱氢酶活性,能显著抑制LDH的活性、MDA的生成以及提高NO的含量,并能明显抑制心肌细胞凋亡。结论: 缩醛基毛冬青提取化合物R4具有明显抗缺氧/复氧损伤、保护心肌细胞的作用。     

大蒜素对病毒性心肌炎小鼠的治疗作用

目的:观察大蒜素(garlicin,Gal)注射液对病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)小鼠的作用并探讨其可能的作用机制。方法:将40只BALB/c健康小鼠随机分为4组:正常组(control组)、VMC模型组以及大蒜素低剂量组(Gal-L组)与高剂量组(Gal-H组);经相应处理后,HE染色观察心肌组织形态;比色法检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和肌酸激酶(CK)的水平;Western blot检测心肌组织中Bcl-2、Bax、cleavedcaspase-9、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP与cleaved-caspase-8的蛋白水平。结果:HE染色结果显示大蒜素能减少病毒性心肌炎小鼠心肌组织的坏死与炎性细胞的浸润;与VMC组相比,大蒜素呈浓度依赖性降低血清中LDH、AST和CK的水平,同时,降低心肌组织中Bax、cleaved-caspase-9、cleaved-caspase-3和cleaved-PARP的蛋白表达水平,升高Bcl-2的蛋白表达水平,而cleaved-caspase-8的蛋白水平不变。结论:大蒜素能有效改善病毒性心肌炎小鼠的心肌损伤,降低血清中LDH、AST和CK的水平,其可能的作用机制可能与内源性细胞凋亡通路有关。     

松弛素抑制氧化应激反应保护小鼠心肌微血管内皮细胞的缺氧/复氧损伤

背景：松弛素是人松弛素2的重组形式,作为机体内源性抗纤维化活性物质,松弛素治疗可能会缓解急性心力衰竭患者的症状并改善其预后,但尚未有研究松弛素在氧化应激方面对缺氧/复氧损伤小鼠心肌微血管内皮细胞(H5V)的作用。目的：探讨松弛素在小鼠H5V细胞缺氧/复氧损伤模型中的作用。方法：建立小鼠H5V细胞缺氧/复氧损伤模型,分别为缺氧3,6,12 h,复氧3 h,通过检测细胞活力和乳酸脱氢酶活性确定细胞缺氧/复氧的最佳时间。选用不同质量浓度的松弛素(0,60,100,140,180 ng/mL)作用于H5V细胞缺氧/复氧损伤模型,通过检测细胞活力和乳酸脱氢酶活性确定松弛素干预的最佳质量浓度。在此基础上,将H5V细胞分为3组：对照组、缺氧/复氧模型组、缺氧/复氧+180 ng/mL松弛素组,检测丙二醛、超氧化物歧化酶和活性氧水平。结果与结论：(1)与对照组比较,缺氧6 h/复氧3 h、缺氧12 h/复氧3 h的细胞活力均显著降低(P <0.05),细胞上清中乳酸脱氢酶活性均显著增加(P <0.05),选取缺氧6 h/复氧3 h进行后续实验;(2)与缺氧/复氧模型组比较,缺氧/复氧+松弛...     

环氧化酶-2参与血红素氧化酶1对抗大鼠心肌缺氧-复氧的损伤

目的 研究环氧化酶-2是否参与血红素氧化酶1(HO-1)对抗大鼠心肌缺氧.复氧的损伤及其可能的机制.方法 采用离体大鼠心脏Langendorff灌流法观察左室舒张末压(LVEDP)、左室发展压(LVDP)和最大左室收缩、舒张速率(±dp/dtmax).用全自动生化分析仪分析冠脉流出液乳酸脱氢酶(LDH)释放量.应用双波长分光光度计法间接测定大鼠血中COHb含量.心脏冷冻切片法观察心肌梗死面积.用6-keto-PGF1αRIA kit测定样本中前列腺素I2(PGI2)的稳定产物6-keto-PGF1α的含量.结果 ①HO-1的诱导剂高铁血红素明显抑制缺氧-复氧心脏LVEDP增高,降低LVDP和±dp/dtmax;减少复氧期LDH释放,缩小心肌梗死面积(P＜0.01).②HO-1的抑制剂可加重缺氧-复氧心脏LVDP和±dp/dtmax下降,LDH释放和梗死面积明显高于单纯缺氧-复氧组(P＜0.05).③环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布有部分取消高铁血红素降低缺氧-复氧心脏LVEDP、增加LVDP和±dp/dtmax,的作用,使LDH的释放和梗死面积明显增加(P＜0.05).结论 诱导HO-1增加可保护缺氧-复氧心肌,其作用可能通过调节COX-2的活性来完成.