TECAN全自动酶免分析系统检测乙型肝炎血清学标志物的特异性评价

目的对TECAN全自动酶免分析系统检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)的特异性进行评价。方法参考美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP12-A、EP7-A及有关文献,分别通过加样针的携带污染、加样和加酶间隔时间、溶血干扰等试验对仪器的RSP150/8前处理系统和BEPⅢ后处理系统检测HBsAg、抗-HBs的特异性进行评价。结果标本HBsAg>8 000 S/CO时,加样针仍未出现携带污染,而标本抗-HBs>1 000 m IU/mL时加样针出现携带污染现象。已加样HBsAg、抗-HBs阴性及弱阳性标本的反应板室温放置30 min内加酶以及标本中加入血红蛋白(浓度≤8 g/L),未出现假阳性结果。结论高浓度的抗-HBs对加样容易产生携带污染。血红蛋白对HBsAg、抗-HBs试验的干扰并不明显。HBsAg、抗-HBs酶标板在室温放置30 min内加酶对检测结果影响不大。     

HBsAg和抗-HBs双阳性模式分析及临床意义

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)同时阳性的感染模式,探讨此类模式的产生原因及其临床意义。方法应用时间分辨免疫荧光分析法定量检测10 939例血清标本,从中筛选出HBsAg和抗-HBs同时阳性的标本,进而分析其检测结果 ,并与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测的12000例血清标本得到的HBsAg和抗-HBs同时阳性的结果进行比较。结果定量检测10939例血清标本,其中HBsAg阳性3 338例,阳性率为30.5%,HBsAg和抗-HBs同时阳性者占0.8%(28/3 338);ELISA定性检测12 000例标本,HBsAg和抗-HBs同时阳性者占0.3%(12/12 000),统计学分析两种方法在检测HBsAg和抗-HBs同时阳性的结果 ,差异有统计学意义(P0.05)。该28例表现出4种类型HBV血清学指标的组合方式,以HBsAg、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)阳性模式和HBsAg、乙型肝炎e抗体(抗-HBe)、抗-HBc阳性模式为主,分别有8例和17例;HBsAg、抗-HBs和抗-HBc阳性模式1例;其余2例仅HB-sAg和抗-HBs双阳性。结论 HBsAg和抗-HBs同时阳性虽然少见,但具有一定的临床意义,应当引起实验室和临床的注意。     

两对半定量检测中HBsAg与抗-HBs同时阳性的实验分析

目的探讨乙型肝炎标志物检测中血清乙型肝炎表面抗原（HBsAg）与乙型肝炎表面抗体（抗-HBs）同时阳性的特殊模式分析。方法采用时间分辨荧光免疫分析技术（TRFIA）检测样本的乙型肝炎病毒（HBV）血清标志物,从中选取HBsAg与抗-HBs同时阳性的样本,测定其丙氨酸氨基转移酶（ALT）,天门冬氨酸氨基转移酶（AST）,总胆红素（TBIL）,γ～谷氨酰基转移酶（GGT）等肝功能项目。结果对2011年1～8月7002例患者进行HBV血清标志物检测后,HBsAg阳性为631侧,其中有27例为HBsAg、抗-HBs同时阳性,占总送检标本的0．39％,占HBsAg阳性标本的4．28％。肝功能异常的】8例（66．7％）,以ALT,AST,TBIL,GGT的升高为主。结论HBsAg和抗-HBs同时阳性,是由多种原因引起,临床应加以重视。     

抗-HBs拖带对HBsAg测定的影响

目的 探讨血站自动化加样仪加高浓度抗-HBs标本拖带造成弱阳性HBsAg标本测定为阴性的概率,以采取防范措施。方法 通过采用不同的加样方式对弱阳性HBsAg进行测定,观测OD值的改变情况。结果 抗-HBs污染量越多,HBsAg的OD下降值越大。HBsAg含量越低（原始OD值小）,OD下降值就越小,但占原始OD值的百分比越大。不同自动化加样洗针方式的OD值差异元显著性。结论 手工加样不换吸头很容易造成假阴性,但在目前血站自动化加样仪加样方式下,高滴度抗-HBs标本拖带造成弱阳性HBsAg标本阴性的概率不到万分之一。     

新疆沙湾县部分汉族和哈萨克族人群乙型肝炎表面抗原和表面抗体阳性率对比分析

目的对比分析新疆沙湾县汉族和哈萨克族自然人群中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带率和乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)阳性率的分布情况,为制定和控制HBV感染有效措施和预防接种提供科学依据。方法对被检人群血清标本采用酶联免疫吸附试验法行HBsAg和抗-HBs检测。结果检测总数1100例,HBsAg阳性检出率6.3%,抗-HBs阳性检出率28.8%,其中汉族600例HBsAg阳性49例,阳性率为8.2%,哈萨克族500例HBsAg阳性21例,阳性率4.2%,汉族和哈萨克族HBsAg携带率间差异有统计学意义(χ2=7.20,P0.05),抗-HBs汉族阳性230例,阳性率38.3%,哈萨克族阳性87例,阳性率哈萨克族17.4%;二者间差异有统计学意义(χ2=54.29,P0.01)。结论本次调查沙湾县汉族、哈萨克族HBsAg携带率和抗-HBs阳性率两族群差异明显,提示应强化乙肝疫苗的接种和执行力度,提高易感人群免疫力控制传染源切断传播途径。     

全自动酶免疫分析系统加样中携带污染问题及其解决方案

目的 评价全自动酶免疫分析系统ELISA实验中的HBsAg加样携带污染并探索解决方案。方法 利用分配HBsAg强阳性标本的加样针再分配阴性标本进行阳性携带污染评价，通过对不同洗针次数的洗涤效果比较选择阳性携带污染解决方法；利用洗涤后未干燥和已干燥的加样针分配0.5ng/ml HBsAg标本观察阴性携带污染(稀释效应)。结果 加样针在吸取强阳性标本进行分配后洗涤5次，再分配阴性标本，造成部分实验孔出现弱阳性结果，洗涤后未经干燥的加样针再分配低值弱阳性标本使部分实验孔出现阴性结果，造成弱阳性标本漏检。洗涤次数增加至10次和干燥后的加样针没有类似问题。结论 加过强阳性标本的加样针未经充分洗涤会对阴性标本造成携带污染，出现假阳性结果；洗涤后未经干燥的加样针存在稀释效应，造成弱阳性标夏漏检。通过增加洗涤次数和对加样针进行干燥可以在一定程度上解决携带污染问题。     

520例体检人员乙型肝炎病毒标志物检测结果分析

目的探讨福州市晋安区520例体检人员乙型肝炎（下称乙肝）病毒（HBV）标志物分布情况。方法采用酶免疫试剂盒检测血清乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝表面抗体（抗-HBs）、乙肝e抗原（HBeAg）、乙肝e抗体（抗-HBe）及乙肝核心抗体（抗-HBc）。结果老年组HBsAg阳性率（25．3％）显著高于青年组（8．6％）和中年组（10．8％）,差异有统计学意义（P〈0．01）。青年组抗-HBs阳性率（71．9％）明显高于中年组（38．5％）和老年组（44．2％）,差异也有统计学意义（P〈0．01）;中年组和老年组抗-HBs阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）。老年组抗-HBc阳性率显著高于青年组和中年组,差异有统计学意义（P〈0．01）,青年组和中年组抗-HBc阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论青年组人群HBsAg阳性率较低（8．6％）,但抗-HBs阳性率最高（71．9％）,这可能是我国推行乙肝疫苗接种所产生的效果。中年组和老年组人群抗-HBs阳性率偏低,提示其为HBV易感人群。老年组人群抗-HBs阳性率较高,可能是HBV既往感染引起的免疫应答结果。     

乙型肝炎表面抗原和表面抗体同时阳性患者随访分析

目的：分析乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和乙型肝炎表面抗体（抗-HBs）同时阳性的乙型肝炎病毒（HBV ）感染者病毒学特征动态变化。方法对53例 HBsAg和抗-HBs同时阳性患者进行平均13．5个月的随访,检测随访前后血清 HBV标志物,并对 HBV DNA进行定量检测及丙氨酸氨基转移酶（ALT）检测,分析其病毒学特征变化特点。结果53例患者随访期间,4例（7．55％）HBsAg转为阴性,13例（24．53％）抗-HBs转为阴性,而36例（67．92％）HBsAg和抗-HBs仍同时为阳性。随访后患者血清 HBsAg与抗-HBs水平、乙型肝炎e抗原（HBeAg ）阳性率及ALT水平与随访前相比差异无统计学意义（P＞0．05）,随访后 HBV DNA水平（3．44±1．60log10）IU/mL较随访前（3．00±1．36）log10 IU/mL降低,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论大多数 HBsAg与抗-HBs同时阳性的HBV感染者抗原与抗体可长期存在,HBsAg及HBV DNA水平较低、HBeAg阴性患者更易发生HBsAg转阴。     

乙型肝炎病毒标志物及其DNA相关性及联合检测临床价值

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）血清免疫标志物（HBV M）和HBV DNA含量的相关性及两种指标联合检测的临床应用。方法酶联免疫吸附试验检测HBV M;荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测HBV DNA含量。结果乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）阳性的标本HBV DNA阳性率高,分别为：Ⅰ组[HBsAg、HBeAg和乙型肝炎核心抗体（抗-HBc）阳性],HBV DNA阳性率98.9%（181/183）;Ⅳ组（HBsAg和HBeAg阳性）,HBV DNA阳性率96.3%（26/27）;Ⅶ组[HBsAg、HBeAg、乙型肝炎e抗体（抗-HBe）和抗-HBc阳性],HBV DNA阳性率100.0%（2/2）;HBsAg阳性、HBeAg阴性,HBV DNA阳性率也较高,为Ⅱ组（HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性）60.4%（58/96）;Ⅲ组（HBsAg、抗-HBc阳性）50%（10/20）;HBeAg、HBsAg阴性有一定的HBVDNA阳性率,但阳性率低,分别为：Ⅴ组（抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc阳性）13.3%（2/15）;Ⅵ组（抗-HBs、抗-HBc阳性）8.3%（1/12）;Ⅷ组（抗-HBs阳性）0（0/26）;Ⅸ组（HBV M全阴性）6.7%（1/15）。结论血清HBV DNA水平与HBV M表现模式有关,与HBsAg,HBeAg有良好的相关性,而HBV M阴性的患者也可能有HBV DNA阳性,因此HBV M和HBV DNA联合检测,可有效提高乙型肝炎的检出率,为临床提供HBV感染、复制及传染性判断以及指导治疗的实验室依据。     

全自动酶免疫分析系统加样中携带污染问题及其解决方案

目的 评价全自动酶免疫分析系统ELISA实验中的HBsAg加样携带污染并探索解决方案。方法 利用分配HBsAg强阳性标本的加样针再分配阴性标本进行阳性携带污染评价,通过对不同洗针次数的洗涤效果比较选择阳性携带污染解决方法;利用洗涤后未干燥和已干燥的加样针分配0.5ng/mL HBSAg标本观察阴性携带污染(稀释效应)。结果 加样针在吸取强阳性标本进行分配后洗涤5次,再分配阴性标本,造成部分实验孔出现弱阳性结果,洗涤后未经干燥的加样针再分配低值弱阳性标本使部分实验孔出现阴性结果,造成弱阳性标本漏检。洗涤次数增加至10次和干燥后的加样针没有类似问题。结论 加过强阳性标本的加样针未经充分洗涤会对阴性标本造成携带污染,出现假阳性结果;洗涤后未经干燥的加样针存在稀释效应,造成弱阳性标本漏检。通过增加洗涤次数和对加样针进行干燥可以在一定程度上解决携带污染问题。     

应用CLSI EP12-A2文件评价HBsAg酶联免疫吸附试验试剂盒的分析性能

目的：应用CLSI EP12-A2文件评价乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）的酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒的性能,并比较2个不同厂家试剂盒之间的性能差异。方法按照CLSI发布的EP12-A2文件,对实验室使用的2个不同厂家的 HBsAg ELISA试剂盒的性能进行评价。结果2个厂家的试剂盒对分析物浓度为120％临界值的标本的检测阳性率均大于或等于95％,对分析物浓度为80％临界值浓度的标本的检测阴性率大于或等于95％,批内变异系数小于或等于15％,批间变异系数小于或等于20％。2个厂家试剂盒的灵敏度分别为94．2％（95％CI：84．3％∽98．0％）和92．3％（95％CI：81．8％∽97．0％）;特异性分别为98．0％（95％CI：89．5％∽99．6％）和100．0％（95％CI：92．8％∽100．0％）。2个厂家试剂盒灵敏度差值95％区间为-5．46％∽10．19％,特异性差值95％区间为-2．00％∽5．32％。结论2个厂家试剂盒检测 HBsAg 临界值＆#177;20％的浓度范围之外标本,能够得到稳定、可靠的检测结果,并具有较高的灵敏度和特异性,两者的检测灵敏度和特异性相近。     

自建检测系统定性检测乙型肝炎病毒表面抗原的重复性研究

目的通过在自建检测系统上对乙型肝炎病毒表面抗原的测定,评估自建检测系统定性检测乙型肝炎病毒表面抗原的重复性,并为其标准化提供参考依据.方法参照NCCLS《EP12‐A文件》,用酶联免疫吸附试验(ELISA)在自建检测系统上对-20%临界值浓度和+20%临界值浓度的样本分别测定20次,然后对检测结果进行统计学分析.结果-20%临界值浓度的样本阴性率为105%,+20%临界值浓度的样本阳性率为100%.结论自建检测系统对±20%临界值浓度范围以外样本的检测可以得到稳定的结果,可以满足《EP12‐12A文件》对定性试验重复性的要求.     

TECAN RMP150全自动酶免分析仪性能评价

目的对TECANRMP150全自动酶免分析仪的性能进行评价。方法参考NCCLSEP5文件及有关文献,分别用零点漂移、不精密度、线性、交叉污染、加样精度、洗板残液量、准确度等试验对仪器的加样系统、洗板系统和比色系统进行评价。结果TECANRMP150全自动酶免分析仪零点漂移为±0.001;不精密度高、中、低值样本CV值分别为Swr:1.82%、2.34%、3.60%,Srr:1.26%、0.77%、3.20%,Sdd:1.20%、0.26%、2.27%,ST:1.80%、1.69%、4.26%;线性实验Y=0.0007 0.1131X,r=0.9999;交叉污染率为0.65%;加样精度变异系数为0.30%,洗板残液量平均每孔为0.0125~0.0625μl。结论TECANRMP150全自动酶免分析仪加样系统、洗板系统、比色系统性能可靠、操作简单,能够满足检验科ELISA实验全程自动化的需要。     

胶体金免疫层析法检测乙型肝炎病毒表面抗原

目的建立一种简易快速、自测式胶体金免疫层析法（ＧＩＣＡ）用于检测血清中乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记乙型肝炎病毒表面抗体（抗ＨＢｓ），制成免疫层析检测试条。血清中ＨＢｓＡｇ与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动，与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。结果ＧＩＣＡ试条只与ＨＢｓＡｇ有特异性反应，与乙型肝炎病毒核心抗原、ｅ抗原等无交叉反应。检测中国药品生物制品检定所ＨＢｓＡｇ标准品，灵敏度可达１ｎｇ／ｍｌ。用ＧＩＣＡ与酶免疫法比较检测了３９５份不同血清标本中ＨＢｓＡｇ，两法符合率为９９．０％。结论ＧＩＣＡ检测血清中的ＨＢｓＡｇ特异性强、灵敏度高、简便快速，无需特殊仪器设备，有广泛应用价值。     

低水平 HBsAg 标本的检测及其临床意义

目的：探讨低水平乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）的检测方法及其临床意义。方法血清样本为上海科华公司生产的 HBsAg 酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒或罗氏 cobas E601分析仪免疫发光分析仪初筛为弱阳性的标本;用丽珠 HBsAg中和试剂盒（酶联免疫法）或罗氏 cobas E601进行确认试验,并结合相应样本的肝功能及 HBV-DNA 检测结果进行分析。结果经科华试剂盒初筛为弱阳性的53例样本中,丽珠 HBsAg 中和试剂盒检测为阳性37例、阴性16例;经电化学发光法检测为弱阳性的18例样本中,丽珠 HBsAg 中和试剂盒检测为阳性4例,阴性6例。结论不同检测系统检测低水平 HBsAg 的结果存在差异,低水平 HBsAg 的临床价值有待进一步研究。     

遵义医学院珠海校区2007级新生HBV感染状况分析

目的掌握遵义医学院珠海校区2007级新生乙型肝炎(简称乙肝)病毒(HBV)感染情况,为防治HBV传染提供一定依据。方法空腹静脉采血5 mL,分离血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中的HBsAg,对HBsAg阳性者进行乙肝三系统(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc)检测;用全自动生化分析仪检测〔紫外-乳酸脱氢酶法测丙氨酸氨基转移酶(ALT),紫外-苹果酸脱氢法测天门冬氨酸氨基转移酶(AST)〕肝功能。结果受检的933名新生中,HBsAg阳性率为4.61%,其中男生为7.94%,女生为2.91%,男生HBV感染率高于女生,不同性别间感染情况差异有统计学意义(χ2=10.39,P0.01)。ALT异常者占0.86%,HBsAg阳性者中合并ALT异常的人数占11.63%,ALT异常者中HBsAg阳性人数占62.50%。结论2007级新生HBsAg阳性率低于全国平均水平(10%)。     

MEIA确证HBSAg的方法学及其应用评价

目的：建立简便、快速、价廉的MEIA确证HBsAg的方法。方法：采用国产多抗HBsAb及标准阴性血清依据中和试验的原理建立MEIA确证HBsAg的方法。同时采用Abbott确证HBsAg试剂盒分别对80例血清标本进行确证并评价其结果。结果：该法能够对在线性范围内的HBsAg“阳性”标本（2．1－3000S／N）进行确证,对＞300S／N以上的HBsAg“阳性”标本应当进行适当稀释。然后再进行确证;采用两种方法对80例HBsAg“阳性”标本同时进行确证试验,两法符合率为100％。结论：该法操作简便、成本低廉、结果易判断,在常规检测中可以替代Abbott确证HBsAg试剂盒。     

对乙型肝炎表面抗原弱阳性结果进行确认试验的应用研究

目的评估抗体中和确认试验在乙型肝炎表面抗原（HBsAg）低值弱阳性标本中的应用。方法将由微粒子酶免疫发光法（MEIA）检测的HBsAg结果（S/CO）在1.0-10.0之间的111份弱阳性血清标本进行抗体中和确认试验,并进行乙型肝炎病毒（HBV）酶联免疫吸附试验（ELISA）,对比各试验结果间的差异。结果抗体中和确认试验阳性92例（82.9%）,ELISA检测阳性47例（42.3%）,2项试验检测结果间差异有统计学意义（P=0.033）。结论对HBsAg低值弱阳性标本,ELISA检测漏检率很高,敏感性和特异性均不佳;抗体中和确认试验可做为HBsAg弱阳性标本进一步确认的手段。