自来水及水源水有机提取物类雌激素活性研究

为了检测自来水及水源水有机提取物的类雌激素活性 ,应用环境雌激素基因重组酵母、细胞增殖和子宫增重等三项短期生物学实验进行测定。结果发现 :水样有机提取物在相当于原水量 50ml时两项体外实验均检出雌激素活性 ,原水量 2 50ml时细胞增殖效应达到最大 ,以后随原水量增大细胞增殖效应逐步减弱。原水量 12 50ml时酵母菌β -半乳糖苷酶活性最强 ,以后随原水量增大 β -半乳糖苷酶活性逐步减弱。水厂水源水有机提取物低、中剂量组受试小鼠子宫湿重增加 ,与对照组比较有统计学意义 ,高剂量组湿重减少。提示水源水有机提取物具有类雌激素活性。采用这三项实验组成的生物学检测程序具有一定的灵敏度 ,且较快速、方便。     

P,P’-DDD对人乳腺癌细胞的增殖作用

[目的]观察对,对-二氯二苯基二氯乙烷（P,P’-DDD）对人乳腺癌（MCF-7）细胞增殖的影响。[方法]采用体外培养MCF-7细胞增殖试验检测DDD的类雌激素活性,并用生长曲线对其作用机制进行初步探讨。[结果]DDD染毒剂量在3×10^-7mol／L、3×10^-6mol／L时,存在刺激MCF-7细胞增殖的类雌激素活性（P〈0．05）,在3×10^-6mol／L剂量时其增殖效应最大。细胞生长曲线方面,DDD组在第3、5、7天各时间段细胞数均明显高于溶剂对照组（P〈0．05）。[结论]DDD在3×10^-7mol／L、3×10^-6mol／L具有刺激MCF．7细胞增殖的类雌激素活性。     

温室土壤有机提取物遗传毒性研究

[目的]检测温室土壤中有机提取物的遗传毒性作用. [方法]以小鼠为实验动物,共分5组:阴性对照组(二甲亚砜)、阳性对照组(环磷酰胺)及土壤有机提取物低、中、高剂量组,染毒剂量分别为5、15和30g土壤干重/(kg小鼠体重·d),染毒方式为每日灌胃1次,连续染毒4周.用胞质分裂阻滞微核细胞试验和彗星试验分别检测有机提取物所致小鼠外周血淋巴细胞的染色体损伤作用和外周血细胞的DNA损伤作用. [结果]有机提取物剂量与微核率具有较明显的剂量-效应关系,显著高于阴性对照组;随着有机提取物作用剂量的增加,彗星尾长、尾部DNA含量和Olive尾矩显著升高. [结论]温室土壤中有机提取物可以诱使小鼠发生染色体和DNA损伤.     

镉雌激素样作用的筛检--子宫增重试验

[目的]用子宫增重试验筛检镉的雌激素样作用,比较子宫增重试验中子宫湿重和剥离重之间的关系,评价子宫增重试验的测量指标.[方法]分别对去卵巢SD大鼠皮下注射雌二醇(0,30,100,300,1 000,3 000,10 000 ng/kg·bw)和氯化镉(0,25,50,75,100,200 μg/kg·bw),连续染毒3 d后,第4天处死动物,分离子宫,称量子宫的湿重和挤去子宫腔内液后的剥离重.[结果]与对照组相比,雌激素组和氯化镉组子宫重量都有增加的剂量效应趋势.雌激素组子宫湿重在30 ng/kg·bw时与对照组相比差异有显著性(P＜0.05),剥离重在100 ng/kg·bw时差异才出现显著性(P＜0.05).氯化镉组情况类似,湿重和剥离重差异呈现显著性的剂量分别为75 μg/kg·bw和100 μg/kg·bw.子宫腔内液在雌激素组随着剂量的增加,持续上升;在氯化镉组,当达到一定浓度后不再增加,对子宫增重的影响逐渐减少.[结论]镉可以引起大鼠子宫增重.     

污水处理传统工艺与新工艺出水中有机提取物的雌激素样作用比较

目的评价污水处理厂传统处理工艺和新技术处理工艺出水中有机提取物的雌激素样活性,比较两种处理工艺对微量有机污染物的去除效果。方法采用树脂吸附固相萃取富集水样中的微量有机污染物,利用重组基因酵母试验和小鼠子宫增重实验检测水样中有机提取物的雌激素样活性大小。结果重组基因酵母检测中,在原水样中微量有机污染物浓缩1000倍条件下,新技术出水有机提取物处理的酵母表现出β-半乳糖苷酶活性,而三级出水、二级出水和进水都为500倍,相同条件下的β-半乳糖苷酶活性,新技术出水组三级出水组二级出水组进水组。小鼠子宫增重实验中,仅进水有机提取物油溶液原液组和阴性对照组之间具有显著性差异(P0.05),其他各水样组之间皆无显著性差异。结论郑州市城市污水经处理后雌激素样活性显著下降,但仍对环境具有潜在危害;新技术对污水中微量有机污染物的去除效果明显好于传统技术。     

染镉未成年雌性大鼠的雌激素样作用研究

目的评价镉的雌激素样活性。方法SD未成年雌性大鼠随机分为6组(阴性对照组、0.5、1.0、2.0、4.0mg/kgCd2 组及β-雌二醇阳性对照组,皮下注射染毒,每天1次,共3d,第4天时剖杀观察子宫湿重,子宫内膜腔上皮厚度,子宫内膜增殖细胞核抗原(PCNA)表达。结果各剂量染镉组大鼠子宫增重、子宫内膜腔上皮厚度及PCNA阳性表达各项指标与阴性对照组比较差异未见统计学意义(P>0.05)。结论在该实验条件下,并未显示镉具有雌激素样活性。     

丙烯腈类性激素作用的整体动物筛检试验

[目的]研究丙烯腈（AN）的类性激素样作用.[方法]①采用经典大鼠子宫增重方法测试丙烯腈的类雌激素样作用,对去卵巢SD大鼠皮下注射剂量分别为0、10、15、25、40、60 mg/kg受试物丙烯腈,每天一次、连续3天;同时皮下注射剂量为0.001 mg/kg雌二醇玉米油溶液为阳性对照组.最后一次给药24 h后,将大鼠麻醉后取血并处死,观察受试动物子宫湿重、干重、肝重、肾重等指标.②研究丙烯腈的抗雄激素作用.采用OECD推荐的内分泌干扰体内筛检实验方法（Hershberger试验）,对雄性去势大鼠皮下注射剂量为0.4mg/kg体重丙酸睾酮,同时经口灌胃剂量分别为0,10,20,30,40,50 mg/kg体重的受试物丙烯腈以及25 mg/kg体重的阳性参照物氟他胺（flutamide,FLU）,每天一次,连续10天.最后一次给药24 h后,将大鼠麻醉后取血并处死,观察受试动物前列腺、精囊腺、阴茎、肛提肌/球体海绵体肌、尿道球腺等附性腺组织（sex accessorytissue,SAT）重量和肝重、肾重等指标.[结果]①子宫增重实验：丙烯腈各剂量组大鼠子宫干重、湿重与溶剂对照组无显著差异（P＞0.05）,阳性对照组与溶剂对照组及丙烯腈各剂量组比较,子宫干重、湿重差异存在显著性（P＜0.05）.②Hershberger试验：丙烯腈各剂量组与阴性对照组相比,SAT重量差异无显著性（P＞0.05）,阳性对照组（FLU）与阴性对照组相比,SAT重量差别具有显著性（P＜0.05）.丙烯腈各剂量组肝、肾重量与阴性对照组差别无显著性（P＞0.05）,提示受试动物无明显系统毒性.[结论]采用子宫增重测试和Hershberger体内筛检试验未发现丙烯腈具有类性激素作用.     

镉对未成年雌性小鼠子宫增重作用的剂量-效应关系

目的通过研究镉对未成年小鼠子宫增重作用的剂量-效应关系,为探讨镉的雌激素样活性提供实验依据。方法将64只未成年雌性昆明种小鼠按体重分层,随机分为8组(阴性对照组,雌二醇阳性对照组和1.25、5、20、80、320、1 280μg/kg氯化镉剂量组),采用腹腔注射染毒方法,每天注射1次,注射容积为0.25 ml/10(g.d),连续注射3 d,最后1次腹腔注射24 h后称重,颈椎脱臼处死小鼠,取子宫称重。结果各染镉剂量组子宫增重与阴性对照组比较,差异无显著性(P>0.05),雌二醇阳性对照组子宫增重显著(P<0.05),实验中各染镉剂量与子宫脏器系数之间无剂量-效应关系。结论在该实验镉剂量范围内,未检测到镉对未成年雌性小鼠子宫有增重作用。     

污灌玉米中有机污染物对小鼠的遗传毒性及氧化损伤作用

[目的]研究污灌玉米中有机污染物对小鼠的遗传损伤及其氧化损伤机制。[方法]选取某污灌农田产出的玉米为研究对象,地下水灌溉的玉米为对照,采用超声振荡法提取玉米中的有机污染物,对小鼠灌胃法染毒（共分为5组,每组8只：试剂对照组、对照区低剂量组、对照区高剂量组、污灌区低剂量组、污灌区高剂量组）。每日染毒1次,染毒剂量：低剂量组相当于10g玉米干重／（kg·d）,高剂量组相当于60g玉米干重／（kg·d）。连续染毒2周后,进行单细胞凝胶电泳试验、微核试验并测定总超氧化物歧化酶（T—SOD）活力、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力和丙二醛（MDA）含量。[结果]与试剂对照组比较,对照区各组的T-SOD活力均降低（P〈0．05）;污灌区拖尾率、拖尾长度及微核率均增高,且高于对照区（P〈0．05）;污灌区T—SOD和GSH-PX活力均降低（P〈0．05和P〈0．01）,且低于对照区（P〈0．05）。[结论]该污灌区玉米有机提取物中含有致小鼠遗传毒性及氧化损伤的有机污染物,其毒性强于对照区。     

大豆异黄酮对大鼠子宫雌激素受体的影响

[目的]探讨大豆异黄酮对子宫雌激素受体的影响及其雌激素样作用机制. [方法]30只大鼠行双侧去卵巢手术后随机分为阴性对照组(蒸馏水)、低、中、高剂量大豆异黄酮组(0.02 mg/kg、0.10 mg/kg、0.50 mg/kg)和阳性对照组(0.08 mg kg雌二醇),连续用药3 d后取子宫,采用放射性配基结合分析法和雌激素受体结合试验检测雌激素受体数量. [结果]大豆异黄酮各浓度组放射活性与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P≤0.05).大豆异黄酮各浓度组雌激素受体数量与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P≥O.05). [结论]大豆异黄酮影响雌二醇与雌激素受体结合,但不影响雌激素受体的数量,可能是通过与雌激素受体结合显示雌激素样作用.     

水源水有机物低剂量混合暴露的雌/雄激素效应

目的研究水源水中有机物低剂量混合暴露对整体动物的雌/雄激素效应。方法利用固相萃取(SPE)富集水中有机物,借鉴美国环保局(EPA)推荐的子宫增重和雄/抗雄激素实验方法,检测人体日常饮用水量水平的有机物暴露所产生的雌/雄激素效应。结果日常饮水量的水源水有机物暴露的实验组与阴性对照组子宫重量变化及雄大鼠副性重量变化均无统计学差异,但4·0L/60kg组子宫上皮细胞高度明显高于阴性对照。结论人类日饮水量体积内所含的有机物混合暴露,未能在整体动物中检测到雄/抗雄激素效应,但可能有潜在雌激素干扰效应。     

Bioassay-derived androgenic and estrogenic activity in municipal sewage in Australia and New Zealand

Raw sewage and sewage at various stages of treatment were sampled from 15 municipal sewage treatment plants in south Queensland (Australia) and Canterbury (New Zealand). Estrogenic and androgenic activities were determined with sheep estrogen receptor and rainbow trout androgen receptor binding assays, respectively. Selected estrogenic chemicals were also analyzed by gas chromatography-mass spectrometry. The raw sewage influents contained significant levels of both estrogenic (<4-185 ng/L estradiol equivalents) and androgenic (1920-9330 ng/L testosterone equivalents) activity. Subsequent treatment of raw sewage successfully removed most of the activity so that the estrogenicity and androgenicity associated with the final effluents were very low (<1-4.2 ng/L estradiol equivalents and <6.5-736 ng/L testosterone equivalents, respectively). Secondary treatment was the most effective treatment step to remove estrogenic and androgenic activity from sewage water. Activated sludge treatment in particular removed 92% to >99% of the estrogenic activity and 82% to >99% of the androgenic activity in sewage.     

武汉市饮用水中有机提取物对HepG2细胞DNA的损伤作用

目的研究武汉市生活饮用水中有机提取物对人肝肿瘤HepG2细胞DNA损伤作用。方法用XAD-2/8复合树脂(XAD-2和XAD-8树脂等体积混合)等比富集武汉市生活饮用水中有机污染物,应用慧星试验检测有机提取物的遗传毒性。结果该市不同水源、不同水文期下饮用水中有机提取物对HepG2细胞均产生不同程度的DNA损伤作用。同一水文期不同水源比较,在剂量10和30ml/ml下,汉江水源末梢水有机提取物致DNA损伤程度大于长江水源(P0.05);同一水源不同水文期时比较,在剂量10和30ml/ml下,枯水期有机提取物致DNA损伤程度大于丰水期(P0.05)。结论武汉市主要水源汉江和长江的氯化饮用水有机提取物对HepG2细胞DNA均有损伤作用,损伤作用的严重程度从大到小为汉江水长江水,枯水期丰水期。     

小鼠肝细胞彗星实验对饮用水氯化消毒副产物诱变性研究

目的 用小鼠肝细胞彗星实验检测生活饮用水氯化消毒前后的诱变性。方法 采用彗星实验分别对泸州市南部水厂的水源水、出厂水、自来水的有机浓集物的诱变性进行检测。结果 水源水的有机浓集物的彗星实验在高剂量组(相当于原水样量500ml)才出现阳性，而出厂水、自来水的望星实验在较低剂量组(相当于原水样量100m1)呈阳性反应。结论 水源水和氯化消毒饮用水都能诱导动物细胞DNA损伤，说明水源水和氯化消毒饮用水里存在致突变物质，2者对人类健康都存在潜在的威胁，但经氯化消毒过后的饮用水其消毒产生的氯化副产物比水源水具有更强的致突变性。     

某市饮用水有机提取物对小鼠肝细胞DNA损伤的研究

目的研究某市生活饮用水有机提取物对小鼠肝原代细胞所致的DNA损伤作用。方法采用小鼠肝原代细胞彗星试验分别对某市南郊水厂的水源水、出厂水、自来水的有机提取物的致突变性进行检测。结果该市水源水、出厂水和自来水对小鼠肝原代细胞均产生了不同程度的DNA损伤作用,但出厂水和自来水引起肝细胞DNA损伤作用的阈值更低(在本研究为100m1)。结论该市生活饮用水的水源水和氯化消毒后饮用水都受到不同程度的有机致突变物的污染,氯化消毒后饮用水比水源水的致突变性更强,可能是由氯化消毒副产物的致突变性所致。     

The in vitro estrogenic activities of polyfluorinated iodine alkanes

Background: Polyfluorinated iodine alkanes (PFIs) are important intermediates in the synthesis of organic fluoride products. Recently, PFIs have been detected in fluoropolymers as residual raw materials, as well as in the ambient environment.Objectives: High production volumes and potential environmental releases of PFIs might become a concern, but the exposure risk and toxicity of these chemicals are still unclear. In this study, we investigated the potential estrogenic effects of PFIs.Methods: We studied the estrogenic effects of fluorinated iodine alkanes (FIAs), fluorinated telomer iodides (FTIs), and fluorinated diiodine alkanes (FDIAs) using the E-screen and MVLN assays and the evaluation of estrogen-responsive genes in MCF-7 cells.Results: FIAs have an iodine atom at one end of the perfluorinated carbon chain. 1-Iodoperfluorohexane (PFHxI) and 1-iodoperfluorooctane (PFOI) promoted the proliferation of MCF-7 cells, induced luciferase activity in MVLN cells, and up-regulated the expression of TFF1 and EGR3. In these assays, other FIAs gave negative responses. FDIAs have an iodine atom at each end of the perfluorinated carbon chain, and all the FDIAs showed estrogenic effects. The estrogenic potencies of FIAs and FDIAs correlate well with the carbon chain length of the chemicals. The optimum chain length for estrogenic effects is six carbons, and then eight and four carbons. All FTIs have a single iodine atom at the end of a partially fluorinated carbon chain. None of the FTIs showed estrogenic effects in the tests.Conclusions: The estrogenic effects of PFIs are dependent on the structural features of iodine substitution and chain length. This research will be helpful in further understanding the estrogenic effects of perfluorinated compounds.     

加氯消毒对水中有机提取物致人胎肝细胞DNA损伤的影响

目的探讨自来水加氯消毒对水中有机提取物致细胞DNA损伤的影响。方法于2007年7月(夏季)和2008年3月(春季)采集以长江为水源的某水厂的水源水、经加氯消毒处理后的出厂水和末梢水,以人胎肝细胞(L-02)为靶细胞,采用单细胞凝胶电泳技术,检测水样有机提取物诱导细胞DNA损伤的效应。水样有机提取物设4个染毒浓度(1.2、6、30、150ml/ml),阳性对照为苯并(a)芘(200μmol/L),溶剂对照为二甲基亚砜(DMSO,10μl/ml)。结果春季水源水、出厂水和末梢水以及夏季出厂水和末梢水水样有机提取物在低、中、高浓度(6、30、150ml/ml)引起的L-02细胞DNA损伤较溶剂对照组明显增加。春夏两季加氯消毒后的出厂水和末梢水有机提取物在低、中、高浓度(6、30、150ml/ml)引起的L-02细胞DNA损伤较水源水明显增强。春季的水样有机提取物对细胞DNA的损伤作用高于夏季。结论水源水、出厂水和末梢水有机提取物均能引起L-02细胞的DNA损伤,氯化消毒增加了水源水的遗传毒性,春季水样的遗传毒性大于夏季。     

Evaluation of the estrogenic potential of river and treated waters in the Paris area (France) using in vivo and in vitro assays

For many years, surface waters have been shown to be contaminated by endocrine-disrupting compounds (EDCs), which can cause adverse effects on human and wildlife growth, development, and reproduction. It is therefore of primary importance to determine if drinking water could be contaminated by EDCs when produced from polluted surface waters. It is also essential to determine if disinfection by-products can account for estrogenic activity in treated waters. The estrogenic potential of river and treated waters was investigated using an in vivo assay. Adult male zebrafish were placed in three drinking water treatment plants (DWTPs) in the Paris area and exposed for 1 month to the two types of waters. After exposure, vitellogenin (VTG) was measured in the plasma of fish using a competitive ELISA. In addition, an in vitro assay (MELN cells) was used to assess the estrogenic potential of 10 major chlorination by-products. No significant induction of VTG was observed in fish exposed to river or treated waters. Among the 10 chlorination by-products tested, only 2-chlorophenol was found to be weakly estrogenic at concentrations up to 1mg/L. Therefore, the risk for the three DWTPs studied to produce drinking water with significant level of estrogenic substances appears to be low.     

镉雌激素样作用的实验研究

目的 评价镉的雌激素样效应。方法 从体外和体内两个水平,观察不同浓度的氯化镉对MCF－7人乳腺癌细胞生长和去卵巢SD大鼠子宫的诱导增生作用。结果 10^-6mol/L的氯化镉使MCF－7细胞增殖达最大,为对照的3．92倍,并且其诱导增殖作用被纯抗雌激素ICI 182,780完全阻断。镉的相对增殖效率为雌二醇的65％,相对增殖能力为雌二醇的1／1000。每天0．1、0．5及2．5mg/kg连续3d腹腔注射氯化镉能明显促进去卵巢大鼠子宫的增生,并且具有剂量－效应关系。结论 镉能够模拟雌二醇诱导MCF－7细胞增殖及大鼠子宫增重。镉具有雌激素样效应。