腹腔注射ATP对大鼠坐骨神经再生影响的实验研究

目的 观察腹腔注射细胞外ATP对大鼠坐骨神经再生的影响。方法 健康雌性Wistar大鼠48只，随机分成两组。将两组大鼠左侧坐骨神经切断后立即行外膜吻合术。术后实验组腹腔注射ATP（2mg／kg）0．4ml，对照组注射生理盐水0．4ml。术后1周、4周和8周从每组随机取8只大鼠，检测每只大鼠双侧小腿三头肌湿重、术后1周时测神经纤维再生速度、术后4周时电镜检测髓鞘横截面积和髓鞘厚度。结果实验组与对照组相比，1周时神经再生速度快（P〈0．05）、4周时髓鞘横截面积大（P〈0．05）、髓鞘厚（P〈0．05），4周、8周时小腿三头肌湿重明显优于对照组（P〈0．05）。结论 腹腔注射细胞外ATP对大鼠神经再生和功能恢复具有较强促进作用。     

骨髓基质细胞源性神经活性蛋白促进周围神经再生的实验研究

目的 通过局部注射不同剂量的骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)条件培养液神经活性蛋白,观察其对大鼠坐骨神经损伤后的再生作用.方法 取Wistar大鼠30只,随机分成3组,每组10只.行左侧坐骨神经切断并造成6mm缺损,用10 mm硅胶管套接缝合.其中10只硅胶管内注射高剂量BMSCs条件培养液神经活性蛋白(高剂量组),10只硅胶管内注射低剂量BMSCs条件培养液神经活性蛋白(低剂量组),10只硅胶管内注射等量生理盐水(对照组).术后8周通过后肢小腿三头肌肌湿重、形态学及图像分析为观察指标来判断不同剂量的BMSCs条件培养液神经活性蛋白对大鼠坐骨神经损伤后再生作用的影响.结果 高剂量组和低剂量组各项指标均优于对照组,高剂量组各项指标均优于低剂量组.结论 BMSCs条件培养液神经活性蛋白对坐骨神经再生有明显作用,高剂量作用更佳.     

坐骨神经损伤及神经生长因子对背根神经节中TrkA及其mRNA表达的调控

目的 研究周围神经损伤、神经再生及外源性神经生长因子对脊神经背根神经节中TrkA及TrkA mRNA表达的影响。方法 将24只SD大鼠坐骨神经从神经中段切断后，外膜缝合修复神经。实验组动物的胫后肌内每日注射NGF200U，术后3、7、14、28d，采用免疫组织化学及原位杂交方法，检查大鼠坐骨神经损伤、神经再生及外源性NGF靶肌肉注射后脊神经背根神经节中TrkA及TrkA mRNA表达。结果 正常背根神经节中有大量的神经元表达TrkA及TrkA mRNA；坐骨神经损伤后，背根神经节中TrkA的表达下降，术后7d组最低，28d接近正常；NGF靶肌肉注射后，背根神经节中TrkA的表达明显增高。结论 神经损伤后背根神经节中TrkA的表达降低，靶肌肉注射外源性NGF背根神经节中TrkA的表达增加，表明靶肌肉注射可作为NGF的有效给药途径.     

^125碘—辣根过氧化物酶追踪手术后神经轴浆流的实验研究

目的 研究^125碘－辣根过氧化物酶（^125I-HRP）追踪术后神经轴浆流的可行性；为临床应用放射性同位素研究神经再生提供实验依据。方法 24只SD磊鼠，按手术先后顺序分为两组。（1）实验组：于从骨结节远端0．8cm处切断大鼠右侧坐骨神经后立即行端端缝合术。术后4周，从右侧小腱三头肌内注射^125I－HRP。（2）对照组：将^125Ｉ－ＨＲＰ注射到大鼠右侧小腱三头肌内。于注射^125I－HRP24h后，实验组取神经缝合口近段0．8cm神经干，对照组取石侧坐骨结节远端的坐骨神经0．8cm；两组同时切取该段神经周围肌肉和左侧相应部位坐骨神经干，进行^125碘放射性强度的Г－计数。结果 对照组，注射侧坐骨神经干的^125碘放射性强度是其它组织的30倍以上。实验组，注射侧坐骨神经的6125碘放射性强度是其周围肌肉和对侧坐骨神经的6倍和7倍。两组注射侧坐骨神经的^125碘放射性强度和其它组织相比，均有显著性意义（P＜0．01）。结论 ^125I-HRP注入肌肉被神经末梢摄取后，经轴浆逆流可以通过神经缝合口到达神经近段，应用Г－计数器可探测神经组织中的^125碘放射性强度。     

靶肌肉注射神经生长因子促进鼠坐骨神经再生的实验研究

目的：为研究在靶肌肉上注射神经生长因子（Ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＮＧＦ）的可行性。方法：用硅胶管桥接大鼠双侧５ｍｍ长坐骨神经缺损，术后第１天向右侧胫前肌及腓肠肌分别注射高剂量（８μｇ／ｄ）、低剂量（０．８μｇ／ｄ）的２．５ｓＮＧＦ和等量生理盐水，术后２０、４０、８０天，运用胫前肌湿重、运动神经传导速度测定、形态学及图像分析等手段测定各项指标。结果：高ＮＧＦ组和低ＮＧＦ组再生神经在结构及功能上均优于对照组，术后４０天高ＮＧＦ轴突直径优于低ＮＧＦ组，高ＮＧＦ组内右侧明显优于左侧。结论：靶肌肉注射ＮＧＦ能促进鼠坐骨神经再生。     

125碘 - 辣根过氧化物酶追踪手术后神经

目的　研究12 5碘 辣根过氧化物酶 ( 12 5I HRP)追踪术后神经轴浆流的可行性 ;为临床应用放射性同位素研究神经再生提供实验依据。方法　 2 4只SD大鼠 ,按手术先后顺序分为两组。 ( 1)实验组 :于坐骨结节远端 0 .8cm处切断大鼠右侧坐骨神经后立即行端端缝合术。术后 4周 ,从右侧小腿三头肌内注射12 5I HRP。 ( 2 )对照组 :将12 5I HRP注射到大鼠右侧小腿三头肌内。于注射12 5I HRP 2 4h后 ,实验组取神经缝合口近段 0 .8cm神经干 ,对照组取右侧坐骨结节远端的坐骨神经 0 .8cm ;两组同时切取该段神经周围肌肉和左侧相应部位坐骨神经干 ,进行12 5碘放射性强度的г 计数。结果　对照组 ,注射侧坐骨神经干的12 5碘放射性强度是其它组织的 3 0倍以上。实验组 ,注射侧坐骨神经的12 5碘放射性强度是其周围肌肉和对侧坐骨神经的 6倍和 7倍。两组注射侧坐骨神经的12 5碘放射性强度和其它组织相比 ,差异均有显著性意义 (P <0 0 1)。　结论　12 5I HRP注入肌肉被神经末梢摄取后 ,经轴浆逆流可以通过神经缝合口到达神经近段 ;应用г 计数器可探测神经组织中的12 5碘放射性强度。     

细胞外ATP对失神经支配后骨骼肌和脊髓前角运动神经元ATPase活性的影响

目的了解细胞外三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）对坐骨神经损伤后腓肠肌和相应脊髓节段ATPase活性的影响。方法SD大鼠168只，切断其右侧坐骨神经后，随机分为3组，每组56只。损伤组：坐骨神经离断后不修复。对照组和实验组在坐骨神经离断修复后，于腓肠肌内注射同体积的生理盐水和ATP。术中和术后每日用药1次至取材为止。3组分别于手术后12h、1d、3d、7d、14d、28d、56d时每组各取8只大鼠，测定腓肠肌和L4-6水平脊髓前角运动神经元Na-K-ATPase及Ca-ATPase活性。术后7d、14d、28d、56d取双侧腓肠肌称肌湿重。结果实验组术后能显著改善ATPase的活性，这种改变与肌湿重的变化相一致，与损伤组和对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论细胞外ATP可通过对ATPase的影响，对失神经骨骼肌和脊髓前角运动神经元具有一定的保护和促进功能恢复作用。     

维生素D3通过调控AMPK/mTOR信号通路对糖尿病肾病肾小管上皮细胞转分化的影响

目的:基于腺苷酸活化蛋白激酶/雷帕霉素靶蛋白(adenosylated activated protein kinase/target of rapamycin, AMPK/mTOR)信号通路探讨活性维生素D3(Vitamin D3,VitD3)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)大鼠肾小管上皮细胞转分化的调节作用。方法:取60只成年雄性Wistar大鼠用链脲佐菌素腹腔内注射复制DN大鼠模型，并随机分为模型组、VitD3低剂量组和VitD3高剂量组，剩余的20只大鼠作为对照组。VitD3低剂量组、VitD3高剂量组自造模成功后第2天开始分别灌胃给予10 IU/g、20 IU/g的VitD3(溶于花生油),对照组和模型组给予等体积花生油灌胃处理，共给药8周，然后统计每组剩余大鼠个数：对照组15只，模型组12只，VitD3低剂量组14只，VitD3高剂量组15只。模型构建8周后处死大鼠，测定尿蛋白量和血肌酐；HE染色检测肾脏病理改变；TUNEL检测肾小管细胞凋亡；采用Western blot检测磷酸化腺苷酸激活的蛋白激酶(phosphorylated adeno...     

纤维蛋白胶粘合修复周围神经损伤的实验研究

目的 比较纤维蛋白胶粘合法与神经外膜缝合法修复周围神经损伤的效果。方法 将雄性Wistar大鼠20只随机分为两组，即粘合组和缝合组，每组10只。以大鼠左侧坐骨神经为修复神经模型进行实验。术后8周，各组取8只大鼠进行电生理、组织学检查，每组其余2只取标本做透射电镜观察。结果 术后8周粘合组神经纤维较缝合组平直，粘合组与缝合组比较，运动神经潜伏期延迟比、吻合口神经纤维通过比、有髓纤维截面积恢复比、肌湿重恢复比差别具有显著性意义(t值分别为2．32、2．43、2．39、2．36，P值分别为0．032、0．029、0．030、0．031)。结论 应用纤维蛋白胶粘合修复周围神经损伤是一种较为有效的神经接合方法。     

大鼠失神经靶肌肉注射异体不同细胞对神经再生影响的研究

目的研究注射异体不同细胞于大鼠失神经靶肌肉对神经再生的影响.方法 SD成年大鼠36只,雌性,体重120～150 g,随机分为4组,每组9只.无菌条件下切断左侧坐骨神经,一期神经外膜缝合.术后即于小腿三头肌处注射相应细胞,7天注射1次,共4次.A组注射单纯雪旺细胞1×106/ml 1 ml,B组注射雪旺细胞加成肌细胞(雪旺细胞∶成肌细胞为1∶1)1×106/ml 1 ml,C组注射肾内皮细胞提取液1 ml,D组注射无血清培养液1 ml作对照.术后3个月取手术侧坐骨神经及坐骨神经所支配的小腿三头肌,进行大体和组织形态学观察、神经鞘细胞密度及单位面积靶肌肉(小腿三头肌)运动终板计数.结果术后3个月,各组近端神经鞘细胞均数为A组0.134 5±0.029 8,B组0.093 1±0.025 6,C组0.072 4±0.023 7,D组0.187 7±0.054 2;A组∶D组P值<0.05,B组∶D组、C组∶D组及A组∶B组P值均<0.01,B组∶C组P值＞0.05.术后3个月各组远端神经鞘细胞密度均数为A组0.186 0±0.042 5,B组0.155 1±0.032 1,C组0.104 7±0.013 3,D组0.240 9±0.056 8;A组∶D组P值<0.05,B组∶D组、C组∶D组及B组∶C组P值<0.01,A组∶B组P值＞0.05.术后3个月各组靶肌肉运动终板个数均数为A组6.000±0.866,B组9.000±2.291,C组12.780±1.394,D组3.110±0.782;A组∶D组、B组∶D组及C组∶D组P值<0.01,A组∶B组、A组∶C组及B组∶C组P值<0.01.结论雪旺细胞、混合细胞、肾内皮细胞提取液均有促进神经再生作用,肾内皮细胞提取液优于雪旺细胞及混合细胞.     

细胞外ATP对外周神经再生作用的实验研究

目的：研究细胞外ATP对外周神经再生的影响。方法：采用大鼠坐骨神经硅胶管再生室模型,左侧再生室中加入1mmol/LATP作为实验组,右侧再生室中加入生理盐水对照。术后1、2、4、6和12周取材,每次取材除作肉眼观察外,第6、12地行光镜及电镜观察,并采用图像分析检测再生轴突数目和髓鞘厚度。结果：ATP实验组再生神经干的直径,神经干内有髓纤维的数目以及髓鞘的厚度同对照组相比 ,差异非常显著。电镜观察表明,实验组再生随鞘的厚度及成熟情况明显优于对照组。结论：细胞外ATP具有较强的促进神经再生的作用。     

联合使用ATP和NGF对周围神经再生作用的实验研究

目的 研究三磷酸腺苷(adenosine tri-phosphate，ATP)和神经生长因子(nerve growth factor，NGF)联合使用时对受损周围神经再生的作用并比较两者作用的强弱。方法 将64只SD大鼠左侧坐骨神经切断后直接作端端缝合，缝合段置于硅胶管室内。根据室内注入药物的不同，分为生理盐水(NS)、ATP、NGF、和ATP加NGF4组，每组16只大鼠。术后4周和8周(每组均为8只)取标本，作形态学，肌湿重，运动神经传导速度(MNCV)、复合运动动作电位(CMAP)波幅，及组织学的检测。结果 ATP加NGF组的神经纤维数目、大小、髓鞘厚度和MNCV、CMAP及肌湿重均优于其它3个组。NGF组的各项指标比ATP组好。结论联合使用ATP和NGF时受损周围神经的再生作用明显增强。NGF的作用强于ATP。     

党参黄芪丹参等复方中草药合剂对周围神经再生影响的实验研究

目的观察党参、黄芪、丹参、生地、当归及红花等组成的复方中草药合剂对大鼠坐骨神经再生的影响。方法将６０只ＳＤ大鼠随机分为中草药组和对照组。两组大鼠均切断左侧坐骨神经后立即进行缝合术。分别于术后第４、８、１２周检测两侧坐骨神经运动诱发电位的潜伏期和波幅，组织学检测有髓神经轴突数目；计算腓肠肌肌湿重及最大收缩肌张力。结果各指标经统计学处理，术后第４周，实验组各项指标优于对照组；术后第８周、１２周两时间组，中草药组和对照组之间差异无统计学意义。结论党参、黄芪、丹参等复方中草药合剂对大鼠坐骨神经的早期再生具有一定的促进作用     

Safe injection of cultured schwann cells into peripheral nerve allografts

The effects of cultured host Schwann cells on axonal regeneration in peripheral nerve allografts were studied. Fischer rats served as recipient animals and Buffalo rats provided nerve allografts. Animals were randomized into 9 groups. Rats receiving tibial nerve isografts were left untreated (group I), or injected with isogeneic Fischer Schwann cells (group II) or placebo suspension (group III). Allografts obtained from Buffalo rats were left untreated (group IV), or received isogeneic Fischer Schwann cells (group V), 2 mg/kg Cyclosporin A and Fischer Schwann cells (group VI), 5 mg/kg Cyclosporin A (group VII), or 5 mg/kg Cyclosporin A with Schwann cells (group VIII). No Schwann cell tumors were identified 4 or 8 weeks postoperatively. Group IX animals, harvested 3 days postoperatively, demonstrated no evidence of injection injury. Schwann cells modestly improved axonal regeneration in both isografts and allografts and may have a clinical role in the treatment of peripheral nerve allografts.     

Acetyl Salicylic Acid Locally Enhances Functional Recovery after Sciatic Nerve Transection in Rat

Local effect of acetyl salicylic acid (ASA) on peripheral nerve regeneration was studied using a rat sciatic nerve transection model. Forty-five male healthy White Wistar rats were divided into three experimental groups (n = 15), randomly: Sham-operation (SHAM), control (SIL), and ASA-treated (SIL/ASA) groups. In SHAM group after anesthesia left sciatic nerve was exposed through a gluteal muscle incision and after homeostasis the muscle was sutured. In SIL group the left sciatic nerve was exposed the same way and transected proximal to tibio-peroneal bifurcation leaving a 10-mm gap. Proximal and distal stumps were each inserted into a silicone tube and filled with 10 μl phosphate buffered solution. In SIL/ASA group defect was bridged using a silicone tube filled with 10 μl acetyl salisylic acid (0.1 mg/ml). Each group was subdivided into three subgroups of five animals each and were studied 4, 8, and 12 weeks after surgery. Data were analyzed statistically by factorial analysis of variance (ANOVA) and the Bonferroni test for pair-wise comparisons. Functional study confirmed faster and better recovery of regenerated axons in SIL/ASA than in SIL group (p < 0.05). Gastrocnemius muscle mass in SIL/ASA was significantly more than in SIL group. Morphometric indices of regenerated fibers showed that the number and diameter of the myelinated fibers in SIL/ASA were significantly higher than in control group. In immuohistochemistry, location of reactions to S-100 in SIL/ASA was clearly more positive than in SIL group. Response to local treatment of ASA demonstrates that it influences and improves functional recovery of peripheral nerve regeneration.     

神经束植入联合甲钴胺治疗失神经骨骼肌的实验研究

目的研究神经束植入治疗失神经支配骨骼肌．并比较靶肌肉局部用药与全身性用药的疗效,探讨神经营养药物应用的最佳给药方法。方法选用雄性大鼠60只随机等分5组．每组12只,制作左侧胫神经切断动物模型。A组：神经束植入组;B纽：神经束植入＋左侧腓肠肌注射甲钴胺;C组：神经束植入＋腹腔注射甲钴胺;D组：胫神经切断：E组：胫神经切断＋左侧腓肠肌注射生理盐水。术后当日开始,B组隔日左侧腓肠肌注射甲钴胺300μg／kg;C组隔日腹腔注射甲钴胺300μg／kg;E组隔日左侧腓肠肌注射等渗盐水0．02ml。分别于术后4周和8周测量左小腿腓肠肌电生理、肌纤维横截面积和肌细胞TUNEL染色。结果术后4周及8周,A,B,C三组腓肠肌电位波幅组间比较差异均有显著性（P〈0．05）;D组与E组腓肠肌纤颤电位波幅差异无显著性（P〉0．05）。术后4周及术后8周,肌纤维横截面积和肌细胞TUNEL阳性细胞数A,B,C组间差异均有显著性（P〈0,05）,D,E组间差异无显著性（P〉0．05）,A,B,C组与D,E组差异有显著性（P〈0．05）。B组明显优于其他组。结论神经柬植入能有效防治失神经骨骼肌萎缩,靶肌肉给药效果优于全身用药。     

MSCs静脉移植对周围神经再生的作用

目的检测间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)经静脉移植后在周围神经损伤模型内的迁移、分布情况,并评价其对轴突、靶器官的保护作用。方法经尾静脉注射BrdU标记的MSCs入大鼠坐骨神经损伤模型内(实验组)。术后自神经断端、肌肉组织取材检测BrdU阳性细胞,评价坐骨神经指数(SFI)、肌纤维横截面积及肌细胞凋亡数量。结果术后4、8周从神经断端、肌肉组织内检测到BrdU阳性细胞。实验组的SFI、肌纤维横截面积明显高于对照组(不注入MSCs),细胞凋亡数量低于对照组,两组差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论MSCs静脉移植至体内能归巢到损伤的神经断端、肌肉组织,具有促进轴突再生、延缓肌萎缩的作用。     

Functional recovery of sciatic nerve through inside-out vein graft in rats

Objective: Present study aimed at further comprehensive functional, histomorphometrical and immunohistochemical assessment of peripheral nerve regeneration using rat sciatic nerve transection model.Methods: The 10-mm rat sciatic nerve gap was created in rats. In control group nerve stumps were sutured to adjacent muscle and in treatment group the gap was bridged using an inside-out vein graft. In sham-operated group the nerve was manipulated and left intact. All animals underwent walking track analysis test 4, 8, and 12 weeks after surgery.Subsequently, muscle mass measurement was performed to assess reenervation, histological examination to observe the sciatic nerve regeneration morphologically and immunohistochemistry to detect Schwann cells using anti S-100. Results were analyzed using a factorial ANOVA with two between-subjects factors. Bonferroni test for pairwise comparisons was used to examine the effect of treatments.Results: Functional analysis ofmyelinated nerve fibers showed that nerve function improved significantly in the time course in treatment group. However, quantitative morphometrical analysis of myelinated nerve fibers showed that there was no significant difference between 8 and 12 weeks in treatment group. Muscle weight ratio was bigger and weight loss of the gastrocnemius muscle was ameliorated by inside-out vein grafting. The position of positive immunohistochemical reactions further implied that regenerated axons and Schwann cell-like cells existed after vein grafting was performed, and was accompanied by the process of myelination and structural recovery of regenerated nerves.Conclusion: Functional analysis of peripheral nerve repair is far more reliable than quantitative morphometrical analysis     

终末器官对端侧神经吻合后轴突再生影响的实验研究

目的　探讨受神经远端终末器官对端侧吻合后神经再生的影响。方法　SD雌性大鼠 1 0只 ,动物随机分为A、B2组。A组 :在近端切断腓总神经 ,其远断端与胫神经外膜开窗处进行端侧吻合 ;B组 :同A组两神经端侧吻合后 ,在距吻合口 1 .5cm处切断其与终末器官的联系 ,并将连接肌肉的腓总神经远端反折固定在邻近的肌肉组织。术后 1 2周取吻合口处的神经标本 ,甲苯胺蓝和抗神经微丝抗体免疫组化染色、光镜检查及图像分析。结果　甲苯胺蓝染色及神经微丝免疫组化染色结果说明A、B2组再生神经纤维数目、髓鞘厚度、纤维结缔组织含量及神经纤维丝排列 ,均有明显差异。结论　终末器官对促进端侧神经吻合后神经再生具有重要作用