姜黄素对前列腺癌LNCaP细胞PSA生成及AR表达的影响

【目的】研究姜黄素对前列腺癌细胞株LNCaP细胞增殖的影响。【方法】化学发光法检测不同浓度的姜黄素处理前列腺癌细胞株LNCaP后前列腺特异抗原(PSA)含量,利用荧光素酶报告基因pGL-3构建含PSA基因5’侧启动子区640 bp DNA的荧光素酶表达载体pGL3-PSA,并将其转染LNCaP细胞,不同浓度姜黄素作用24 h后应用荧光素酶测定系统检测荧光素酶表达活性。用免疫印迹Western-blotting技术检测雄激素受体(AR)的表达。【结果】姜黄素抑制LNCaP细胞培基中PSA蛋白及含PSA启动子的荧光素酶活性的表达;形态学结果显示姜黄素可抑制前列腺癌细胞LNCaP的增殖;Western-blotting技术检测结果显示姜黄素抑制AR的表达,并且对AR表达的抑制程度依赖于姜黄素的浓度。【结论】姜黄素对PSA启动子的影响及PSA蛋白表达的抑制作用是通过抑制雄激素受体(AR)的表达实现的,姜黄素能够抑制前列腺癌细胞LNCaP的增殖。     

雄激素受体反义RNA抑制前列腺癌细胞LNCaP致瘤性的研究

目的　观察雄激素受体 (Androgenreceptor ,AR)反义RNA对前列腺癌细胞LNCaP致瘤性的影响。方法　分别用细胞平板克隆形成试验及裸鼠接种实验观察前列腺癌细胞LNCaP、LNCaPNeo和LNCaPas AR 细胞致瘤性的变化。结果　LNCaPas AR细胞的克隆形成效率显著低于LNCaPNeo细胞 (P <0 .0 1)。LNCaPas AR细胞在雄性裸鼠体内形成的瘤体体积明显小于LNCaPNeo细胞并且形成瘤体的时间延长。结论　雄激素受体反义RNA可抑制前列腺癌细胞LNCaP成瘤能力。     

RNAi沉默PSA基因对人前列腺癌细胞系LNCaP生长的影响

目的研究运用RNA干扰技术沉默PSA基因后对人前列腺癌细胞系LNCaP细胞产生的影响。方法构建针对PSA基因的小分子干扰RNA(PSA-siRNA),将前列腺癌LNCaP系进行分组,设PSA-siRNA转染组、阴性对照组、转染液组(只由转染试剂进行转染实验)和对照组(不添加任何转染试剂)进行实验。应用蛋白印迹法检测PSA的变化,并通过MTT法和流式细胞技术检测LNCaP细胞的调亡和细胞增殖方面的变化。结果蛋白印迹法检测结果显示,与阴性对照组、转染液和对照组比较,应用PSA-siRNA处理48h后的LNCaP细胞株,PSA的表达明显降低,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。MTT法和流式细胞仪检测示,转染组的细胞生长抑制率为27.5%,且观察到更强的细胞调亡(19.3%)。结论运用RNA干扰技术沉默PSA基因可以有效抑制LNCaP细胞中PSA基因的表达,进而抑制LNCaP细胞的生长与增殖,并可有效诱导细胞调亡。     

游离前列腺与总前列腺特异性抗原比值在前列腺癌诊断中的价值

目的 :探讨游离前列腺特异性抗原 ( FPSA)与总前列腺特异性抗原 ( TPSA)比值在鉴别前列腺癌 ( PC)和良性前列腺增生 ( BPH)中的作用。　 方法 :采用放射免疫法对 12例 PC和 30例 BPH患者的血清 FPSA和 TPSA进行测定。　 结果 :FPSA与 TPSA比值在 PC和 BPH中差异非常显著 ( P<0 .0 0 1) ,分别为 9.85%和 2 0 .12 %。当二者比值的界值 <0 .15时 ,其 PC诊断的敏感性 (取 PSA<4 ng/ ml为界值 )为 92 % ,特异性由 60 %提高至 80 %。　 结论 :二者比值 <0 .15时提高了 TPSA在 PC和 BPH中的鉴别诊断 ,可早期发现 PC     

Effects of blocking androgen receptor expression with specific hammerhead ribozyme on in vitro growth of prostate cancer cell line

Aseriesofstudieshaveindicatedthatandrogenreceptor(AR) playsakeyroleinthedevelopmentofprostatecancerbymediatingandrogenactivityontargetcells 1Ithasbeen proposedthatdecreasingandrogenandARlevelscouldbeaneffectivetherapeuticstrategyforprostatecancer 2 　InthisstudyaribozymeapproachtoselectivedegradationofARmRNAwasusedtoexploretheeffectsofblockingARexpressiononinvitrogrowthofhumanprostatecancercells METHODSRibozymedesignandsynthesisUsingtheMFOLDcomputerprogramanARspecificribozyme(RZ)was…     

野生型KLF6对前列腺癌LNCaP细胞的作用

目的:探讨野生型抑癌基因KLF6对前列腺癌LNCaP细胞的生长增殖、细胞周期和侵袭转移能力的影响及其可能的作用机制.方法:利用RT-PCR法克隆目的基因KLF6,并将含KLF6的pEGFP-C1质粒转染入LNCaP细胞.分为转染组和对照组分别进行MTT法观察LNCaP细胞的生长抑制率,流式细胞仪观察细胞周期比例变化和凋亡率,细胞爬片划痕法观察LNCaP细胞的侵袭转移能力变化.结果:转染了野生型抑癌基因KLF6的前列腺癌LNCaP细胞生长抑制率为(31.9±4.7)%,对照组为0%,差异有统计学意义(P＜0.01),细胞周期比例表现为G2/M期减少,G0/G1期比例增加为(75.0±8.8)%,对照组为(55.9±7.1)%,差异有统计学意义(P＜0.05),细胞凋亡峰为(29.3±3.7)% ,对照组为(8.6±0.9)%,差异有统计学意义(P＜0.01);每毫米划痕区内迁移入的细胞数为102.8±15.4,对照组为(192.7±25.2),差异有统计学意义(P＜0.05).结论:野生型抑癌基因KLF6的转染可以明显抑制前列腺癌LNCaP细胞的生长增殖,并诱导其调亡,使其侵袭转移能力下降,其机制可能与野生型抑癌基因KLF6部分地逆转LNCaP细胞的恶性表型有关.     

DAB2IP表达载体的构建及其对前列腺癌细胞LNCaP DNA合成及凋亡的影响

目的构建表达载体pEGFP-N1-DAB2IP,观察DAB2IP在前列腺癌细胞LNCaP中高表达后对细胞凋亡及DNA合成的影响。方法 PCR扩增DAB2IP基因全长,经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切后T4 DNA连接酶连接,DH5α转化,用酶切及测序签定来确定构建的质粒正确。用对照载体pEGFP-N1和pEGFP-N1-DAB2IP转染前列腺癌细胞LNCaP,荧光显微镜下观察转染效率,Western blot检测DAB2IP蛋白的表达,应用BrdU/PI掺入法检测DAB2IP对细胞DNA合成的影响,应用AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测两组细胞凋亡情况。结果 pEGFP-N1-DAB2IP表达载体经酶切和测序鉴定正确,并成功转染LNCaP细胞,Western blot显示转染后DAB2IP的蛋白表达水平明显升高。BrdU/PI掺入法检测:pEGFP-N1组BrdU+细胞比例:0.66±6%,pEGFP-N1-DAB2IP组BrdU+细胞比例:0.45±3%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),提示DAB2IP能抑制LNCaP细胞的DNA合成。细胞凋亡检测:pEGFP-N1组凋亡细胞比例:7.44±0.68%,pEGFP-N1-DAB2IP组:17.98±1.5%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),提示DAB2IP能诱导前列腺癌细胞LNCaP的凋亡。结论成功构建了表达载体pEGFP-N1-DAB2IP,并在前列腺癌细胞LNCaP中成功高表达DAB2IP,DAB2IP高表达后能抑制LNCaP DNA合成并诱导细胞的凋亡。     

Androgen receptor functioned as a suppressor in the prostate cancer cell line PC3 in vitro and in vivo

Background Prostate cancer is one of the most common urogenital tumors in the world with an increasing incidence in China. Androgen deprivation therapy is the major therapeutic option for advanced prostate cancer. However, the role of androgen receptor （AR） in hormone-refractory prostate cancer still remains unclear. This work aimed to investigate the role of AR in an androgen independent prostate cancer cell line by in vitro and in vivo studies.
Methods The role of AR in the proliferation and invasion/metastasis ability of PC3-AR9 （a PC3 stable clone expressing human AR driven by natural human AR promoter） were examined with M-IF assay, soft agar assay, chamber invasion assay, wound healing assay, and also with orthotopic xenograft mouse model. Results Restoring androgen receptor in PC3 cells resulted in decreased proliferation and invasion/metastasis ability in MTT, soft agar, chamber invasion and wound healing assay. In the mouse orthotopic xenograft model, PC3-AR9 resulted in smaller primary tumors and metastasis tumors, with a lower proliferation rate and higher apoptosis rate.
Conclusion The AR might function as a tumor suppressor in PC3 cells both in vitro and in vivo.     

PSA对社区老年男性前列腺癌筛查的临床意义和分析

目的：探讨应用血清前列腺特异性抗原（PSA）在社区50岁以上男性人群中行前列腺癌筛查的临床意义。方法：采用化学发光免疫分析技术检测自2008年7月-2009年7月广州市荔湾区逢源和彩虹两个社区3021名50岁以上的男性血清PsA。对于PSA≥14.0ng／mL前列腺癌可疑病例进行前列腺穿刺活检以确诊。结果：筛查中血清PSA≥4．0ng/mL者占7．0％（210／3021）,其中前列腺癌发现率6．0％（18／210）,且随着年龄的增加和血清PSA浓度的增加,前列腺癌发病增高。结论：用血清PSA在社区老年男性人群中筛查前列腺癌是可行的,可以早期发现前列腺癌,筛查可为这些患者提供有效的治疗机会。     

PSA?F/T值与PSAD在前列腺穿刺活检中诊断价值的探讨

目的:探讨前列腺特异抗原(PSA)、游离PSA/总PSA(F/T)比值及前列腺特异抗原密度(PSAD)在前列腺穿刺活检中的诊断价值。方法:选取2006年1月～2008年12月经直肠超声引导下前列腺穿刺活检患者285例,检测血清总PSA、游离PSA,计算F/T及PSAD,探讨穿刺诊断前列腺癌(PCa)最佳的PSA、F/T值与PSAD值。结果:以PSA>15ng/ml为临界值,PSA诊断前列腺癌的灵敏度为70.0%,特异度为68.5%,阳性预测值为58.6%;在PSA<15ng/ml区域,良性前列腺增生(BPH)组与PCa组间PSA差别无显著性(t=0.018,P>0.05),此时两组间F/T值及PSAD比较,差别均有显著统计学意义(t=4.137、3.158,P<0.01)。F/T值取0.16,PSAD取0.35ng/(ml·cm3)时,F/T值及PSAD诊断PCa的灵敏度、特异度、阳性预测值均较高。结论:PSA>15ng/ml时高度怀疑前列腺癌;在PSA<15ng/ml时联合应用F/T值和(或)PSAD可以明显提高前列腺癌的穿刺检出率。     

多西他赛对雄激素依赖型及非依赖亚型前列腺癌细胞中C-jun与雄激素受体相互作用的影响

目的研究C-jun和雄激素受体（AR)在多西他赛处理的前列腺癌LNCaP细胞及其非雄激素依赖亚型LNCaP-bic细胞中的
相互作用。方法采用多西紫杉醇处理雄激素依赖型LNCaP前列腺癌细胞及其亚型雄激素非依赖型LNCaP-bic细胞,采用荧光
素酶分析检测AR及AP-1基因的表达,利用Western blotting,免疫沉淀方法分析C-jun以及AR的蛋白表达和相互作用。结果
经多西他赛处理后,LNCaP-bic以及其父代LNCaP细胞AR和C-jun在基因表达水平均得到增强。Western blotting提示
LNCaP-bic细胞中C-jun的磷酸化水平高于LNCaP细胞,同时其PSA蛋白表达也更强。免疫沉淀结果提示多西他赛使
LNCaP-bic细胞株中的AR和C-jun有更高的相关作用。结论多西他赛可以激活AR非配体依赖的转录功能,AR和C-jun之间
的相互作用可能影响多西他赛对前列腺癌的化疗结果。
     

前列腺癌患者癌组织前列腺干细胞抗原、血清前列腺特异抗原检测

目的:探讨前列腺癌(PCa)组织中前列腺干细胞抗原(PSCA)的表达及与血清前列腺特异抗原(PSA)的关系.方法:采用免疫组织化学方法检测36例PCa组织、20例前列腺高分级上皮样内瘤样病变(HG-PIN)及20例良性前列腺增生(BPH)组织中PSCA的表达,术前ELISA法检测血清PSA水平.结果:BPH组织中无PSCA表达,HG-PIN、PCa组织中PSCA阳性率分别为70.0%(14/20)、80.6%(29/36),高于BPH组织(P＜0.05).高分化、中分化、低分化PCa组织中PSCA的阳性率分别为6/11、14/16、9/9,依次增高(P＜0.05).PSCA阳性率与PCa患者血清PSA水平无相关性(r=0.215,P＞0.05).结论:PSCA有可能是一种新的PCa肿瘤标志物.     

经直肠超声引导下前列腺穿刺活检结合血清PSA在诊断前列腺癌中的价值

目的 探讨经直肠超声(transrectal ultrasound,TRUS)引导下前列腺穿刺活检结合血清前列腺特异抗原(prostate specific antigen,PSA)在诊断前列腺癌(prostate cancer,PCA)中的临床意义.方法 经直肠超声检查联合超声引导下穿刺病理证实的前列腺癌患者62例,病例来源于2005年1月至2014年8月在本院超声诊断科检查的3 874例前列腺疾病门诊患者,年龄(68.5±13.5)岁,分析前列腺癌经直肠超声图像特征分型及其PSA值的分布情况.结果 前列腺癌的经直肠超声图像特征可分为隐匿型、结节型、弥漫浸润型及弥漫浸润伴结节型,且弥漫浸润型和弥漫浸润伴结节型各自与前两种(隐匿型和结节型)之间的PSA值差异有统计学意义(P＜0.01),而隐匿型和结节型之间以及弥漫浸润型和弥漫浸润伴结节型组别之间的PSA值差异无统计学意义(P＞0.05).结论 血清PSA值结合TRUS引导下前列腺穿刺活检,对于前列腺癌(尤其是隐匿性和弥漫浸润型前列腺癌)具有重要诊断价值.     

原花青素对前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究原花青素对人雄激素依赖性前列腺癌细胞株LNCaP细胞增殖和凋亡的影响.方法 体外培养的LNCaP细胞株与100、200、300 μg/ml的原花青素共孵育,分别在24、48和72 h时观察细胞形态学变化,MTT检测细胞增殖抑制率,流式细胞术分析细胞凋亡情况.结果 原花青素可引起LNCaP细胞形态较明显改变.不同浓度(100、200、300 μg/ml)原花青素对LNCaP细胞作用的细胞增殖抑制率分别为27.1%、72.1%和86.4%.流式细胞术检测表明原花青素可诱导LNCaP细胞凋亡,300μg/ml原花青素处理72 h引起36.5%的凋亡率.这3种作用均随原花青素浓度和作用时间的延长而增强.结论 原花青素可在体外抑制前列腺癌LNCaP细胞增殖,并促进其凋亡.     

雄激素受体调控基因组表达与去势抵抗性前列腺癌关系探索

目的 探索雄激素受体调控基因与前列腺癌发生去势抵抗的关系.方法 选取80例经病理检查和临床资料证实并采用内分泌治疗的前列腺癌患者,随访获取发生去势抵抗时间,定量即时聚合酶链锁反应(qRT-PCR)检测确诊时穿刺标本的六个雄激素受体调控基因KLK3(PSA),PMEPA1,NKX3.1,ODC1,AMD1和ERG表达并分...     

miRNAs表达在前列腺癌中的研究进展

前列腺癌(PCa)是男性泌尿系最常见的恶性肿瘤之一,微小RNA (miRNA)是一类长度约为22个核苷酸,研究发现miRNA与PCa的发生和发展密切相关,多种miRNA在PCa中表达异常.本文通过近5年miRNA在PCa中的异常表达以及与雄激素相关性进行综述,并阐述miRNA在PCa诊断及疗效判断中的应用前景.     

雄激素对大鼠前列腺不同分叶雄激素受体及其mRNA表达的影响

目的 探讨雄激素对大鼠前列腺腹叶及侧叶1(Lateral lobe part1，LP1)、侧叶2(Lateral lobe part2，LP2)、雄激素(Androgen receptor，AR)及AR mRNA表达的影响。方法 选用健康成年雄性Wistar大鼠，随机分成以下3组：正常对照组(N组)；雄激素去势组(C组，共56只)：经阴囊手术切除双侧睾丸，制成雄激素去势动物模型，再分成去势后1d(C1)、3d(C3)、7d(C7)及14d(C14)四个时相点；雄激素替代组(T组，共28只)：双侧睾丸切除后14d，丙酸睾丸酮0．5ml(2．5mg/只)皮下注射，1次／d，分成雄激素替代后1d(T1，14只)，7d(T7，14只)两个时相点。应用免疫组织化学及半定量PCR方法分别检测大鼠前列腺121及LP2 AR、AR mRNA的表达。结果鼠前列腺腹叶、LP1及LP2对雄激素调节的敏感性不同，在腹叶及LP1，雄激素与AR表达呈正相调节关系，雄激素去势后，AR表达下调，AR mRNA呈一过性上调；而在LP2，情形与前者明显不同，雄激素去势后，AR mRNA表达持续上调，而对AR表达无明显影响。结论 鼠前列腺不同分叶对雄激素调节敏感性与其AR表达的调节方式不同有关。     

RNA干扰沉默雄激素受体基因对前列腺癌细胞生长的抑制作用研究

目的设计、合成针对雄激素受体(AR)基因的具有高干扰效率的si RNA,观察其对前列腺癌细胞的生长抑制作用。方法设计、合成多个针对AR的si RNA,转染前列腺癌细胞LNCaP,筛选出对AR基因干扰效率最高的ARsi RNA,用RT-PCR检测AR mRNA水平,并计算细胞生长抑制率。结果采用Silencer si RNA Construction Kit成功合成了ARsi RNA,转染LN-CaP细胞,筛选出一个对其生长抑制作用最强的si RNA,并证实AR mRNA水平显著下降,LNCaP细胞的生长抑制率为78.2%。结论针对雄激素受体的si RNA可沉默雄激素受体基因,并抑制前列腺癌细胞的生长。     

血清PSA水平在前列腺穿刺患者中的临床意义

目的 探讨血清前列腺特异性抗原(PSA)在前列腺穿刺患者中的临床价值.方法 收集该院2013年1月至2014年12月361例行前列腺穿刺患者的血清PSA检测、穿刺病理检查及全身骨显像等资料,依据不同血清PSA水平将其分为A组(PSA≤4.0 ng/mL)、B组(4.0 ng/mL＜PSA≤10.0 ng/mL)、C组(10 ng/mL＜PSA≤20 ng/mL)、D组(PSA＞20.0 ng/mL),比较各组前列腺穿刺阳性率,以及不同PSA水平前列腺穿刺阳性患者的骨转移发生率.结果 A、B、C、D4组患者前列腺穿刺阳性率分别为9.09％、9.84％、26.21％、74.73％,其中A、B组前列腺穿刺阳性率与D组比较,B组与C组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).在B组中,游离态PSA/总PSA比值(F/T)≤0.16与F/T＞0.16的患者穿刺阳性率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).前列腺穿刺阳性患者中,PSA＞ 20 ng/mL者骨转移发生率高于PSA≤20 ng/mL者,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 血清PSA水平越高,前列腺穿刺阳性率越高;初诊前列腺癌患者血清PSA＞20 ng/mL建议行全身骨显像检查.     

前列腺特异抗原(PSA)在晚期前列腺癌诊治中的作用

目的：研究前列腺特异抗原在晚期前列腺癌诊治中的作用。方法：分析11例晚期前列腺癌,包括肿瘤分期,PSA水平,转移部位与诊断方法,抗雄激素治疗反应,缓退瘤撤除反应。结果：PSA随临床分期增高而升高,它可以反映肿瘤对治疗的反应,结论：PSA作为瘤标对晚期前列腺癌有意义,它可指导调整治疗方案,值得临床应用。