异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的临床特征及耐药分析

目的 分析异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌(hVISA)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床特征以及对常用抗菌药物的耐药情况,为临床用药以及控制MRSA和hVISA感染提供依据。方法 采用VITEK-2 Compact全自动细菌鉴定和药敏分析仪对临床分离的263株金黄色葡萄球菌进行药敏分析,MRSA菌株的鉴定根据CLSI规则进行;分别采用2、3和4μg/ml的万古霉素脑心浸液琼脂平皿(BHIA2V、BHIA3V和BHIA4V)对263株金黄色葡萄球菌进行筛选,对筛选阳性的菌株用菌群分析-曲线下面积法(PAP/AUC法)进行确认;回顾性分析263名感染金黄色葡萄球菌患者的临床资料。结果 263株金黄色葡萄球菌中hVISA共22株,检出率为8.4%;MRSA共60株,检出率为22.8%。临床资料显示：与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌组(MSSA组)和万古霉素敏感金黄色葡萄球菌组(VSSA组)相比,MRSA组和hVISA组在不同性别、年龄和科室中的检出均无统计学意义(P>0.05),在不同来源标本中的检出有统计学意义(P<0.05),且都是在血液标本中检出率最高。药敏结果显示...     

异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌的筛选和生物被膜形成能力的研究

目的 调查笔者医院异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌(hVISA)的分离率,并探索hVISA菌株的生物被膜形成能力。方法 收集临床139例MRSA菌株,采用浓度为5mg/L的替考拉宁脑心浸液琼脂平皿(BHIA5T)进行hVISA筛选,应用改良菌群分析-曲线下面积(PAP-AUC)法进行确证,报告笔者医院hVISA的发生率。用刚果红琼脂和结晶紫染色法检测hVISA的生物被膜形成能力,微量肉汤稀释法和K-B纸片法检测生物被膜中细菌对抗生素的敏感度。结果 经过PAP-AUC方法检测,从139株MRSA中确定1例为hVISA阳性,hVISA的分离率为0.72%。分离出来的hVISA菌株可以形成生物被膜,hVISA菌株的最低抑制生物被膜浓度(MBIC)明显升高,K-B法检测显示它对利奈唑胺和替加环素敏感。同时,研究发现低浓度的万古霉素可能对生物被膜的形成有促进作用。结论 笔者医院hVISA的发生率虽然不高,但此菌株可以形成生物被膜,形成生物被膜后细菌对万古霉素敏感度降低,需要引起临床的高度重视,此时可尝试换用利奈唑胺或替加环素。     

头孢西丁纸片法检测MRSA的评价

目的评价头孢西丁纸片法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的方法。方法采用头孢西丁纸片法（30μg/片）和苯唑西林纸片法（1.0μg/片）检测MRSA,以苯唑西林琼脂平板筛选法为参考方法。结果用苯唑西林琼脂平板筛选法检测的98株金黄色葡萄球菌,其中MRSA有72株,用头孢西丁纸片法筛选MRSA敏感性为100%,特异性为100%,苯唑西林纸片法检测MRSA敏感性为94.4%,特异性为96.2%。结论头孢西丁纸片法与苯唑西林琼脂平板筛选法一样,是检测MRSA的可靠方法。     

异质性万古霉素中介的金黄色葡萄球菌的分子特征

摘要：目的了解我院异质性万古霉素中介的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分布及分子学特征。方法对2015年10月至2016年5月我院临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,采用菌群分析策略-曲线下面积法(PAP-AUC)筛选异质性万古霉素中介的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌;采用多重PCR法对hVISA进行agr、spa、SCC基因分型测定,对PCR产物进行测序确定spa分型。结果分离的79株MRSA经筛选获得9株h VISA;9株hVISA中有7株为agr-Ⅰ型,2株为agr-Ⅲ型;有6种spa克隆型,包括t437(4株),t114(1株)、t2310(1株)、t14062(1株)、t030(1株)、t16472(1株)。SCCmec分型以Ⅳa型为主,占55.56%,其次为Ⅲ型33.33%、Ⅱ型11.11%。结论我院hVISA检出率为11.39%,呈多克隆流行。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌医院内感染及其监测

对本院1989年10月～1990年10月临床分离的142株金黄色葡萄球菌(简称金葡茵),用4％NaCl M-H琼脂和苯唑青霉素纸片检测耐甲氧西林金葡菌(MRSA),分离率为79.6％(113/142),取材于呼吸、烧伤、血液病房的菌株中,MRSA的分离率分别高达92.0％(23/25)、84.6％(11/13)和83.3％(30/36)。MRSA医院内感染株占79.6％(99/113)。所有金葡菌对青霉素、氨苄西林耐药,对万古霉素敏感。MRSA     

半纤维素酶水解物木糖醇发酵酵母菌的筛选

对 7株酵母菌通过商品木糖培养基摇瓶初筛 ,选出热带假丝酵母 (Candidatropicalis )AY 91 0 0 9作为出发菌株进行驯化培养 ,结合木糖平板筛选出一株优良的木糖醇生产菌C .tropicalisLH - 0 81 ,并用其进行了玉米芯半纤维素酶水解物发酵制备木糖醇的初步试验。 2 5 0mL摇瓶发酵结果表明 ,当水解物中还原糖浓度为 1 5 .2 4 g/L ,装料量为 1 0 0mL ,初始 pH值5 .4 ,(2 8± 1 )℃培养 72h木糖醇浓度 2 .1 9g/L ,还原糖利用率 2 8.7% ,转化率 0 .5 0 g/g ;木糖转化率 0 .75 g/g ,达到理论转化率的 83.3%。     

外科术后168株感染菌的菌种分布和药敏分析

目的：了解外科术后感染菌的菌种分布和药敏情况。为外科临床合理使用抗菌药物提供参考。方法：从151份外科术后感染标本中分离出168株菌株（其中17株为复数菌感染）进行鉴定和药敏试验;结果：168株术后感染菌株中,革兰阳性菌（G^ c)57株。占33.9%(57/168）,检出率较高的是金黄色葡萄球菌,凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）和肠球菌属,对20种抗菌药物敏感试验提示,葡萄球菌属对万古霉素呈高度敏感耐药率为0%,肠球菌属对万古霉素耐药率为12%,革兰阴性杆菌（G^-b)99株,占59%（99/168）,检出率较高的是大肠埃希菌,肠杆菌属,克雷伯菌属,铜绿假单胞菌,嗜麦芽窄食单胞菌和不动杆菌属,对24种抗菌药物敏感试验提示,亚胺硫霉素耐药率较低为10%-25%（嗜麦芽窄食单胞菌除外）,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的检出率分别为70%和85%,分离出2株耐万古霉素的肠球菌（VRE）,占肠球菌检出率12%;产超广谱-β内酰胺酶（ESBLS）大肠埃希菌和克雷伯菌检出率分别为65%和44%;真菌2株,占1.2%(2/168);厌氧菌10株,占5.9%(10/168)。结论：外科术后感染菌株以G^-b为主,各种菌株耐药情况较为严重,抗菌药物可供选择范围极小,应引起外科临床的高度重视,合理使用抗菌药物。     

从实验室角度谈耐万古霉素的金黄色葡萄球菌和耐万古霉素的肠球菌

我国是一个耐苯唑西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）菌株发生率极高, 而耐万古霉素的肠球菌（VRE）菌株发生率很低的国家.万古霉素和替考拉宁保持了对MRSA和VRE很高的活性,国内也还没有见到耐万古霉素的金黄色葡萄球菌（金葡菌）分离株的报道.但是了解国内外葡萄球菌中耐万古霉素的金葡菌（VRSA）和肠球菌的VRE耐药流行动态是很有必要的.……     

万古霉素单用及联合用药对MRSA 耐药性的影响

目的 培养耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的临床分离菌株,比较万古霉素单用与联合其他抗生素对MRSA 的影响。方法 采用琼脂平板倍比稀释法配置肉汤培养基,培养1×1010 CFU/ml 浓度的细菌,测定上述抗菌药物单用及联合使用对10 株MRSA 临床分离株的防耐药突变浓度（MPC）,并计算相应的选择指数（SI）和耐药频率。结果 万古霉素单独用药组中,对MRSA 的SI 为16 ～ 64 ;万古霉素与利福平联合应用时,SI 为2 ～ 6 ;万古霉素与磷霉素联合应用时,SI 为1 ～ 8 ;并且耐药频率也呈下降趋势。结论 万古霉素分别与利福平、磷霉素联合使用,可降低其单用的MPC,缩小耐药突变选择窗,防止耐药突变菌的产生。     

单克隆抗体标志乳胶凝集试验快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的探讨快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的实验方法。方法目标菌株采用SlidexMRSA Detection乳胶快速检测金黄色葡萄球菌(SA)菌株青霉素结合蛋白2 a(PBP2 a),确认MR-SA;设立SA耐苯唑西林筛选试验对照,两组不符合菌株经PCR方法检测M ecA基因确认。结果Sli-dexMRSA Detection乳胶快速检测247株SA的PBP2 a,阳性93株(37.65%);247株SA经苯唑西林筛选试验及PCR测定M ecA基因确定MRSA102株(41.30%),93株PBP2 a阳性菌株都为MRSA;PBP2 a阴性耐苯唑西林22株中,经PCR法检测M ceA基因,9株确认为MRSA,13株为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)。乳胶凝集法快速检测SA的PBP2 a确定MRSA,敏感性91.2%,特异性100%,阳性预测值为1,阴性预测值0.94。结论单克隆抗体乳胶凝集法快速检测鉴定MRSA具有较高敏感性和特异性。     

Heterogeneous vancomycin-intermediate among methicillin resistant Staphylococcus aureus

Background

Hetero-resistance vancomycin intermediate Staphylococcus aureus (hVISA) is phenotype, which on in-vitro susceptibility test is vancomycin susceptible (VSSA) but has a minority population of vancomycin intermediate (VISA). hVISA is responsible for vancomycin treatment failure. Population Analysis Profile- Area under Curve (PAP-AUC) is a test for detection of hVISA; however, this test is unsuitable for clinical microbiology laboratory. Tests, such as Brain Heart Infusion Agar with 6 μg/ml vancomycin (BHIA6V), E test and Macromethod E Test (MET) are available; however reported to have variable results.

Methods

58 clinical isolates of Methicillin resistant S aureus (MRSA) having MIC of vancomycin more than 1 μg/ml by E test and agar dilution were analyzed by PAP-AUC, BHIA6V and MET.

Result

The prevalence of hVISA was 6.9%. hVISA isolates were having vancomycin E test MIC >2 μg/ml. Sensitivity of BHIA6V, MET and E test with MIC >2 μg/ml were 0.75, 0.67 and 1.0 respectively; however, positive predictive values (PPV) were 0.43, 0.4 and 0.27 respectively with PAP-AUC. PAP-AUC ratio correlated with MIC by E test and MET.

Conclusions

There is need for screening MRSA isolates showing in-vitro vancomycin susceptibility ≤2 μg/ml by agar dilution method for detection of hVISA. PAP-AUC test is unsuitable for routine laboratory testing. BHIA6V, MET and E test can be used for screening, however have low PPV.     

穿心莲内酯对金黄色葡萄球菌生物膜的体外抑制作用

目的：研究穿心莲内酯对金黄色葡萄球菌生物膜的体外抑制作用。方法从临床分离30株金黄色葡萄球菌,通过刚果红平板法筛选生物膜阳性菌株和结晶紫染色法半定量检测生物膜;以万古霉素为阳性对照药,微量肉汤二倍稀释法测定抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）和药物对细菌生物膜的最小抑膜浓度（SMIC）;XTT减低法评价穿心莲内酯对不同时间段金黄色葡萄球菌生物膜的早期黏附能力的影响。结果30株金黄色葡萄球菌中,刚果红平板法生物膜阳性菌株有12株,即生物膜形成率为40％,结晶紫染色法半定量生物膜实验阳性有22株（73.3％）;穿心莲内酯对金黄色葡萄球菌生物膜的SMIC50为125 mg／L,SMIC80为500 mg／L;1000、500和250 mg／L的穿心莲内酯对金黄色葡萄球菌生物膜的早期黏附能力均有较强的抑制作用。结论一定浓度的穿心莲内酯对金黄色葡萄球菌生物膜的形成和黏附有抑制作用,但效果不及万古霉素。     

176株金黄色葡萄球菌感染的临床分布及耐药性分析

目的：了解医院近3年金黄色葡萄球菌感染分布及耐药情况。方法：对176株临床分离的标本分布和科室分布情况进行调查,用纸片扩散法进行药敏试验并对结果进行分析。结果：176株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）125株,占71.0%,MRSA对青霉素G100%耐药,对万古霉素、替考拉宁、利奈唑烷100%敏感,对氯霉素耐药率为18.4%,复方新诺明为12.8%,对大环内酯类、氨基糖苷类、克林霉素等抗菌药物耐药率均较大（77.6-94.4%）,且存在多重耐药,MR-SA耐药率显著高于MSSA。结论：金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物显示多重耐药,特别对于MRSA应有针对性加强监测与控制,根据药敏试验合理换用相应抗菌药物以减缓VISA、VRSA的出现。     

老年人下呼吸道感染细菌谱及抗生素耐药性监测

目的探讨老年人下呼吸道感染细菌谱及致病菌株对抗生素的耐药性.方法采用微量肉汤稀释法及双纸片法测定了154株致病菌对20种抗生素的敏感性,并进行耐甲氧西林葡萄球菌和产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)研究.结果革兰阳性菌34株,以凝固酶阴性葡萄球菌(50%)和金黄色葡萄球菌(26%)多见,万古霉素、利福平为最敏感.其中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率占59%,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为(67%),对青霉素、苯唑青霉素的耐药率,对万古霉素的敏感性均为100%.革兰阴性菌120株,克雷伯菌属(29%)和大肠埃希氏菌(18%)常见,亚胺硫霉素、阿米卡星和头孢他啶的抗菌活性最强,覆盖率广.17株产ESBLs主要为克雷伯菌(58%)和大肠埃希氏菌(29%).结论老年人下呼吸道感染的常见致病菌中MRSA,MRCNS和产ESBLs的比例很高.开展细菌药物敏感性监测,以强调临床合理使用抗生素.     

临床常见葡萄球菌的分布特征及耐药性分析

目的 了解常见葡萄球菌的分布特征及耐药情况,为临床合理用药提供依据。方法 采集临床可疑感染患者的标本,进行细菌分离培养和鉴定常规培养分离细菌,应用全自动细菌分析仪鉴定细菌,常规药敏试验采用K-B纸片法。结果 2011-01～2013-12共分离出葡萄球菌864株,分离率居前三位的是:金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和缓慢葡萄球菌,主要来源于痰液和分泌物,分离率较高的科室为ICU和神经外科。三年间耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌MRCNS检出率分别为62.1%、63.6%、62.7%和37.9%、42.7%、39.6%。金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌对多种抗生素耐药,未检出耐万古霉素菌株。结论 葡萄球菌感染最多的是金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌,主要来源于痰液和分泌物。MRSA的检出率三年内趋于平稳,对多数抗生素呈现耐药,但对万古霉素敏感。     

血流感染患者金黄色葡萄球菌的临床分布及耐药性分析

目的分析自2006年1月—2011年8月血流感染患者的金黄色葡萄球菌的临床分布及其耐药性特点,为临床药物治疗提供依据。方法对血流感染病原菌金黄色葡萄球菌应用VITEK-2 Compact全自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定和药物敏感试验。结果 2006年1月—2011年8月共分离出血流感染病原菌金黄色葡萄球菌90株,主要分布于感染科、肾科、ICU、血液科等。对青霉素G、红霉素、庆大霉素的耐药率分别为93.3%、65.6%、42.2%,莫西沙星、利福平的耐药率低于20%,对万古霉素、利奈唑胺、替加环素、替考拉宁、呋喃妥因的敏感率为100.0%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)药敏结果显示,MRSA对多种抗生素的耐药率明显高于MSSA。结论导致血流感染的金黄色葡萄球菌对青霉素G、红霉素、庆大霉素的耐药率最高,其中MR-SA多表现为多药耐药,在临床治疗过程中应结合药敏结果合理选择抗菌药物,以提高治疗效果,同时延缓细菌耐药性的产生。     

我院细菌耐药性监测与抗菌药物敏感性分析

目的：了解该院细菌对抗菌药物的敏感性,指导临床抗菌药物合理应用。方法监测该院2012年临床分离菌株的耐药性,以美国临床和实验室标准协会（ CLSI）推荐的纸片扩散法测定其抗菌药物敏感性,用WHONET5.3软件分析结果。结果按照监测方案,共获得780株细菌对抗菌药物敏感性结果,其中革兰阳性菌239株,占30.6％;革兰阴性菌541株,占69.4％。除绿脓杆菌外,所有革兰阴性杆菌对碳青霉烯类药物敏感率均在85.7％以上,哌拉西林他唑巴坦79.6％以上;所有葡萄球菌对万古霉素100.0％敏感,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ MRSA）检出率为51.1％,MRSA对氯霉素的敏感率为80.0％,对其他药物均较耐药;屎肠球菌和粪肠球菌对万古霉素和利奈唑胺最敏感（96.6％,100.0％;100.0％,100.0％）。结论肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、肠杆菌属对碳青霉烯类敏感率较高,但铜绿假单胞菌对其耐药率较高。葡萄球菌属对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁敏感率均较高。     

耐甲氧西林葡萄球菌药性分析

耐甲氧西林葡萄球菌是引起医院内感染的重要致病菌。为了解该菌的耐药情况，进而为临床预防与治疗提供依据，我们对不葡萄球菌进行了耐甲氧西林及耐其它１４种常用抗生素和产β－内酰胺酶的测定。结果：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出率为５６％，耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌检出率为４７．６％；耐甲氧西林敏感葡萄球菌对１４种常用抗生素的耐药性及多重耐性均高于甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌；产β－内酰胺酶最高的是耐甲氧西     

医院感染的金黄色葡萄球菌耐药性与耐药基因检测

目的研究医院感染的金黄色葡萄球菌的耐药性与耐药基因状况,指导临床合理用药。方法对本院感染标本分离出的120例金黄色葡萄球菌（SAU）进行药敏试验,多重PCR法检测aph（2＂）、aph（3）’Ⅲ、ant（4’,4）＂、TEM、tetM、macA、erm和qacA/B基因。结果 120株SAU中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）有71株,占59.1%;甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）有49株（40.9%）。MSSA对15种抗生素制药率超过50%的只有6种,而MRSA对15种抗生素耐药率超过50%的12种;经8种基因进行检测,MRSA与MSSA对8种耐药基因携带率各不相同,MRSA高于MSSA。结论医院感染的金黄色葡萄球菌对抗菌药物有很高的耐药性,MRSA较MSSA的耐药性更高、更复杂,必须加强金黄色葡萄球菌的耐药性监控,以最大限度降低其耐药性的发生。