CD13~ CD7~ 白血病微小残留病水平与患者生存时间的关系

目的 :利用流式细胞术研究具有CD13 CD7 免疫表型白血病的微小残留病 (MRD)水平与患者生存时间的关系。方法 :选择表达CD13 CD7 独特免疫表型白血病 ,以CD13 CD7 免疫表型作为此类白血病细胞的特异标志 ,利用经特殊优化处理过的多参数流式细胞系统动态监测该免疫表型的白血病细胞数量 ,应用SPSS软件的生存分析功能分析白血病微小残留病水平与患者中位生存时间的关系。结果 :(1) 18例CD13 CD7 双表型白血病患者的免疫表型稳定表达 ,而非白血病患者骨髓细胞中无CD13 CD7 免疫表型细胞存在 ;(2 )根据MRD水平分为 3组 ,A组 3例MRD水平低于 10 -4 ,中位生存时间 34 5 0个月 ;B组 5例MRD在 10 -3 ～ 10 -4 之间 ,中位生存时间 2 1 2 5个月 ;C组 10例CD13 CD7 白血病细胞大于 10 -3者 ,中位生存时间为 11个月 ;(3) 3组间中位生存时间差异具有显著意义 (P =0 0 0 1) ,A组长于B组 (P =0 0 2 45 ) ,显著长于C组 (P =0 0 10 9) ,B组显著长于C组 (P =0 0 2 1)。结论 :白血病微小残留病状态是决定白血病患者生存时间的作用因素     

流式细胞术检测白血病微小残留病的研究进展

流式细胞术（flow cytometry，FCM）具有高度的精密性，测定数据可靠，既可分析单个细胞，也可区分群体细胞，利用白血病免疫表型标志与正常细胞的不同，通过多参数分析，可从以正常细胞中区分白血病细胞，具有快速、简便、定量和灵敏度高等优点，为白血病微小残留病（MRD）的检测提供了一种新颖可靠的手段，从而给白血病治疗策略的制定提供了依据。     

流式细胞术检测白血病微小残留病的研究进展

流式细胞术(flow cytometry,FCM)具有高度的精密性,测定数据可靠,既可分析单个细胞,也可区分群体细胞,利用白血病细胞免疫表型标志与正常细胞的不同,通过多参数分析,可以从正常细胞中区分白血病细胞,具有快速、简便、定量和灵敏度高等优点,为白血病微小残留病(MRD)的检测提供了一种新颖可靠的手段,从而给白血病治疗策略的制定提供了依据。     

急性髓系白血病微小残留病检测的临床意义

目的探讨微小残留病（MRD）检测在急性髓系白血病预测复发及指导治疗的临床意义。方法选择32例初治急性髓系白血病（除外M3）患者128份标本,利用多参数流式细胞术（FCM）进行微小残留病检测,CD45/SSC设门,选择2-4组四色抗体组合,从诱导化疗后第21天开始,每1-3个月监测一次。结果按照首次诱导治疗后第21天MRD水平将32例AML分为高（MRD〉1×10-2）、中（1×10-2〉MRD〉1×10-4）、低（MRD〈1×10-4）三组。高、中、低三组的2年复发率依次为83.3%、11.1%、0。其中MRD〉1×10-2组2年复发率最高,MRD〈1×10-4组预后好,两组的复发概率差异有统计学意义（P〈0.05）。形态学与MRD动态监测两年结果显示,其中26例缓解,6例复发。6例形态学复发者均在MRD持续阳性4-6个月出现。形态学完全缓解时MRD阳性组与阴性组的复发率有显著性差异（P〈0.05）。结论 MRD〉1×10-2高度提示复发,MRD阳性比形态学复发出现早,连续监测MRD对个体化治疗和预测复发有重要意义。     

221例急性早幼粒细胞白血病免疫表型特点与微小残留病检测及基因标志的关系

本研究探讨急性早幼粒细胞白血病（APL）患者的免疫表型特点与微小残留病（MRD）检测及基因标志之间的关系。采用四色流式细胞术（FCM）分析了221例初诊APL患者的免疫表型,其中87例加做CD123抗体,196例同时运用PCR检测特异融合基因pml-rarer。结果发现：初诊APL患者中CD123、CD33和CD9的阳性表达率分别为100％、99．1％和96．0％,阳性患者中平均阳性细胞比例均在90％左右;虽然CD117、CD13、CD38及CD64的阳性表达率均高于96％,但阳性患者中阳性细胞比例分布不一致,平均阳性细胞比例在70％左右;部分患者表达CD15、CD56和CD11b,多数患者不表达CD34和HLA-DR,阳性患者中阳性细胞的平均比例均较低。196例初诊APL患者中,pml—rara基因的不同转录本bcr1、bcr2和bcr3所占比例分别为63．3％、4．6％和32．1％。bcr3型基因与CD34的阳性表达相关,以20％为界时bcr3和bcr1型中CD34^＋患者的比例分别为15．4％（10／65）和3．3％（4／121）（P〈0．05）;以10％为阳性界限,bcr3和bcr1型中CD34^＋患者的比例分别为47．7％（31／65）和5．8％（7／121）（P〈0．001）;其余抗原的表达无明显区别。APL细胞中CD34为阳性且表现为非高侧向角（NL-SSC）时高度提示基因为bcr3型。结论：APL患者的免疫表型具有独特特征,CD123、CD33和CD9更适用于APL的MRD检测,CD34的阳性表达、NL-SSC与bcr3基因亚型相关,CD34的阳性界限设为10％更能提示基因类型与抗原表达的关系。     

急性髓系白血病M_2微小残留病与细胞遗传学关系探讨

目的 了解急性髓系白血病(AML)M2微小残留病(MRD)水平与细胞遗传学分组的关系.方法 采用多参数流式细胞仪(MFC)进行白血病免疫分型,然后再根据白血病相关免疫表型(LAIP)选择抗体组合,完成对117例M2病人的MRD监测.结果 将初次缓解AML-M2病人的微小残留病灶水平以5×10-4为界,在细胞遗传学预后较好组、预后中等组、预后较差组之间进行比较,发现三组MRD水平差异无显著性.动态监测中比较了45例患者1年内不同遗传学分组MRD从10-3水平后上升到10-2水平的发生率:预后较好组33%,预后中等组32%,预后较差组50%.结论 MFC检测AML-M2病人MRD水平可用于评估治疗反应及预测复发.     

伴有CD7抗原表达的急性白血病的基因表型和细胞来源

用MPO,CD3ε和IgH等多种基因标志并结合免疫分型研究了9例伴有CD7抗原表达的急性白血病的基因表型和细胞来源。结果发现,4例有典型的急性髓系白血病(AML)的形态学和组化染色特征并表达MPO基因,但对CD3εmRNA阴性,属于AML伴有CD7抗原表达;3例对胞浆CD3抗原和CD3ε基因阳性,但未检测出MPO基因,属于早期T细胞来源;1例同时检测出MPO和CD3ε基因,考虑为T/粒两种细胞来源,另外1例只检测出MPO基因,属于早期粒细胞来源。上述结果提示,伴有CD7抗原表达的急性白血病实际上是T、粒等多种细胞来源的白血病。     

慢性淋巴细胞白血病微小残留病研究进展

近年来,很多技术用于慢性淋巴细胞白血病微小残留病的检测,本组比较目前常用的流式细胞术及聚合酶链反应这两种技术的优缺点,并进一步探讨微小残留病在慢性淋巴细胞白血病预后中的意义。     

CD56在急性髓系白血病细胞上的表达及微小残留病分析

目的探讨CD56在非M3急性髓系白血病（AML）中的表达及在微小残留病（MRD）检测的意义。方法应用流式细胞术分析145例非AML-M3 AML患者免疫表型,以CD56、CD19、CD117、CD34、CD33为标志,CD45设门MRD分析。结果 145例AML患者中CD56阳性37例,占25.52%,CD19阳性17例,占11.72%,分布在M1、M2、M4、M5。CD56或/和CD19阳性的AML患者共49例,其中CD56和CD19同时阳性5例,均为M2亚型。P170蛋白阳性36例,占24.83%,其表达率与CD56呈显著正相关（P〈0.01）。48例AML患者在诱导治疗结束和维持治疗第14、32、56周作MRD检测。单纯CD56＋组MRD阳性率93.55%,复发率77.41%,与单纯CD19＋组（MRD阳性率25.00%,复发率0）比较,差异有统计学意义（P均〈0.01）。CD56＋CD19＋组MRD阳性率100.00%,复发率80.00%,与单纯CD56＋组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,与单纯CD19＋组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 CD56、CD19在非M3 AML有较高的表达率。用CD45设门以CD56、CD19、CD34、CD117、CD33为组合的MRD方案能有效检测MRD。     

急性B淋巴细胞白血病抗原异常表达与微小残留病检测（附17例报告）

多参数流式细胞术（FCM）免疫表型分析已成为白血病分型诊断的重要工具。近年来主张用CD45／SSC双参数散点图设门的方法进行多色分析，容易将恶性克隆细胞与正常细胞群相区别，使白血病分型更为准确，并可用于微小残留病的检测。作应用FCM对70例初诊为急性B淋巴细胞性白血病（B—ALL）患进行免疫分型，发现多种抗原异常表达，并试用不同的抗体组合对其中18例缓解后的患进行微小残留病（MRD）的追踪检测。报告如下。     

急性髓系白血病微小残留病的多色流式细胞术检测

目的:建立本实验室急性髓系白血病微小残留病检测的十色抗体组合方案,探讨其临床应用价值.方法:根据初发急性髓系白血病患者白血病细胞的抗原表达特征,采用多参数流式细胞术检测骨髓微小残留病,并将检测结果与骨髓细胞形态学和PCR结果进行比较,确定本实验室微小残留病检测的十色抗体组合方案.结果:分析郑州大学第一附属医院392例初...     

儿童急性白血病微小残留病检测

目的 研究微小残留病(MRD)的检测在儿童急性白血病中的临床意义.方法 对已诊断并坚持治疗的40例急性白血病患儿采集骨髓标本,应用单克隆抗体直接免疫荧光标记法和三色流式细胞术(FCM)多参数分析技术的方法,进行MRD的检测并进行随访,随访期为1～5年.结果 40例急性白血病患儿中,已停药25例,维持治疗15例.停药的25例患儿中,诱导缓解结束时有18例MRD阴性,7例由阴性转阳性.15例维持治疗患儿中,缓解时至今MRD阴性者为8例,缓解时阳性者为7例.结论 连续监测MRD对儿童急性白血病预测预后及指导个体化治疗有重要的意义.     

急性淋巴细胞白血病微小残留病与中枢神经系统白血病的关系

目的探讨急性淋巴细胞白血病患儿外周血和脑脊液微小残留病（MRD）与中枢神经系统自血病（CNSL）的关系。方法对2003年1月～2007年8月在我院确诊的50例急性淋巴细胞白血病患儿采集外周血和脑脊液,利用单克隆抗体直接免疫荧光标记法和流式细胞仪多参数分析技术进行微小残留病的检测,并动态随访。结果50例患儿中发生CNSL的共有12例,12例中脑脊液MRD和脑脊液形态学同时阳性仅4例。其中初诊时伴CNSL者2例,脑脊液微小白血病（MRD）和脑脊液形态学检查均阳性。缓解期复发的10例CNSL中,脑脊液形态学检查阳性的仅2例;10例患儿外周血和脑脊液MRD同时阳性4例。缓解期CNSL复发的10例患儿中,完全诱导缓解第33天测血MRD和脑脊液MRD均阳性,但脑脊液细胞数正常,脑脊液涂片显示幼稚细胞阴性,临床不符合CNSL的诊断,故未按CNSL治疗,分别于6个月内出现CNSL复发1例、6～18月有2例、18月后有2例复发,复发率为50％（5／10）。结论流式细胞术检测脑脊液MRD较脑脊液形态学更加敏感,可较早预知CNSL状况,以提前实行针对性治疗,可早期阻止CNSL的发生。     

流式细胞术检测微小残留病的研究进展

流式细胞术(FCM)是利用白血病细胞免疫表型标志与正常细胞的差异,通过多参数分析,与正常细胞鉴别并区分出白血病细胞的一种技术,具有简单、快速、定量和灵敏度高等优点,为白血病微小残留病(MRD)的检测提供了一种有效的方法,从而能更早地预测白血病复发,指导临床用药或进一步观察造血干细胞移植后的骨髓净化效果.笔者现就FCM检测MRD的优势、免疫学基础、临床意义及应用前景进行综述.     

CD56在急性髓系白血病细胞上的表达及微小残留病分析

目的探讨CD56在非M3急性髓系白血病(AML)中的表达及在微小残留病(MRD)检测的意义。方法应用流式细胞术分析145例非AML-M3 AML患者免疫表型,以CD56、CD19、CD117、CD34、CD33为标志,CD45设门MRD分析。结果 145例AML患者中CD56阳性37例,占25.52%,CD19阳性17例,占11.72%,分布在M1、M2、M4、M5。CD56或/和CD19阳性的AML患者共49例,其中CD56和CD19同时阳性5例,均为M2亚型。P170蛋白阳性36例,占24.83%,其表达率与CD56呈显著正相关(P<0.01)。48例AML患者在诱导治疗结束和维持治疗第14、32、56周作MRD检测。单纯CD56+组MRD阳性率93.55%,复发率77.41%,与单纯CD19+组(MRD阳性率25.00%,复发率0)比较,差异有统计学意义(P均<0.01)。CD56+CD19+组MRD阳性率100.00%,复发率80.00%,与单纯CD56+组比较,差异无统计学意义(P>0.05),与单纯CD19+组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 CD56、CD19在非M3 AML有较高的...     

流式细胞术检测儿童急性淋巴细胞白血病微小残留病研究进展

多参数流式细胞术（FCM）检测白血病微小残留病（MRD）具有快速、敏感、可定量的优势。联合抗原受体基因重排的聚合酶链反应检测,可检测几乎所有儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）的MRD,可评估早期治疗反应,预示复发,实施个体化治疗,提高生存质量。本文重点介绍多参数FCM检测MRD的原理、优缺点及临床意义。     

CD123在急性早幼粒细胞白血病微小残留病检测中的应用

为了探讨CD123联合应用其它免疫标志检测急性早幼粒细胞白血病(APL)中微小残留病(MRD)的作用及意义,采用四色流式细胞术(FCM)分析了186例初诊APL患者的免疫表型特点及20例正常骨髓中与APL细胞表型相同的细胞所占比例,并应用以CD34/CD117/CD123/HLA-DR为主的4色抗体组合对172份标本进行MRD检测并与实时定量PCR结果相比较。172份标本包括19例连续随访APL患者的116份骨髓或外周血标本和47例距初诊3个月至2年不等的非连续随访患者的56份骨髓标本,其中形态学完全缓解(CR)后117份,CR前55份标本。对18份标本同时加做抗体组合CD9/CD117/CD34/CD33检测。结果表明:初诊APL患者除高表达CD9、CD33、CD117和低表达CD34、HLA-DR外,CD123的阳性表达率为100%(30/30);正常骨髓中CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞和CD117+CD34-CD9+CD33+细胞在有核细胞中的比例分别为(0.066±0.012)%和(0.089±0·066)%,与APL患者相比相差4个对数级;随访期内,19例患者全部获得形态学CR,中位时间为4周(3-6周),13例FCM结果转阴的中位时间为7.5周(5-11周),11例PCR结果转阴的中位时间为8周(5-12周);形态学CR后随访的117份标本中41份FCM检测MRD呈阳性,8份标本CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞比例>5%,中位值为9.02%(5.26%-18.14%),33份标本CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞比例<5%,中位值为0·48%(0.02%-4.70%);CD117+CD34-细胞中CD123+HLA-DR-细胞的中位相对比例分别为86.77%(63.29%-92.62%)和63.59%(15.11%-98.36%);FCM与PCR同时检测MRD结果显示,FCM(+)标本中95.9%(93/97)PCR为阳性,FCM的假阳性率为4.1%(4/97),PCR的假阴性率为8.75%(7/93)。FCMMRD(-)标本中,92%(69/75)PCR阴性,8%(6/75)为PCR阳性。连续随访的116份标本和形态学CR后的117份标本显示,CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞比例与实时定量PCR检测的mRNA水平基本一致,两者均有一定的相关性(r=0.824,P<0.001和r=0.754,P<0.001)。结论:应用CD34/CD117/CD123/HLA-DR为主的2组4色抗体组合检测APL患者中的MRD简单可行,可与PCR检测相互补充。     

CD7阳性急性髓细胞白血病免疫表型及临床特点分析

随着系列单克隆抗体的应用,白血病细胞免疫分型的广泛开展及其研究的深入,伴CD7抗原表达的急性髓细胞白血病不断被发现.有学者认为CD7阳性急性髓细胞白血病（CD7＋AML）是一类独特的急性髓细胞白血病亚型,具有不伴有CD7抗原表达的急性髓细胞白血病不同的临床特点、生物学特征与预后.本文对56例AML进行免疫表型及临床特点进行分析,旨在探讨CD7＋AML免疫表型及临床特点.     

双温PCR法检测淋巴细胞白血病微小残留病

免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）重排可作为Ｂ淋巴系肿瘤的基因标志，应用ＰＣＲ方法检测此重排可进行淋巴细胞白血病微小残留病（ＭＲＤ）的研究。我们通过基因释放剂提取ＤＮＡ及双温ＰＣＲ循环，建立一种快速可靠ＰＣＲ方法检测３８例淋巴细胞白血病ＩｇＨ重排基因，２８／３８（７３．７％）阳性，敏感度为１０￣（－４）～１０￣（－５）水平。此方法简便、快捷且成本低，更适于临床检测实际需要。     

半巢式PCR检测淋巴细胞白血病微小残留病

半巢式ＰＣＲ检测淋巴细胞白血病微小残留病徐兵，周淑芸，孙竞免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排可作为Ｂ－淋巴细胞白血病的克隆标志，一次ＰＣＲ方法检测ＩｇＨ重排敏感性可达１０￣（－４）～１０￣（－５）水平，我们采用更灵敏的半巢式多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测了...