199葡萄籽提取物对H2O2诱导的人成淋巴细胞染色体损伤的抑制作用

葡萄籽提取物(GSE)主要是由聚合度为2～15的原花青素(89%)组成.作者研究了GSE抑制染色体损伤时的安全性和有效性.     

葡萄籽提取物对H2O2诱导的人成淋巴细胞染色体损伤的抑制作用[英]／Sugisawa A…／／Biol Pharm Bull．

葡萄籽提取物(GSE)主要是由聚合度为2～15的原花青素(89％)组成。作者研究了GSE抑制染色体损伤时的安全性和有效性。     

木棉花提取物对H_2O_2诱导血管内皮细胞氧化应激损伤的保护作用

目的:探讨木棉花提取物对过氧化氢(H_2O_2)所诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECS)氧化应激损伤的保护作用及其机制。方法:体外培养HUVECS,采用MTT法检测木棉花提取物对正常HUVECS细胞毒性作用;给予不同浓度木棉花提取物(15,30,60 mg/L)预处理保护HUVECS 24 h后,采用0.5 mmol/L H_2O_2诱导损伤3 h建立氧化应激损伤模型,MTT法检测细胞增殖活力,ELISA法测定细胞上清液中一氧化氮(NO)、乳酸脱氢酶(LDH)含量和谷胱甘肽-S转移酶(GST)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性;同时检测细胞中丙二醛(MDA)的含量及过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性;采用流式细胞仪检测活性氧(ROS)和细胞内钙离子含量。结果:木棉花提取物对HUVECs细胞无毒性作用;与H_2O_2损伤模型组比较,15、30、60 mg/L剂量组的木棉花提取物能明显提高H_2O_2诱导损伤HUVECs的增殖活力,提高细胞上清液NO含量和SOD、GST活性,降低LDH漏出量;能增强细胞内CAT、GSH-Px的活性,降低MDA水平;同时能减少细胞内ROS表达,下调细胞内钙离子浓度。结论:木棉花提取物对H_2O_2诱导的内皮细胞氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能与通过抑制氧化应激、抗过氧化损伤以及清除细胞内ROS,抑制细胞内钙离子介导的细胞凋亡有关。     

葡萄籽原花青素对H_2O_2损伤PC12细胞的保护作用

目的:检测葡萄籽原花青素对H2O2引起PC12细胞氧化损伤的保护作用及其作用机制。方法:用盐酸-香草醛法检测葡萄籽原花青素中低聚花青素的含量,并用DPPH(1,1-d iphenyl-2-p icrylhydrazyl)法检测其对自由基的清除能力,以PC12细胞为实验对象,进一步检测葡萄籽原花青素对氧化损伤的PC12细胞的保护效应。结果:低聚原花青素含量为45.16%的葡萄籽原花青素在浓度为64μg/m l时对DPPH自由基的清除率为76.69%,对H2O2损伤的PC12细胞在浓度为100μg/m l时保护率为83.1%,同时可使细胞内超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽(GSH)活性增加,细胞的脂质过氧化水平降低。结论:葡萄籽原花青素是通过清除自由基和提高细胞内源抗氧化酶来保护PC12细胞免受氧化损伤。     

氧化苦参碱对H_2O_2诱导L02细胞损伤的抑制作用及其机制的研究

该文研究氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)抑制H2O2诱导的L02细胞损伤的作用及其机制。以人正常肝实质细胞L02为研究对象,采用H2O2诱导氧化应激建立肝损伤模型进行实验,通过CCK-8检测OMT对L02细胞活性的影响;CSFE荧光实验检测OMT对L02细胞增殖的影响;流式细胞术检测OMT对H2O2诱导的L02细胞凋亡率的影响;DCFH-DA荧光探针检测OMT对H2O2诱导的L02细胞内ROS含量;微板比色法检测OMT对GSH-PX和SOD活性的影响。结果显示,OMT在6.25~100 mg·L-1通过诱导NADPH的产生,增强L02细胞内GSH-PX酶和SOD酶的活性,进而促进GSH介导的活性氧ROS的清除,从而抑制H2O2诱导的L02细胞凋亡的发生,达到抑制H2O2诱导L02细胞损伤的作用。     

荭草花提取物对H_2O_2诱导的HUVEC细胞氧化损伤的保护作用研究

该文首先建立了人脐静脉内皮细胞(HUVEC)过氧化氢(H_2O_2)氧化损伤模型,并筛选了荭草花提取物的低、中、高给药剂量来评价荭草花提取物对H_2O_2所致HUVEC细胞氧化损伤的保护作用并探讨其机制。采用MTS法检测HUVEC细胞活力;生化试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出量,细胞内丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力;qRT-PCR和Western blot法分别测定Bcl-2,Bax的mRNA及蛋白水平;Western blot法测定cleaved caspase-3的蛋白水平。结果表明,120μmol·L~(-1)H_2O_2作用0.5 h后,HUVEC细胞存活率下降至55%左右,并且使HUVEC细胞的LDH漏出量、MDA含量增加,SOD及CAT活性降低。此外,H_2O_2还能上调HUVEC细胞中促凋亡蛋白cleaved caspase-3蛋白水平和Bax的mRNA及蛋白水平,下调凋亡抑制蛋白Bcl-2的mRNA及蛋白水平。与H_2O_2模型组相比,50~200 mg·L~(-1)荭草花提取物预处理24 h能明显增加氧化损伤后细胞存活率,降低LDH漏出量、MDA含量,提高SOD及CAT活性,下调促凋亡蛋白cleaved caspase-3蛋白水平和Bax的mRNA及蛋白水平,并上调凋亡抑制蛋白Bcl-2的mRNA及蛋白水平。实验结果提示,荭草花提取物对H_2O_2所致的HUVEC细胞氧化损伤具有一定的保护作用,其机制可能与增强细胞清除自由基能力及抑制细胞凋亡有关。     

熊果酸对H_2O_2诱导的HUVECs损伤的保护作用

目的:探讨熊果酸(ursolic acid,UA)对H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化应激的保护及相关分子机制。方法:培养人脐静脉内皮细胞,分组为正常组,H2O2组(400μmol/L,作用8h)、1μmol/L熊果酸预给药组、5μmol/L熊果酸预给药组、10μmol/L熊果酸预给药组、15μmol/L熊果酸预给药组和阳性对照组(0.1g/L Vit E+H2O2)。采用CCK-8检测各组内皮细胞的活性,DCFH-DA荧光探针法检测ROS含量,硝酸还原酶法检测细胞培养上清液中NO含量及细胞内NOS的表达,Western blotting检测有效剂量组内皮细胞Pten、Akt、p-Akt(ser473)、e NOS的蛋白表达水平。结果:H2O2处理后,细胞存活率较正常组明显下降,NO、NOS含量降低,ROS水平升高;熊果酸给药后,其中三组细胞存活率明显升高,NO和NOS的水平明显升高。细胞内ROS含量降低,Pten蛋白水平表达降低,Akt磷酸化水平增加,e NOS表达水平升高。结论:熊果酸预给药能明显改善HUVECs的细胞活性,可能与促进内皮细胞NO的释放和熊果酸潜在的清除ROS而直接抗氧化的作用有关,其机制可能涉及到Pten的下调和Pi3k/Akt信号通路的激活。     

菥蓂子乙醇提取物对H_2O_2诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的:研究菥蓂子乙醇提取物对H2O2诱导损伤的PC12细胞保护作用及其作用机制。方法:用H2O2作用PC12细胞建立氧化应激损伤模型,采用MTT法测定细胞活力,活性氧检测试剂盒(DCFH-DA)检测细胞内活性氧,线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测细胞线粒体膜电位,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:菥蓂子乙醇提取物能够保护H2O2诱导的PC12细胞活力损伤,抑制H2O2所致胞内ROS水平升高,抑制H2O2导致的线粒体膜电位下降,减少细胞凋亡的发生。结论:菥蓂子乙醇提取物能够抑制H2O2诱导PC12细胞氧化损伤,在神经细胞氧化损伤保护方面具有较好的应用价值。     

杨梅总黄酮对H_2O_2诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的:探讨杨梅总黄酮对过氧化氢(H2O2)诱导血管内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法:体外培养人脐静脉血管内皮细胞ECV-304,通过H2O2诱导建立血管内皮细胞损伤模型,利用噻唑蓝(MTT)染色法研究杨梅总黄酮对血管内皮细胞存活率的影响,以MDA、LDH、SOD、NO含量的测定研究杨梅总黄酮对血管内皮细胞氧化应激的影响。结果:与模型组比较,杨梅总黄酮各给药组细胞存活率及SOD、NO活性显著提高,MDA含量和LDH漏出量显著降低。结论:杨梅总黄酮可能通过抑制氧化应激,达到保护内皮细胞的作用。     

茶多酚对H_2O_2诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的研究茶多酚(tea polyphenols,TP)对H2O2所致大鼠嗜铬细胞PC12细胞损伤的保护作用。方法 PC12细胞用TP及H2O2处理,MTT法观察细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞膜通透性及完整性,流式细胞术测定细胞周期分布,BrdU免疫荧光法检测细胞周期相S期DNA合成。结果 500μmol/L H2O2作用PC12细胞2 h,细胞出现明显损伤,细胞活力下降,培养上清液中LDH量增加,DNA合成减少;5、10、20μmol/LTP预处理可有效提高细胞存活率,减少LDH渗漏,提高S期DNA合成。结论 TP对H2O2所致的PC12细胞损伤有保护作用。     

龙眼提取物对H_2O_2致PC12细胞损伤的保护作用

目的:通过比较龙眼不同提取物的神经保护作用,探讨龙眼各部位的药效价值。方法:以H_2O_2诱导细胞损伤,以龙眼不同部位(肉、壳、核)提取物和龙眼肉不同极性(水、正丁醇、乙酸乙酯)提取物进行干预,倒置显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:正常组细胞贴壁良好,轴突明显,易成簇生长;模型组细胞形态不规整,突起肿胀破裂,有脱壁漂浮现象;给药组细胞形态趋于正常,结构较完整。龙眼不同部位中以龙眼肉提取物促进增殖最明显;龙眼肉不同极性提取物中,以乙酸乙酯提取物促进增殖最显著,其对细胞中晚期凋亡及坏死有明显抑制作用。结论:龙眼提取物具有神经保护作用,抑制细胞中晚期凋亡与坏死是其可能的神经保护作用机制。     

蛇毒三肽pENW对H_2O_2诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

目的:研究蛇毒三肽pENW对体外过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用。方法:用体外培养的人脐静脉内皮细胞株传代后进行实验,H2O2(300μmol/L,12h)模拟氧化损伤模型;药物处理组分别加入不同剂量的蛇毒三肽pENW(10-4mol/L,10-5mol/L,10-6mol/L)以及阳性对照药依达拉奉(10-5mol/L);用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力;比色法检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的漏出率,细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和谷胱甘肽(GSH-Px)的含量;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:蛇毒三肽pENW(10-4mol/L,10-5mol/L)能够显著抑制H2O2对人脐静脉内皮细胞的氧化损伤作用,降低H2O2诱导人脐静脉内皮细胞的凋亡,降低LDH漏出率,提高人脐静脉内皮细胞中SOD、GSH-Px活性。结论:蛇毒三肽pENW可降低过氧化氢对人脐静脉内皮细胞的氧化损伤作用,其保护作用可能与抗氧化及抑制细胞凋亡有关。     

木豆叶提取物对H_2O_2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用及机制研究

目的研究木豆叶提取物(ECCL)对H2O2诱导的H9c2细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制。方法建立H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤模型,于H2O2刺激前加入PI3K信号通路阻断剂LY294002(LY)预处理10 min,加入20、50μg/m L ECCL预处理24 h。MTT法检测细胞存活率,比色法测定上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,Western blotting检测细胞内p-Akt、p-e NOS蛋白表达。结果与模型组比较,ECCL可明显增加H9c2细胞H2O2损伤后细胞存活率(P0.01),增加SOD活力,降低MDA、LDH水平,增加p-Akt和p-e NOS蛋白表达(P0.05、0.01),LY可阻断ECCL对H9c2的上述作用。结论 ECCL能够减轻H2O2所致的H9c2细胞损伤,可能是通过激活PI3K通路促进其下游因子Akt和e NOS磷酸化发挥作用。     

美洲大蠊提取物对脂多糖诱导人牙周膜成纤维细胞炎症的抑制作用

目的 探究美洲大蠊提取物对脂多糖(LPS)刺激人牙周膜成纤维细胞(HPDLFs)炎症的抑制作用。方法 采用原代培养法获得HPDLFs细胞,经免疫组化鉴定为牙周膜成纤维细胞。分别以600、300、150、75、37.5、18.25μg/mL美洲大蠊水提物和醇提物进行处理,采用MTT法检测12、24、36、48 h HPDLFs细胞存活率,选择合适的实验时间及剂量。建立LPS诱导牙周膜成纤维细胞炎症模型,相应剂量药物给药,RT-qPCR法检测IL-1β、IL-6 mRNA相对表达,ELISA法检测IL-1β、IL-6、TNF-α、iNOS水平,Western blot法检测p-NF-κB、NF-κB、p-p38、p38蛋白表达。结果 与对照组比较,在36 h、150μg/mL剂量以下,美洲大蠊水提物、醇提物组细胞存活率随剂量升高而增加(P<0.05,P<0.01)。与LPS组比较,美洲大蠊水提物和醇提物组细胞IL-6、IL-1β mRNA表达,TNF-α、IL-6水平,p-NF-κB、NF-κB、p-p38、p38蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01)。结论 ...     

红景天总黄酮对H_2O_2诱导神经元及胶质细胞损伤的保护作用

目的研究红景天总黄酮提取物(TFR)对H_2O_2诱导神经元及胶质细胞损伤的保护作用。方法通过H_2O_2(200μg/m L)损伤原代神经元及胶质细胞建立脑组织氧化应激损伤模型,采用MTT(噻唑蓝)法检测在TFR预保护下细胞的存活率,Hoechst 33258染色观察TFR对细胞抗凋亡的作用,通过测定超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)的水平评价TFR对细胞抗氧化保护的作用。综合两种细胞各项指标数据,对比分析TFR对两种细胞保护作用的差异。结果中剂量(10μg/m L)和高剂量(100μg/m L)TFR保护组细胞存活率均显著高于H_2O_2损伤组,而且细胞凋亡显著减少,高剂量组神经元的存活率显著高于胶质细胞。TFR具有抗氧化保护作用,高剂量(100μg/m L)下对神经元的保护作用显著高于胶质细胞。结论 TFR能够显著降低H_2O_2诱导神经元和胶质细胞的损伤,在高剂量(100μg/m L)组中,TFR对神经元的保护作用显著高于胶质细胞。     

地骨皮提取液对H_2O_2诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

目的：探讨地骨皮醇提液对H2O2诱导的HUVEC细胞凋亡的影响,探讨地骨皮醇提液对血管内皮的保护作用,为研究糖尿病并发症治疗的新药提供新的理论基础。方法：将HUVEC细胞分为正常对照组、高药物浓度组、H2O2组和药物预处理＋H2O2作用组,作用18-24h后,用显微镜观察细胞形态改变,用流式细胞仪通过Annexin V/PI双染法检测各组细胞的凋亡百分比,用RT-PCR检测Bcl-2基因的表达变化。结果：地骨皮醇提液有效降低H2O2引起的细胞凋亡率;地骨皮醇提液可以增加凋亡相关基因Bcl-2的表达。结论：地骨皮醇提液对H2O2诱导的HUVEC细胞凋亡有不同程度的抑制作用,对血管内皮具有保护作用。     

甘木通总黄酮保护H_2O_2诱导的PC12细胞损伤

目的探讨甘木通(Clematis filamentosa)总黄酮(TFC)对H_2O_2引起的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)损伤的保护作用。方法用H_2O_2损伤PC12细胞建立神经元氧化应激损伤模型,噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,观察甘木通总黄酮对神经元损伤的作用;形态学以及Hoechst 33258染色观察TFC对细胞形态的影响;生化法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)的量。结果与200μmol/L H_2O_2诱导的模型组对比,中(10μg/m L)、高(100μg/m L)剂量甘木通总黄酮预处理细胞形态好于模型组,细胞活性明显增强(P0.05),细胞内的SOD活性增强(P0.05),MDA水平减低(P0.05)。结论甘木通总黄酮对H_2O_2引起的神经损伤有保护作用。     

凉血通瘀方对H_2O_2诱导损伤的血管内皮细胞的保护作用

目的观察凉血通瘀方对H2O2诱导损伤的血管内皮细胞增殖、凋亡及SOD表达的影响,探讨凉血通瘀方治疗出血性中风的可能机理。方法 100μmol/LH2O2造成血管内皮细胞氧化应激损伤模型,采用MTT法测定阴性对照组,模型组,凉血通瘀方高(2g/mL)、中(1g/mL)、低(0.5g/mL)剂量组细胞活性和细胞凋亡情况,黄嘌呤氧化酶法检测各组细胞上清液中SOD的活力。结果 100μmol/LH2O2可抑制血管内皮细胞增殖,促进细胞凋亡,降低SOD活力;而凉血通瘀方则能提高H2O2诱导损伤的血管内皮细胞活性,减轻内皮细胞的凋亡,提升SOD活力。这可能是凉血通瘀方治疗出血性中风机理所在。结论凉血通瘀方可能通过抗氧化和减轻内皮细胞的凋亡,发挥其对血管内皮细胞的保护作用。     

橄榄苦苷对H_2O_2诱导的PC12氧化应激损伤的保护作用

目的:观察橄榄苦苷(Oleuropein)对H_2O_2诱导的PC12细胞氧化应激损伤的保护作用,并探讨其分子机制。方法:实验分为空白对照组、模型组和实验组。利用H_2O_2作用PC12细胞建立氧化应激损伤模型,实验组给予50、100、200、400μmol/L的橄榄苦苷分别作用24、48、72 h,采用MTT法检测PC12细胞的活力,TUNEL法检测细胞凋亡率,ELISA法检测超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX)活性,免疫印迹法(western blot)检测胞浆细胞色素c(Cytochrome c,Cyt-c)、Caspase-3蛋白的表达。结果:橄榄苦苷能够抑制H_2O_2诱导的PC12细胞的活力下降(P0.01),降低H_2O_2诱导的PC12细胞的凋亡率(P0.05,P0.01),抑制H_2O_2诱导的PC12细胞内SOD及GSH-PX活力的降低(P0.01,P0.05),橄榄苦苷抑制H_2O_2诱导的细胞凋亡蛋白Cyt-c、Caspase-3表达的上调(P0.01,P0.05)。结论:橄榄苦苷对H_2O_2诱导的PC12细胞氧化应激损伤具有保护作用,其作用机制可能与抑制细胞凋亡有关。     

山楂中有机酸对H_2O_2诱导H9C2心肌细胞损伤的保护作用

目的:探讨山楂中有机酸对H_2O_2诱导H9C2心肌细胞损伤的保护作用及机制。方法:将对数期生长的H9C2心肌细胞随机分为6组:空白对照组、模型组、NAC阳性对照组和山楂有机酸(浓度分别为6.25、25、100μg/m L)组。心肌细胞在100μg/m L H_2O_2作用2 h后,采用MTT法检测细胞增殖,利用试剂盒测定细胞外液LDH漏出量和GSH-Px活性及细胞内SOD、MDA水平。对心肌细胞进行HE染色,用光学显微镜观察细胞形态变化。结果:与模型组比较,山楂有机酸可促进H9C2心肌细胞增殖,使LDH漏出量和MDA含量显著降低,SOD和GSH-Px活性显著升高(P<0.05~P<0.001),并能明显抑制H_2O_2引起的心肌细胞形态改变。结论:山楂有机酸对H_2O_2诱导的H9C2心肌细胞损伤具有保护作用,作用机制可能和有效地改善细胞内抗氧化酶的活性,抑制氧化应激损伤有关。