pH梯度洗脱高速逆流色谱制备性分离决明子中的橙黄决明素和大黄酸

目的 建立一种从决明子提取物中分离特征性成分橙黄决明素的高效制备性分离方法。方法 采用高速逆流色谱技术,针对目的化合物选择合适的两相溶剂体系,水相为流动相并采用pH梯度洗脱。结果 采用制备性高速逆流色谱技术一次性从150 mg决明子提取物中分离得到了28 mg橙黄决明素以及30 mg大黄酸,其纯度分别为98.7%和95.5%。结论 采用pH梯度洗脱的方法能快速的分离得到中草药中的蒽醌类化合物。     

决明子中橙黄决明素的提取、分离及纯化方法的研究

目的研究决明子中橙黄决明素的提取、分离、纯化工艺,为橙黄决明素的开发及生产提供参考数据。方法以橙黄决明素含量为指标,采用正交试验法考察提取时间、提取次数、乙醇浓度及用量对橙黄决明素提取率的影响,再采用硅胶柱层析方法,选择适当洗脱系统分离决明子中橙黄决明素,丙酮反复多次重结晶以获得纯度较高橙黄决明素。结果最佳提取工艺为:决明子用6倍量90%乙醇回流提取2次,1 h.次-1;柱层析法[石油醚(60~90℃)-丙酮=(9∶1)]及丙酮重结晶后得到的橙黄决明素纯度可>99%。结论乙醇浓度对决明子中橙黄决明素提取率有显著影响,分离纯化方法操作简单、实用性强、成本低、可推广应用。     

短叶决明子的化学成分研究

摘 要 目的：研究豆科决明属植物短叶决明子的化学成分。 方法: 采用柱色谱、薄层色谱以及重结晶分离纯化短叶决明子的醇提物,并通过理化鉴别与波谱解析进行结构鉴定。 结果: 从短叶决明子分离得到7个化合物,经鉴定为1 去甲甲基钝叶决明素（Ⅰ）、橙钝叶决明素（Ⅱ）、芦荟大黄素（Ⅲ）、钝叶决明素（Ⅳ）、甲基钝叶决明素（Ⅴ）、美决明子素（Ⅵ）、橙黄决明素（Ⅶ）。 结论:所有化合物均为首次从短叶决明子中分离得到。     

浅析决明子降血脂的有效成分

目的 简要分析决明子降血脂的有效成分.方法 将决明子研成粗粉,按系统溶剂提取法制取决明子正丁醇提取物.将决明子的正丁醇提取物上AB-8大孔吸附树脂,依次通过水、20%乙醇、80%乙醇洗脱,得到80%乙醇洗脱物.然后将洗脱物分别经过硅胶柱和氯仿-甲醇梯度洗脱,分段收集.然后将分段收集液经过硅胶柱层析(石油醚一丙酮梯度洗脱)、Spehadex LH-20柱层析(甲醇一水梯度洗脱)、C18柱层析(甲醇一水梯度洗脱)得到六种化合物.最后通过运用低密度脂蛋白受体(LDLR)报告基因模型对六种化合物的有效成分进行分析.结果 化合物Ⅱ能明显增强荧光素酶的活性,说明其能明显增强低密度脂蛋白的基因表达,从而有效的降低血脂含量.结论 化合物Ⅱ(橙黄决明素)为决明子降血脂的有效成分.     

高速逆流色谱分离纯化远志中3,6′-二芥子酰基蔗糖酯和远志蔗糖酯A

目的研究制备型高速逆流色谱从远志中分离纯化3,6′-二芥子酰基蔗糖酯和远志蔗糖酯A。方法采用分析型高速逆流色谱摸索制备型高速逆流色谱的分离条件。根据化合物的光谱数据,鉴定结构。结果选择乙酸乙酯-正丁醇-水（4：1：5,v/v/v）为制备型高速逆流色谱分离的溶剂系统,从400mg远志样品中得到3,6′-二芥子酰基蔗糖酯和远志蔗糖酯A分别为24.6mg和45.2mg,HPLC检测纯度分别为93%和95%。结论本法简单快速,为远志及同属植物中糖酯类化合物的制备提供了一种新的分离方法 。     

ASE-HPLC法快速测定决明子中大黄酚和橙黄决明素

摘 要 目的：建立快速溶剂萃取（ASE）及HPLC测定决明子中大黄酚和橙黄决明素的分析方法。方法: 利用正交试验对ASE350快速溶剂萃取系统进行提取方法的研究,采用HPLC法同时测定决明子中大黄酚和橙黄决明素的含量。色谱柱为ACE Excel C18 PFP柱(75 mm×2.1 mm,2.5 μm),流动相为乙腈 0.1%磷酸溶液梯度洗脱,流速为0.4 ml·min^-1,检测波长为284 nm,柱温为40℃。结果: 采用甲醇为萃取溶剂、萃取温度为120℃、静态萃取时间为5 min以及循环萃取3次的方法最优,可以很好地提取决明子中大黄酚和橙黄决明素,耗时仅为药典提取方法的1/9。大黄酚和橙黄决明素线性范围为0.73~58.57 μg·ml^-1(r=0.999 7)和1.09~87.29 μg·ml^-1（r=0.999 6),平均回收率分别为102.7%（RSD=0.8%）和98.2%（RSD=1.5%）。 结论:该方法能简便、快速、准确的测定决明子中的大黄酚和橙黄决明素。     

决明子化学成分的分离与鉴定

目的:对决明子的化学成分进行研究。方法:采用微波辐射苯-H2SO4浸提法和硅胶柱色谱分离纯化决明子,根据理化性质和波谱数据鉴定其结构。结果:从决明子的苯-H2SO4提取物中共分离鉴定出8种化合物,分别为大黄酸(1)、美决明子素(2)、美决明子素甲醚(3)、芦荟大黄素(4)、大黄素(5)、橙黄决明素(6)、大黄酚(7)和大黄素甲醚(8)。其中化合物1是首次从该植物中分离得到。结论:本方法简单、快速,可为决明子的进一步研究提供一定依据。     

基于HPLC多指标成分定量控制联合化学计量学的山菊降压胶囊质量评价研究

目的建立山菊降压胶囊中多指标成分高效液相色谱测定方法,并联合化学计量学方法对其进行综合质量评价。方法以Eclipse Plus C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,乙腈–0.1%磷酸为流动相进行梯度洗脱;检测波长分别为340 nm(0～22 min检测牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷和牡荆素)、284 nm(22～41 min检测橙黄决明素、黄决明素和美决明子素)和208 nm(41～75 min检测泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B);柱温30℃;体积流量0.9 mL/min;进样量10μL。采用SPSS 26.0统计软件对10批山菊降压胶囊含量测定结果进行主成分分析和聚类分析。结果 9种成分牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、橙黄决明素、黄决明素、美决明子素、泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B线性范围良好,平均加样回收率96.90%～100.02%,RSD值均小于2.0%;聚类分析和主成分分析结果一致,10批山菊降压胶囊聚为2类,主成分1～3是影响山菊降压胶囊质量评价的主要因子。结论所建立的HPLC法可用于山菊降压胶囊中9种指标成分牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、橙黄决明素、黄决明素、美决明子素、泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B的定量控制和综合质量评价。     

决明子降血脂有效成分探讨

目的探讨决明子降血脂有效成分。方法研磨决明子为粉末状,通过系统溶剂提取法将决明子正丁醇提取出。使用树脂大孔吸附决明子正丁醇提取物中的AB-8成分,并使用80%乙醇洗脱、20%乙醇和水获得80%的乙醇洗脱物,再行氯仿-甲醇和硅胶柱梯度洗脱,并分段收集六种化合物,最后对六种化合物中的降脂成分进行分析。结果化合物Ⅱ有助于荧光素酶活性的快速提高,这一结果显示,决明子有助于低密度脂蛋白基因表达能力的提高,进而获得较为满意的血脂控制效果。讨论由本次研究结果可见,橙黄决明素(化合物Ⅱ)是决明子中控制患者血脂水平的主要有效成分,     

UPLC法测定决明子中4种蒽醌类成分的含量

目的：利用UPLC法同时测定决明子中4种蒽醌类成分的含量,优化决明子中蒽醌类化合物含量测定的供试液制备方法。方法：采用Waters Acquity UPLC BEHC18（150 mm × 2.1 mm,1.7 μm）色谱柱;以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.2 mL·min-1,检测波长为284nm。通过单因素试验优化供试品溶液的制备方法。采用本方法和《中国药典》方法对21批决明子进行了含量测定,并作了比较。结果：决明子中橙黄决明素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚4种成分线性关系良好,精密度、稳定性、重复性的RSD值均小于2.0%,平均加样回收率为99.1%～105.7%。结论：所建立的UPLC方法有效、快速、简便,重现性好,可作为决明子质量控制的方法。     

胶束电动毛细管色谱法测定头孢克肟的含量

目的建立测定头孢克肟含量的胶束电动毛细管色谱方法。方法采用非涂渍石英毛细管51cm×75μm;运行缓冲液为含100mmol·L^-1十二烷基硫酸钠的磷酸盐缓冲液（70mmol·L^-1,pH7.0）;压力进样5s,分离电压15kV,柱温25℃,检测波长254nm,选择乙酰苯胺为内标。结果头孢克肟在6.08～777.98μg·mL^-1内,线性关系良好（r=0.9993）。头孢克肟的最低检测限为1.03μg·mL^-1,最低定量限为3.43μg·mL^-1;含量测定结果与HPLC所得结果没有显著性差异。结论胶束电动毛细管色谱法分析头孢克肟的含量,方法准确、简便、灵敏,与HPLC具有互补性。     

高速逆流色谱法从多花蒿中分离制备阿格拉宾

目的 采用高速逆流色谱法分离制备多花蒿中阿格拉宾.方法 多花蒿乙醇提取物经硅胶柱色谱分离,所得组份Fr.1用高速逆流色谱进一步分离,采用正己烷-醋酸乙酯-甲醇-水(1.2∶0.8∶1.5∶0.5)为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,主机转速850 r/min,体积流量2.0 mL/min,检测波长为254 nm.采用波谱法对所得化合物进行结构鉴定,HPLC法测定产品的纯度.结果 从500 mg组分Fr.1中得到260 mg质量分数为99.5％的阿格拉宾.结论 该方法操作简单,可用于阿格拉宾化学对照品的分离制备.     

高速逆流色谱法从棉花花提取物中分离制备异槲皮素

目的 应用高速逆流色谱法分离制备异槲皮素.方法 对棉花花提取物用高速逆流色谱法一步分离纯化,以醋酸乙酯-水(1∶1)为两相溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,主机转速为800 r/min,体积流量2.0 mL/min,检测波长254 nm,采用波谱法对所得化合物进行结构鉴定,薄层色谱、高效液相色谱法测定产品的纯度.结果 在该条件下经一步分离可得到质量分数为99％的异槲皮素对照品.结论 该方法操作简便,适合于从棉花花提取物中分离制备异槲皮素对照品.     

采用高速逆流色谱法快速制备枳壳中高纯度柚皮苷和新橙皮苷的研究

目的 建立一种从枳壳中快速分离制备高纯度柚皮苷和新橙皮苷的方法.方法 以高速逆流色谱（High-speed counter-current chromatography,HSCCC）对枳壳大孔吸附树脂纯化物进行分离纯化,以乙酸乙酯∶正丁醇∶水（2：1：3）为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,流速2.0ml/min,主机转速800r/min,检测波长280 nm.结果 按此分离条件经一步洗脱从500 mg枳壳粗提物中得到210 mg和122 mg纯度高于99%的柚皮苷和新橙皮苷.结论 该法操作简便、产品纯度高、适合于大规模制备.     

高速逆流色谱法分离小花黄堇中延胡索乙素和原阿片碱

目的高速逆流色谱法分离纯化小花黄堇中延胡索乙素和原阿片碱。方法采用高速逆流色谱法进行分离,以正已烷．乙酸乙酯．甲醇．水（8：8：12：8,V／V）为溶剂系统．上相为固定相,下相为流动相,转速：800r·min一,流速：2mL·min－1,检测波长：280nm。结果从小花黄蔓总生物碱提取物中分离得到延胡索乙素和原阿片碱。纯度分别可达99．2％和99．6％。结论利用高速逆流色谱法可高效分离和纯化小花黄堇中延胡索乙素和原阿片碱。     

乌拉立肽的纯化工艺优化

本研究采用制备高效液相色谱法,对含有较多结构相似的多肽混合物的乌拉立肽粗品进行二步纯化。通过单因素试验与响应面法优化一步纯化工艺,结果表明,使用Daiso-SP-ODS(30 nm,10μm)填料,在70 mmol/L磷酸二氢铵水溶液,pH 4.0和柱温30℃条件下,一步纯化后样品纯度98.65%,收率70%。再经过转盐二步纯化后,产品纯度由文献中的98%提高至99.91%,总收率由29%提高至56%。该二步纯化工艺可为多肽分离纯化方法的建立提供参考。     

Preparative Separation of Main Ustilaginoidins from Rice False Smut Balls by High-Speed Counter-Current Chromatography

Ustilaginoidins are bis-naphtho-γ-pyrone mycotoxins isolated from the rice false smut balls (FSBs) infected by the pathogen Villosiclava virens in rice spikelets on panicles. In order to obtain large amounts of pure ustilaginoidins to further evaluate their biological activities and functions, phytotoxicity on rice, security to human and animals as well as to accelerate their applications as pharmaceuticals, preparative high-speed counter-current chromatography (HSCCC) was successfully applied to the isolation and purification of seven bis-naphtho-γ-pyrone mycotoxins, namely ustilaginoidins A (1), G (2), B (3), H (4), I (5), C (6), and J (7) from the ethyl acetate crude extract of rice FSBs. Both 1 and 2 were prepared by HSCCC from the low-polarity fraction of the crude extract using the two-phase solvent system composed of n-hexane-ethyl acetate-methanol-water at the volume ratio of 6.5:3.5:5.0:5.0. Similarly, 3, 4 and 5 were prepared from the medium-polarity fraction using the system at the volume ratio of 4.0:5.0:5.0:6.0, and 6 and 7 were prepared from the higher-polarity fraction using the system at volume ratio of 3.0:5.0:4.0:6.7. A total of 6.2 mg of 1, 5.1 mg of 2, 3.9 mg of 3, 1.2 mg of 4, 5.7 mg of 5, 3.5 mg of 6, and 6.1 mg of 7 with purities of 88%, 82%, 91%, 80%, 92%, 81% and 83%, respectively, were yielded from total 62 mg fraction samples in three independent HSCCC runs. The structures of the purified ustilaginoidins were characterized by means of physicochemical and spectrometric analysis.     

高速逆流色谱法分离纯化长春花中长春新碱

目的采用高速逆流色谱(HSCCC)分离纯化长春花中长春新碱,建立相关工艺条件,为工业生产提供参考数据。方法采用高速逆流色谱仪,氯仿-甲醇-0.3mol.L-1 HCl(4∶3∶2)溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,流动相流速为2.0mL.min-1,紫外检测波长为280nm,主机转速为800r.min-1,恒温循环温度为28℃。结果 HPLC检测HSCCC纯化后长春新碱质量分数为79.7%。结论高速逆流色谱纯化长春花中长春新碱容量大、分离纯度和效率高,避免了有机溶剂的大量使用,适用于工业生产高纯度产品。     

On-line purity monitoring in high-speed counter-current chromatography: application of HSCCC-HPLC-DAD for the preparation of 5-HMF, neomangiferin and mangiferin from Anemarrhena asphodeloides Bunge

An efficient on-line purity monitoring strategy based on on-line coupling of high-speed counter-current chromatography (HSCCC) with high-performance liquid chromatography-diode array detection (HPLC-DAD) was successfully applied for the first time to the isolation and purification of 5-hydroxymethyl-furancarboxaldehyde (5-HMF), mangiferin and neomangiferin from the Chinese medicinal plant Anemarrhena asphodeloides Bunge, a plant used in the traditional Chinese medicine. The introduction of on-line purity monitoring in HSCCC has greatly improved the efficiency of this technique by overcoming the drawbacks of post-purification sample handling in HSCCC isolation. The effluent from the outlet of HSCCC was split into two parts, and one was collected, while the other was introduced directly through a switch valve into a HPLC-DAD system for purity monitoring. Using this method the desired fractions with high purities could be collected. From 600 mg partially purified extract, 165.6 mg neomangiferin and 292.8 mg mangiferin with purities of 98.9 and 99.5%, respectively, were obtained with a two-phase solvent system composed of n-butanol-water (1:1, v/v) by increasing the flow-rate of the mobile phase stepwise from 1.0 to 2.2 ml min(-1) after 210 min. A 17.1mg 5-HMF with purity of 96.6% was also isolated for the first time.