他克莫司阳离子微乳原位凝胶的制备及体外释放研究

目的 为了改善他克莫司水溶性差、眼部生物利用度低的问题,研制了他克莫司阳离子微乳原位凝胶,并研究其体外药物释放行为,为后期进一步研究提供基础。方法 通过高压均质法制得他克莫司阳离子纳米乳,并将其分散于泊洛沙姆407和泊洛沙姆188中制备他克莫司阳离子微乳原位凝胶。采用无膜溶出模型研究其体外释放行为。结果 采用玻璃瓶倒置法测定胶凝温度,筛选出最优凝胶基质处方为26%泊洛沙姆407和12%泊洛沙姆188;体外释药结果显示凝胶溶蚀速率是决定体外释药速率的关键。结论 成功制备了他克莫司阳离子微乳原位凝胶,其体外释药稳定,能满足眼用制剂要求,展现出良好的眼部应用前景。     

成人肝移植术后他克莫司群体药动学研究

目的：应用非线性混和效应模型考察中国肝移植患者他克莫司群体药动学特征。方法：回顾收集天津市第一中心医院成人肝移患者57例,1 094个他克莫司谷浓度点,验证组患者10例,183个谷浓度点。采用一房室模型,分析处理数据,采用NPDE、Bootstrap和外部验证的方法对模型进行评估。结果：最终模型显示血红蛋白（HGB）和术后时间（POD）为影响清除率的主要因素。药动学参数的群体典型值：清除率（CL/F）估算值为19.8 L·h^-1,表观分布容积估算值为597 L。模型评价显示该模型及所估算参数稳定。结论：本研究所建立的成人肝移植受者口服他克莫司的群体药动学模型能较好地估算患者的个体及群体药动学参数,为今后肝移植患者个体化给药方案的制订提供相关参考。     

他克莫司在肝移植患者体内的药动学

目的:考察口服他克莫司(FK506)胶囊在肝移植患者体内的药动学特征,为临床调整个体化给药方案提供科学依据.方法:22例肝移植患者,给予FK506为基础的免疫抑制治疗,术后24 h后开始服用FK506,剂量为(0.13±0.04)mg·kg-1·d-1,每12 h服用1次.受试者在服药前(0 h)和服药后0.33,0.66,1,1.5,2,3,4,6,8,10,12 h共12个时间点分别取外周静脉血,用MEIA法进行药物浓度测定,PKBP-N1软件计算药动学参数,并绘制血药浓度-时间曲线.结果:FK506口服后血药浓度一时间曲线为一级吸收二室开放模型,22例肝移植受者在口服FK506后,血药浓度迅速上升达到峰值,然后迅速下降,PK参数分别为t1/2a为(1.2±2.1)h,t1/2β(21.0±10.1)h,Ka(2.2±0.9)·h-1,CLs(0.64±0.3)L·h-1·kg-1,AUG0-12为(136.2±33.7)μg·h·L-1.本实验中和AUC相关性最好的是G、C4、C8,r分别为0.95,0.94,0.91.结论:肝移植患者口服FK506药动学个体差异大,用药应个体化.根据PKBP-N1分析得到的药动学参数,能较好的体现患者的药动学信息,根据单点血药浓度可以比较准确的预测AUC0-12.     

他克莫司在中国健康人体内的药动学特征

采用随机开放试验设计,研究了22名中国健康男性志愿者单剂量口服5mg他克莫司胶囊的药动学特征.以环孢素D为内标,建立了LC-MS/MS法测定他克莫司在全血中浓度.主要药动学参数为:T1/2(31.4±9.0)h,c max(41.3±19.6)ng/ml,T max(1.7±0.8)h,AUC (o-t),(330.3±143.5)h·ng·ml-1,AUC (o-∝)(394.9±186.3)h·ng·ml-1.所得结果与国外文献接近,他克莫司在人体的吸收代谢存在较大的个体变异,变异来源与CYP3A4/5的基因多态性密切相关.     

肾病综合征患者他克莫司的群体药动学研究

目的 应用非线性混合效应模型NONMEM考察成人肾病综合征患者他克莫司的群体药动学特征。方法 回顾性收集肾病综合征患者51例,246个血药浓度监测数据。以其年龄、性别、体质量、他克莫司日剂量、肝肾功能及合并用药等为协变量,采用具有一级吸收和消除的一室模型拟合数据,并通过自举法和正态化预测分布误差法对模型进行验证。结果 他克莫司的表观清除率（CL/F）为13.9 L·h^-1,表观分布容积（V/F）为382 L,他克莫司日剂量（DD,mg·d^-1）、红细胞压积（HCT）、合并使用五酯胶囊对CL/F有显著影响。模型评价显示该模型及参数估算值可靠稳定,CL/F的最终模型为CL/F=13.9×0.668^WZ×（DD/2）^0.354×（HCT/0.394）^-0.522,其中合并使用五酯胶囊时WZ为1,反之为0。结论 建立的肾病综合征患者口服他克莫司的群体药动学模型能较好地估算患者的群体及个体药动学参数,可为该药的个体化给药方案设计提供参考。     

他克莫司在肝移植患者中群体药动学研究进展

新型强效免疫抑制剂广泛应用于肝移植术后受体患者。其中,他克莫司在临床的应用不仅预防和治疗了肝移植患者术后抗移植排斥反应,提高移植器官的存活率,并已成为肝移植术后抗排异反应的一线用药。本文从他克莫司及其在肝移植患者中的应用、群体药动学的基本认识,以及口服他克莫司在肝移植患者的群体药动学研究等方面做一综述。     

他克莫司群体药动学在儿童肝移植中的研究进展

他克莫司治疗窗窄，药动学个体差异大，临床难以建立儿童受者的个体化治疗方案。群体药动学（PPK）在个体化给药研究方面有巨大优势。为了实现他克莫司在儿童肝移植受者中的个体化治疗，国内外学者致力于儿童肝移植受者的PPK研究，但各研究的结果存在差异。本文通过检索PubMed、Web of Science及Scopus数据库中的相关文献，着重分析了既往他克莫司PPK在儿童肝移植受者中的研究，总结影响他克莫司PPK参数的主要因素，期望应用PPK方法为构建儿童肝移植受者的个体化治疗方案奠定基础。     

合用他克莫司或环孢素对霉酚酸酯及其代谢产物药动学的影响

目的比较合用他克莫司(FK506)与合用环孢素(Cs A)时霉酚酸酯(MMF)及其代谢产物的药动学差异。方法 20例服用MMF肾移植患者分为2组,分别为合用FK506组或合用Cs A组,于服药前和服药后共11个时间点采取外周静脉血,采用高效液相色谱法测定血浆中MMF及其代谢产物霉酚酸葡萄糖苷(MPAG)和霉酚酸酰基葡萄糖苷(Ac MPAG)浓度,计算药动学参数并进行比较。结果与FK506组相比,Cs A组霉酚酸(MPA)C0较低(1.58 vs 3.40 ng·m L-1),且代谢产物Ac MPAG的C0、Cmax和AUC0¹2 h也显著低于FK506组(C0 0.20 vs 0.45 ng·m L-1,Cmax 0.41 vs 0.72 ng·m L-1,AUC012 h也显著低于FK506组(C0 0.20 vs 0.45 ng·m L-1,Cmax 0.41 vs 0.72 ng·m L-1,AUC0¹2 h 3.04 vs 6.50ng·h·m L-1),2组间MPAG药动学参数差异无统计学意义。结论合用其他免疫抑制剂可能会对MMF及其代谢产物Ac MPAG的药动学产生显著影响。     

成人慢性肾小球肾炎患者他克莫司群体药动学研究

目的:建立成人慢性肾小球肾炎患者他克莫司群体药动学(population pharmaco-kinetics,PPK)模型。方法:收集55例慢性肾小球肾炎患者的268个他克莫司血药浓度数据。采用非线性混合效应模型考察CYP3A5基因型、体质量、年龄、实验室指标、合并用药等对他克莫司药动学参数的影响,建立他克莫司PPK模型,并通过拟合优度诊断、Bootstrap自举法及正态预测分布误差法对模型进行验证。结果:他克莫司表观清除率及表观分布容积的群体典型值分别为13.8L·h-1和733L,CYP3A5基因型和合并用药五酯胶囊对他克莫司清除率具有显著影响。经验证他克莫司PPK模型稳定有效。结论:首次建立成人慢性肾小球肾炎患者他克莫司PPK模型,可为慢性肾小球肾炎患者的他克莫司个体化给药提供参考。     

肝移植患者术后口服他克莫司群体药动学研究

目的:考察肝移植患者术后口服他克莫司的群体药动学模型,为临床个体化用药提供参考。方法:回顾性收集天津市第一中心医院18例肝移植患者术后口服他克莫司12 h全血药浓度监测数据145个。运用非线性混合效应模型(nonlinear mixed effect model,NONMEM)建立他克莫司群体药动学模型,并考察了年龄、性别、移植术后天数、血清肌酐等固定效应对药动学参数的影响,得到最终模型方程,最后利用Bayesian反馈得到的个体药动学参数值进行个体化给药方案设计。结果:本次研究建立起了口服他克莫司一级吸收和消除的二房室群体药动学模型,并通过NONMEM模拟程序为1例患者进行了个体化给药设计。结论:NONMEM法建立的模型能较好地估算他克莫司的个体及群体药动学参数,为临床合理使用他克莫司提供参考依据。     

Development of loteprednol etabonate-loaded cationic nanoemulsified in-situ ophthalmic gel for sustained delivery and enhanced ocular bioavailability

A novel cationic nanoemulsified in-situ ophthalmic gel of loteprednol etabonate (LE) was developed to improve the permeability and retention time of formulations for overall improvement of drug’s ocular bioavability. Capryol 90 (oil phase), tween 80 (surfactant) and transcutol P (cosurfactant) was selected as formulation excipients to construct pseudoternary phase diagrams and nanoemulsion region was recognized from diagrams. Spontaneous emulsification method was used to manufacture LE nanoemulsion and it was optimized using 3² factorial design by considering the amount of oil and the ratio of surfactant to cosurfactant (S_mix) as independent variables and evaluated for various physicochemical properties. Optimized NE was dispersed in Poloxamer 407 and 188 solution to form nanoemulsified sols that were predictable to transform into in-situ gels at corneal temperature. Drug pharmacokinetics of sterilized optimized in situ NE gel, NE-ISG2 [0.69% w/w Capryol 90, 0.99%w/w S_mix (3:1), 13% Poloxamer 407, 4% w/w Poloxamer 188] and marketed formulation were assessed in rabbit aqueous humor. The in-situ gels were clear, shear thinning in nature and displayed zero-order drug release kinetics. NE-ISG2 showed the minimum ocular irritation potential and significantly (p?<?0.01) higher C_max and AUC_(0–10?h), delayed T_max, extended mean residence time and improved (2.54-fold times) bioavailability compared to marketed formulation.     

Microparticulated anti-HIV vaginal gel: In vitro-in vivo drug release and vaginal irritation study

The aim of this study was to develop and evaluate a Zidovudine (AZT)-loaded microparticulated bioadhesive vaginal gel (MBVG) in order to obtain a controlled releasing, safe gel delivery system. AZT microparticles (ZMPs) were evaluated for encapsulation efficiency, drug loading, surface morphology and in vitro drug release profiles and drug release mechanism and optimized. The optimized ZMPs were then encompassed in bioadhesive gel using different bioadhesive polymers and evaluated for the drug encapsulation efficiency, drug loading, in vitro and in vivo drug release profiles, drug release mechanism and vaginal irritancy study. From the dissolution data of ZMP4 and MBVG4 showed a zero-order diffusion pattern and Fickian diffusion case I transport mechanism in 24 and 36?h, respectively. On the basis of a pharmacokinetic study of MBVG4 (containing ZMP: Carbopol 1:4), it was found to have better bioavailability, larger AUC and T_max in comparison to an oral pure suspension of AZT.     

眼刺激性评价体外替代方法研究进展

眼用药物及可能接触眼睛的受试物均应考虑进行眼刺激试验。Draize试验一直是公认的测定急性眼刺激性的国际标准,但随着"3R"原则的实施,体外替代方法逐渐成为眼刺激性评价研究的发展方向。目前已有多种体外替代方法得到了欧洲化学品局(European Chemical Agency, ECHA)、美国国家环境保护局(US Environmental Protection Agency, US EPA)及经济合作与发展组织(The Organization for Economic Co-operation and Development, OECD)的认可,其中有5种替代试验得到了OECD的认可,分别是牛角膜不透明度和渗透性试验,离体鸡眼试验、短时暴露试验、重组人角膜上皮模型试验试验以及荧光素渗漏试验。在使用体外替代方法时,由于单一的方法不能蕴含所有的观察终点,所以应根据每种替代方法的特点及应用范围进行组合以覆盖整个分层测试策略。相信随着体外替代试验研究的不断深入,有希望在未来能够完全替代体内试验。本文就眼刺激评价的体外替代方法和评价标准进行了综述。     

Validation of the OptiSafe™ eye irritation test

Abstract

Purpose

OptiSafe is an in chemico test method that identifies potential eye irritants based on macromolecular damage following test chemical exposure. The OptiSafe protocol includes a prescreen assessment that identifies test chemicals that are outside the applicability domain of the test method and thus determines the optimal procedure. We assessed the usefulness and limitations of the OptiSafe test method for identifying chemicals not requiring classification for ocular irritation (i.e. bottom-up testing strategy).     

A new cell-based method for assessing the eye irritation potential of chemicals: an alternative to the Draize test

Using a human corneal cell line (HCE-T cells) and 2 evaluation criteria, we developed a new alternative method to assess the eye irritation potential of chemicals. We exposed HCE-T cells to different concentrations of 38 chemicals for 1h and measured relative cell viability (RCV) as an endpoint at each concentration. Using the RCV values, we calculated the RCV50. We also exposed HCE-T cells to 3 fixed concentrations of the 38 chemicals (5%, 0.5%, and 0.05%) for 1h and measured the RCV at each concentration. Using the RCV values at 5%, 0.5%, and 0.05%, we developed a new criterion for eye irritation potential (total eye irritation score, TEIS) and estimated the ocular irritancy. We then assessed the correlation of the results of RCV50 and TEIS with those of the Draize rabbit eye irritation. Both the RCV50 and TEIS results exhibited good positive correlations (sensitivity: 80.77%, specificity: 83.33%, and accuracy: 81.58% for TEIS; sensitivity: 73.08-76.92%, specificity: 75.00%, and accuracy: 73.68-76.32% for RCV50). We conclude that the new in vitro model using HCE-T cells is a good alternative evaluation model for the prediction of the eye irritation potential of chemicals.     

布洛芬离子导入凝胶剂在家兔体内的药动学

目的:通过研究布洛芬凝胶剂的药动学,为布洛芬离子电导入经皮给药系统的临床应用提供理论依据.方法:采用反相高效液相色谱法测定布洛芬凝胶剂透皮给药后不同时间家兔血药浓度,计算药动学参数.结果:布洛芬离子导入凝胶剂的吸收速度、峰浓度及血药浓度时间曲线下面积虽低于离子导入溶液剂,但AUC及C max 分别为透皮给药对照组的 2.6 倍和 4.5 倍,且吸收速度快.结论:布洛芬凝胶剂经离子导入有良好的吸收性.     

兔角膜上皮细胞短期暴露实验替代兔眼刺激实验的可行性研究

目的：探讨用兔角膜上皮细胞（SIRC）模型对眼用制剂包装材料的浸提液进行短时暴露（STE）实验,以替代动物眼刺激实验的可行性。方法：在眼用制剂包装材料的浸提液中加入不同浓度的阳性物质,同时进行STE实验和兔眼刺激实验,比较两种实验分级的一致程度。结果：两种方法对不同浓度的阳性浸提液进行实验分级的一致程度为78．6％,统计学分析证明两种方法具有相当的一致性。以动物实验的分级为标准,STE实验的灵敏度和特异性分别为100％和80％,假阳性率为20％,假阴性率为0％。结论：SIRC的STE眼刺激实验有潜力作为眼用制剂包装材料眼刺激性实验的替代方法。     

加替沙星眼用凝胶中微生物检查法的建立

目的 完善加替沙星眼用凝胶微生物的限度检查方法.方法 采用滤纸过滤(除去辅料)加薄膜过滤(过滤过程中加2%硫酸锰溶液的中和剂)法,去除主药加替沙星的抗菌活性.结果 5株验证菌株中枯草芽孢杆菌对主药加替沙星最敏感,可作为加替沙星眼用凝胶微生物检查方法的质控菌株.结论 所建方法可检查出眼用凝胶中的细菌、控制菌、霉菌及酵母菌.