地塞米松对大鼠房水中TGF-β及晶状体上皮细胞中TGF-β受体表达的影响

目的 探讨地塞米松(DEX)对大鼠房水中转化生长因子β(TGF-β)及晶状体上皮细胞(LECs)中TGF-β受体表达的影响及其在抑制后发性白内障(PCO)中的作用. 方法 1个月龄SD大鼠眼局部应用DEX半年,用药后每月取房水,ELISA法检测TGF-β,用药1、3、6个月后,免疫组织化学法检测LECs中转化生长因子β受体(TGF-βR)的表达,RT-PCR检测LECs中TGF-βR mRNA的表达.培养大鼠LECs,不同浓度DEX干预24 h,RT-PCR和Western blot法检测TGF-βR的表达. 结果 各时段房水中TGF-β质量浓度与正常对照组相似(P＞0.05);TGF-βR于用药1、3、6个月后的表达与对照组比较均降低(P＜0.05),TGF-βR mRNA在上述时段分别为1.07±0.19、0.85±0.10、0.65±0.09,对照组分别为1.53±0.15、1.08±0.13、0.87±0.15,各时段组间差异有统计学意义(P＜0.05).DEX干预培养的LECs后,TGF-βR分别为0 mol/L组1.11±0.13,10-8 mol/L组0.98±0.12,10-7 mol/L组0.49±0.07,10-6 mol/L组0.27±0.07,组内差异有统计学意义(P＜0.05).结论 DEX降低LECs中TGF-βR的表达,可能是抑制PCO形成的一个重要途径.     

转化生长因子-β信号通路在后发性白内障发生发展中的作用

后发性白内障(PCO)是现代白内障术后常见的并发症,白内障术后残留的晶状体上皮细胞(LECs)增生、迁移、上皮-间质转化(EMT)、胶原沉积、残留LECs向晶状体纤维的再生和转化是形成PCO的主要原因.转化生长因子-β(TGF-β)是目前已知的与诱导LECs转分化和组织病理性纤维化关系最为密切的细胞因子,许多研究已经证实Smad经典通路参与了TGF-β诱导的EMT过程,但越来越多的研究结果显示多条非Smad通路共同参与TGF-β诱导的EMT过程,包括磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3 K/Akt) Akt激酶、Rho、Wnt和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路等.就参与PCO病理过程的TGF-β信号通路的研究进展进行综述.     

基质金属蛋白酶-1及其抑制剂和转化生长因子-β1在翼状胬肉中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)及其抑制剂金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)和影响两者作用的转化生长因子β1(transforming growth foctor-β1,TGF-β1)在翼状胬肉头部组织中的表达及意义.方法采用免疫组化技术检测MMP-1、TIMP-1及TGF-β1在翼状胬肉头部(22例)和正常结膜(12例)中的表达.结果MMP-1与TGF-β1在翼状胬肉头部组织中的阳性表达率显著高于正常结膜(P＜0.01),而TIMP-1的表达差异无显著性(P＞0.05).经Spearman等级相关分析可知,翼状胬肉中MMP-1与TGF-β1阳性表达间存在正相关(r=0.625,P＜0.01);TIMP-1与TGF-β1阳性表达间无相关性(r=-0.0512,P＞0.05).结论MMP-1,TIMP-1及TGF-+β1可能积极参与翼状胬肉发生、发展过程中的基质重构与角膜Bowman's膜的破坏.     

2型糖尿病视网膜病变的不同时期晶状体上皮细胞TGF-β1表达

目的 研究转化生长因子-β1transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)在2型糖尿病性白内障患者晶状体上皮细胞(LECs)中的表达;探讨TGF-β1在2型糖尿病性白内障发生、发展过程中的作用.方法采用蛋白质免疫印迹(Westernblot)方法 检测75例伴糖尿病视网膜病变不同分期的2型糖尿病性白内障眼和20例无糖尿病的老年性白内障眼晶状体上皮细胞中TGF-β1蛋白水平,并进行统计分析.结果 糖尿病组TGF-β1的蛋白表达水平高于非糖尿病组平均水平(P=0.00);糖尿病各组间TGF-β1表达水平存在差异.结论 TGF-β1有促进2型糖尿病患者白内障发展的作用.     

转化生长因子β及其受体在翼状胬肉中基因表达的定量检测(英文)

目的:定量检测转化生长因子-β(Transforming Growth Fac-tor-β,TGF-β)及其受体在翼状胬肉和正常球结膜组织中的表达水平,探讨其在翼状胬肉病变发生发展过程中的作用。方法:随机选取翼状胬肉患者30例,手术切除翼状胬肉组织,并留取患眼角膜上缘上方的正常球结膜组织作为自身对照,实时荧光定量PCR技术分析翼状胬肉和正常球结膜组织中TGF-β1、TGF-β2及其I型和II型受体相对于内参照基因18S的相对mRNA含量。结果:TGF-β1在正常球结膜和翼状胬肉组织中平均表达水平分别为4.26×10-7±1.45×10-7和10.67×10-7±7.47×10-7,TGF-β2在正常球结膜和翼状胬肉组织中表达水平分别为1.08×10-10±0.68×10-10和8.23×10-11±6.63×10-11。TGF-βⅠ型受体在正常球结膜和胬肉组织中平均表达水平分别为0. 003015 ±0. 0036和0. 000379 ±0.000281, TGF-βⅡ型受体在正常球结膜和胬肉组织中表达水平分别为5.33×10-5±5.05×10-5和1.002×10-5±9.04×10-6。TGF-β1在胬肉组织中表达水平比正常结膜中表达水平升高倍数为2.9±2.8,差异有统计学意义(P<0.01)。TGF-β2在胬肉组织中表达水平比正常结膜中表达水平升高倍数为7.5±1.4,差异有统计学意义(P<0.01)。TGF-βⅠ型受体在胬肉组织中表达水平比正常球结膜中明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。TGF-βⅡ型受体在胬肉组织中表达水平比正常球结膜中表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:TGF-β1和TGF-β2在胬肉组织中表达水平均高于正常球结膜组织。TGF-β1在正常球结膜和胬肉组织中表达水平均远高于相应组织中的TGF-β2表达,但是TGF-β2在胬肉中表达水平升高变化幅度高于TGF-β1。TGF-βⅠ型和Ⅱ型受体在胬肉组织中表达水平均低于正常球结膜组织。TGF-βⅠ型受体在正常球结膜和胬肉组织中表达水平均高于相应组织中的TGF-βⅡ型受体表达,提示胬肉组织中Ⅰ型、Ⅱ型受体表达的降低可能导致TGF-β分泌的增加,从而导致翼状胬肉病变的发生发展,提示转化生长因子-β及其受体在翼状胬肉病变发生发展中可能起着重要的作用。     

转化生长因子β在脉络膜新生血管形成中的作用

转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是具有生物活性的多肽,其与脉络膜新生血管形成(choroidal neovascularization,CNV)密切相关.Smad通路为TGF-β行使生物功能的经典通路.TGF-β信号通路在血管系统发育中起着重要作用.TGF-β通过与血管内皮细胞表面的ALK5和ALK1受体结合对其不同活化阶段进行调控,并通过Smad3和p38/MAPK两条信号通路来调控血管平滑肌的分化.CNV形成过程中TGF-β分泌升高,后者在CNV的形成和增生过程中起重要作用.干预TGF-β信号通路有可能成为CNV治疗的新靶点.     

转化生长因子-β与青光眼术后滤过泡瘢痕化的关系

青光眼滤过术后滤过泡瘢痕化是手术失败的最主要原因.转化生长因子-β( TGF-β)能诱导人Tenon囊成纤维细胞表型转化,进一步迁移、增殖,合成细胞外基质,与滤过泡瘢痕化有重要关系.近年来在细胞因子及基因水平抗纤维化方面的研究取得一定进展,通过TGF-β抗体(如重组抗人TGF-β2单克隆抗体、CAT-152)、TGF-β抑制剂(如Decorin、糜酶抑制剂、SB-431542等)以及基因水平(如TGF-β的反义寡核苷酸等)来抑制TGF-β信号通路(如ALK5/Smad2/Smad3通路、MAPK通路、Rho-ROCK通路、PI3 K-AKT通路等)的重要靶点或蛋白表达,从而达到调控滤过泡瘢痕形成的作用.但目前很多药物的应用均缺乏临床试验支持,同时也缺少不同药物比较的研究.探索TGF-β细胞信号转导不同通路之间的关系,并寻找调控滤过道瘢痕化的最佳靶点是今后的研究方向.     

雌激素对人角膜基质细胞MMP-2、TIMP-2及TGF-β1表达的影响

目的:在体外实验中探讨雌激素对人角膜基质细胞中基质金属蛋白酶MMP-2及其抑制剂TIMP-2和转化生长因子TGF-β1蛋白表达的影响.方法:用1.5ng/mL IL-1β模拟角膜基质细胞炎性环境,不同浓度雌激素(0,10-10,10-8,10-6,10-4mol/L的17-β雌二醇)体外作用于人角膜基质细胞,四甲基偶氮唑(MTT)比色法鉴定细胞活性.酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组细胞上清中MMP-2、TIMP-2及TGF-β1蛋白的表达量.结果:不同浓度雌激素(E2)对角膜基质细胞的活性没有影响.E2处理组的MMP-2、TIMP-2及TGF-β1表达量与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).E2处理组与对照组相比,雌激素处理使MMP-2及TGF-β1的表达明显减少,而TIMP-2的表达则显著增多.结论:雌激素能一定程度抑制MMP-2及TGF-β1的表达,同时促进TIMP-2的表达,这可能对正常人角膜起保护作用.     

MMP-9和TGF-β1在STZ-糖尿病大鼠晶状体上皮细胞的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)和转化生长因子-β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)在链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病大鼠晶状体上皮细胞中的表达及意义,了解MMP-9与TGF-β1在糖尿病性白内障发病中的作用.方法 8周龄SD大鼠60只随机分为对照组和实验组,给予实验组大鼠20 g·L-1 STZ溶液55 mg·kg-1一次性腹腔注射,诱发糖尿病性白内障.每周裂隙灯观察大鼠晶状体变化.采用免疫组织化学方法检测2周末、4周末、8周末时MMP-9及TGF-β1在大鼠晶状体上皮细胞中的表达.结果 对照组大鼠晶状体始终保持透明,实验组大鼠晶状体逐渐混浊.实验组MMP-9和TGF-β1的阳性表达高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);实验组MMP-9 和TGF-β1阳性表达逐渐增高,各时段间差异有统计学意义(P＜0.05).MMP-9和TGF-β1的阳性表达呈正相关(r=0.937,P＜0.01).结论 MMP-9 和TGF-β1的表达增高可能在糖尿病性白内障的发生、发展中有重要作用.     

MTT法检测转化生长因子-β对人角膜基质细胞增殖的影响

目的探讨转化生长因子-β(TGF-β)对体外培养的人角膜基质细胞增殖的影响.方法体外培养的传2～3代人角膜基质细胞,分别加入0.01,0.1,1,5ng/ml的TGF-β,采用MTT法研究TGF-β对人角膜基质细胞增殖的影响.结果 TGF-β以剂量依赖方式促进人角膜基质细胞增殖,其作用在第2天达到高峰.结论 TGF-β能明显促进人角膜基质细胞增殖,因而可能成为促进角膜溃疡愈合的新方法.     

阻断Rac1对转化生长因子-β诱导视网膜色素上皮细胞行为改变的作用研究

目的 观察转化生长因子β1(TGF-β1)诱导视网膜色素上皮(RPE)细胞间质样转分化(EMT)过程中Rac1在其细胞学行为改变中的作用.方法 人RPE-19细胞分为空白组、TGF-β1组、TGF-β1+NSC23766组、NSC23766组.所有实验于加入TGF-β1前2h给予NSC23766以封闭Rac1受体.免疫荧光、蛋白免疫印迹法检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;细胞划痕、侵袭及凝胶收缩实验,观察NSC23766对细胞迁徙、侵袭、凝胶收缩作用.结果 TGF-β1组细胞中α-SMA荧光表达较空白组、TGF-β1+ NSC23766增强,差异有统计学意义(F=825.314,P=0.003);细胞划痕实验结果显示,TGF-β1组细胞间距小于TGF-β1+ NSC23766组,差异有统计学意义(P24h=0.04,P48h =0.001);与空白组细胞间距比较,差异无统计学差异(P=0.278).细胞侵袭实验结果显示,TGF-β1组穿过纤维膜的细胞数与空白组、TGF-β1+ NSC23766组、NSC23766组穿过纤维膜的细胞数比较,差异无统计学意义(F=0.371,P=0.055).凝胶收缩实验结果显示,TGF-β1组能明显增加细胞的促凝胶收缩能力,组间差异有统计学意义(F=40.473,P=0.014),TGF-β1组相对TGF-β1+ NSC23766组,差异有统计学意义(P=0.022).结论 Rac1在TGF-β1诱导RPE细胞凝胶收缩改变中发挥作用;NSC23766可通过调控Rac1活化抑制RPE细胞学行为的改变.     

大鼠视网膜中转化生长因子β1和β2基因表达的定量检测(英文)

目的:定量检测转化生长因子-β1(Transforming growth factor β1,TGF-β1)和转化生长因子-β2(TGF-β2)在大鼠正常视网膜中的表达水平,探讨TGF-β1和TGF-β2在视网膜中表达的差异及其意义。方法:分离取出大鼠正常视网膜,抽提RNA并逆转录,实时荧光定量PCR技术分析TGF-β1和TGF-β2的mRNA含量。结果:大鼠视网膜RNA保持完好未被降解,能够用于表达水平分析。大鼠视网膜中TGF-β2相对于β-actin的基因表达水平为0.0378±0.009,TGF-β1为0.0008±0.0003,前者明显高于后者,统计学上差异有显著性(t=12.37,P<0.001),说明在视网膜中TGF-β的表达以TGF-β2为主,TGF-β2和TGF-β1的比值为55.00±26.61。结论:实时荧光定量PCR技术能够针对性地精确分析极少量组织细胞的基因表达。TGF-β在视网膜中以TGF-β2表达为主,提示可能是TGF-β2在视网膜病变中起主导作用。     

TGF-β1、TGF-βRⅡ及Smad4蛋白在原发性翼状胬肉中的表达

目的研究转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、转化生长因子-β1Ⅱ型受体(transforming growthfactor-β1receptorⅡ,TGF-βRⅡ)和Smad4蛋白在原发性翼状胬肉组织中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学SP法检测56眼翼状胬肉头部组织及8眼正常结膜组织中TGF-β1、TGF-βRⅡ及Smad4蛋白的表达,阳性表达率用阳性细胞占细胞总数百分率的平均值表示,利用统计学软件SPSS13.0分析本研究结果。结果TGF-β1在胬肉头部侵入角膜缘≤1mm、2~3mm和≥4mm翼状胬肉组和正常结膜组的阳性表达率利用分别为(21.08±3.63)%、(20.12±2.68)%、(21.55±3.07)%、(12.36±1.97)%;TGF-βRⅡ的表达率分别为(15.35±9.37)%、(21.07±10.96)%、(15.48±8.80)%、(33.77±9.31)%,Smad4蛋白的表达率分别为(14.38±4.02)%、(13.05±3.50)%、(13.13±4.10)%、(38.69±5.70)%,TGF-β1在各翼状胬...     

转化生长因子-β1对人视网膜色素上皮细胞热休克蛋白47及血管内皮生长因子表达的影响

人视网膜色素上皮(RPE)细胞增生、迁移、合成细胞外基质是促进增生性玻璃体视网膜疾病(PVD)发生和发展的主要原因之一[1-3].血管内皮生长因子(VEGF)可诱导入RPE细胞增生、迁移;转化生长因子-β1(TGF-β1)可诱导入RPE细胞迁移及合成细胞外基质;均在PVD形成过程中发挥着重要作用[2-4].但目前,有关其作用机制尚不明确.RPE细胞热休克蛋白47(HSP47)是一种胶原特异的分子伴侣,对胶原成熟有一定影响[5].我们通过观察TGF-β1对人RPE细胞HSP47及VEGF合成的影响,以进一步探讨TGF-β1在PVD发病机制中的作用.现将结果报道如下.     

TGF-β1、VEGF在兔角膜缝线后新生血管形成中的表达及意义

目的 探讨角膜组织中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、血管内皮细胞生长因子(vescular endothelium growth factor,VEGF)与角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)形成的相关性.方法 双侧角膜缝线制备兔角膜新生血管模型.33只兔随机分为正常对照组(3只)、实验组(15只)和实验对照组(15只);实验组兔行单纯角膜缝线,实验对照组兔术后隔日结膜下注射一定量地塞米松.术后每日观察CNV生长情况并记录,分别于术后1 d、4 d、7 d、14 d、21 d检测角膜组织中TGF-β1、VEGF阳性表达情况.结果 缝线后各时间点,实验对照组CNV面积、角膜组织炎症细胞浸润程度及TGF-β1、VEGF的表达情况与实验组相比明显受到抑制(P＜0.05).角膜组织中TGF-β1、VEGF的表达与CNV面积存在显著的相关性.结论 CNV的形成与炎症反应密切相关,TGF-β1、VEGF可能参与了CNV的形成过程,地塞米松可能通过抑制角膜炎症反应及TGF-β1、VEGF等细胞因子的表达进而抑制CNV的生长.     

转化生长因子及糖基化终末产物在糖尿病性白内障中的作用

糖基化终末产物(AGEs)在糖尿病眼部并发症的致病作用已基本明确,循环血中沉积在眼部的AGEs和晶状体的各种蛋白糖化形成的AGEs与其受体相互作用,导致了糖尿病性白内障的发生.转化生长因子-β(TGF-β)通过引起晶状体前、后囊膜下纤维化和混浊致白内障,且其在高糖环境下含量有所增高.研究表明,AGEs和TGF-β之间存在着协同作用.     

TGF-β2及Myocilin蛋白在原发性开角型青光眼的研究进展

转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)是参与原发性开角型青光眼(primary open-angle glaucoma,POAG)发病机制的一个重要细胞因子,TGF-β2对小梁网的作用机制成为近年来研究的一个热点.Myocilin是第一个被证明与POAG相关的基因,在许多眼内、眼外组织中均有表达,特别是小梁网.在过去的十几年里,学者们对Myocilin蛋白在正常眼或青光眼的功能方面做了很多的研究.此文将以TGF-β2对小梁网作用机制以及Myocilin蛋自在POAG发病机制中的研究为综述.     

曲尼斯特对人眼Tenon囊成纤维细胞TGF-β1，2 mRNA表达的影响

目的观察曲尼斯特对人眼Tenon囊成纤维细胞(human tenon fibroblast,HTF)TGF-β1、TGF-β2 mRNA表达的影响.方法体外进行HTF细胞原代及传代培养.采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),研究不同浓度和不同作用时间的曲尼斯特对HTF细胞TGF-β1、TGF-β2 mRNA表达的影响.结果曲尼斯特作用24 h后,25.0、50.0、100.0 mg/L浓度曲尼斯特组与对照组相比均能够明显下调HTF细胞TGF-β1(P＜0.05、0.05、0.01)和TGF-β2(P＜0.01、0.05、0.01)mRNA表达.50.0 mg/L曲尼斯特处理12 h、24 h、48 h组相对于相应时间对照组,能够明显下调HTF细胞TGF-β1(P＜0.05、0.01、0.01)和TGF-β1(P＜0.01、0.01、0.01)mRNA表达.结论 曲尼斯特能够下调体外培养HTF细胞TGF-β1、TGF-β2 mRNA的表达,下调效应随药物浓度和作用时间的延长而加强.(中国眼耳鼻喉科杂志,2006,681～83)