米非司酮对胰岛素抵抗人脐静脉内皮细胞功能的影响及其机制

目的：考察米非司酮对单用或合并使用胰岛素和地塞米松诱导的胰岛素抵抗人脐静脉内皮细胞功能的影响,并初步探讨其作用机制。方法：1）将常规培养的人脐静脉内皮细胞随机分为正常对照组,胰岛素（5×10^-6、5×10^-1和5×10^-8mol·L^-1）组,地塞米松（3×10^-5和3×10^-6mol·L^1）组,胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6和1．5×10^-7mol·L^1）组。培养24或48h后,测定各组细胞葡萄糖消耗量,以考察人脐静脉内皮细胞胰岛素抵抗的形成情况,并通过胰岛素刺激和模型持续时间研究进一步验证造模效果。2）将人脐静脉内皮细胞随机分为正常对照组,米非司酮（1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7mol·L^1）组,胰岛素（5×10^-7mol·L^1）组,胰岛素（5×10^-7mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5、1×10^-6、1×10～×10^-7mol·L^1）组,地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）组,地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7mol·L^1）组,胰岛素（2．5×10^-5mol·L^1）＋地塞米松（1．5×10^-6mol·L^1）组,胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7mol·L^1）组。分别加入不同浓度的药物培养24或48h,然后对各组细胞葡萄糖消耗量、一氧化氮含量、一氧化氮合酶活性和抗超氧阴离子自由基活力单位进行测定,以考察细胞功能状态变化。结果：1）胰岛素（5×10^-7mol·L^-1）作用24h可诱导人脐静脉内皮细胞发生胰岛素抵抗并可维持24h,地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）作用48h可诱导细胞的胰岛索抵抗并可维持36h,胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6molL^-1）共同作用48h可诱导细胞的胰岛素抵抗并可维持24h。2）地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5和1×10^-6mol·L^-1）组,以及胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5和1×10^-6mol·L^-1）组人脐静脉内皮细胞的葡萄糖摄取量、一氧化氮含量、一氧化氮合酶活性和抗超氧阴离子自由基活力单位分别显著高于地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）组和胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6mol·L^-1）组;胰岛素（5×10^-5mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7mol·L^-1）组细胞的上述指标则与胰岛素（5××10^-7mol·L^-1）组无显著性差异。结论：胰岛素、地塞米松单独使用及合用均可诱导人脐静脉内皮细胞出现胰岛素抵抗并持续一定时间;米非司酮可改善地塞米松及地塞米松＋胰岛素诱导的胰岛素抵抗内皮细胞的功能紊乱,而对胰岛素诱导的胰岛素抵抗无改善作用。     

米非司酮对胰岛素抵抗大鼠心肌损伤的保护作用及其机制

目的：考察米非司酮对高脂饮食所致胰岛素抵抗大鼠心肌功能和结构变化的影响,并从细胞水平研究其作用机制。方法：1）将40只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、吡格列酮组及米非司酮高、低剂量组,每组8只。除正常对照组给予普通饲料外,其余各组均给予高脂饲料。正常对照组和模型组每日灌胃给予0．5％CMC-Na溶液（0．1mL·kg^-1）,给药组分别给予吡格列酮（3mg·kg^-1·d^-1）及米非司酮（40,20mg·kg^-1·d^-1）。8周后,测定各组大鼠空腹血糖、空腹胰岛素水平,计算HOMA-胰岛素抵抗指数,模型组该指数显著高于正常对照组时,视为造模成功;采用套尾法测定各组大鼠血压,并做心脏病理切片观察心肌功能和结构的变化。2）将原代培养2—3天的心肌细胞随机分为正常对照组、地塞米松（6×10^-6mol·L^-1）组、地塞米松（6×10^-6mol·L^-1）＋吡格列酮（2×1^-4mol·L^-1）／米非司酮（高、中、低剂量）（2×10^-4,2×10^-5,2×10^-6mol·L^-1）组、胰岛素（5×10^-6mol·L^-1）组、胰岛素（5×10^-4mol·L^-1）＋吡格列酮（2×10^-4mol·L^-1）／米非司酮（高、中、低剂量）（2×10^-4,2×10^-5,2×10^-6mol·L^-1）组。分组给药、连续培养48小时后,测定各组原代心肌细胞葡萄糖消耗量、细胞活力及游离脂肪酸和乳酸脱氢酶的含量,考察心肌细胞功能状态变化。结果：1）高脂饮食饲养8周后,大鼠出现胰岛素抵抗并伴有脂质代谢紊乱,血清皮质酮含量升高,病理切片结果显示模型组大鼠心肌受损,米非司酮组上述状况明显改善（P〈0．01）。2）胰岛素和地塞米松均能造成原代心肌细胞胰岛素抵抗模型,并造成细胞代谢紊乱,而米非司酮可改善地塞米松造成的心肌功能状态异常（P〈0．05,P〈0．01）,但对胰岛素诱导的异常无效（P〉0．05）。结论：米非司酮可降低高脂饮食所致的胰岛素抵抗大鼠心肌受损程度,推测其通过拮抗糖皮质激素而发挥作用。     

血管紧张素Ⅱ对大鼠肾入球小动脉细胞内钙离子浓度的影响及Losartan的拮抗作用

目的探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对肾小球入球小动脉细胞内钙离子浓度（[Ca^2＋]i）的影响与高血压肾小动脉重建的关系及Losartan的治疗作用。方法细胞培养：大鼠肾小球入球小动脉细胞随机分为4组。对照组：不加AngⅡ处理;AngⅡ组：加入终浓度为0.1μmol.L^-1AngⅡ;Losartan组：加入终浓度为50μmol.L^-1Losartan;AngⅡ＋Losartan组：同时加入Losartan 50μmol.L^-1AngⅡ0.1μmol.L^-1负载后上机检测[Ca^2＋]i。结果细胞培养显示AngⅡ引起了细胞收缩变化,表现为胞突变细变短,胞突回缩,胞体变圆,细胞长度与直径均明显缩小。Losartan处理组较AngⅡ组细胞形态变化减轻且Losartan对AngⅡ增高RASMCs内[Ca^2＋]i有明显抑制作用。结论 AngⅡ可引起肾小球入球小动脉细胞内[Ca^2＋]i的上升,导致细胞收缩,因此Ca^2＋超载可能是肾素-血管紧张素系统起作用的重要环节。Losartan可抑制细胞内Ca^2＋超载。     

TRPV1/SIRT1介导吴茱萸次碱抗AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞衰老

目的探讨吴茱萸次碱(rutaecarpine,Rut)对长寿蛋白SIRT1表达及AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)衰老的影响。方法采用AngⅡ(1μmol·L^-1)孵育大鼠胸主动脉平滑肌细胞72 h,预先加入不同浓度的Rut(0.3、1、3μmol·L^-1),采用TRPV1拮抗剂CAPZ(10μmol·L^-1)和AMPK抑制剂Compound C(1μmol·L^-1)探讨TRPV1/AMPK是否介导Rut的保护效应。SA-β-Gal测定衰老细胞数目,DCFH-DA法测定细胞ROS水平。划痕愈合结合Transwell检测VSMCs迁移。Western blot检测VSMCs中长寿蛋白SIRT1和衰老相关蛋白p53、p21的表达以及p-AMPK水平。结果Rut明显地抑制AngⅡ诱导的VSMCs衰老和ROS生成,并抑制VSMCs迁移。预先给予TRPV1拮抗剂可取消Rut这一保护作用。AngⅡ可降低SIRT1的表达,给予Rut可剂量依赖性地恢复SIRT1的表达,且下调其下游衰老相关蛋白p53和p21的表达。AngⅡ可抑制p-AMPK,加入Rut能恢复p-AMPK水平。CAPZ和Compound C可消除Rut升高SIRT1表达的效应。结论Rut可上调SIRT1表达,抑制AngⅡ诱导的VSMCs衰老和迁移,其机制可能激活TRPV1/AMPK信号途径。     

三氧化二砷抑制血管平滑肌细胞及单核细胞肿瘤坏死因子-α启动子活性（英文）

目的探讨三氧化二砷（As2O3）对血管平滑肌细胞（VSMCs）及THP-1单核细胞体外转染的TNF-α基因启动子活性的调控作用。方法利用虫荧光素酶（luciferase）报告基因系统,构建含有人类TNF-α基因启动子的质粒DNA,经阳离子脂质体转染体外培养的VSMCs及THP-1,以LPS及Ang Ⅱ刺激并经不同浓度的As2O3处理后,通过检测luciferase的活性来观察启动子活性的变化。结果本实验发现：TNF-α启动子在VSMCs及THP-1中可高效稳定地表达,分别为阳性对照（CMV启动子）的58.3%和80.9%;而经LPS及Ang Ⅱ刺激的VSMCs和THP-1中,TNF-α启动子活性呈现明显上调（P〈0.05）。VSMCs中2-8μmol·L^-1、THP-1中1-4μmol·L^-1的As2O3对未受诱导的TNF-α启动子有抑制作用,更可显著抑制经LPS及Ang Ⅱ刺激后上调表达的TNF-α启动子活性,并呈剂量依赖关系（P〈0.05）。结论以上结果提示,As2O3对TNF-α启动子转录活性的抑制,提示其对促炎细胞因子在转录水平的潜在抑制作用及心血管系统中的潜在抗炎作用。     

急性冠脉综合征患者抗血小板治疗的临床研究

目的研究单抗血小板治疗与双抗血小板治疗对急性冠脉综合征患者预后的影响,为临床规范治疗提供理论参考。方法90例患者被随机分成2组：A组（单用阿司匹林,n=50）,B组（联合应用阿司匹林和氯吡格雷,n=40）。A组患者接受每天100mg阿司匹林治疗,B组患者接受每天100mg阿司匹林和75mg氯吡格雷的联合治疗,治疗7d和30d后分别比较2组患者血清中超敏C-反应蛋白和肿瘤坏死因子α的水平。结果经过7d治疗,A、B两组患者血清中超敏C-反应蛋白和肿瘤坏死因子-α的水平与治疗前水平的比较：超敏C-反应蛋白,A组：（6．15±1．39）mg·L^-1 vs（9．18±1．62）mg·L^-1,P〈0．01;B组：（4．99±1．62）mg·L^-1vs（10．29±1．47）mg·L^-1（P〈0．05）;肿瘤坏死因子-α,A组：（90．99±28．91）ng·L^-1vs（117．20±37．13）ng·L^-1（P〈0．05）;B组：（74．32±21．83）ng·L^-1vs（115．27±32．11）ng·L^-1（P〈0．01）。治疗30d后,A、B两组患者血液中超敏C-反应蛋白和肿瘤坏死因子-α的水平比较：超敏C-反应蛋白：（3．49±1．53）mg·L^-1和（2．40±1．17）mg·L^-1（P〈0．05）;肿瘤坏死因子-α（63．28±29．01）ng·L^-1和（43．95±17．10）ng·L^-1（P〈0．05）。结论联合应用阿司匹林和氯吡格雷治疗急性冠脉综合征,可明显降低患者血清中C-反应蛋白和肿瘤坏死因子的水平。阿司匹林和氯吡格雷可产生抗炎反应,长期联合治疗比单独应用阿司匹林可能产生更好的临床效果。     

米非司酮对胰岛素抵抗高血压大鼠血管收缩功能的影响

目的：考察米非司酮对胰岛素抵抗高血压大鼠血管收缩功能的影响。方法：将40只雄性sD大鼠随机分为正常组、模型组、罗格列酮（O．4mg·kg-1）组、米非司酮低剂量（20mg·kg-1）组、米非司酮高剂量（40mg·kg-1）组。除正常组外均予以高脂饮食饲养,8周后,取血样测定各组大鼠空腹胰岛素含量、空腹血糖含量,并计算胰岛素敏感指数及抵抗指数以判断胰岛素抵抗模型是否形成,测定血清皮质酮浓度以考察胰岛素抵抗形成过程中糖皮质激素的变化,测定。肾上腺素和去甲肾上腺素浓度以考察交感神经紧张程度,并于实验期间采用套尾法每4周测定1次血压。实验8周末处死大鼠,取出胸主动脉,制备胸主动脉环。用氯化钾预刺激收缩血管环后,分别加入系列浓度的去甲肾上腺素（1X10^-1x10^-5mol·L-1）和血管紧张素Ⅱ（1×10^8、3×10^-8×10^-7、3×10 ^-7和1×10^-6 mol·L-1）,并在地塞米松孵育后再次加入同等系列浓度的去甲肾上腺素。采用生物机能实验系统测定胸主动脉血管的收缩幅度,以氯化钾诱发的最大收缩幅度为100％,将加入去甲肾上腺素或血管紧张素Ⅱ后的血管收缩幅度与氯化钾诱发的最大收缩幅度之间的百分比计为收缩率以反映血管收缩功能。结果：高脂饮食饲养8周可致动物出现高血糖、高胰岛素血症、胰岛素敏感性降低、胰岛素抵抗指数上升,以及血清儿茶酚胺、血清皮质酮水平和血压升高,米非司酮可逆转除皮质酮水平升高以外的上述变化。与正常组相比,模型组大鼠胸主动脉环对去甲肾上腺素及血管紧张素Ⅱ的收缩反应明显增强;与模型组相比,米非司酮高、低剂量组大鼠胸主动脉环对去甲肾上腺素及血管紧张素Ⅱ所致的收缩反应显著降低,用地塞米松孵育后,其对去甲肾上腺素所致的收缩反应与模型组相比无显著变化,但较正常组及未用地塞米松孵育时显著升高。结论：高脂饮食饲养8周可诱导大鼠形成胰岛素抵抗高血压模型并伴有血管收缩功能障碍;米非司酮可改善以上症状,推测其可能通过拮抗糖皮质激素的生物学效应及降低胰岛素抵抗高血压大鼠血管环对血管紧张素Ⅱ的收缩性而发挥作用。     

子痫前期患者血浆总同型半胱氨酸水平及其与叶酸、维生素B12的关系

目的：测定子痫前期患者血浆总同型半胱氨酸（tHcy）、血清叶酸、维生素B12水平,以探讨子痫前期患者血浆tHcy水平及其与叶酸、维生素B12的相互关系。方法：采用荧光偏振免疫分析法测定320例子痫前期患者（其中轻度236例,重度84例）和320例正常同期妊娠妇女血浆tHcy水平,同时用离子捕捉免疫分析法测定其血清叶酸水平,用微粒子酶联免疫分析法测定其血清维生素B12水平。结果：子痫前期组血浆tHcy水平为（11．65±3．54）μmol·L^-1,显著高于正常妊娠组[（6．73±2．58）μmol·L^-1]（P〈0．01）,且重度患者[（16．57±5．21）μmol·L^-1]显著高于轻度患者[（10．48±4．11）μmol·L^-1]（P〈0．01）;血清叶酸水平子痫前期组[（11．82±3．67）nmol·L^-1]显著低于正常妊娠组[（14．71±3．89）nmol·L^-1]（P〈0．01）;血清维生素B12水平子痫前期组[（338±91）pmol·L^-1]显著低于正常妊娠组[（406±88）pmol·L^-1]（P〈0．01）。结论：子痫前期患者血浆tHcy水平明显升高,且随着病情的加重血浆tHcy水平呈逐渐上升趋势,血浆tHcy水平与叶酸、维生素B12水平呈负相关。     

油酰乙醇胺对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的研究油酰乙醇胺(OEA)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的抑制作用以及对p38信号通路的影响。方法分离大鼠胸主动脉,组织贴块法培养VSMCs,AngⅡ刺激VSMCs建立细胞增殖模型,不同浓度OEA(5,10,20μmol/L)作用后,用溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)掺入的方法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞周期变化;Western-bolt法检测对P-p38和p38蛋白表达的影响。结果与AngⅡ组比较,随着OEA浓度升高,VSMCs的增殖受到抑制、G0/G1比例显著升高,G2/M比例显著降低,且P-p38和p38蛋白的表达量降低并呈浓度依赖关系。结论 OEA对VSMCs的增殖有抑制作用,其机制可能是抑制了p38MAPK信号通路。     

白藜芦醇对U937泡沫细胞清道夫受体CD36表达的影响

目的 研究白藜芦醇对U937泡沫细胞B类清道夫受体CD36mRNA、蛋白表达的影响.方法 U937细胞与佛波酯100μg·L^-1、ox-LDL 80 mg·L^-1孵育48 h,建立U937泡沫细胞模型;以不同浓度的白藜芦醇（1、10、20μmol·L^-1）预处理U937细胞24 h再加入佛波酯100μg·L^-1、ox-LDL 80 mg·L^-1共同孵育48 h后通过RT-PCR和Western印迹检测分别检测U937细胞CD36mRNA和蛋白的表达情况.结果 U937泡沫细胞组CD36mRNA和蛋白的表达较U937细胞对照组明显增加（2.389±0.249）vs（0.953±0.242）,P〈0.01;（2.562±0.218）vs（1.000±0.052）,P〈0.01,白藜芦醇干预后,随着浓度的增加,U937泡沫细胞的CD36mRNA和蛋白表达水平呈浓度依赖性下降（P〈0.05）.结论 白藜芦醇能浓度依赖性地下调ox-LDL诱导的U937泡沫细胞CD36mRNA和蛋白的表达.     

新诺明分子印迹传感器的制备及应用研究

目的以吡咯为单体在玻碳电极表面电聚合一种新诺明分子印迹膜。方法研究了聚吡咯、新诺明浓度、扫描圈数及扫描速率对印迹膜制备的影响,并探讨检测液的pH值、乙腈与水的体积比对响应电流的影响。采用循环伏安法及电化学交流阻抗技术对分子印迹膜进行表征。结果在最佳实验条件下新诺明的浓度在2．50×10^-5～7．50×10^-4mol·L^-1及7．50×10^-4～2．00×10^-3mol·L^-1内时,差分脉冲伏安法的峰电流响应值呈现线性关系（线性相关系数分别为0．9958和0．99671,检出限（S／N=3）为2．80×10^-6mol·L^-1。结论印迹电极也显示出较好的选择性、重复性、稳定性。将此印迹传感器对复方新诺明药品中磺胺甲嗯唑的含量进行了测定,回收率在94．2％～105．0％。     

高血压病患者冠状动脉病变程度与血管相关因子关系的研究

目的探讨脂联素、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）及内皮素（ET）-1与老年高血压病患者冠状动脉病变的关系。方法选择拟诊为冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）行冠状动脉造影检查的老年患者173例。分对照组（30例）,造影正常组（40例）,冠状动脉粥样硬化组（40例）,冠心病组（63例）,采用酶联免疫吸附法测MMP-9浓度,采用放射免疫法测ET-1、AngⅡ、脂联素水平。采用Gensini积分方法对冠状动脉病变程度进行定量评价。结果高血压冠状动脉各亚组血浆中脂联素水平显著低于对照组（P〈0．01）,且脂联素随着重构增高逐渐降低（P〈0．05）;而MMP-9、AngⅡ、ET-1水平[造影正常组MMP-9、AngⅡ、ET-1分别为（274．4±70．1）μg／L,（59．2±15．4）μg／L,（5．0±1．0）μg／L,冠状动脉粥样硬化组分别为（478．5±79．3）μg／L、（69．3±18．2）μg／L、（7．3±2．4）μg／L,冠心病组分别为（615．8±112．8）μg／L、（95．9±26．1）μg／L、（9．0±1．0）μg／L]显著高于对照组[MMP-9、AngⅡ、ET-1分别为（137．2±35．6）μg／L、（45．8±13．2）μg／L、（3．3±1．0）μg／L]（P〈0．01）,且随着重构增高逐渐增高（P〈0．05）。冠状动脉病变随着Gensini积分增高,血浆MMP-9、AngⅡ、ET-1水平逐渐增高（P〈0．05）,而脂联素水平逐渐下降（P〈0．05）。血浆脂联素水平与Gensini积分呈显著负相关（r=-0．714,P〈0．01）,血浆MMP-9、AngⅡ、ET-1水平与Gensini积分呈正相关（r=0．841,P〈0．01;r=0．760,P〈0．01;r=0．880,P〈0．01）。多元线性回归分析显示,MMP-9、AngⅡ、ET-1是独立于收缩压、胆固醇外的与Gensini积分相关的因素。结论高血压患者血浆MMP-9、AngⅡ、ET-1、脂联素浓度均可作为预测冠状动脉病变的发生、发展及病变严重程度的指标。     

酪酸梭菌活菌散剂辅助治疗足月新生儿高胆红素血症

目的探讨口服酪酸梭菌活菌散剂辅助治疗足月新生儿高胆红素血症的疗效及安全性。方法将236例高胆红素血症的足月新生儿随机分为观察组（n=127）和对照组（n=109）。2组均采用双面兰光治疗等综合措施。观察组在此基础上口服酪酸梭菌活菌散剂500mg,bid,连用5d,每Et测经皮胆红素（WeB）值。结果治疗2dTCB下降值、5d内TCB下降值观察组为（41．38±25．31）、（30．10±9．75）μmol·L^-1,明显高于对照组的（33．00±29．58）、（25．31±9．92）μmol·L^-1（t=2．34、3．73,P〈0．05、〈0．01）;TCB降至171μmol·L^-1以下所需的时间观察组为（7．37±1．27）d,明显短于对照组的（9．19±1．78）d（P〈0．01）。治疗5d总有效率观察组为79．53％,明显高于对照组的58．72％（P〈0．01）。观察组10例（7．87％）发生发热、腹泻等一过性不良反应,无严重不良反应发生。结论口服酪酸梭菌活菌散剂辅助治疗足月新生儿高胆红素血症是一种安全有效的措施。     

血管紧张素Ⅱ阻断剂治疗慢性肾小球肾炎时TNF-α和蛋白尿的相关性研究

目的：探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）阻断剂对慢性肾小球肾炎（CGN）患者肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响及TNF-α与蛋白尿之间的关系。方法：32例经肾穿刺活检证实为原发性CGN并伴有明显蛋白尿患者，分别接受AngⅡ阻断剂[苯那普利、缬沙坦或两药联合（苯那普利＋缬沙坦）]治疗，疗程8-12周。分别检测治疗前、后血TNF-α、尿TNF-α、24小时尿蛋白定量和血肌酐水平，并观察血、尿TNF-α水平与蛋白尿之间的关系。结果：治疗后患者血、尿TNF-α水平、24小时尿蛋白量较治疗前显著下降，分别为（7．8±3．9）vs（5．0±1．6）fmol／mL，（11．9±6．8）vs（8．3±3．5）fmol／mL，（2、55±2．01）vs（0．97±0．52）g（分别为P〈0．01，P〈0．05，P〈0．01）。治疗前后血TNF-α水平和24小时尿蛋白排泄量均呈正相关（分别为r=0．515，P〈0．01；r=0．385，P〈0．05）。治疗前后尿TNF-α与24小时尿蛋白也均呈正相关（分别为r=0．622，P〈0．05；r=0．360，P〈0．05）。结论：CGN患者血、尿TNF-α水平升高，与尿蛋白水平呈正相关，AngⅡ阻断剂可有效降低血、尿TNF-α的水平，减少蛋白尿及保护肾功能。     

血脂康对血管紧张素Ⅱ诱导内皮细胞E-选择素表达的影响

目的观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对人脐静脉内皮细胞（简称内皮细胞）E-选择素表达的影响以及血脂康对AngⅡ此诱导作用的干预。方法用ELISA法检测AngⅡ对内皮细胞E-选择素表达的影响，用RT—PCR检测AngⅡ对内皮细胞E-选择素mRNA表达的影响，用细胞计数法观察经AngⅡ作用的内皮细胞与单核细胞的粘附率，同时检测血脂康的干预效应。结果四种不同浓度的AngⅡ（10^-8、10^-8、10^-7、10^-6mol／L）能诱导内皮细胞E-选择素及其mRNA的表达，增加内皮细胞与单核细胞的粘附率，且作用呈剂量依赖关系；而血脂康（500ng／ml）能抑制AngⅡ诱导的内皮细胞E-选择素及其mRNA的表达，降低内皮细胞与单核细胞的粘附率。结论血脂康能发挥抗动脉粥样硬化作用，抑制动脉粥样硬化的进程。     

依达拉奉治疗老年糖尿病周围神经病变的研究

目的观察依达拉奉治疗老年糖尿病周围神经病变（DPN）的临床疗效并探讨其机制。方法老年DPN患者61例,随机分为治疗组33例和常规组28例．两组均予基础治疗,治疗组加用依达拉奉联合前列地尔,常规组予弥可保及前列地尔,疗程均为2周。治疗前后分别判定症状。检查神经传导速度。测定血清MDA、LPO浓度及SOD活力。结果与常规组（53．6％）相比,治疗组症状显著改善（81．8％,P〈0．05）;神经传导速度增快（P〈0．05）;常规组血清MDA（6．13±1．46VS6．25±1．56μmol·L^-1,P〉0．05）、LPO（14．82±2．25VS15．24±2．49μmol·L^-1,P〉0．05）、SOD活力（57．14±9．28VS55．75±11．21U·mL^-1,P〉0．05）无明显变化,而治疗组MDA（4．32±1．09VS6．15±1．34μmol·L^-1,P〈0．05）、LPO（10．80±2．37vs14．55±2．25μmol·L^-1 P〈0．05）浓度明显降低。SOD活力（76．85±10．76VS61．27±12．98U·mL^-1 P〈0．05）显著升高。结论依达拉奉可有效改善DPN患者的临床症状,其机制可能与抗氧化作用有关。     

TRV027在血管紧张素Ⅱ下调心肌细胞缝隙连接蛋白43表达中的作用

目的 探讨TRV027是否通过影响AngⅡ并激活β-arrestin蛋白,从而影响心肌细胞Cx43的表达。方法 通过培养大鼠心肌细胞（H9C2细胞）,将其分为四组：对照组（无药物干预）、AngⅡ组（1×10-5mol/L AngⅡ干预48h）、TRV027组（1×10-8mol/L TRV027干预24h）、AngⅡ+TRV027组（1×10-5mol/L AngⅡ干预24h后,1×10-8mol/L TRV027干预24h）。采用蛋白质印迹（WB）法检测Cx43和β-arrestin的蛋白表达水平,PCR法检测Cx43和β-arrestin的mRNA表达水平,免疫荧光法观察上述两种蛋白在细胞内的表达情况。应用ImageJ分析图像,SPSS 22.0软件进行统计学分析。结果 WB结果显示,与对照组相比,AngⅡ组H9C2细胞Cx43和β-arrestin的蛋白表达量明显降低（P<0.01）;与AngⅡ组相比,AngⅡ+TRV027组和TRV027组H9C2细胞Cx43和β-arrestin的蛋白表达量明显升高（P<0.01）。PCR结果显示,与对照组相比,AngⅡ组H9C2...     

鱼藤酮对小鼠小胶质细胞 BV-2存活率及一氧化氮含量的影响

目的：研究鱼藤酮对小鼠小胶质细胞BV-2存活率及一氧化氮含量的影响。方法 BV-2细胞以5×10^7/L密度接种到细胞培养板中,分别加入鱼藤酮0、1×10^-11、1×10^-10、1×10^-9、1×10^-8、1×10^-7、1×10^-6、1×10^-5 mol/L后0、6、12、24、48、72 h等测定细胞存活率。另以1×10^-8 mol/L鱼藤酮干预BV-2细胞48 h,测定上清液中超氧化物歧化酶、过氧化物酶、总巯基、超氧阴离子和NO含量并与未给予鱼藤酮干预的对照组比较。结果5×10^7/L BV-2细胞于0、6、12、24、48、72 h细胞增殖活力分别为0．035±0．001、0．132±0．006、0．334±0．017、1．073±0．044、2．272±0．172、0．776±0．032,可见48 h达到细胞生长曲线的峰值。鱼藤酮（1×10^-6 mol/L ）干预 BV-2细胞24、48、72 h 细胞存活率分别降低至（63．4±10．1）％、（51．7±12．2）％、（33．9±11．2）％;鱼藤酮（1×10^-7 mol/L）干预BV-2细胞72 h细胞存活率降低至（50．8±2．9）％。1×10^-8 mol/L 鱼藤酮干预48 h 后 BV-2细胞上清液一氧化氮水平达（27．6±6．2）μmol/L,明显高于对照组的（13．3±2．5）μmol/L （t＝-2．135, P＝0．044）。结论鱼藤酮在一定浓度范围内可激活小胶质细胞,但是超出此浓度范围时则可能导致小胶质细胞存活率降低。     

血管紧张素Ⅱ对足细胞骨架的影响

目的 研究血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对足细胞骨架（F-actin）的影响,及血管紧张素Ⅱ1型受体阻断剂（AT1RA）对足细胞骨架的保护作用.方法 用10-6mol/L的AngⅡ浓度按10min、30min、60min、120min时间顺序作用足细胞,rhodamine-phalloidin细胞骨架染色观察纤维状肌动蛋白（F-actin）的变化 将足细胞分成对照组（C）、AngⅡ 10-10mol/L、10-8mol/L、10-6mol/L,氯沙坦（LO,10-6 mol/L）＋AngⅡ（10-6 mol/L）组,观察F-actin的变化.结果 AngⅡ能够减少F-actin 的表达,具有浓度依赖性及浓度依赖性 AngⅡ能够破坏足细胞F-actin的形态,使其由F-actin 由有序排列变成松散形态 氯沙坦能够阻断AngⅡ对足细胞F-actin的影响.结论 AngⅡ能够通过其1型受体损伤足细胞的F-actin,AT1RA能够阻断AngⅡ的作用途径,保护足细胞.     

内吗啡肽抑制苯肾上腺素和血管紧张素Ⅱ诱导的离体大鼠胸主动脉环收缩

目的:研究吗啡、内吗啡肽-1和内吗啡肽-2对由苯肾上腺素(PE)和血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导离体大鼠胸主动脉环收缩的抑制作用.方法:离体血管环张力试验.结果:与对照组相比,吗啡、内吗啡肽-1和内吗啡肽-2的预处理(0.1-10μmol/L)能明显降低由PE(0.1μmol/L)和Aug Ⅱ(1μmol/L)(P<0.01)诱导离体大鼠胸主动脉环的张力,但是不能减少去内皮血管的张力.纳络酮(1μmol/L)能部分阻断内吗啡肽-1和内吗啡肽-2的抑制作用(P<0.01),N~(ω)-nitro-L-arginine(10μmol/L)或血管环去内皮能完全阻断这种作用(P<0.01).结论:内吗啡肽-1和内吗啡肽-2通过纳络酮敏感方式抑制由PE和AngⅡ诱导的离体大鼠胸主动脉环收缩,这种抑制作用可能与血管内皮NO的释放有关.