清开灵对缺氧体外血脑屏障紧密连接蛋白ZO-1表达的影响

目的观察缺氧对体外血脑屏障（blood brain barrier,BBB）紧密连接蛋白ZO-1表达的影响以及清开灵的干预作用。方法通过体外培养Balb/c小鼠脑微血管内皮细胞系形成BBB,采用缺氧缺糖24 h建立BBB缺血损伤模型,分别以荧光实时定量和Western blot的方法测定BBB紧密连接蛋白ZO-1的基因转录和蛋白表达水平,同时观察不同剂量清开灵对ZO-1表达的影响。结果与正常组相比,缺氧缺糖24 h可使BBB表达ZO-1明显减少（P〈0.01）。清开灵能够显著增加缺血后ZO-1的基因转录和蛋白表达水平,与模型组差异显著（P〈0.05或P〈0.01）。结论清开灵可通过改善脑缺血对BBB主要组成蛋白的表达,发挥其对缺血性脑中风的脑保护作用。     

血脑屏障模型及中药对其通透性影响研究进展

血脑屏障(BBB)作为脑毛细血管壁与神经胶质细胞形成的血浆与脑细胞之间的屏障和由脉络丛形成的血浆和脑脊液之间的屏障,能够阻止某些物质(多半是有害的)脑组织,从而保持脑组织内环境的基本稳定,但同时其阻止大多数药物进入颅内,给颅脑疾病的治疗带来困难。血脑屏障实验模型的建立是进行颅脑疾病药物治疗的一个关键技术。因此,对血脑屏障模型的建立及其通透性改变的研究,将深化对神经-血管相互作用的认识,为中枢神经系统疾病的诊疗提供重要的理论依据。中药可通过影响脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、抑制髓过氧化物酶(MPO)活性及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,影响闭锁小带蛋白-1(ZO-1)的表达或上调紧密连接蛋白-5 (Claudin-5)等的表达抑制病理条件下BBB通透性,对BBB起到保护作用。中药也可通过影响细胞黏着因子-1(CAM-1),ZO-1和纤维状肌动蛋白(F-actin),P-糖蛋白(P-gp)及增加5-羟色胺(5-HT)等的表达来促进BBB通透性改变,或与其他药物共递送,增加药物透过率。本文对近年来血脑屏障实验模型建立的方法、优缺点及中药单体及有效成分、中药复方等对血脑屏障通透性作用的文献进行整理,为下一步中西医治疗颅内疾病提供重要的指导意义和方向。     

石菖蒲对血脑屏障超微结构及通透性的影响

目的:研究石菖蒲对大鼠血脑屏障超微结构及通透性的影响,证实其"醒脑开窍"之药理作用.方法:用电镜观察大鼠大脑皮层血脑屏障的超微结构在给药前后的变化,测定伊文思蓝(EB)的含量,并采用HPLC测定石菖蒲对中枢神经系统药苯妥英钠在脑内的蓄积程度的影响.结果:石菖蒲可以影响大鼠血脑屏障的超微结构,使内皮细胞之间的紧密连接松弛;同时,增加伊文思蓝透过血脑屏障的含量,促进中枢神经系统药苯妥英钠在脑内的蓄积,即增加血脑屏障的通透性.结论:说明石菖蒲能够提高血脑屏障通透性,具有醒脑开窍的药理作用.     

中医药对血脑屏障通透性影响的研究进展

正根据世界卫生组织(WHO)报道,脑部疾病如阿尔茨海默氏症、中风、脑肿瘤、癫痫等,已经成为影响人类健康的重要疾病。而在脑部疾病治疗方面,由于血脑屏障(Blood Brain Barhei BBB)的存在,只有部分小分子物质才可以通过BBB,然而有98%小分子其很大程度上不能通过BBB[1]。为了让药物到达BBB,可以采用某些方法使BBB可逆性开放,王耀明等[2]发现甘露醇高渗溶液、组织胺等活性物质可     

清开灵注射液对Aβ42刺激下小鼠体外血脑屏障转运Aβ的影响及机制研究

目的 观察具有神经毒性的寡聚肽Aβ42对体外血脑屏障通透性及转运Aβ的影响以及清开灵的干预作用.方法 通过体外培养Balb/c小鼠脑微血管内皮细胞形成血脑屏障,随机分为正常对照组(加入DMEM)、模型组(加入Aβ42)和清开灵组(加入Aβ42+清开灵),测定各组TEER值、HPR 2小时通透率,用ELISA法检测各孔A...     

清开灵注射液类过敏反应的实验研究

实验采用小鼠全身类过敏试验、大鼠皮肤类过敏试验及测量血液中组胺,VEGF,TNF-α含量来研究清开灵注射液致小鼠和大鼠的类过敏反应,为其临床用药安全提供参考。小鼠全身类过敏试验：ICR小鼠随机分为生理盐水（NS）对照组、阳性药Compound 48/80（Comp）25 mg·kg^-1组、清开灵注射液（QKLI）3,6,12 mL·kg^-1组（本实验所用QKLI为液体,故剂量单位选用mL·kg^-1）,各组分别一次性尾静脉注射含0.4%伊文思蓝（EB）的受试药,记录给药30 min后耳廓蓝染阳性率,对耳廓蓝染程度进行评分,测定耳廓伊文思蓝渗出量。大鼠皮肤类过敏试验：剃除大鼠背部和脊柱两侧的毛,经尾静脉注射含0.6%EB的NS 2 mL·kg^-1,10 min后,在麻醉的情况下,沿脊柱两侧,皮内注射阴性对照NS、阳性对照Comp（0.5 mg,50 μL）、不同浓度QKLI（分别相当于清开灵注射液原液 12.5,25,50 μL）,各组注射体积均为50 μL。给药20 min后记录各注射点的蓝斑直径。对血液中组胺,VEGF,TNF-α的影响：ICR小鼠随机分成NS组、Comp 25 mg·kg^-1组、QKLI 12 mL·kg^-1组。各组经尾静脉注射不含EB的受试物。给药30 min后,摘眼球取血,离心分离血清,采用ELISA方法测定。实验结果显示尾静脉注射QKLI 3,6,12 mL·kg^-1后,小鼠耳廓出现不同程度的耳蓝染现象。提示QKLI可引起小鼠血管通透性增高,导致其发生类过敏反应;大鼠皮内注射QKLI（相当于原液 25,50 μL/点）时可导致注射点处形成与NS组相比直径较大的蓝斑（P<0.01）;静脉注射QKLI后可引起血液VEGF明显增高,组胺有一定增高趋势,TNF-α未见增高。实验证明了QKLI有显著的使血管通透性增高的作用,从而诱发大鼠、小鼠而发生类过敏反应,其类过敏反应可能与组胺和VEGF释放有关。     

千叶素A对缺氧损伤下血脑屏障通透性的影响及其机制研究

目的 研究千叶素A对缺氧损伤下血脑屏障通透性的影响及其调控机制.方法 利用原代培养大鼠脑微血管内皮细胞(BMEC)建立体外血脑屏障模型,缺氧诱导损伤.荧光分光光度法检测千叶素A对BMEC异硫氰酸荧光素(FITC)-葡聚糖的荧光强度,观察其对体外血脑屏障模型通透性的影响;RT-PCR法检测千叶素A对BMEC紧密连接蛋白ZO-1、claudin-1基因表达的影响,Cell-Based ELISA法检测千叶素A对BMEC中ZO-1蛋白表达的影响.结果 缺氧使体外血脑屏障模型对FITC-葡聚糖的通透量明显增加,脑微血管内皮细胞ZO-1基因和蛋白表达下调;千叶素A能明显拮抗缺氧造成的上述损伤.结论 千叶素A对缺氧损伤体外血脑屏障具有保护作用,其机制与其影响ZO-1表达有关.     

清开灵注射液的过敏性研究

目的:研究清开灵注射液在皮肤被动过敏试验(PCA)中是否有过敏反应。方法:按照《中药、天然药物免疫毒性(过敏性、光变态反应)研究的技术指导原则》的试验方法对清开灵注射液进行皮肤被动过敏试验。结果:清开灵注射液高剂量组均出现过敏反应;低剂量组中1∶2出现过敏反应,1∶8未出现过敏反应。结论:清开灵注射液大鼠皮肤被动过敏性试验研究结果与临床实际使用有较好的相关性。     

清开灵注射液的临床研究

清开灵注射液的临床研究河南三门峡铝厂职工医院金玉龙（４７２０００）三门峡水利枢纽管理局职工医院赵志新关键词清开灵，临床研究，综述清开灵注射液为安宫牛黄丸的改良剂型，由北京中医大学实验药厂生产，主要成分用猪牛羊胆酸代替天然牛黄，用水牛角代替犀角，其它成...     

川芎嗪与葛根素合用对糖氧剥夺诱导的体外血脑屏障通透性的影响

目的:探讨川芎嗪与葛根素合用对糖氧剥夺诱导的体外血脑屏障(aBBB)通透性的影响。方法:实验分为正常对照组、模型组、川芎嗪组、葛根素组、葛根素与川芎嗪合用组和尼莫地平组6个组。原代培养大鼠脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞共培养构建aBBB模型,经糖氧剥夺诱导处理建立aBBB损伤模型,跨内皮电阻抗、γ-谷氨酰转肽酶、碱性磷酸酶及乳酸脱氢酶鉴定aBBB损伤情况,高效液相色谱法测定川芎嗪、葛根素及尼莫地平的含量,并计算在OGD诱导下的aBBB药物透过浓度。结果:与对照组相比,模型组TEER值降低(P0.01),川芎嗪组、川芎嗪与葛根素合用组、尼莫地平组-γGT,AKP升高(P0.01),与川芎嗪与葛根素合用组相比,川芎嗪、葛根素单用AKP升高明显(P0.01),尼莫地平各指标均有显著性差异(P0.05),提示川芎嗪与葛根素合用在可升高TEER,增加-γGT,AKP含量和降低LDH具有协同作用,OGD诱导下aBBB模型的培液中川芎嗪与葛根素合用组各成分透过浓度均较川芎嗪、葛根素单用增加。结论:川芎嗪与葛根素合用较两者单用易透过aBBB,且对aBBB有一定的保护作用,可能与降低OGD诱导下的aBBB通透性有关。     

清开灵注射液对小鼠脑微血管内皮细胞缺氧模型紧密连接蛋白claudin-5的影响

目的 观察缺氧对脑微血管内皮细胞紧密连接蛋白claudin-5 表达的影响及清开灵的干预作用.方法 体外培养Balb/c 小鼠脑微血管内皮细胞,分为正常组、模型组和清开灵小中大剂量组,采用氧糖剥夺24 h 模拟缺血损伤,荧光定量PCR 法检测Claudin-5mRNA 的转录水平,western blot 法检测蛋白表达.结果 缺氧损伤后,Claudin 5mRNA 和蛋白表达水平明显降低（P 〈0.05）;与模型组比较,清开灵小、中、大各剂量组都有改善趋势,其中小、大剂量对基因转录水平提高明显,中剂量对蛋白表达的增强更显著,具有统计学意义（P 〈0.05）.结论 清开灵通过调节紧密连接蛋白claudin-5 表达,改善血脑屏障通透性从而阻抑脑缺血反应过程.     

清开灵和葛根素注射液对清醒犬血压的影响

目的:清醒Beagle犬静脉滴注给予清开灵注射液或葛根素注射液,观察药物是否引起类过敏反应及其对血压的影响.方法:经手术在Beagle犬体内埋植植入子,手术恢复后用文献报道的类过敏阳性药compound 48/80和聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯(吐温-80)来验证该动物检测模型的可行性,然后分别经静脉滴注给予清开灵注射液或葛根素注射液,采用DataquestA.R.T.4.3系统连续监测给药过程中及给药后Beagle犬血压的变化并观察犬的体征变化.结果:类过敏阳性药compound 48/80和吐温-80给药后犬出现骚动、皮肤潮红、巩膜充血等类过敏症状,且血压出现不同程度的下降,证明清醒Beagle犬遥测系统检测类过敏反应模型成立.清开灵注射液1.2,2.3,11.5 mL·kg-1对犬血压均未见明显影响;0.24 mL·kg-1葛根素注射液组的血压变化不明显,而0.47 mL·kg-1葛根素注射液引起犬血压明显降低,平均动脉压在药后30 min时从药前的(115.35 ±7.73) mmHg降低到(91.74± 10.18) mmHg (P ＜0.01),收缩压从药前的(147.33±14.65) mmHg降低到(112.88 ±6.51) mmHg(P ＜0.01),但未见明显的体征变化.结论:清开灵注射液对清醒Beagle犬血压没有明显影响,葛根素注射液可引起清醒Beagle犬血压下降,且与剂量相关,可能是由其自身的药理作用引起的,初步判断清开灵注射液和葛根素注射液没有引起清醒Beagle犬发生类过敏反应.     

三化汤对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障损伤的保护作用

目的:观察三化汤对大鼠脑缺血再灌注血脑屏障损伤的保护作用.方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、三化汤低、高剂量组(7.2,14.4 g?kg-1 )ig、尼莫地平组(8.1 mg?kg-1)ig.大鼠常规饲养3d后灌胃给药,每日1次,连续给药7d后采用线栓法制备脑缺血再灌注大鼠模型.采用比色法检测大鼠脑组织伊文思蓝(EB)的含量,采用酶联免疫法检测大鼠血清S100B蛋白的含量.结果:假手术组大鼠脑组织EB含量、血清S100B蛋白含量减少,模型组大鼠脑组织EB含量、血清S100B蛋白含量显著升高(P＜0.01);与模型组比,各用药组大鼠脑组织EB含量、血清S100B蛋白含量显著降低(P＜0.05),其中三化汤高剂量组、尼莫地平组比三化汤低剂量组降低明显(P＜0.05).结论:大鼠脑缺血再灌注后可引起血脑屏障的损伤,三化汤对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障损伤具有一定的保护作用.     

穴位注射“冰片液”对血脑屏障通透性的影响

目的 :探讨“冰片液”穴位注射对SD大鼠血脑屏障通透性的影响 ,为临床提高某些中枢神经治疗药疗效提供实验依据。方法 :采用“哑门”穴位注射自制“冰片液” ,观察不同浓度“冰片液”穴位注射对伊文斯蓝 (Even’sBlue,EB)透过血脑屏障的作用 ,并与电针刺激组比较。结果 :“冰片液”穴位注射和电针刺激均可促进EB透过血脑屏障 (P <0 0 0 1 ,P <0 0 5) ,穴位注射“冰片液”高、低剂量组均优于电针组 (P <0 0 5) ,但“冰片液”高、低剂量组间无明显差异 (P >0 0 5)。结论 :“冰片液”穴位注射是促血脑屏障开放的一种有效方法 ,其作用优于电针刺激。     

清开灵、复方丹参、黄芪3种注射液抗大鼠脑缺血的比较研究

目的比较清开灵、复方丹参、黄芪注射液抗大鼠急性脑缺血的作用。方法运用线栓法造成大鼠局灶性脑缺血,造模后2h分别腹腔注射3种药物2.5mL/kg,72h后取材,观测指标为梗死体积比、脑水肿比。通过测定加药物血浆的血小板聚集率,比较3种药物对血小板聚集的影响。结果清开灵、复方丹参、黄芪注射液给药组均能有效降低脑梗死体积比,与模型组比较,P<0.05或P<0.01;复方丹参、黄芪注射液组能降低脑水肿比,与模型组比较,P<0.05或P<0.01。3种注射液终浓度为50、25、12.5μL/mL,均能降低血小板的聚集率,其中,黄芪注射液作用强于清开灵、复方丹参注射液。结论清开灵、复方丹参、黄芪注射液均有抗大鼠脑缺血和血小板聚集作用。     

香丹注射液和清开灵注射液联合用药对急性炎症血栓模型大鼠脏器的保护作用

目的:基于血栓变化、炎性指标、脏器功能和病理改变等考察香丹注射液(Xiangdan injection,XDI)和清开灵注射液(Qingkailing injection,QKLI)联合用药在炎症血栓动物模型的治疗上是否具有协同增效作用.方法:100只雄性SD大鼠,根据体质量随机分为正常组,炎症血栓模型组,XDI组(2...     

醒脑开窍中药对血脑屏障影响的研究进展

通过综合分析多年来有关醒脑开窍中药研究的文献,系统地揭示醒脑开窍中药（麝香、石菖蒲、冰片等）对血脑屏障（BBB）的影响。该类中药有效成分脂溶性强、分子量极小,易挥发;易快速透过BBB进入脑组织,并具有双向调节BBB通透性的作用,能改善BBB功能和保护脑组织;能引药上行,除了本身能透过BBB进入脑组织发挥作用之外,还可促进其他药物透过BBB,提高药物的疗效。加强醒脑开窍中药对BBB影响的研究,能更科学地解释＂辛香走窜＂、＂开窍醒神＂、＂引药上行＂的本质,对治疗脑病有重要的理论意义和应用价值。