水蛭素气雾给药对大鼠凝血功能和体内血栓形成的影响

目的考察水蛭素气雾给药对大鼠凝血功能及体内血栓形成的影响。方法测定大鼠凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）、活化的部分凝血酶时间（aPTT）,血浆纤维蛋白原（FIB）含量,观察水蛭素气雾给药的抗凝血作用;建立下腔静脉结扎模型和动-静脉旁路结扎模型,测定大鼠静脉及动脉血栓的湿重和干重。结果与正常对照组相比,水蛭素气雾给药中剂量和高剂量组（500U·kg^-1,1000U·kg^-1）对PT,T,aPTT有显著延长作用（P〈0．05或P〈0．01）;对大鼠静脉血栓、动脉血小板血栓形成均有显著的抑制作用（P〈0．05或P〈0．01）,对FIB无明显影响（P〉0．05）。结论水蛭素气雾给药能够发挥其抗凝血作用。     

重组水蛭素Ⅲ乳化微粒口服的药效学

 目的探讨重组水蛭素Ⅲ乳化微粒(rHVⅢEP)口服的抗凝血、抗血栓作用。方法①将SD大鼠随机分为4组,分别为水蛭素大、小剂量组(65,130U·g^-1),华法林钠阳性对照组和生理盐水组。分别于给药前、后1h各取血1.5～2mL,测定凝血时间(CT)、血浆凝血酶原时间(PT)、凝血酶凝固时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT);②采用大鼠弥散性血管内凝血模型,测定PT、TT、APTT;③动物分组如上,采用大鼠下腔静脉血栓模型,测定血栓湿重和干重,计算血栓抑制率;④动物分组如上,采用大鼠颈动静脉回路形成的血小板性动脉血栓模型,测定血栓湿重,计算血栓抑制率。结果①rHVⅢEP能延长CT、PT、TT、APTT,与空白对照组有显著差异(P<0.05或P<0.01);②rHVⅢEP能延长大鼠弥散性血管内凝血模型PT、TT、APTT,并与生理盐水组有显著差异;③rHVⅢEP口服可使大鼠下腔静脉血栓湿重、干重明显减少,血栓抑制率显著升高,与生理盐水组有显著差异;④rHVⅢEP口服可使大鼠颈动静脉回路形成的血小板性动脉血栓重量明显减少,显著升高血栓形成抑制率,与生理盐水组有显著差异。结论rHVⅢEP口服抗凝血、抗血栓作用显著,可用于防治实验性大鼠弥散性血管内凝血、大鼠颈动静脉回路形成的血小板性动脉血栓和大鼠下腔静脉血栓,具有良好的应用前景。     

水蛭免加热提取物抗凝血及抗血栓作用

目的观察水蛭免加热提取物的抗凝血、抗血栓作用,并与水蛭煎煮浓缩物进行比较.方法小鼠灌胃给水蛭两种提取物5.72g生药/kg,2.86g生药/kg,1.43g生药/kg,采用玻片法测定小鼠凝血时间;剪尾法测定小鼠出血时间.大鼠灌胃给水蛭两种提取物4g生药/kg,2g生药/kg,1g生药/kg,观察对大鼠下腔静脉结扎后静脉血栓湿重及干重的影响、对电刺激颈总动脉闭塞性血栓形成时间的影响、对大鼠动-静脉旁路血小板血栓湿重的影响.结果水蛭免加热提取物延长正常小鼠凝血时间和出血时间,减轻大鼠静脉血栓的湿重和干重,延长大鼠颈总动脉血栓形成时间、减轻大鼠血小板血栓的湿重.结论水蛭免加热提取物具有强大的抗凝血作用,抑制大鼠静脉血栓、动脉血栓及血小板血栓的形成.水蛭免加热提取物在抑制大鼠静脉血栓形成、延长小鼠凝血时间等方面优于传统的煎煮提取物.     

水蛭免加热提取物对高凝动物模型凝血系统及血小板聚集率的影响

目的：观察水蛭免加热提取物对鞣花酸所致高凝动物模型凝血系统及血小板聚集率的影响.方法：动物灌胃给药,小鼠尾静脉注射鞣花酸制造高凝动物模型,以剪尾法测定出血时间（BT）;眼球采血,玻片法测定凝血时间（CT）.大鼠舌下静脉注射鞣花酸,腹主动脉采血,用试剂盒测定凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）,PT法测定凝血因子Ⅱ的活性,按吴氏法测定循环血小板聚集率.结果：水蛭免加热提取物能延长高凝模型小鼠的BT、CT和高凝模型大鼠的PT、APT,抑制凝血因子Ⅱ的活性,降低血小板聚集率.结论：水蛭免加热提取物对高凝模型动物具有抗凝血、抗血小板聚集作用.     

蚂蝗抗凝血酶活性物质提取工艺改进

目的 通过正交实验研究中药水蛭中抗凝血酶活性物质提取的最佳工艺.方法 采用正交实验设计法,以提取温度,生理盐水用量,提取次数和提取时间为考察因素,每个因素设计3个水平进行实验.以测得的水蛭素含量和蛋白质含量计算出水蛭素的比活力做为评价指标进行正交实验.结果 最佳提取工艺为:15倍溶剂量,温度为70℃,提取时间为30 min,提取次数为两次.结论 该方法可为中药水蛭中抗凝血酶活性物质的提取提供依据.     

不同分子量硫酸皮肤素的抗血栓活性

 目的 研究不同相对分子质量硫酸皮肤素（DS)的抗血栓活性。方法 采用美国药典的羊血浆法测定不同相对分子质量的DS的抗凝血活性，电刺激大鼠动脉血栓形成法测定其体内抗血栓活性，以及生色底物法测定其激活肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)抗凝血酶活性。结果相对分子质量分别为27.5×10³,8.0×10³,5.3×10³和4.0×10³的DS和低分子硫酸皮肤素(LMWDS₁，LMWDS₂和LMWDS₃)的抗凝效价分别为4.00，2.25，0.94和0.54 u·mg^-1；体内抗血栓活性的血栓堵塞时间（OT)值分别为58.12,50.58,123.90和133.53 min，均较生理盐水组19.79 min显著延长；体外激活HCⅡ抗凝血酶活性分别为223.23,123.71,89.29和58.00u·mg^-1。结论 随着LMWDS相对分子质量的降低，其抗凝血活性降低,体外激活HCII抗凝血酶活性也降低，但体内抗血栓活性增强。     

β-榄香烯抗凝血溶血栓活性研究

目的：研究β-榄香烯体外抗凝血与溶血栓活性以及体内抗凝血,抗血小板聚集作用,为探讨β-榄香烯活血化瘀药效提供参考。方法：采用新西兰兔体外抗凝血法、血浆复钙时间实验及体外血栓法、全血块法研究β-榄香烯的体外抗凝血、溶血栓作用;采用皮下注射盐酸肾上腺素和冰水刺激复制大鼠急性寒凝血瘀证模型,通过观察凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）以及二磷酸腺苷（Adenosine diphosphate,ADP）和花生四烯酸（Arachidonic acid,AA）诱导血小板最大聚集率,研究β-榄香烯口服制剂对血瘀大鼠体内凝血功能的影响。结果：β-榄香烯各剂量组均能延长新西兰兔血浆复钙时间（P〈0.05）,加快体外血栓及全血凝块的溶解（P〈0.05）;β-榄香烯口服制剂高剂量组延长寒凝血瘀大鼠的凝血酶原时间（PT）（P〈0.05）,β-榄香烯口服制剂各剂量组延长寒凝血瘀大鼠的凝血酶时间（TT）（P〈0.01）,且对ADP和AA诱导的血小板最大聚集率有显著的抑制作用（P〈0.01）。结论：β-榄香烯具有抗凝血和溶血栓的作用。     

水蛭不同提取物抗凝活性的体外实验研究

目的:研究水蛭不同提取物的抗凝活性,为水蛭的新药开发提供实验依据.方法:Wistar大鼠腹静脉取血,应用血凝仪体外测定凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)和活化的部分凝血活酶时间(APTT).结果:水蛭的乙酸乙酯部分能使大鼠的PT、TT、APTT显著延长.正己烷部分、水溶液部分能使大鼠的PT显著延长,正丁醇部分能使大鼠的APTT显著延长.结论:水蛭各提取物均有抗凝活性,水蛭中存在不同于水蛭素的新的抗凝血成分.     

抗凝血酶滴定法优化水蛭煮散提取工艺

目的:优选水蛭煮散的提取工艺。方法:利用抗凝血酶滴定法测定水蛭中抗凝血酶活性物质含量。以粉碎度为指标,筛选粉碎设备,考察水分对水蛭煮散粉体的影响;以浸膏得率和抗凝血酶活性物质转移率为评价指标,通过单因素试验考察粉碎度、浸泡时间、加水量、煎煮次数、煎煮温度及时间对提取工艺的影响,并与传统饮片进行比较。结果:水蛭煮散的最佳提取工艺为取水蛭最粗粉,加20倍量水浸泡10 min,于100℃煎煮提取3次,每次20 min;抗凝血酶活性物质转移率达93.31%,高于传统饮片的52.44%。结论:优选的提取工艺稳定可行,水蛭煮散具有效率高、时间短、能耗低、环保等优点,为水蛭煮散的工业化生产和新药开发提供参考。     

水蛭素对大鼠纤维化肝组织Smad4 mRNA表达的影响

目的:观察水蛭素对肝纤维化大鼠肝脏组织Smad4mRNA表达的影响。方法:SD大鼠60只随机分为空白对照组、模型组和水蛭素组共3组,每组20只,用40%四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)复制大鼠肝纤维化模型,水蛭素干预12周后处死大鼠,采用实时荧光定量PCR法检测大鼠肝组织Smad4mRNA的表达。结果:模型组Smad4mRNA2-ΔΔCt值(4.63±0.86)显著高于正常对照组(1.00±0.13)(P<0.05),表明模型组Smad4mRNA表达上调。与模型组比较,水蛭素组Smad4mRNA2-ΔΔCt值(2.26±0.49)显著降低(P<0.05),表明Smad4mRNA表达下调。结论:水蛭素可能通过下调Smad4mRNA的表达抑制肝脏细胞外基质异常增生,从而发挥抗肝纤维化作用。     

薯蓣皂苷元对小鼠下腔静脉结扎血栓形成及相关因子的影响

目的研究薯蓣皂苷元对静脉血栓形成的影响,并初步探讨其抗血栓作用的机理。方法通过小鼠下腔静脉结扎,测定形成血栓的重量及血清和血管壁内NO与MPO水平的变化。结果薯蓣皂苷元对小鼠下腔静脉结扎血栓形成具有抑制作用,能使血清中NO升高,而血管壁内的NO降低,MPO则升高。结论薯蓣皂苷元通过影响血液和血管壁内NO与MPO水平而发挥抗血栓形成作用。     

丹红化瘀口服液抗血栓形成作用

目的:从抗血栓形成作用初步探讨丹红化瘀口服液(Danhong Huayu Koufuye,DHK)抗糖尿病视网膜病变和糖尿病肾病的作用机制。方法:采用毛细管法检测新西兰兔凝血时间,断尾法检测昆明种小鼠出血时间,同时考察DHK对大鼠下腔静脉结扎诱导的静脉血栓、动-静脉旁路血栓和Fe Cl3诱导颈动脉血栓3种血栓形成的作用。凝血时间、出血时间、下腔静脉血栓和动静脉旁路血栓实验动物分为4组:溶剂组,DHK低剂量组(各实验剂量分别为0.60,2.25,1.60,1.60 g·kg-1·d-1),DHK高剂量组(各实验剂量分别为1.20,4.50,3.20,3.20 g·kg-1·d-1),阿司匹林组(各实验剂量分别为2.88,11.26,7.81,7.81 mg·kg-1·d-1);Fe Cl3诱导颈动脉血栓实验分为5组:假手术组,模型组,DHK低、高剂量组(1.60,3.20 g·kg-1·d-1),氯吡格雷组(30 mg·kg-1·d-1)。凝血时间实验采用单次及连续ig给药5 d后进行指标检测,其余实验均连续ig给药5 d后进行指标检测。结果:与溶剂组比较,DHK高剂量组显著延长新西兰兔凝血时间(P0.05)和小鼠出血时间(P0.05)。与模型组比较,DHK高、低剂量组抑制大鼠下腔静脉血栓、动-静脉旁路血栓和Fe Cl3诱导的大鼠动脉血栓的形成(P0.05)。结论:DHK有明显的活血化瘀和抗血栓形成作用。     

蓬子菜中香叶木苷抗血栓形成作用的实验研究

目的：研究蓬子菜活性成分-香叶木苷的抗凝血和抗静脉血栓作用.方法：通过结扎大鼠下腔静脉造成下肢静脉血栓模型,通过对凝血四项指标：凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶时间（APTT）、血浆纤维蛋白原（FIB）、凝血酶时间（TT）的观察,及下腔静脉在光镜下的组织学变化,研究香叶木苷对血栓大鼠凝血功能的影响.结果：香叶木苷90、180、360mg/kg能明显延长PT和TT时间;180、360mg/kg能明显延长APTT时间;90、180、360mg/kg能显著降低FIB含量（P＜0.05或P＜0.01）.光镜观察香叶木苷高、中、低剂量组均能明显抑制大鼠下腔静脉血栓形成,保护血管内皮细胞,且中剂量组与阿司匹林组作用相当.结论：香叶木苷具有抗凝血和抗静脉血栓形成作用.     

乌苏里藜芦碱抗血栓作用的研究

目的 研究乌苏里藜芦生物碱(VnA)对大鼠的抗血栓作用。方法 分别应用电刺激诱发大鼠颈总动脉血栓形成模型和瘀血诱发下腔静脉血栓形成模型评价VnA的抗动、静脉血栓形成作用。结果 大鼠iv6种不同剂量的VnA(7．2～42．9μg／kg)导致血管阻塞时间(OT)显著延长，且具明显的剂量依赖性，VnA30μg／kg产生的抗动脉血栓形成作用与赖氨匹林18．0mg／kg的作用相当。单次ivVnA30μg／kg使OT呈时间依赖性延长。VnA抗动脉血栓形成作用起效迅速，持续至少80min，iv后15min达效应峰值。iv VnA(15～45μg／kg)显著减少下腔静脉血栓干质量，并呈剂量依赖性。结论 VnA具有强大的抗动、静脉血栓形成作用，并具明显的剂量依赖性守时间依赖性。其抗血栓效能高，作用强度大，在大鼠的有效剂量低至μg／kg水平。VnA抗血栓活性的发现为其研究开发展示了新的前景。     

Effects of Cydonia oblonga Miller extracts on blood hemostasis,coagulation and fibrinolysis in mice,and experimental thrombosis in rats

Introduction

Cydonia oblonga Miller (COM) is traditionally used in Uyghur medicine for the prevention of cardiovascular disease. The present study is designed to explore the effects of COM extracts on models and markers of thrombosis and related biomarkers.

Materials and methods

20, 40, 80 mg/kg/day COM aqueous extracts and 5 mg/kg/day aspirin, orally for 14 days were compared to untreated controls in mice on bleeding and clotting times, using the tail cutting and glass slide methods and for death rates in collagen–epinephrine pulmonary thrombosis, thrombolysis in vitro and euglobulin lysis time (ELT). In rats, common carotid artery FeCl₃-induced thrombus and inferior vena cava thrombosis occlusion time, plasma concentrations of thromboxane B₂ (TXB₂) and 6-keto-prostaglandine F₁α (6-keto-PGF1α) were measured.

Results and conclusion

Compared to controls, COM extracts dose-dependently prolonged bleeding by 2.17, 2.78 and 3.63 times, vs. aspirin 2.58, and the clotting time by 1.44, 2.47 and 2.48 times, vs. aspirin 1.91. COM reduced pulmonary embolus mortality by 27, 40 and 53%, vs. 47% for aspirin. COM dose-dependently increased thrombolysis by 45, 55 and 63%, vs. 56% for aspirin, and shortened ELT to 71, 61 and 43%, vs. 43% for aspirin. In rats, venous occlusion time was prolonged. Arterial and venous thrombus weights were dose-dependently reduced in COM groups. TXB₂ decreased and 6-keto-PGF1α increased with COM and aspirin, with an association between 6-keto-PGF1α/TXB2 and arterial or venous thrombus weight for all products, and for occlusion time with COM but not for aspirin.

Conclusion

We confirm the experimental effects of COM on hemostasis and thrombosis. Further exploration of putative clinical effects appear justified.     

简易悬吊术制备大鼠深静脉血栓模型

目的建立一种简便、适合动态研究的大鼠深静脉血栓模型。方法将60只体质量为(250±20)g的SD大鼠按随机数字表法分为3组:动物模型组36只,对照组18只,假手术组6只。动物模型组采用改良下腔静脉结扎法(简易悬吊术)制备动物模型,造模后观察血管内膜及血栓不同时期的病理变化,并与对照组及假手术组做观察比较。结果采用改良法制作模型后,大鼠下腔静脉内不仅均形成稳定的血栓,而形成血栓的大鼠存活率很高,符合人体静脉血栓形成急性期的病理演变。结论简易悬吊术可以成功制作适合动态研究的大鼠深静脉血栓模型。     

冠脉康胶囊对大鼠血栓模型及小鼠急性脑缺血模型的影响

[目的]复制大鼠血栓模型及小鼠急性脑缺血模型,观察冠脉康胶囊对大鼠血栓模型及对小鼠急性脑缺血模型的影响。[方法]采用结扎大鼠左肾下方下腔静脉致血栓模型形成法,观察冠脉康胶囊抗血栓形成作用;采用小鼠断头缺血模型,观察冠脉康胶囊抗急性脑缺血作用。[结果]冠脉康胶囊能减轻血栓模型大鼠的血栓重量,增加小鼠张口呼吸次数,延长小鼠张口呼吸时间。[结论]冠脉康胶囊具有抗血栓形成、抗急性脑缺血作用。     

复方血栓通胶囊抗血栓作用的实验研究

目的：研究复方血栓通胶囊的抗血栓作用。方法：将大鼠随机分为模型对照组、复方血栓通胶囊低、中、高剂量组（0.375,0.75,1.5 g·kg^-1·d^-1）、阿司匹林肠溶片组（50 mg·kg^-1·d^-1）,灌胃给药,每天1次,连续7 d。末次给药1 h后,建立大鼠下腔静脉血栓模型和动-静脉旁路血栓模型,观察复方血栓通胶囊对血栓湿重、干重及血栓形成抑制率的影响;将大鼠按上述方法分组,建立颈总动脉血栓溶栓模型,从造模当天开始灌胃给药,每天1次,连续5 d,末次1 h后取大鼠血栓,观察复方血栓通胶囊对血栓湿重及溶栓率的影响;将大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、复方血栓通胶囊低、中、高剂量组、阿司匹林肠溶片组,采用皮下注射盐酸肾上腺素联合冰浴、减少喂食的方法建立大鼠急性血瘀模型,造模期间同时灌胃给药,每天1次,连续7 d,第8 d造模成功,灌胃给药1 h后,观察复方血栓通胶囊对大鼠凝血时间（CT）、凝血酶时间（TT）及血小板聚集功能的影响。结果：与正常组比较,模型组CT,TT显著缩短（P<0.01）,血小板聚集能力显著提高（P<0.01）;与模型组比较,复方血栓通胶囊组大鼠下腔静脉、动-静脉旁路血栓的湿重和干重减轻（P<0.05~P<0.01）,颈总动脉血栓的湿重减轻（P<0.05）,CT和TT延长 （P<0.05~P<0.01）,血小板聚集能力降低（P<0.05）。结论：复方血栓通胶囊具有抗血栓作用,其机制可能与改善凝血功能、血小板聚集功能有关。     

Antithrombotic Effect of a Polysaccharide Fraction from Laminaria japonica from the South China Sea

Some in vitro studies have identified an antithrombotic effect of polysaccharides from Laminaria japonica, but this activity remains to be confirmed in vivo. In this study a polysaccharide fraction termed PLG was extracted from L. japonica in the Beibu Gulf in Guangxi, China, and its antithrombotic effects explored in rat models of carotid and venous thrombosis. Its anticoagulation and antiplatelet properties were assessed by measuring the prothrombin time (PT), activated partial thromboplastin time (APTT) and ADP‐induced platelet aggregation rate (Agg_max). Its effects on bleeding time were measured using the tail transection method. It was found that pretreatment with an intraperitoneal injection of PLG at 2.5 or 5.0 mg/kg significantly prolonged the occlusion time in the carotid thrombosis model, and a dose of 5.0 mg/kg reduced the thrombus weight in the venous thrombosis model. Pretreatment with PLG (5.0 mg/kg) increased the APTT and decreased the ADP‐induced platelet Agg_max. Neither dose of PLG significantly prolonged the bleeding time compared with the control group. In an in vitro anticoagulation assay using human plasma, PLG at 57.14, 28.57 and 28.57 μg/mL inhibited APTT and PT in a concentration‐dependent manner. The results show that PLG possesses antithrombotic activity in a rat model, and that it may prove to be clinically useful in humans. Copyright © 2011 John Wiley & Sons, Ltd.     

鬼箭锦鸡儿抗血栓活性部位筛选

该实验通过建立大鼠下腔静脉血栓模型和小鼠急性肺血栓模型,考察鬼箭锦鸡儿醇提物(TE)的抗血栓作用。通过考察TE的2个主要部分TE-1和TE-2对小鼠急性肺血栓的作用,以及比较TE、TE-1和TE-2对出血时间和凝血时间的影响,探索其抗血栓活性部位。通过对照品对照结合液相色谱-质谱分析对提取物中所含6种主要成分及其他成分的种类或类别进行鉴定。结果表明,TE各剂量组均能够显著降低大鼠下腔静脉血栓质量(P0.01),中、高剂量时能够提高对急性肺血栓模型小鼠的保护率(P0.05)。TE-2在保护小鼠免于偏瘫或死亡、延长出血时间和凝血时间方面均比TE-1显示出较强活性。TE中主要含有异黄酮、紫檀素及茋类化合物,TE-2中以异黄酮和紫檀素类成分为主,TE-1中以茋类为主,提示这3类成分可能均为鬼箭锦鸡儿抗血栓的活性成分。