针灸对环磷酰胺化疗小鼠骨髓细胞Notch信号通路差异基因蛋白表达的影响

目的:通过观察针灸对环磷酰胺(CTX)化疗小鼠骨髓细胞notch信号通路中差异基因蛋白表达的影响,探讨针灸改善化疗后小鼠骨髓抑制的分子生物学机制。方法:选用雄性昆明种清洁小鼠40只,体质量(18±2)g,自由喂养3 d后,随机分为空白组、模型组、针刺组、艾灸组,每组10只,检查基础白细胞计数后,将两极小鼠剔除,每组仅保留8只用于实验的小鼠。针刺组、艾灸组、模型组按照100 mg/(kg·d)用药量腹腔注射环磷酰胺注射液,空白组小鼠按体质量0.02 mL/g的用药量注射生理盐水,连续3 d,第3天造模4 h后模型成功,按照小鼠造模的顺序进行治疗。针刺组和艾灸组选取"大椎""膈俞""肾俞""足三里"分别进行针刺和艾灸,1次/d,连续5 d;空白组、模型组只抓取、固定,不治疗。第6天小鼠脱颈处死,在干冰上取一侧的肱骨和股骨,剔净骨头后,用生理盐水冲洗,在75%乙醇中浸泡2 min后,再用生理盐水冲洗,并立即放入-80℃低温冰箱保存,运用Western-blot法检测。结果:针刺和艾灸可使CTX小鼠外周血白细胞提前一天回升并提前一天达到正常水平;治疗5 d后,针刺组、艾灸组与模型组比,jag1、notch2蛋白含量下降(P0.05),numb2蛋白含量升高(P0.05),numb1蛋白量变化虽无显著性差异(P0.05),但有升高趋势,针刺组与艾灸组相比无显著性差异(P0.05)。结论:针刺和艾灸增加numb蛋白的含量、降低notch蛋白的含量,抑制过度激活的notch信号通路,应该是针灸减轻骨髓抑制、保护造血功能、增加外周血白细胞的重要机制之一。     

针灸对CTX荷瘤小鼠骨髓细胞DNA修复基因MGMTmRNA POLβmRNA表达的调控研究

目的:观察针灸对环磷酰胺(CTX)造模的荷瘤小鼠骨髓细胞DNA修复基因MGMTmRNA、POLβmRNA表达的影响。方法:将雄性清洁级昆明种小鼠植种S180肉瘤,分为荷瘤空白组、荷瘤模型组、荷瘤针刺组、荷瘤艾灸组,其中荷瘤模型组、荷瘤针刺组、荷瘤艾灸组腹腔注射CTX,制备CTX荷瘤小鼠模型。荷瘤针刺组、荷瘤艾灸组分别采用针刺、艾灸治疗,荷瘤空白组、荷瘤模型组每日陪同抓取、固定,不做任何治疗。各组分别于1～6天用Real-time PCR法检测骨髓细胞DNA修复基因MGMTmRNA、POLβmRNA的动态表达情况。结果:烷化剂CTX致使荷瘤小鼠骨髓细胞损伤,荷瘤模型组DNA修复基因MGMTmRNA、POLβmRNA增高,针刺和艾灸可以进一步上调CTX荷瘤小鼠骨髓细胞DNA修复基因MGMTmRNA、POLβmRNA的表达,加速骨髓细胞DNA损伤的直接快速修复和剪基切除修复,从而对抗烷化剂CTX造成的不良反应,减轻骨髓抑制。结论:促进受损骨髓细胞DNA修复基因MGMTmRNA、POLβmRNA的表达,是针灸改善化疗后骨髓抑制、保护造血功能,提升白细胞的关键机制之一。     

针灸对骨髓抑制小鼠DNA修复基因XPD蛋白表达的影响

目的通过测定针刺和艾灸前后,骨髓抑制小鼠DNA修复基因XPD蛋白表达量的改变,探讨针灸减轻骨髓抑制、增加外周血白细胞的分子生物学机制。方法取清洁级、雄性昆明种小鼠224只,分成正常组、模型组、针刺组、艾灸组。模型组、针刺组、艾灸组的小鼠腹腔注射环磷酰胺(CTX),造成CTX骨髓抑制小鼠模型,正常组小鼠腹腔注入等量的0.9%氯化钠溶液。针刺组、艾灸组分别进行针刺、艾灸,正常组、模型组陪同固定,不治疗。各组均在2~6d用免疫组化染色法(Elivison二步法)、Western Blot法检测和分析骨髓细胞XPD蛋白表达量的变化。结果针灸可以通过上调CTX模型小鼠骨髓细胞中XPD的蛋白表达,促进骨髓细胞受损DNA的核苷酸切除修复,减轻因CTX化疗引起的骨髓抑制。结论上调受损骨髓细胞DNA修复基因XPD的表达,促进细胞受损DNA核苷酸切除修复,是针灸减轻骨髓抑制、保护造血功能、增加外周血白细胞的重要机制之一。     

针灸对CTX小鼠骨髓细胞DNA切除修复相关蛋白的调节

目的:探讨针灸改善骨髓抑制,促进白细胞升高的分子生物学机制.方法:选用清洁级、雄性昆明种小鼠224只,随机分为正常组、模型组、针刺组、艾灸组,每组56只.用环磷酰胺(CTX)造成骨髓抑制模型.针刺组、艾灸组选取"大椎""膈俞""肾俞""足三里",分别进行针刺、艾灸,正常组、模型组每日与针刺组和艾灸组同时抓取、固定,不做任何治疗.各组分别于第2～7天用免疫组化法观察骨髓细胞DNA聚合酶β(pol β)、切除修复交叉互补基因(XPD)表达的动态变化.结果:针刺和艾灸可以明显上调CTX模型小鼠骨髓细胞DNA修复蛋白XPD、pol β的表达,促进骨髓细胞DNA损伤的碱基切除修复和核苷酸切除修复,从而减轻烷化剂CTX造成的骨髓抑制,增加白细胞.结论:促进骨髓细胞DNA的切除修复,保护造血细胞因化学药物引起的细胞损伤,是针灸改善化疗后骨髓抑制,保护造血功能,提升白细胞的重要机制之一.     

针灸对环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠骨髓细胞周期调节蛋白Cyclin D1表达及细胞周期的动态影响

目的 探讨针灸抗化疗毒副反应,改善骨髓抑制、提高外周血白细胞数量的分子生物学机制。     

针灸对CTX荷瘤小鼠骨髓细胞DNA切除修复蛋白POLβ的影响

目的以荷瘤小鼠为研究对象,通过观察针灸干预后荷瘤小鼠骨髓细胞DNA切除修复蛋白DNA聚合酶β(POLβ)的表达、蛋白量以及mRNA转录情况,探讨针灸改善荷瘤小鼠骨髓抑制新的分子生物学机制,为临床针灸治疗恶性肿瘤患者化疗所致骨髓抑制提供实验室依据。方法选取清洁级、雄性昆明种小鼠210只,自由饮食喂养3 d后左腋下植瘤。接种7天后,挑选体重(22±2)g、瘤体直径0.8cm左右的小鼠192只,随机分为荷瘤模型组,荷瘤针刺组,荷瘤艾灸组各48只;1次性腹腔注射环磷酰胺150mg/kg造成骨髓抑制模型。荷瘤空白组小鼠腹腔注入同体积生理盐水。荷瘤针刺组、荷瘤艾灸组选取大椎、膈俞、肾俞、足三里,分别进行针刺、艾灸,荷瘤空白组、荷瘤模型组每日陪同抓取固定,不作任何治疗。各组分别于2~6d用免疫组化法、Western Blot法、Real-time PCR法观察荷瘤小鼠骨髓细胞DNA聚合酶β(POLβ)表达的动态变化。结果针刺和艾灸可以明显上调环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)化疗所致荷瘤小鼠骨髓细胞DNA修复蛋白polβ的表达含量,促进荷瘤小鼠骨髓细胞DNA损伤的碱基切除修复,进而减轻因CTX化疗所致的骨髓抑制。结论通过针刺和艾灸干预后,提高了荷瘤小鼠骨髓细胞DNA的碱基切除修复能力,保护因化疗引起的骨髓造血细胞损伤,是针灸改善荷瘤小鼠化疗所致骨髓抑制,保护骨髓造血功能的重要机制之一。选用荷瘤小鼠,目的是使荷瘤小鼠体质更接近临床肿瘤患者,可为肿瘤临床提供新的实验室治疗思路和依据。     

四物汤对环磷酰胺所致小鼠贫血的影响

目的：探讨四物汤抑制环磷酰胺(CY)所致小鼠贫血的作用机制。方法：用CY腹腔注射建立小鼠贫血模型．同时给小鼠灌服四物汤，采用骨髓细胞培养测定小鼠骨髓干细胞增殖能力、ELISA方法检测小鼠血清促红细胞生成素(EPO)的含量。结果：四物汤能明显促进骨髓干细胞的增殖和升高血清EPO的含量。结论：四物汤能明显抑制环磷酰胺所致的小鼠贫血，其作用机制可能是通过减轻CY对骨髓的抑制、促进红系细胞生长，并促进肾脏合成EPO而实现的。     

麦粒灸对骨髓抑制小鼠骨髓细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的：观察麦粒灸“大椎”“足三里”“三阴交”对骨髓抑制小鼠骨髓细胞Wnt/β-连环蛋白（β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响,探讨麦粒灸治疗骨髓抑制的可能机制。方法：将45只SPF级雄性CD1(ICR)小鼠随机分为空白组、模型组和麦粒灸组,每组15只。采用腹腔注射环磷酰胺（CTX,80 mg/kg）制备骨髓抑制模型。麦粒灸组于“大椎”“足三里”“三阴交”行麦粒灸治疗,每穴3壮,每壮约30 s,每日1次,连续7 d。检测小鼠造模前、干预前及干预3、5、7 d后白细胞计数（WBC）。干预后,观察小鼠一般情况;检测小鼠骨髓有核细胞计数;采用ELISA法检测小鼠血清白细胞介素-3(IL-3)、白细胞介素-6(IL-6)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）的含量;采用Western blot法和实时荧光定量PCR法检测小鼠骨髓细胞β-catenin、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、增殖调控蛋白（C-Myc）蛋白及mRNA表达。结果：与空白组比较,模型组小鼠反应迟钝、步态不稳、体重减轻,WBC、骨髓有核细胞计数及血清IL-3、IL-6、GM-CSF含量减少（P<0....     

DS-1226对环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的保护作用

目的:探讨DS-1226胶囊对环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的影响.方法:将小鼠随机分为5组,正常对照组、模型组、DS-1226 3个剂量组(37.5、75、150mg·kg-1·d-1).模型组、DS-1226组腹腔注射环磷酰胺(200mg·kg-1)造模,同时DS-1226组给予不同剂量的DS-1226灌胃,对照组、模型组给予蒸馏水灌胃,共8d.检测小鼠的一般状况、外周血象、骨髓有核细胞、骨髓结构、胸腺指数及淋巴细胞转化率.结果:DS-1226能改善骨髓抑制小鼠的一般状况,升高外周血象和骨髓有核细胞数量,促进骨髓腔内造血组织的增生,提高胸腺指数及淋巴细胞转化率.结论:DS-1226具有改善环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的作用,其机制可能与增强免疫功能,促进造血功能恢复有关.     

DS-1226对环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的保护作用

目的：探讨DS-1226胶囊对环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的影响。方法：将小鼠随机分为5组,正常对照组、模型组、DS-1226 3个剂量组（37.5、75、150mg·kg-1·d-1）。模型组、DS-1226组腹腔注射环磷酰胺（200mg·kg-1）造模,同时DS-1226组给予不同剂量的DS-1226灌胃,对照组、模型组给予蒸馏水灌胃,共8d。检测小鼠的一般状况、外周血象、骨髓有核细胞、骨髓结构、胸腺指数及淋巴细胞转化率。结果：DS-1226能改善骨髓抑制小鼠的一般状况,升高外周血象和骨髓有核细胞数量,促进骨髓腔内造血组织的增生,提高胸腺指数及淋巴细胞转化率。结论：DS-1226具有改善环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的作用,其机制可能与增强免疫功能,促进造血功能恢复有关。     

养血升白方对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制及免疫抑制的研究

目的探讨中药复方养血升白方对环磷酰胺诱导的骨髓抑制及免疫抑制小鼠的作用及其机理。方法将小鼠随机分为5组：正常对照组、模型对照组、养血升白方小剂量组、中剂量组和大剂量组。模型组、中药组腹腔注射环磷酰胺造模,同时中药组给予不同剂量养血升白方灌胃,对照组、模型组给予生理盐水灌胃,共10天。检测小鼠外周血象、骨髓CD3＋4细胞在骨髓有核细胞中的比例、自然杀伤（NK）细胞活性以及免疫器官指数的变化。结果养血升白方3个剂量均可升高小鼠外周血象、提高骨髓CD3＋4细胞在骨髓有核细胞中的比例、增强NK细胞活性、增加脾、胸腺指数,与模型组比较均有显著性差异（P〈0.05或P〈0.01）。结论养血升白方具有改善小鼠骨髓抑制、增强小鼠免疫功能的作用。     

原花青素对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制的预防及保护作用

目的:研究原花青素对环磷酰胺引起小鼠骨髓抑制及毒性是否具有保护作用。方法:将ICR小鼠随机分为5组,空白对照组、模型组、原花青素组(高、中、低剂量),每组16只。GPC组按相应剂量隔天一次喂养3周,空白对照组给予等量生理盐水,3周后除空白对照组外均给予环磷酰胺100mg·kg-1,连续3天造模,空白对照组给予等体积生理盐水,GPC组继续按原剂量给药,于造模结束后第l、7日停药采外周血检测血常规;取胸腺和脾称重,计算胸腺指数、脾指数;提取骨髓计算骨髓有核细胞计数;并制作骨髓组织病理切片。从实验造模前一天开始,每天称量小鼠体重。结果:模型组小鼠外周血细胞数、骨髓有核细胞计数、胸腺指数、脾脏指数明显减少,而原花青素中高剂量组外周血象、胸腺、脾脏指数显著提高,且明显改善骨髓组织形态变化。结论:原花青素对环磷酰胺诱导的骨髓抑制等毒性具有保护作用。     

针灸“足三里”对环磷酰胺小鼠超氧化物歧化酶的影响

针灸“足三里”对环磷酰胺小鼠超氧化物歧化酶的影响孙亦农，尚明华，卞慧敏（南京中医药大学，２１００２９）主题词超氧化物歧化酶类／针灸效应；穴．足三里；环磷酰胺超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）是清除超氧阴离子、保护细胞、保持机体氧化与抗氧化平衡的重要物质。在所有...     

哈萨克斯坦植物抑制DNA聚合酶的活性成分

探讨了中亚哈萨克斯坦的传统药用植物玄参科准噶尔毛蕊花(Verbascum songaricum)提取物对DNA聚合酶的抑制活性,并对其活性成分进行了鉴定。 结果:用乙酸乙酯回流提取准噶尔毛蕊花的根茎(干重78g),再用热甲醇回流提取得提取物     

针灸对环磷酰胺小鼠骨髓细胞DNA核苷酸切除修复基因ERCC1和RRM1的影响

目的通过观察针灸对环磷酰胺(CTX)化疗后小鼠骨髓中切除修复交叉互补基因1(ERCC1)以及核糖核苷酸还原酶1(RRM1)的调节作用,探讨针灸改善化疗后小鼠骨髓抑制的分子生物学机制。方法选取清洁级雄性(KM)小鼠40只,随机分为空白组、模型组、针刺组、艾灸组,每组10只。针刺组、艾灸组选取"大椎"、"膈俞"、"肾俞"和"足三里"分别进行针刺、艾灸治疗,每天1次,连续治疗5天,空白组、模型组每日陪同固定,不做任何治疗。各组小鼠于第6天取股骨ELISA法检测骨髓中ERCCI和RRMI的含量。结果针刺和艾灸可以明显上调CTX模型小鼠骨髓细胞DNA修复基因的表达,促进骨髓细胞DNA损伤的核苷酸切除修复,从而减轻CTX造成的骨髓抑制。结论针灸可以促进骨髓细胞DNA的核苷酸切除修复的能力,保护因化疗引起的骨髓造血细胞损伤,应该是针灸改善小鼠化疗所致骨髓抑制,保护骨髓造血功能的重要机制之一。     

针灸对荷瘤小鼠环磷酰胺化疗后白细胞及骨髓有核细胞总数的影响

荷瘤小鼠一次性腹腔注射大剂量环磷酰胺致骨髓造血细胞，外周白血细胞总数显著降低。每日１次艾烃灸大椎、膈俞可使化疗后的白细胞总数回升时相提前，针刺足三里，三阴交亦心作用。升白机理与促进骨髓造血干细胞的分裂增殖有关。     

五子衍宗方对环磷酰胺致小鼠DNA损伤的影响

目的观察五子衍宗方对环磷酰胺(CTX)致小鼠DNA损伤的影响,并探讨其作用机制。方法将BalB/c小鼠随机分为正常组、模型组、五子衍宗方低剂量组、五子衍宗方高剂量组。五子衍宗方低、高剂量组预给药1周后,除正常组外,其余各组腹腔注射CTX 100 mg/kg造模,隔日1次,共3次,同时五子衍宗方低、高剂量组继续给药,末次给予CTX后12 h处死小鼠,分离血清,ELISA检测血清中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的含量,应用单细胞凝胶电泳技术检测骨髓细胞DNA损伤。结果五子衍宗方低、高剂量组能够降低血清中8-OHdG的含量,使小鼠骨髓细胞彗星图像的Olive尾矩、尾距、尾长和尾部DNA含量降低。结论五子衍宗方对CTX致小鼠DNA损伤具有较好的保护作用。     

055苯乙醇苷对哺乳动物DNA聚合酶的作用

应用一种灵敏的检测DNA聚合酶反应的方法，从源自哈萨克斯坦的准葛尔毛蕊花(Verbascum songaricum)的甲醇提取物中，筛选出2个具有抑制哺乳动物DNA聚合酶活性的已知的苯乙醇苷类的单体。     

地榆升白片对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制的拮抗作用

目的:观察地榆升白片对环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的保护作用.方法:Balb/C小鼠24只随机分为空白对照组、模型组、地榆升白片组.腹腔注射环磷酰胺100 mg· kg-1建立骨髓抑制模型,地榆升白片组按100 mg·kg-1灌胃,给药10d.观察地榆升白片对模型小鼠外周血象、骨髓有核细胞数、骨髓中DNA含量的影响,流式细胞术检测骨髓中各时相细胞周期百分比.结果:模型组小鼠外周血白细胞数、血小板数、骨髓有核细胞数以及骨髓中DNA含量显著降低(P＜0.05或P＜0.01);骨髓细胞周期中G0/G1期细胞百分比显著增高,G2/M期细胞百分比显著降低(P＜0.05或P＜0.01).地榆升白片可以显著增加模型小鼠外周血白细胞数、骨髓有核细胞数及骨髓中DNA含量,恢复骨髓中各期细胞百分比(P＜0.05或P＜0.01).结论:地榆升白片对环磷酰胺致骨髓抑制有显著的改善和恢复作用.     

环磷酰胺诱导的小鼠骨髓抑制模型及中药对其防治作用机制研究进展

化疗后骨髓抑制容易导致患者发生感染或出血,严重影响患者治疗、预后和生命质量,甚至危及生命,给患者及家属带来很大痛苦。中医药防治化疗导致骨髓抑制越来越受到重视。随着骨髓抑制动物模型的建立、应用和成熟,中药防治化疗导致骨髓抑制机制的研究也取得许多进展,显出中药治疗的优势和前景。