复方苦参注射液对人子宫内膜癌细胞HEC-1B雌激素受体表达的影响

目的探讨复方苦参注射液对人子宫内膜癌细胞（HEC-1B）雌激素受体（ER）亚型ER-α36、ERα-66的影响,探讨其作用机制。方法 HEC-1B细胞给予高、中、低3个浓度复方苦参注射液、苦参注射液、白土苓注射液、顺铂注射液处理,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察各给药组对HEC-1B细胞增殖的影响。HEC-1B细胞给予中浓度复方苦参注射液、苦参注射液、白土苓注射液、顺铂注射液处理,采用反转录聚合酶链反应法（RT-PCR）观察不同给药组对HEC-1B细胞雌激素受体ER-α36、ERα-66表达水平的影响。结果与空白对照组比较,高浓度复方苦参注射液、苦参注射液均显著抑制HEC-1B细胞增殖（P〈0.05）。复方苦参注射液、苦参注射液、顺铂注射液作用于HEC-1B细胞48 h后,与空白对照组比较,细胞中ER-α36 mRNA表达水平均明显降低（P〈0.05）;除白土苓组外,其他各给药组ERα-66mRNA表达水平亦明显降低（P〈0.05）。结论复方苦参注射液抑制HEC-1B细胞增殖的作用机制可能与抑制细胞雌激素受体ER-α36、ER-α66的基因表达有关。     

姜黄素对人子宫内膜癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的观察姜黄素（curcumin）对体外培养的人子宫内膜癌（HEC-1-B）细胞增殖和细胞周期分布的影响。方法应用10～80μmol/L的姜黄素分别处理HEC-1B48h后,采用MTT法检测姜黄素对HEC-1B的增殖程度的影响;流式细胞仪进行细胞周期时相分析。结果①MTT法显示培养48h后,姜黄素组的吸光度值A490nm低于对照组（P〈0.01）,且在一定浓度范围内呈剂量依赖性。②流式细胞仪检测显示培养48h后,姜黄素组的G2/M比例高于对照组（P〈0.05）,且在一定浓度范围内呈剂量依赖性。结论姜黄素在体外能显著抑制人子宫内膜癌细胞的增殖,引起细胞周期重新分布可能是姜黄素抑制人子宫内膜癌细胞增殖的机制之一。     

华蟾素对两株子宫内膜癌细胞生物学行为的影响

目的研究华蟾素对体外培养的两株子宫内膜癌细胞(PTEN表达完整的HEC-1A细胞和PTEN缺失的Ishikawa细胞)生物学行为影响并探讨分子机制。方法以不同浓度华蟾素作用两株子宫内膜癌细胞,MTT和克隆形成法检测细胞增殖;流式细胞法检测细胞周期及凋亡率;Transwell法检测侵袭;RT-PCR和Western blot法检测胰岛素生长因子-1受体(IGF-1R)基因和蛋白表达。结果 PTEN基因缺失的Ishikawa细胞随华蟾素浓度升高,增殖和侵袭能力明显降低,凋亡率显著升高,G1期细胞比例明显增多,IGF-1R基因和蛋白表达显著下降,HEC-1A细胞对华蟾素作用不敏感。结论PTEN基因缺失可增强子宫内膜癌细胞对华蟾素的敏感性。     

紫草素对子宫内膜癌Ishikawa细胞雌激素信号通路表达的影响

目的:观察紫草素对子宫内膜癌Ishikawa细胞雌激素信号通路表达的影响。方法:Ishikawa细胞体外培养,经1、3、5M紫草素及相应浓度紫草素中分别加入雌激素10 n M,处理细胞后,用MTT法分别检测治疗24 h、48 h、72 h后Ishikawa细胞生长抑制率;Western-blot及RT-PCR法检测雌激素信号通路ERα、Cyclin D1、c-myc蛋白表达情况及ERα基因的表达情况。结果:显示随着紫草素作用浓度的增加及干预时间的延长,Ishikawa细胞抑制率明显上升;紫草素作用于子宫内膜癌Ishikawa细胞24 h后,ERα、Cyclin D1、c-myc蛋白表达下降,与空白对照组比较差异有统计学意义(P0.05),但是ERαmRNA表达无统计学意义,与空白对照组比较(P0.05)。结论:紫草素随着浓度的增加及作用时间的延长,能够显著抑制Ishikawa细胞的增殖;紫草素通过抑制雌激素信号通路中ERα、Cyclin D1、c-myc蛋白表达,起到抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖的作用。     

熊果酸通过调控雌激素受体抑制甲状腺癌BCPAP 细胞增殖、迁徙、侵袭的机制研究

目的：观察熊果酸对雌激素受体ERα、ERβ表达的影响,研究熊果酸抑制甲状腺癌BCPAP细胞增 殖、迁徙、侵袭的机制。方法：Western blot 实验检测人正常甲状腺细胞（Nthy-ori3-1 细胞） 与甲状腺癌 BCPAP细胞中ERα、ERβ的蛋白表达,CCK-8实验检测熊果酸对甲状腺癌BCPAP细胞增殖的影响,细胞划痕 实验、Transwell实验检测熊果酸对甲状腺癌BCPAP细胞迁徙、侵袭能力的影响。Western blot实验检测熊果酸 对甲状腺癌BCPAP细胞雌激素受体ERα、ERβ表达的影响。结果：Nthy-ori3-1细胞与BCPAP细胞比较,ERα 的表达水平较低（P＜0.05）,ERβ的表达水平较高（P＜0.05）。不同浓度的熊果酸（4、8、16、32、64 μmol/L） 对BCPAP 细胞增殖具有抑制作用,呈时间和浓度依赖性（P＜0.05）。同时间点,B4 组（4 μmol/L）、B8 组（8 μmol/L） BCPAP细胞迁移力低于B0组（0 μmol/L）（P＜0.05）。与B0组比较,B4组、B8组BCPAP细胞 侵袭数明显降低（P＜0.05）。熊果酸作用24 h后,B4组、B8组ERα表达水平低于B0组（P＜0.05）,ERβ表达 水平高于B0组（P＜0.05）。结论：熊果酸可能通过雌激素受体ERα、ERβ降低甲状腺癌BCPAP细胞增殖、迁 徙、侵袭的能力。     

紫草素对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和顺铂耐药性的影响

目的探讨紫草素调控HNF1A-AS1/miR-20b-5p轴对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和顺铂耐药性的影响。方法将子宫内膜癌细胞HEC-1B分为对照组、紫草素低、中、高剂量组、si-NC组、si-HNF1A-AS1组、miR-NC组、miR-20b-5p组、pcDNA-NC+紫草素组、pcDNA-HNF1A-AS1+紫草素组、pcDNA-HNF1A-AS1+miR-NC+紫草素组、pcDNA-HNF1A-AS1+miR-20b-5p+紫草素组。CCK-8检测细胞存活率和顺铂对HEC-1B细胞的半抑制浓度值(IC_(50));流式细胞术检测凋亡;RT-PCR检测HNF1A-AS1和miR-20b-5p的表达;Western blot检测CyclinD1、Cleaved-caspase-3、MRP1表达。双荧光素酶报告基因实验和RT-PCR验证HNF1A-AS1对miR-20b-5p的靶向调控作用。结果低、中、高剂量紫草素处理后HEC-1B细胞存活率降低,细胞凋亡率升高(P0.05,P0.05),HNF1A-AS1、CyclinD1、MRP1表达降低,miR-20b-5p和Cleaved-caspase-3表达升高,IC_(50)值降低(P0.01)。干扰HNF1A-AS1表达或过表达miR-20b-5p后,HEC-1B细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,CyclinD1、MRP1蛋白表达降低,Cleaved-caspase-3表达升高,IC_(50)值降低(P0.01)。HNF1A-AS1靶向负调控miR-20b-5p表达。过表达HNF1A-AS1可以逆转紫草素对子宫内膜癌细胞HEC-1B细胞增殖、凋亡和顺铂耐药性的影响(P0.01)。过表达miR-20b-5p可以逆转pcDNA-HNF1A-AS1对紫草素处理的子宫内膜癌细胞HEC-1B细胞增殖、凋亡和顺铂耐药性的影响(P0.01)。结论紫草素可抑制子宫内膜癌细胞存活,诱导细胞凋亡,提高其顺铂敏感性,其机制与调控HNF1A-AS1/miR-20b-5p轴有关。     

四物汤基于雌激素受体亚型介导的雌激素样效应及其分子机理的研究

目的:利用在体动物实验和体外雌激素受体(ER)阳性MCF7细胞培养实验研究四物汤的雌激素样效应及其分子机理。方法:40只未性成熟SD大鼠,体质量50 g,21 d,按照随机分组的原则分为4组:正常对照组、雌激素组、四物汤高剂量组和四物汤低剂量组。灌胃给药,2次/d,持续4 d后取材,称量子宫重量,计算子宫系数,并制备药理血清。用四物汤药理血清作用于MCF7细胞,并分别加入ERα和ERβ特异性拮抗剂MPP和PHTPP作为工具药,通过MTT法检测四物汤对MCF7细胞增殖的影响; Western blot法检测四物汤对MCF7细胞ERα、ERβ蛋白表达的影响。结果:四物汤可发挥雌激素样效应,增加未性成熟大鼠的子宫系数(P 0. 05或0. 01);四物汤药理血清可促进细胞增殖(P 0. 05或0. 01),该促增殖作用在加入MPP或PHTPP后均被减弱,且加入PHTPP后拮抗作用更显著(P 0. 01)。Western blot检测发现四物汤药理血清可提高MCF7细胞ERα、ERβ的表达水平,并可降低ERα与ERβ比值(P 0. 01)。结论:四物汤在整体动物水平可表现出雌激素样效应;体外实验进一步证实四物汤可通过ER通路,特别是ERβ途径影响ER阳性细胞的增殖活性,并可改变ERα与ERβ比值。     

紫草素对子宫内膜癌Ishikawa细胞生长的作用研究

目的研究紫草素体外诱导人子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的作用,并初步探讨其诱导凋亡的机制,为紫草素的临床应用提供实验依据。方法采用MTT法测定各组药物对Ishikawa细胞的增殖抑制作用;流式细胞术观察紫草素对子宫内膜癌Ishikawa细胞周期及其凋亡率的影响;应用RT-PCR法检测紫草素对子宫内膜癌Ishikawa细胞中Bax及其Bcl-2蛋白表达的影响。结果紫草素对Ishikawa细胞的增殖有明显抑制作用,并呈明显的量效关系和时间依赖性。紫草素主要将细胞阻滞于G1期,并且同一时间点下紫草素诱导Ishikawa细胞凋亡的作用具有浓度依赖性。紫草素诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的机制与蛋白Bax及Bcl-2表达相关,通过促进Bcl-2表达下调与Bax表达上调从而诱导子宫内膜癌细胞的凋亡(P<0.05)。结论紫草素可以有效抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞的增殖,并具有时间和浓度依赖性。促进细胞凋亡并将细胞周期阻止于G1期,其机制可能与抑制Ishikawa细胞中Bax与Bcl-2蛋白的表达有关。     

大萼香茶菜甲素对多发性骨髓瘤细胞株U266体外作用的研究

目的:观察大萼香茶菜甲素(macrocalyxin A,MA)体外对多发性骨髓瘤细胞株U266增殖、凋亡的作用,并初步探讨其机制。方法:以不同质量浓度的(2、4、8μg/mL)MA体外作用于U266细胞,运用细胞计数、PI染色、MTT比色法体外观察MA对U266细胞增殖抑制作用;采用细胞形态观察、Annexin V/PI双染色和DNA亚二倍体检测方法研究MA诱导U266细胞凋亡作用;用Western免疫印迹法检测β1、β1i、β2、β2i、β5、β5i、NF-κB、IκB-α蛋白表达。结果:MA抑制细胞增殖;MA可促进细胞凋亡,细胞瑞氏染色后出现典型的凋亡小体;AnnexinV+/P I-表达升高;亚G1峰显著增加;在Western免疫印迹中β2、β1i、β5i、NF-κB随着药物作用浓度的增高表达逐渐降低,而IκB为增高趋势,β1、β2、β2i无明显变化。结论:MA在体外对U266细胞增殖有明显抑制作用,并诱导细胞调亡。     

一贯煎对大鼠肝星状细胞雌激素受体的影响

目的:观察一贯煎含药血清对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)2种亚型基因表达的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法:体外培养活化的大鼠HSC-T6细胞,分为空白组、雌二醇组和一贯煎高、中、低剂量组,共5组,空白组加入空白鼠血清,药物组加入相应的含药血清进行干预,培养24 h、48 h、72 h后,分别收集细胞和上清液,保存备用。MTT法检测细胞增殖情况;ELISA法检测细胞上清液中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原含量;Real time-PCR方法检测ERα、ERβ mRNA的表达。结果:一贯煎高剂量组表现对细胞增殖有明显的抑制作用,能够降低细胞上清液中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原含量,且作用较雌二醇显著(P0.05);一贯煎在提高HSC-T6细胞ERα、ERβ mRNA的表达方面作用较雌激素含药血清组弱,差异无统计学意义。结论:一贯煎能够抑制肝星状细胞活化,其机制可能是通过提高肝星状细胞的雌激素受体表达而起作用。     

注射用灯盏花素粉针剂治疗冠心病心绞痛疗效观察

[目的]观察注射用灯盏花素粉针剂治疗冠心病心绞痛的临床效果。[方法]将50例冠心病心绞痛患者按随机数字表法随机分为治疗组与对照组,每组各25例,两组均用阿司匹林、β受体阻滞剂、硝酸酯类、调脂药等。治疗组加用注射用灯盏花素粉针剂。治疗14 d后观察两组心绞痛症状、心电图ST-T改变、动态心电图缺血性ST-T改变的时间、血流变学变化和血脂情况。[结果]治疗组心绞痛症状、心电图ST-T改变、动态心电图缺血性ST-T改变的时间、血流变学变化和血脂的改善情况均高于对照组(P<0.05)。[结论]注射用灯盏花素粉针剂治疗冠心病心绞痛疗效优于西药常规治疗。     

半边旗提取物5F-Na盐溶液对三种肝细胞癌细胞株的增殖抑制作用

目的:评估半边旗提取物5F-Na盐溶液对肝细胞癌细胞株的增殖抑制作用。方法:采用MTT法,观察不同浓度的半边旗提取物物5F-Na盐溶液分别作24、48、72h对三种不同类型肝细胞癌细胞株(HepG2,Hep3B,BEL-7402)生长增殖的影响。结果:不同浓度的半边旗提取物5F-Na盐溶液分别对3种肝癌细胞作用24、48、72h后,所有的肝癌细胞株生长增殖均受到不同程度的抑制(P<0.05),5F-Na盐溶液对HepG2,Hep3B,BEL-7402作用72h后的IC50分别是20.67,16.74,16.09mg/L。结论:半边旗提取物5F-Na盐溶液能有效抑制肝细胞癌细胞株的体外增殖。     

小檗碱抑制人子宫内膜癌细胞增殖及转移机制的研究

目的探讨小檗碱抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和转移的机制。方法四甲基偶氮唑蓝法检测小檗碱对人子宫内膜癌Ishikawa细胞株的抑制作用;流式细胞仪观察对细胞周期分布的影响;ELISA法检测细胞培养上清液中炎性因子白细胞介素-8（IL-8）的浓度变化;应用Western印迹法检测经小檗碱干预该细胞48 h后,细胞核因子-кB（NF-кB）信号途径中p65的变化。结果小檗碱可显著抑制Ishikawa细胞生长,呈时间剂量依赖性。小檗碱可阻滞细胞于G0/G1期。细胞培养上清液中IL-8的浓度随着干预时间延长而减少（P〈0.05）。小檗碱作用48 h后,细胞中NF-кB p65表达明显下降（P〈0.05）。结论小檗碱具有抗人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖作用,将细胞阻滞于G0/G1期,抑制细胞产生IL-8,并能够阻断NF-кB信号通路,从而抑制子宫内膜癌的转移。     

川陈皮素对乳腺癌细胞的化疗增敏作用

目的 探讨川陈皮素对乳腺癌细胞MDA-MB-231的体外化疗增敏作用.方法 以MDA-MB-231细胞为研究对象,MTT法测定细胞增殖抑制率,DNA Ladder、核小体双抗体ELISA和流式细胞仪测定MDA-MB-231细胞凋亡情况,凝胶阻滞实验(EMSA)和ELISA检测川陈皮素对核转录因子(NF-κB)的转录激活的影响.结果 20 μmol/L川陈皮素分别与1 nmol/L紫杉醇或50 ng/mL阿霉素联合使用肿瘤细胞增殖抑制率为75.1%和82.6%,单独使用1 nmol/L紫杉醇或50 ng/mL阿霉素肿瘤细胞增殖抑制率为40%和45%;核小体双抗体夹心酶免疫法和DNA凝胶电泳实验表明川陈皮素与紫杉醇或阿霉素联合用药可明显促进MDA-MB-231细胞的凋亡,EMSA和ELISA实验表明川陈皮素与紫杉醇或阿霉素联合用药可明显抑制NF-κB的转录活性.结论 川陈皮素可以促进临床化疗药物对乳腺癌细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡作用,其机制可能是通过抑制NF-κB转录作用.     

淡豆豉与黑豆提取物抗癌细胞增殖作用及4种异黄酮成分的含量测定

目的:探讨淡豆豉和黑豆提取物对乳腺癌MCF-7细胞增殖的调节作用,并检测提取物中4种异黄酮成分的含量。方法:MTT法观察淡豆豉和黑豆提取物对乳腺癌细胞株MCF-7细胞增殖率的影响,Annexin/PI法流式细胞仪分析检测细胞的早期凋亡,高效液相色谱法检测淡豆豉和黑豆提取物中4种异黄酮成分大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素的含量变化。结果:淡豆豉和黑豆提取物对MCF-7细胞的增殖均有抑制作用且诱发癌细胞凋亡,但高浓度淡豆豉提取物的抑制癌细胞增殖作用明显高于黑豆(P0.05)。淡豆豉提取物中大豆苷、大豆苷元和染料木素的含量显著高于黑豆提取物(P0.01),但染料木苷的含量未见明显变化。结论:淡豆豉提取物与黑豆相比具有较强的抑制癌细胞增殖作用,淡豆豉中含量较高的异黄酮成分大豆苷、大豆苷元和染料木素,可能是其较强的抗癌细胞增殖作用的物质基础。     

噎膈证方对人表皮生长因子刺激的食管癌EC9706细胞生长信号转导的影响

目的:研究噎膈病辨证施方在不同浓度下对食管癌细胞生长的影响;从生长信号转导角度探讨启膈散等对人表皮生长因子(hEGF)刺激的食管癌EC9706细胞生长抑制机理。方法:体外培养人表皮生长因子(hEGF)刺激的EC9706食管鳞癌细胞株,分别加入启膈散等4方提取液,通过MTT染色、流式细胞技术等观察细胞增殖变化;以western blot法检测PLC-γ1介导的生长信号通路蛋白表达。结果:启膈散(Q)、沙参麦冬汤(S)、通幽汤(T)IC50值分别为849,1004,1 615μg.mL-1;可抑制PLC-γ1信号通路相关蛋白表达,抑制作用强度:TQS;结论:除补气运脾汤外,噎膈证方可抑制hEGF刺激的EC9706细胞的生长;启膈散等3方可通过抑制PLC-γ1介导的生长信号转导而抑制EC9706细胞生长。     

小檗碱对人胃癌细胞株BGC-823增殖的影响

用MTT法、克隆分析、流式细胞仪及免疫组织化学法 ,观察了小檗碱对人胃癌细胞株BGC 82 3增殖的影响 ,结果发现小檗碱对人胃癌细胞株BGC 82 3有抑制增殖作用 ,且与药物浓度呈正相关。其机理主要为使突变型 p5 3和 p2 1蛋白的表达下调 ,阻滞胃癌细胞进入细胞周期 ,使人胃癌细胞BGC 82 3的细胞周期阻滞于G0 /G1期。     

蜂王浆冻干粉对人肝癌细胞系SMMC-7721增殖的影响

目的观察蜂王浆冻干粉对人肝癌细胞系SMMC-7721增殖的影响。方法体外培养人肝癌细胞系SMMC-7721,MTT比色法观察蜂王浆冻干粉水溶液及蜂王浆冻干粉含药血清对其增殖的影响。结果蜂王浆冻干粉水溶液能促进人肝癌细胞系SMMC-7721增殖,呈剂量依赖性。而蜂王浆冻干粉含药血清则能抑制该细胞的增殖,其抑制效应亦呈剂量依赖性。结论蜂王浆冻干粉的抗癌效应可能是其代谢产物或刺激机体产生的活性物质所致。     

乌三颗粒体外对恶性肿瘤细胞核酸合成的抑制作用

目的:探讨中药复方制剂乌三颗粒在体外对肿瘤细胞增殖的影响。方法:将人巨细胞肺癌、人肝细胞癌、人肺腺癌细胞株在体外培养传代3次后,各组分别加入受试药物,~3H-TdR 掺入法检测肿瘤细胞核酸的合成,琼脂集落法检测肿瘤干细胞增殖的能力。结果:乌三颗粒剂量在0.5～8mg/ml 时,可明显减少人巨细胞肺癌、人肝细胞癌、人肺腺癌细胞三株细胞对~3H 标记的胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)的摄入,明显减少肿瘤干细胞集落的形成,与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。结论:乌三颗粒在体外对多株肿瘤细胞的核酸合成有显著抑制作用,同时有抑制肿瘤干细胞的增殖能力。