中药对肺纤维化动物模型细胞因子表达的影响

目的:探讨中药国圣一号对纤维化肺组织TNF -α和IL- 8 表达的影响。方法:48 只Wistar 大鼠随机分为正常对照组、模型组、氢化可的松组和中药组,分别于14d和28d观察肺组织病理改变,TNF -α及IL -8表达情况和中药对肺纤维化的治疗作用。结果:①中药和氢化可的松治疗后肺泡炎及肺纤维化较模型组显著减轻(p<0.05),纤维化程度与正常对照组无显著差异(p>0.05)。②模型组肺组织TNF- α、IL- 8表达显著高于其它三组(p<0.01),28 d时IL- 8 的表达较14 d时显著升高(p<0.05),中药组和氢化可的松组肺组织TNF -α、IL- 8 显著高于对照组(p<0.05)。结论:中药通过下调肺纤维化时肺组织TNF- α及IL-8表达起到治疗作用。     

肺间质纤维化的中医辨治

肺间质纤维化的病名归属以特发性肺纤维化为肺痹,继发性肺纤维化为肺痿。其病因为虚、痰、瘀与五脏相关,表现为虚、实的证候。根据本病分期以肺脾气、肺肾阴、脾肾阳虚损和痰瘀阻络的病机特点,进行综合治疗。提出肺间质纤维化患者生存质量评估及开展行业标准,分型及中医疗效评定标准的研究的必要性。     

粘附分子和肺纤维化

肺间质纤维化 (简称肺纤维化 ) ,是一种病因及发病机制尚不清楚的疾病 ,基本病理过程为肺泡炎 ,随后损伤修复 ,间质胶原增生 ,最终导致肺纤维化。粘附分子 (ａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ,ＡＭｓ)是指由细胞产生 ,介导细胞与细胞间或细胞与基质间相互接触和结合的一类分子。近年来发现粘附分子在肺内炎症及纤维化过程中起重要作用 ,从而为肺纤维化发病机制研究和相应的治疗措施提供了理论基础。1　粘附分子的分类及在肺组织中的表达1.1　粘附分子的分类　粘附分子按性质分为五大类 ,它们分别为 :⑴整和素超家族 (ｉｎｔｅｇｒｉｎｓ…     

肺纤维化大鼠肺泡灌洗液中基质金属蛋白酶表达与地塞米松的干预效应

目的探讨炎症细胞与地塞米松对基质金属蛋白酶活性的影响及基质金属蛋白酶在肺纤维化中的作用。方法①实验于2004-04/07在解放军兰州军区总医院动物实验中心和呼吸内科实验室、血液科实验室完成。选用32只普通W istar大鼠。随机将动物分为3组对照组(n=8),肺纤维化组(n=12),治疗组(n=12)。②肺纤维化组和治疗组按5m g/kg经气管内灌注博莱霉素溶液0.3m L制备大鼠肺纤维化模型,对照组则给予0.3m L生理盐水,治疗组每日腹腔注射地塞米松0.4m L(5m g/kg),对照组及肺纤维化组则每日腹腔注射0.4mL生理盐水。③在实验第3,7,14,27天分别处死后,收集肺泡灌洗液,行细胞计数和分类;聚丙烯酰胺明胶酶谱法鉴定肺泡灌洗液中基质金属蛋白的活性变化;羟脯氨酸法测定肺组织胶原含量的变化。结果大鼠32只均进入结果分析。①病理组织切片示肺纤维化组肺损伤明显,出现典型肺纤维化改变;治疗组肺损伤和纤维化程度明显减轻。②治疗组肺泡灌洗液粒细胞学分类在第7,14天分别比肺纤维化组降低了51.6%和62.4%(P<0.05);第14天治疗组肺胶原总量比肺纤维化组降低了17.8%(P<0.05)。③聚丙烯酰胺明胶酶谱示基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9在两组中活性带均增强,但治疗组活性带的强度比肺纤维化组明显减弱。结论炎症细胞能增强基质金属蛋白酶的活性,基质金属蛋白酶活性增强进一步促进了纤维化的发展,而地塞米松则抑制了基质金属蛋白酶活性增强,减轻了肺纤维化程度。     

犬功能性肺叶切除的病理观察

目的从病理角度探讨功能性肺叶切除的可行性.方法经导管靶肺叶内注入平阳霉素碘油乳化剂及聚甲基丙烯酸甲脂支气管阻塞建立犬功能性肺叶切除的模型,于术后不同时间处死动物,按Szapiel方法测定肺泡炎和肺纤维化的程度,观察肺组织的病理变化.结果模型组靶肺第1～7天以肺泡炎为主,第3天开始出现肺纤维化改变,第14天以后则进入慢性纤维化期,第28天完全纤维化.结论功能性肺叶切除可使靶肺组织不张、纤维化,作为治疗肺部病变的一种微创、安全、有效的介入治疗方法,可望部分替代外科性肺叶切除.     

基质金属蛋白酶9与肺组织重构

目的:总结归纳基质金属蛋白酶9在哮喘、慢性阻塞性肺疾病及肺间质纤维化等疾病过程中参与肺组织重构的表达和作用。资料来源:应用计算机检索Pubmed数据库1979-01/2005-11基质金属蛋白酶9的文章,检索词“GelatinaseB;asthma;PulmonaryDisease,ChronicObstructive;pulmonaryfibrosis”,限定文章语言种类为English;同时检索中国期刊全文数据库1979-01/2005-11期间的相关文章,检索词“基质金属蛋白酶9;哮喘;肺疾病,阻塞性;肺纤维化”,限定文章语言种类为中文。资料选择:纳入标准:有关基质金属蛋白酶9在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺纤维化中的表达。排除标准:①较陈旧的文献;②重复研究。资料提炼:共收集到有关基质金属蛋白酶9在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺纤维化中的肺组织重构的表达及作用文章233篇,排除重复或类似的同一研究,15篇符合要求。资料综合:①基质金属蛋白酶9在哮喘中肺组织的表达:在未经治疗的稳定期的哮喘患者或轻度哮喘患者中均未发现基质金属蛋白酶9的增加。在严重哮喘患者中,哮喘加重期患者,哮喘持续状态患者均有基质金属蛋白酶9的增加。②基质金属蛋白酶9在慢性阻塞性肺疾病中的表达:慢性阻塞性肺疾病患者肺实质、血清和痰中基质金属蛋白酶9水平是增加的,基质金属蛋白酶9在慢性阻塞性肺疾病的发病机制中发挥作用,但其与慢性阻塞性肺疾病分期的关系还有待进一步研究。③基质金属蛋白酶9在肺纤维化中的表达:基质金属蛋白酶9和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1参与了肺纤维化中肺组织的重构,尤其在特发性肺纤维化发病过程中。特发性肺纤维化患者肺泡灌洗液中基质金属蛋白酶9水平是升高的,但在肺间质纤维化不同类型及相同类型的不同阶段,基质金属蛋白酶9有不同的变化,需要进一步的研究。结论:由于基质金属蛋白酶9参与了哮喘、慢性阻塞性肺疾病及肺间质纤维化中肺组织的改变和重构,尤其是在疾病的不同时期基质金属蛋白酶9的表达也是不同的,因此对基质金属蛋白酶9的研究有重要的临床意义。     

进展性肺纤维化的血清标志物研究进展

在肺间质性疾病中,除特发性肺纤维化外,另有一部分疾病经过积极治疗后,肺部纤维化程度仍然继续加重,导致肺功能进行性降低且早期死亡风险增加,将这一类具有进行性肺纤维化表型的疾病统称为进行性纤维化性间质性肺疾病。其病因复杂,诊断和治疗难度大,近年来,关于各种肺纤维化相关的生物标志物进行了很多探索,发现其在肺纤维化疾病诊断、病情评估、病情监测中均有一定的临床价值,本文对进展性肺纤维化相关的血清学标志物进行总结和分析,提高对相关血清学标志物的进一步认识和临床应用。     

胎盘生长因子在肺纤维化发病机制中的作用

目的:总结并分析肺纤维化的发生机制,探讨胎盘生长因子及其受体与肺纤维化发病的联系,为临床治疗肺纤维化提供新的启示。资料来源:应用计算机检索PubMed数据库1990-01/2007-01有关肺纤维化、胎盘生长因子的文章,检索词“pulmonary fibrosis,placenta growth factor”,限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊全文数据库1994-01/2007-01期间的相关文章,检索词“肺纤维化、胎盘生长因子”,限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,选取符合研究要求的有关文章找全文。纳入标准:①有关胎盘生长因子及其受体的结构、生物特性及功能的研究。②肺纤维化发生机制及肺纤维化与胎盘生长因子相关性研究。排除标准:重复性研究。资料提炼:共收集到符合上述要求的文献69篇,排除重复或类似的研究,31篇符合研究要求,其中14篇关于胎盘生长因子生物特性研究,17篇关于肺纤维化与胎盘生长因子相关性研究。资料综合:①胎盘生长因子是病理条件下控制血管生成的开关,能显著增强血管内皮生长因子的生物学活性,而血管内皮生长因子可能促进肺泡炎发生及肺纤维化形成。②胎盘生长因子是促血管生成因子,同时能促进炎症反应,而肺部炎症的产生是肺纤维化发生的基础。③胎盘生长因子能促进肺泡上皮细胞凋亡,而肺泡或细支气管上皮细胞凋亡是导致肺纤维化形成的主要原因。④异常失控的血管生成、炎症反应、细胞凋亡等因素均可能参与了肺纤维化的进程,胎盘生长因子可能通过各种影响因子,促进肺纤维化。结论:胎盘生长因子通过增强血管内皮生长因子的生物学活性,促进炎症反应和细胞凋亡在肺纤维化中发挥重要作用,胎盘生长因子及其受体与肺纤维化的发病有着密切的联系,通过干预其表达可能为治疗肺纤维化提供新的方向。     

基质金属蛋白酶9与肺组织重构

目的：总结归纳基质金属蛋白酶9在哮喘、慢性阻塞性肺疾病及肺间质纤维化等疾病过程中参与肺组织重构的表达和作用。 资料来源：应用计算机检索Pubmed数据库1979-01／2005-11基质金属蛋白酶9的文章，检索词“Gelatinase B；asthma；Pulmonary Disease，Chronic Obstructive；pulmonary fibrosis”，限定文章语言种类为English；同时检索中国期刊全文数据库1979-01／2005-11期间的相关文章，检索词“基质金属蛋白酶9；哮喘；肺疾病，阻塞性；肺纤维化”，限定文章语言种类为中文。 资料选择：纳入标准：有关基质金属蛋白酶9在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺纤维化中的表达。排除标准：①较陈旧的文献；②重复研究。资料提炼：共收集到有关基质金属蛋白酶9在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺纤维化中的肺组织重构的表达及作用文章233篇，排除重复或类似的同一研究，15篇符合要求。 资料综合：①基质金属蛋白酶9在哮喘中肺组织的表达：在未经治疗的稳定期的哮喘患者或轻度哮喘患者中均未发现基质金属蛋白酶9的增加。在严重哮喘患者中，哮喘加重期患者，哮喘持续状态患者均有基质金属蛋白酶9的增加。②基质金属蛋白酶9在慢性阻塞性肺疾病中的表达：慢性阻塞性肺疾病患者肺实质、血清和痰中基质金属蛋白酶9水平是增加的，基质金属蛋白酶9在慢性阻塞性肺疾病的发病机制中发挥作用，但其与慢性阻塞性肺疾病分期的关系还有待进一步研究。③基质金属蛋白酶9在肺纤维化中的表达：基质金属蛋白酶9和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1参与了肺纤维化中肺组织的重构，尤其在特发性肺纤维化发病过程中。特发性肺纤维化患者肺泡灌洗液中基质金属蛋白酶9水平是升高的，但在肺间质纤维化不同类型及相同类型的不同阶段，基质金属蛋白酶9有不同的变化，需要进一步的研究。 结论：由于基质金属蛋白酶9参与了哮喘、慢性阻塞性肺疾病及肺间质纤维化中肺组织的改变和重构，尤其是在疾病的不同时期基质金属蛋白酶9的表达也是不同的，因此对基质金属蛋白酶9的研究有重要的临床意义。     

西药与中药结合治疗特发性肺间质纤维化临床疗效观察

特发性肺纤维化（IPF）是以弥漫性肺泡炎和肺泡结构紊乱最终导致肺纤维化为特征的间质性肺疾病，目前病因尚不清楚，主要表现为逐渐加重的呼吸困难，伴有刺激性干咳，病情一般持续进展，最终因呼吸衰竭而死亡。肺纤维化发病率相对较低，但愈后差，以往治疗效果不好，我科一年来治疗肺纤维化16例，应用中西药结合疗法，治疗较好，现报告如下：     

特发性肺纤维化患者支气管/肺泡上皮细胞凋亡和Fas/FasL基因表达

目的：检测细胞凋亡、Fas/FasL mRNA及其蛋白在特发性肺纤维化患者肺泡/支气管上皮细胞的表达,探讨细胞凋亡和促凋亡信号在此疾病中的意义。方法：应用末端原位杂交（TUNEL）、原位杂交、免疫组化技术,对12例特发性肺纤维化患者的肺活检组织（IPF组）及10例正常肺组织（对照组）检测了细胞凋亡、Fas/FasL mRNA及其蛋白表达的变化。结果：特发性肺纤维化组肺泡/支气管上皮细胞凋亡指数上调,明显高于对照组（P〈0.01）;IPF组肺泡/支气管上皮细胞中Fas/FasL mRNA及其蛋白表达上调,高于对照组（P〈0.01）;IPF组肺泡/支气管上皮细胞凋亡指数与其Fas/FasL mRNA及蛋白表达之间均无明显相关（P〉0.05）。结论：肺纤维化时肺泡/支气管上皮细胞凋亡上调,Fas/FasL mRNA及其蛋白表达增强,在肺纤维化发生、发展中起重要作用。     

急性百草枯中毒大鼠肺组织MMP-2和TIMP-1的基因表达

目的 利用实时荧光定量PCR法测定急性百草枯中毒大鼠肺组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶组织因子抑制剂-1(TIMP-1)基因的表达,探讨其在急性百草枯中毒所致的大鼠急性肺损伤及纤维化中的作用.方法 80只SD大鼠,随机分为对照组(n:8)、染毒组(n:72);对照组一次性腹腔注射与染毒组等体积的生理盐水,染毒组一次性腹腔注射百草枯溶液(18mg/kg)染毒;分别于1、3、5、7、14、28 d光镜下观察两组大鼠的肺组织病理变化,同时利用实时荧光定量PCR法动态测定MMP-2、TIMP-1的mRNA表达量.结果 与对照组相比,染毒组大鼠早期主要表现为肺脏的急性炎症反应,肺水肿和出血明显,染毒5 d后观察到肺纤维化变化,第28天纤维化最明显;染毒组肺组织中的MMP-2的mRNA表达较对照组从第1天开始即明显增强,第7天达到高峰,为对照组的2.83倍,以后逐渐下降,但28 d时仍高于对照组,差异无统计学意义(P<0.01);TIMP-1的mRNA表达第1天也明显高于对照组,逐渐增强至14 d达到峰值,为对照组的7.28倍,后开始缓慢下降,28 d时仍明显高于对照组(P<0.01).结论 MMP-2、TIMP-1在急性百草枯中毒所致的急性肺损伤中起了重要的作用,同时大鼠的肺纤维化进程与MMPs/TIMPs的基因表达比例失调有很大的关系.     

Adenovirus-mediated transfer and overexpression of heme oxygenase 1 cDNA in lung prevents bleomycin-induced pulmonary fibrosis via a Fas-Fas ligand-independent pathway

Heme oxygenase 1 (HO-1) is an inducible enzyme that catalyzes heme to generate bilirubin, ferritin, and carbon monoxide. Because enhanced expression of HO-1 confers protection against many types of cell and tissue damage by modulating apoptotic cell death or cytokine expression profiles, we hypothesized that adenovirus-mediated transfer of HO-1 cDNA and subsequent overexpression of the protein in lung would provide therapeutic benefit in a murine model of bleomycin-induced pulmonary fibrosis. In C57BL/6 mice, HO-1 overexpression clearly suppressed the development of fibrotic changes and was associated with enhanced interferon gamma production in lung and reduced numbers of respiratory epithelial cells with damaged DNA. However, HO-1 overexpression did not prevent pulmonary fibrosis induced by agonistic anti-Fas antibody inhalation in C57BL/6 or ICR mice, a strain known to develop pulmonary fibrosis via the Fas-Fas ligand (FasL) pathway. Consistent with the concept that HO-1 overexpression prevents fibrosis via a pathway independent of Fas-FasL interaction, Ad.HO-1 administration prevented bleomycin-induced pulmonary fibrosis in gld/gld mice, which express nonfunctional FasL. These observations suggest that using HO-1 overexpression strategies to treat idiopathic pulmonary fibrosis, or fibrotic disorders of other target organs, by attenuating apoptotic cell death likely would be effective in clinical situations.     

白细胞介素17在大鼠纤维化模型中的作用及意义

目的研究白细胞介素17（IL-17）在大鼠肺纤维化中的表达及意义。方法健康SD大鼠64只随机分为健康对照组（N组）、肺纤维化模型组（B组）及地塞米松治疗组（D组）。分别于实验的第7、14、28天将N组、B组处死,D组于第14、28天处死,检测支气管灌洗液及肺组织中IL-17表达水平;观察其病理学改变并测定肺组织中羟脯氨酸水平。结果（1）B组肺组织病理切片表现为逐渐由肺泡炎至纤维化动态改变过程,肺组织内羟脯氨酸高于N组和D组（P〈O．05）。（2）在B组和D组中,肺组织和支气管灌洗液中的IL-17的表达趋势相同,都于第7天达到峰值,而在N组中IL-17呈低水平表达,B组和D组IL-17水平各时间点均明显高于N组（P〈O．05）;肺组织和支气管灌洗液中IL-17与肺组织中羟脯氨酸的表达趋势呈负相关（P〈O．05）。结论IL-17参与肺纤维化形成过程。     

TH17细胞、IL-21因子在鼠肺纤维化中的表达及意义

目的探讨Th17细胞、白介素21（interleukin 21,IL-21）因子在肺纤维化发病机制中的表达及意义。方法采用64只SD大鼠随机分为3组：肺纤维化模型组（P,n=24）、地塞米松3mg/kg干预组（D,n=16）、生理盐水对照组（N,n=24）。P、D组均采用一次性气管内注射博来霉素（Bleomycin,BLM）（5mg/kg）方法建立大鼠肺纤维化模型,N组气管内灌注等量0.9%氯化钠注射液。D组从第7天开始1次/日腹腔注射地塞米松;N、P组腹腔注射等量0.9%氯化钠注射液。造模后7、14、28天每组随机分批处死大鼠（8只/组）观察大鼠肺组织病理变化及测定肺组织中羟脯氨酸（HYP）含量;流式细胞术检测肺组织中Th17细胞占CD4＋T细胞的比例;用荧光RT-PCR法检测IL-21的表达水平。结果 P、D组大鼠肺组织早期炎症反应明显,并逐渐出现纤维化及胶原纤维沉积。P组IL-21表达水平、Th17细胞占CD4＋T细胞的比列均较N组明显升高（P〈0.05）,在第7天表达水平最高,此后逐渐下降,第28天最低。结论 Th17细胞、IL-21因子在大鼠肺纤维化发病过程中起重要作用,可能参与了肺纤维化的发生与发展。     

Essential roles of the Fas-Fas ligand pathway in the development of pulmonary fibrosis

The Fas ligand is predominantly expressed in activated T lymphocytes and is one of the major effector molecules of cytotoxic T lymphocytes and natural killer cells. Previously, we found excessive apoptosis of epithelial cells and infiltrating lymphocytes expressing Fas ligand mRNA in the lung tissue of bleomycin-induced pulmonary fibrosis in mice. Here we demonstrated that the administration of a soluble form of Fas antigen or anti-Fas ligand antibody prevented the development of this model and that lpr and gld mice were resistant against the induction of pneumopathy. These results suggest that the Fas-Fas ligand pathway plays an essential role in the development of pulmonary fibrosis and that preventing this pathway could have therapeutic value in lung injury and fibrosis.     

Biochemical and histological changes in pulmonary fibrosis induced in rabbits with intratracheal bleomycin

Pulmonary fibrosis was induced in rabbits by an intratracheal instillation of bleomycin. Histologically, at 2 weeks there was inflammation but only limited evidence of increased collagen deposition; at 8 weeks the inflammatory response had subsided and increased collagen deposition, characteristic of early interstitial fibrosis, was observed. Biochemical analyses showed bleomycin treatment caused marked increases in the total amounts of RNA, DNA, mixed protein, collagen and elastin when compared to controls (P less than 0.001 in all cases). Furthermore the increases were essentially complete by 2 weeks where the contents had increased by 110 +/- 13%, 60 +/- 11%, 148 +/- 12%, 94 +/- 15% and 89 +/- 11% respectively (P less than 0.001 in all cases). When collagen and elastin were expressed as concentrations with respect to wet weight, total protein or DNA content, the changes were not statistically significant. No changes were observed in the relative amounts of type I and type III collagen. It is concluded that: (1) compared to biochemical analysis, histology is relatively insensitive in detecting the early increases in connective tissue proteins; (2) measurements of lung collagen and elastin should be expressed as total lung contents wherever possible; the concentration of these proteins may remain unchanged, especially in the early stages of fibrosis, due to concomitant increases in other lung constituents; (3) changes in the relative amounts to types I and III collagens do not play a major role in the pathology of this form of pulmonary fibrosis.     

博来霉素气管灌注构建肺纤维化模型大鼠肺组织低氧诱导因子1α的动态表达

背景：低氧诱导因子1α是介导低氧反应的核转录因子,其对肺纤维化的作用尚不明确。目的：观察低氧诱导因子1α在肺纤维化发病中的作用。方法：采用博来霉素（5mg/kg）一次性气管内灌注建立SD大鼠肺纤维化模型。造模后7,14,28d观察大鼠肺组织的病理学改变及肺组织中低氧诱导因子1α蛋白及mRNA的动态表达。结果与结论：博来霉素灌注后,大鼠肺组织炎症反应明显,并逐渐出现纤维化及胶原纤维沉积。免疫组织化学及RT-PCR结果显示,在大鼠肺纤维化发病过程中,低氧诱导因子1α蛋白及mRNA的表达趋势相同,即随造模时间的延长表达逐渐增多,并于造模后第14天达高峰。提示低氧诱导因子1α在大鼠肺纤维化发病过程中起重要作用,其过度表达可能参与了肺纤维化的发生与发展。