辛伐他汀对人脐静脉内皮细胞血管细胞粘附分子表达的影响

观察辛伐他汀对人脐静脉内皮细胞血管细胞粘附分子1和细胞间粘附分子1表达的影响。采用免疫细胞化学及Westem blot蛋白印迹方法，观察促炎症因子肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β对体外培养的人脐静脉内皮细胞中血管细胞粘附分子1和细胞间粘附分子1表达的影响，并以辛伐他汀干预，观察其对上述作用的影响。结果发现，肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β明显增加人脐静脉内皮细胞中血管细胞粘附分子1和细胞间粘附分子1的表达，辛伐他汀可一定程度抑制上述作用。结果提示，辛伐他汀一定程度抑制促炎症因子刺激导致的细胞粘附分子表达上调，可能具有增加粥样斑块稳定性和延缓动脉粥样硬化进程的作用。     

PD-L1和PD-L2在支气管哮喘中的研究进展

支气管哮喘(哮喘)是一种伴随气道高反应性、可逆性气流阻塞、气道重塑的慢性气道炎症性疾病。许多研究表明,程序性死亡蛋白1(PD-1)与其配体程序性死亡配体1(PD-L1)和PD-L2之间的相互作用在T细胞激活、耐受和免疫介导的组织损伤中发挥关键作用。但PD-1与其配体PD-L1和PD-L2在哮喘气道高反应性和气道炎症发展...     

辛伐他汀对人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子表达的影响

采用逆转录聚合酶链反应和Western Blot方法，观察促炎症因子肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β对体外培养人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子及其受体表达的影响，并以辛伐他汀干预，观察其对上述过程的影响。结果发现，肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β显著促进人脐静脉内皮细胞中血管内皮生长因子及其受体的表达，在不同水平辛伐他汀对促炎症因子的上述作用具有一定的抑制效应，由此推断辛伐他汀可能具有一定的抗炎症反应及抗动脉粥样硬化的作用。     

血管紧张素Ⅱ对人脐静脉内皮细胞单核细胞趋化因子-1表达的影响

目的　探讨血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )对人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)分泌单核细胞趋化因子 1(MCP 1)的影响。方法　用RT PCR和ELISA方法检测AngⅡ在不用时间和浓度以及氯沙坦干预后对HUVECs分泌MCP 1的影响。结果　AngⅡ显著刺激HUVECs表达MCP 1,MCP 1mRNA分别在AngⅡ的浓度为 1× 10 - 7mol/L和刺激 4h时表达最强烈 ;而MCP 1蛋白质分泌随刺激时间延长而增加 ;氯沙坦干预则明显减低MCP 1的表达。结论　AngⅡ可强烈刺激HUVECs表达MCP 1,氯沙坦可拮抗该作用     

PD-1/PD-L通路对乙型肝炎病毒感染结局的影响

程序性死亡因子-1(programmed death 1,PD-1)是可以表达在T淋巴细胞膜表面的负向协同刺激分子受体,他与PD-1配体(programmeddeath 1 ligand,PD-L)形成通路后,可以减弱T淋巴细胞免疫反应,甚至导致T淋巴细胞功能衰竭.近来研究表明PD-I/PD-L通路的形成可以影响HBV...     

他汀类药对人脐静脐内皮细胞细胞间黏附分子—1表达的影响

目的　观察氟伐他汀 (Flu)和辛伐他汀 (Sim)对肿瘤坏死因子 (TNF)α诱导的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)细胞间黏附分子 (ICAM) 1表达的影响 ,探讨他汀类药物可能的非调脂抗动脉粥样硬化作用。方法　体外培养HUVEC ,加TNFα (10 0U/ml)及 1× 10 -8～ 1× 10 -5mol/L浓度Flu或Sim ,共孵育 6、12和 2 4h ,采用细胞ELISA、流式细胞技术和逆转录 聚合酶链反应测定ICAM 1蛋白及mRNA水平表达。结果　Flu和Sim皆对TNFα诱导的ICAM 1蛋白表达及ICAM 1mRNA表达有抑制作用 ,呈浓度依赖性和时间依赖性特征。结论　Flu和Sim抑制TNFα诱导的HUVECICAM 1表达 ,可能对阻止血单核细胞向血管内皮细胞募集和黏附、延缓动脉粥样硬化的发生和发展有一定作用。     

奇智方对人脐静脉内皮细胞ICAM-1和ICAM-1 mRNA表达的影响

目的采用人脐静脉内皮细胞（HUVEC-304）进行细胞间黏附分子-1（ICAM-1）及其转录水平（ICAM-1mRNA）表达的离体实验研究,观察奇智方对血管内皮功能的作用。方法应用ELISA方法检测ICAM-1;用原位杂交的方法检测ICAM-1 mRNA。结果中药治疗组和阳性对照组与生理盐水组比较,ICAM-1蛋白分子表达均有统计学意义（P〈0．01）;中药治疗组和阳性对照组均能明显使缺氧／复氧后细胞ICAM-1 mRNA下调,与缺氧组比较有统计学意义（P〈0．01）。结论奇智方抑制缺氧／复氧后血管内皮细胞表达ICAM-1和ICAM-1 mRNA,从而保护血管内皮细胞的屏障完整和功能正常,可能是其免疫抑制机理的分子基础之一。     

PD-1/PD-L1免疫检查点抑制剂治疗胰腺癌研究进展

肿瘤免疫治疗已成为当前肿瘤治疗领域的研究热点,其中程序性死亡受体1(PD-1)/程序性死亡受体配体1(PD-L1)通路抑制剂已在多种类型肿瘤的临床治疗中展现疗效。本文就PD-1/PD-L1抑制剂在胰腺癌治疗中的热点问题进行综述。     

二至和肝方对肝郁肾虚型慢性乙型肝炎患者PD-1/PD-L1表达的影响

目的:观察二至和肝方联合恩替卡韦治疗肝郁肾虚型慢性乙型肝炎患者外周血中CD4⁺ T细胞表面程序性死亡受体1(PD-1)/程序性死亡配体1(PD-L1)表达水平的影响。方法:将59例慢性乙型肝炎患者随机分为两组,观察组患者29例,予以二至和肝方+恩替卡韦片治疗;对照组患者30例,单用恩替卡韦片治疗。两组患者分别于治疗前、治疗24周、治疗48周后检查外周血丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乙型肝炎病毒(HBV)标志物、HBV DNA和CD4⁺ T细胞表面PD-1/PD-L1表达水平。结果:治疗24、48周时两组患者外周血CD4⁺ T细胞表面PD-1/PD-L1表达水平均较本组基线值显著下调(P<0.01)。两组患者治疗前、治疗后24周CD4⁺ T细胞表面PD-1/PD-L1表达水平无明显差异(P>0.05);治疗48周后观察组患者CD4⁺ T细胞表面PD-1/PD-L1表达水平较对照组下降明显(P<0.05)。在治疗24、48周时,观察组患者HBV DNA转阴率显著高于...     

硒对人脐静脉内皮细胞ECV-304单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的 观察硒对人脐静脉内皮细胞ECV-304单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响方法分别用高葡萄糖、糖基化终末产物，高胰岛素和过氧化氢孵育人脐静脉内皮细胞ECV-304；在先加入100nmol／L硒后，再给予以上4种因素．分别检测人脐静脉内皮细胞ECV0304MCP-1mRNA的表达并比较。结果 4种因素均可作为独立因素，导致人脐静脉内皮细胞ECV304MCP-1mRNA表达量增加：硒能抑制4种因素所致的MCP-1mRNA表达。结论 硒抑制MCP-1 mRNA在人脐静脉内皮细胞ECV-304中的表达。     

ERK1/2信号通路在内皮微粒诱导人脐静脉内皮细胞ICAM-1表达中的作用

目的:探讨细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）信号通路在内皮微粒（EMPs）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）表达细胞间黏附分子-1（ICAM-1）中的作用。方法:体外培养HUVECs,选取生长良好的第4～5代细胞,分为EMPs不同浓度作用组、EMPs不同时间作用组及ERKl/2特异性抑制剂组。应用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测ICAM-1和磷酸化ERK1/2蛋白的表达。用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测ICAM-1 mRNA的表达。结果:EMPs作用HUVECs后,ICAM-1 mRNA和其蛋白以及磷酸化ERK1/2蛋白的表达显著高于对照组,且呈浓度和时间依赖性的关系（均P<0.01）;而ERKl/2特异性抑制剂PD98059对ICAM-1 mRNA和其蛋白以及磷酸化ERK1/2蛋白的表达,均有明显的抑制作用（均P<0.01）。结论:EMPs可诱导HUVECs中ICAM-1表达,其机制可能与激活ERK1/2信号通路有关。     

青藤碱对肿瘤坏死因子-α诱导人脐静脉内皮细胞VCAM-1表达影响初步研究

目的 进一步研究青藤碱(SIN)对肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管细胞黏附分子(VCAM)-1表达的影响.方法 从新鲜脐带中分离培养HUVECs.用TNF-α诱导HUVECs表达VCAM-1,实验组加入不同浓度的SIN(0.25、0.0和1.0 mol/L)或地塞米松(1.0×106mol/L)分别进行或联合进行干预,用流式细胞仪检测细胞表面VCAM-1表达.结果 与TNF-α刺激组相比,SIN干预组细胞表面VCAM-1表达下降,抑制作用以1.0 mol/L最为显著.联合地塞米松(1.0x106 mol/L)进行干预,可加强SIN对TNF-α诱导的VCAM-1表达的抑制作用.结论 SIN可抑制TNF-α诱导的脐静脉内皮细胞VCAM-1的表达.青藤碱与地塞米松对TNF-α诱导的VCAM-1表达的抑制有协同作用.     

原花青素对培养的人脐静脉内皮细胞脂质过氧化的保护作用

目的观察原花青素对活性氧引起的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)脂质过氧化损伤的影响。方法用含100g/L小牛血清的DMEM培养液体外培养HUVECs,用不同浓度的过氧化氢(H2O2)作为外源性活性氧作用于HUVECs,应用3H-胸腺嘧啶脱氧核苷掺入和细胞周期时相测定等方法观察给予不同浓度的原花青素预处理对H2O2作用后的HUVECs增殖活性的影响。结果 H2O2对HUVECs的增殖活性具有浓度依赖性抑制作用。原花青素可以浓度依赖性抑制H2O2诱导的HUVECs脂质过氧化损伤。结论原花青素可以抑制H2O2诱导的内皮细胞脂质过氧化,对于冠脉介入治疗术后再狭窄的防治可能具有应用前景。     

缺氧条件下血管活性因子对血管内皮细胞中血管内皮生长因子表达的影响

目的　探讨在缺氧条件下人脐静脉血管内皮细胞血管内皮生长因子 (VEGF)表达及缩血管活性物质内皮素 ,舒血管活性物质NO和NO抑制剂LNNA对VEGF基因表达的影响。方法　体外培养人脐静脉血管内皮细胞 ,经缺氧及血管活性物质处理 ,Northern杂交、酶联免疫检测和计算机图像分析等观察VEGFmRNA和蛋白表达水平。结果　缺氧 6h内皮细胞可见VEGF表达。ET可促进VEGFmRNA的表达 ,NO可明显抑制VEGFmRNA的表达 ,NO抑制剂LNNA也影响VEGFmRNA的表达。ELISA检测VEGF蛋白水平分别为 6h组 (8 2± 1 1) μg/L ,ET +6h组 (9 37± 1 0 2 ) μg/L ,NO +6h组 (2 86± 0 91) μg/L ,LNNA +6h组 (14 75± 1 87)μg/L。 结论　缺氧可诱导人脐静脉血管内皮细胞分泌VEGF并受血管活性物质的调控 ,ET促进其表达 ,NO抑制其表达。     

体外人脐静脉内皮细胞的培养鉴定及抗原表达分析

目的探讨体外分离、培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）的方法及进行HUVECs的扩增和鉴定,明确HUVECs表面抗原表达情况。方法采集正常人脐带,应用改良的酶消化法进行HUVECs的分离培养;通过细胞形态学观察及免疫荧光化学鉴定HUVECs,应用细胞荧光化学进行内皮细胞（ECs）功能检测;应用流式细胞仪分析内皮细胞的特异性抗原表达。结果观察细胞形态呈铺路石样,Ⅷ因子相关抗原荧光染色阳性,显示出摄取乙酰化低密度脂蛋白、结合荆豆凝集素等ECs的功能特性;流式细胞仪检测CD31、VWF、KDR、CD34抗原表达阳性百分比高,而CD133处于低水平。结论通过本实验改良的分离培养方法,可以在体外获得较高数量的HUVECs,在细胞形态、表面抗原标志、细胞功能等方面具有ECs特征,可以用于血管ECs模型的构建。     

亚砷酸钠对人脐静脉血管内皮细胞的毒性效应

目的探讨亚砷酸钠对体外培养的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)毒性效应的分子机制。方法通过观察细胞形态和细胞增殖实验分别观察亚砷酸钠对细胞形态及增殖能力的影响;PI染色结合流式细胞仪检测细胞周期的变化;应用实时定量RT-PCR技术检测c-Jun、c-Myc的mRNA表达水平。结果随着亚砷酸钠浓度增加,漂浮的细胞越来越多;细胞增殖抑制率越来越高;细胞周期结果显示,S期的细胞数明显减少,大多数细胞被阻滞在G0/G1期,呈典型的剂量-效应关系;亚砷酸钠下调HUVEC的c-Myc mRNAs水平。结论亚砷酸钠通过下调c-Myc基因表达,抑制细胞增殖能力,提示其在地砷病引起的血管损伤中发挥重要作用。     

Staurosporine对尼古丁诱导人脐静脉内皮细胞表达t-PA与PAI-1的影响

目的 通过观察不同浓度Staurosporine (STS)对尼古丁诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)表达组织型纤溶酶原激活物(tissue type plasminogen activator,t-PA)与1型纤溶酶原激活物抑制剂(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)mRNA及蛋白的影响,探讨尼古丁所致内皮细胞纤溶紊乱的机制.方法 将体外培养的3～6代HUVECs随机分为对照组、尼古丁组及不同浓度STS组,STS组分别以20、50、100μmol/L STS预处理细胞30 min,再与100 μmol/L尼古丁孵育24 h.酶联免疫吸附双抗体夹心法检测细胞上清液t-PA与PAI-1蛋白含量,RT-PCR检测PAI-1 mRNA表达.结果 尼古丁组PAI-1 mRNA与蛋白表达较对照组升高(P值均＜0.05);不同浓度STS组PAI-1 mRNA与蛋白表达较尼古丁组降低(P值均＜0.05),且呈浓度依赖性,以100 μmol/L STS组作用为著,但PAI-1 mRNA与蛋白表达仍高于对照组(P值均＜0.05).各组间t-PA蛋白差异无统计学意义(P值均＞0.05).结论 STS通过阻断蛋白激酶C通路的信号传导可部分减弱尼古丁诱导的血管内皮细胞纤溶功能紊乱.     

银杏叶提取物对培养的人脐静脉内皮细胞结构型一氧化氮合酶的影响

目的 :观察银杏叶提取物 （EGB）对培养的人脐静脉内皮细胞结构型一氧化氮合酶 （ec NOS）活性的影响 ,并探讨 EGB防治 PTCA后再狭窄的意义。方法 :分别用 10 ,5 0 ,10 0 g· L- 1的 EGB作用于体外培养人脐静脉内皮细胞（HU VEC） ,行 ABC免疫酶染色 ,图像分析法观察 EGB对 NOS表达的影响。结果 :与对照组比较 ,各实验组 ec-NOS表达增强 （P<0 .0 5 ）。结论 :EGB增强了培养的内皮细胞的 c NOS表达。     

Effect and mechanism of melatonin's action on the proliferation of human umbilical vein endothelial cells

Melatonin is the major secretory product of the pineal gland and is considered an important natural oncostatic agent. The anticancer activity of melatonin is due to its immunomodulatory, anti-proliferative and antioxidative effects. At present there are no direct data available as to melatonin's possible influence on angiogenesis, which is a major biological mechanism responsible for tumor growth and dissemination. The current study investigated the influence of melatonin on angiogenesis. Human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were cultured, identified, and purified. Cell growth and viability, DNA fragmentation and cell cycle analyses were determined. To elucidate the mechanism of action of melatonin, Western blot analyses for P53, Bax and Bcl-2 expression were carried out. The results demonstrate the anti-proliferative and apoptosis-inducing effects of melatonin; these changes were associated with cell cycle arrest, upregulation of P53 and Bax and downregulation of Bcl-2. Taken together, our data showed that melatonin in high concentrations markedly reduces HUVECs proliferation, induces cellular apoptosis, and modulates cell cycle length. P53 and Bax/Bcl-2 expression changes may be involved in these actions of melatonin.