逆转录聚合酶链反应检测鼻息肉环氧合酶-2 mRNA表达

目的检测研究环氧合酶-2(cyclooxygenase-,COX-2)mRNA在鼻息肉组织中的表达水平,深入认识鼻息肉炎性发病机制.方法利用逆转录-聚合链反应(RT-PCR反应)检测35例鼻息肉组织及23例下鼻甲标本的环氧合酶-2的表达.结果鼻息肉组织中COX-2mRNA表达明显高于下鼻甲正常黏膜.结论 鼻息肉组织中COX-2表达明显增高,鼻息肉发病过程中有前列腺素参与.     

双氯芬酸选择性抑制表达环氧合酶-2的肝癌细胞的增殖

目的 检测体外培养的人肝细胞癌HepG2,Hep3B细胞和正常肝细胞系QSG7701细胞内环氧酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表达,观察环氧酶抑制剂双氯芬酸(diclofenac)对上述细胞增殖的作用,并检测前列腺素E2(PGE2)对双氯芬酸作用的影响,以探讨双氯芬酸抗增殖作用与细胞内COX-2的关系.方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测COX-2 mRNA的表达水平,免疫印迹技术检测细胞内蛋白水平,cell counting kit-8(CCK-8)细胞计数法测定细胞增殖活性.结果 肝细胞癌HepG2和Hep3B细胞均高表达COX-2 mRNA和COX-2蛋白,正常肝细胞系QSG7701微弱表达COX-2.10～200 μmol·L-1的双氯芬酸浓度依赖性地抑制HepG2和Hep3B细胞的增殖(P＜0.01),作用72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为76.41和35.21 μmol·L-1.双氯芬酸对QSG7701的抑制作用较弱,IC50值为170.23 μmol·L-1.20 μmol·L-1 PGE2与50 μmol·L-1双氯芬酸共同孵育能显著削弱后者抗HepG2和Hep3B细胞增殖的作用(P＜0.01).结论 双氯芬酸通过抑制COX-2活性和PGE2的生成,特异性地抑制表达COX-2的肝癌细胞的增殖.     

环氧合酶-2在星形细胞肿瘤组织中的表达及临床意义

目的探讨COX-2的表达与星形细胞肿瘤发生、发展的关系。方法应用免疫组化技术和RT-PCR技术检测各级别星形细胞肿瘤组织及非肿瘤组织中COX-2蛋白和mRNA的表达水平。结果COX-2蛋白在各组中的表达强度(IODA值)分别为:非肿瘤组织(2.19±0.88),肿瘤组织(6.38±3.68);COX-2mRNA在各组中的表达阳性率分别为:非肿瘤组织(33.3%),肿瘤组织(83.3%);COX-2mRNA的相对含量分别为:非肿瘤组织(43.49±19.73),肿瘤组织(119.67±46.56);COX-2在肿瘤组织中的表达显著高于其在非肿瘤组织中的表达(P<0.05)。结论COX-2的过表达与星形细胞肿瘤的发生、发展关系密切,是引起肿瘤细胞恶性表型的相关基因之一;毛细胞型星形细胞瘤与弥漫性浸润性星形细胞肿瘤的遗传基础不同,是一种在生物学和形态学上所发生的基因改变不同于其它胶质瘤的星形细胞肿瘤;COX-2除参与肿瘤形成、炎症的发生等病理过程外,在人体器官发育及正常生理功能的维持过程中也起到比预期更为复杂的作用。     

药物干预对糖尿病大鼠血管环氧合酶-2表达的影响

目的 观察阿司匹林、泼尼松及培哚普利(商品名为雅施达)对糖尿病(DM)大鼠模型血管环氧合酶(COX)-2 mRNA表达的影响.方法 25只Sprague-Dawley大鼠,随机分为为正常对照组、DM组、阿司匹林组、泼尼松组和培哚普利组,用药组的用药量均为1 mg·kg-1·d-1.10周后,采用逆转录-聚合酶链反应(PCR)及实时-PCR方法比较各组大鼠血管COX-2 mRNA表达的变化情况.结果 逆转录-PCR扩增COX-2mRNA的拷贝,在期待的228 bp位置,各组均出现COX-2 DNA条带,DM组的表达最强,随后依次是培哚普利组、阿司匹林组和泼尼松组.正常对照组的表达最弱.实时-PCR结果显示,正常对照组的COX-2 mRNA相对表达量为0.29±0.02,显著低于DM大鼠各组(P值分别<0.01和0.05).DM大鼠各组中,DM组的COX-2mRNA相对表达量为0.83±0.02,显著高于培哚普利组的0.59±0.02、阿司匹林组的0.56±0.13和泼尼松组的0.38±0.06(P值均<0.01),培哚普利组和阿司匹林组又显著高于泼尼松组(P值均<0.05).结论 COX-2mRNA的活性变化可作为观测DM血管炎症反应程度的新指标,抑制COX-2成为抑制血管炎症反应的新途径.泼尼松、阿司匹林和培哚普利均能减轻DM血管炎症,且泼尼松作用最强.     

环氧化酶-2mRNA在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨乳腺癌组织中COX-2mRNA的表达与乳腺癌发生、发展及预后的关系.方法以β-action基因为内参照,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测35例乳腺癌组织、相应癌旁组织、正常乳腺组织中COX-2mRNA的表达,应用Gene Tools from SynGene软件,对RT-PCR产物电泳带进行半定量分析.结果35例癌组织中,29例COX-2表达明显增高(0.83),相应6例癌旁组织COX-2有不同程度的表达(0.17),正常乳腺组织表达很弱或无表达,后二者与癌组织中COX-2表达差异均有显著意义(P<0.05).COX-2表达同年龄、原发肿瘤大小、TNM分期及术前化疗与否无关(P>0.05),而与淋巴结转移状况有关(P<0.05).结论乳腺癌组织中COX-2的表达明显高于相应癌旁组织、正常乳腺组织,且其表达与淋巴结转移状况有关.     

卵巢癌、宫颈癌及子宫内膜癌组织中环氧合酶-2的表达及临床意义

目的研究环氧合酶-2在卵巢癌、宫颈癌及子宫内膜癌组织中的表达，以探讨其与这3种肿瘤发生、发展的关系。方法用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术，检测卵巢浆液性癌、宫颈鳞癌及子宫内膜腺癌组织中COX-2 mRNA表达，并与相应组织比较。结果各种癌组织中COX-2 mRNA表达率及相对含量明显高于其相应的癌前病变或交界性肿瘤组织（P〈0．01），且与良性肿瘤、慢性炎症或正常组织比较，差异有显著性（P〈0．05）。在有淋巴结转移的宫颈鳞癌组织中，COX-2 mRNA相对含量高于无淋巴结转移组（P〈0．05）。在中、低分化及有深肌层浸润的子宫内膜腺癌组织中COX-2 mRNA相对含量高于高分化及浅肌层浸润组，差异有显著性（P〈0．05）。在卵巢浆液性癌组织中COX-2 mRNA的表达与手术病理分期、组织学分级、有无腹水及淋巴结转移无关。结论COX-2可能在卵巢癌、宫颈癌及子宫内膜癌的发生、发展中起重要作用，并与其生物学行为密切相关。     

Akt1在环氧合酶-2抑制剂抑制宫颈癌Hela细胞增殖中的作用

目的研究Akt1在环氧合酶2抑制剂NS398抑制宫颈癌Hela细胞增殖过程中的作用。方法以不同浓度的NS398或Akt1选择性激动剂IGF-1与NS398共同处理Hela细胞,采用噻唑蓝（MTT）比色法分析细胞生长抑制率,Western blotting免疫印迹技术分别检测Akt1蛋白表达的变化。结果与对照组比较,不同浓度的NS398处理Hela细胞后,细胞生长抑制率（IR）增加（P〈0.05）;NS398呈浓度和时间依赖性下调Hela细胞Akt1蛋白质的表达（P〈0.05）;与单独用NS398组比较,Akt1激动剂与NS398共同处理细胞后,细胞IR值逐渐下降,并且其作用呈浓度依赖和时间依赖性（P〈0.05）。结论 NS398呈剂量和时间依赖性抑制Hela细胞的增殖,其作用机制可能与下调Akt1蛋白的表达有关。     

选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398体外抑制结肠癌细胞增殖和侵袭

目的:观察环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS-398对结肠癌细胞增殖、侵袭的影响,探讨COX一2作为结肠癌治疗靶标的可行性.方法:用RT-PCR和Western印迹法检测结肠癌细胞CW-2、COLO-320中COX-2基因及蛋白的表达.MTT法观察NS-398对COLO-320细胞增殖的抑制作用;体外细胞侵袭试验检测NS-398对细胞侵袭能力的影响;Western印迹检测NS-398对基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响.结果:结肠癌细胞株CW-2、COLO-320中COX-2均有阳性表达.NS-398能抑制结肠癌细胞株COLO-320的生长,抑制作用具有时间、浓度依赖性.细胞侵袭试验表明,NS-398体外能抑制结肠癌细胞株COLO-320的侵袭.Western印迹结果表明NS-398可以抑制COLO-320中MMP-2的表达.结论:COX-2抑制剂NS-398体外可显著抑制结肠癌细胞的生长、侵袭,COX-2可作为结肠癌治疗的靶点.     

EGFR mRNA和COX-2 mRNA在NSCLC组织中表达的临床意义

目的　探讨表皮生长因子受体 (epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)mRNA及环氧合酶 2 (cyclooxygenase 2 ,COX 2 )mRNA在非小细胞肺癌 (non smallcelllungcancer,NSCLC)组织中表达的临床意义。 方法　抽取 4 8例NSCLC组织中的RNA ,应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测其中EGFRmRNA及COX 2mRNA的表达。结果　在 2 8例肿瘤组织中存在EGFRmRNA的表达 ,T3 4期的患者的EGFRmRNA表达率显著高于T1 2期的患者 (P <0 .0 5 ) ;在 36例肿瘤组织中存在COX 2mRNA的表达 ,肺腺癌COX 2mRNA的表达率显著高于肺鳞癌(P <0 .0 5 ) ,COX 2mRNA的表达率与 pTNM分期关系密切 (P <0 .0 5 ) ,COX 2mRNA的表达强度与原发肿瘤、淋巴结转移及 pTNM分期的关系密切 (P <0 .0 5 )。COX 2mRNA阳性表达的患者其EGFRmRNA表达率显著高于COX 2mRNA阴性表达的患者 (P <0 .0 5 ) ;EGFRmRNA与COX 2mRNA两者有显著相关性 (相关系数rs=0 .380 7,P <0 .0 5 )。结论　NSCLC中EGFRmRNA和COX 2mRNA的表达在NSCLC的发生、发展和转移中具有重要意义 ,二者可能有协同作用 ,可作为评估NSCLC进展及判断预后的重要指标。     

环氧合酶-2抑制剂调控Stat5信号转导通路抑制结肠癌细胞增殖的分子机制

目的观察选择性环氧合酶-2（COX-2）抑制剂NS-398对结肠癌细胞系SW480中Stats与PPAR8信号转导通路的影响,以期初步阐明选择性COX-2抑制剂抗结直肠癌非COX-2依赖性的作用机制。方法应用RT—PCR检测结肠癌细胞系SW480中COX-2 mRNA表达水平,用选择性COX-2抑制剂NS-398处理结肠癌细胞系SW480,Western印迹检测Stats与PPAR8信号转导通路成员表达,四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖状态,流式细胞技术检测细胞周期与凋亡情况。结果结肠癌细胞系SW480中未检测到COX-2 mRNA表达,NS-398（75μmol／L）作用于SW480细胞72h后,G1期细胞比率由31．2％上升至40．6％,S期细胞比率由52．8％下降至41．2％,细胞增殖受抑制。Stats、PPAR8、细胞周期蛋白D1与Bcl—x1表达水平随NS-398作用时间延长而下降。结论选择性COX-2抑制剂NS-398可能通过非COX-2依赖途径影响结肠癌细胞的增殖。     

COX-2基因在人脑星形细胞肿瘤组织中表达及其与Fas基因表达的相关性

目的：探讨COX-2 mRNA在星形细胞肿瘤组织中的表达及与Fas mRNA表达的相关性。方法： 应用RT-PCR技术检测不同级别星形细胞肿瘤组织及非肿瘤组织中COX-2 mRNA和Fas mRNA的表达水平。结果：COX-2 mRNA表达阳性率分别为：非肿瘤组织33.3%,肿瘤组织78.4%;Fas mRNA阳性表达率分别为：非肿瘤组织8.3%,肿瘤组织74.5%;二者在肿瘤组织中的表达显著高于其在非肿瘤组织中的表达（P<0.05）,且有良好的相关性（r=0.525,P=0.008）。结论：COX-2 mRNA表达与星形细胞肿瘤的发生、发展有关,是评估星形细胞肿瘤恶性生物学行为的可靠指标;COX-2 mRNA表达与Fas mRNA密切相关,两者可能存在共同的激活机制,构成抑制肿瘤细胞凋亡的多种途径。     

血管内皮生长因子B mRNA在乳腺癌组织中的表达及意义

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)B mRNA在乳腺癌组织中的表达及意义.方法采用逆转录-聚合酶链反应技术对手术的47例乳腺癌标本和11例乳腺良性病变标本中VEGF-B mRNA的表达进行检测.结果在良恶性乳腺组织中均检测到VEGF-B167、186 mRNA表达,VEGF-B167在乳腺癌和良性乳腺组织中100%表达,VEGF-B186在乳腺癌和良性乳腺组织中的表达率分别为78.7%和54.5%,VEGF-B167在乳腺癌和良性乳腺组织中表达水平分别为(0.222±0.078)和(0.176±0.062),两者差异无显著性(P=0.077),VEGF-B186在乳腺癌和良性乳腺组织中表达水平分别为0.167(0.080～0.219)和0.071(0.000～0.156),乳腺癌中表达水平明显升高(P=0.010).VEGF-B167、186 mRNA表达与乳腺癌患者年龄、肿块大小、淋巴结转移状况、肿瘤分期及雌、孕激素受体状况之间无明显相关性.结论乳腺癌组织中VEGF-B186 mRNA表达水平上调,而VEGF-B167 mRNA表达水平无明显上调,提示VEGF-B186可能在乳腺癌中起着某些生物学作用.     

星形细胞瘤发生的分子生物学机制及与COX-2 mRNA表达的相关性

目的:探讨环氧合酶2(COX-2)mRNA的表达与星形细胞瘤发生、发展的关系以及星形细胞瘤发生的分子生物学机制。方法:应用RT-PCR技术检测各级别星形细胞瘤组织及非肿瘤脑组织中COX-2mRNA的表达水平。结果:COX-2mRNA表达阳性率肿瘤组织为83.3%,非肿瘤脑组织为28.6%;COX-2mRNA的相对含量肿瘤组织为119.67±46.56,非肿瘤脑组织为43.14±19.26;COX-2mRNA在肿瘤组织中的表达显著高于其在非肿瘤脑组织中的表达(P<0.05)。结论:COX-2mRNA表达与星形细胞瘤的发生、发展呈显著正相关,其过表达是星形细胞瘤的重要分子生物学特征。     

胶原类基因mRNA在口腔鳞癌组织中的表达

摘要：目的研究胶原类基因COL1A1、COL1A2、COL4A1、COL4A2、COL5A2 mRNA在口腔鳞状细胞癌（OSCC）及配对
正常口腔黏膜组织中的表达及意义。方法采用RT-PCR方法检测30例OSCC患者肿瘤组织及其配对的正常口腔黏膜中
胶原基因COL1A1、COL1A2、COL4A1、COL4A2、COL5A2 mRNA的表达;所得数据采用SAS6.12软件包进行t检验。结
果RT-PCR 检测结果表明,COL1A1 mRNA在OSCC 中的表达较其对照粘膜表达上调2.78 倍（P<0.001）。COL1A2、
COL4A1、COL4A2、COL5A2 mRNA在OSCC中的表达较其对照黏膜分别上调1.07、1.15、1.27、1.16 倍（P>0.05）。结论
在OSCC癌变过程中,COL1A1 mRNA过表达,可能是OSCC的一个靶基因;COL1A1在OSCC分类诊断中有应用价值。     

选择性环氧合酶-2抑制剂对胃癌细胞Bgc-823增殖的影响

目的探讨选择性环氧合酶-2（COX-2）抑制剂——美洛昔康、塞来昔布对胃癌细胞Bgc-823增殖与凋亡的影响。方法四唑盐比色实验法（MTT法）检测Bgc-823细胞的生长情况;流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期。结果美洛昔康、塞来昔布呈剂量和时间依赖性抑制Bgc-823细胞的增殖;塞来昔布的作用强于美洛昔康。塞来昔布可诱导Bgc-823细胞凋亡,将细胞阻滞在G0/G1期;随着药物浓度的增加,凋亡率增加,G0/G1期细胞比例增加。结论选择性COX-2抑制剂呈剂量和时间依赖性抑制胃癌细胞生长,这种作用可能依赖于对COX-2表达的抑制。选择性COX-2抑制剂呈剂量依赖性影响细胞周期,诱导胃癌细胞凋亡。     

尼美舒利、阿司匹林对COX-2不同表达水平的食管鳞癌细胞株的抑制作用

目的比较选择性和非选择性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂对不同COX-2表达水平的食管鳞癌细胞的抑制作用。方法选取食管鳞癌细胞株EC109和TE-1,采用Western blotting法测定COX-2蛋白表达、MTT法检测细胞增生以及流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡(PI标记),观察阿司匹林及尼美舒利对2株细胞增生、凋亡的作用。结果 Westernblotting结果显示,EC109细胞表达COX-2,TE-1细胞不表达COX-2。选择性COX-2抑制剂———尼美舒利可抑制EC109细胞的增生,抑制率为(17.5±3.3)%~(80.1±3.9)%。尼美舒利仅在0.4 mmol/L时对TE-1细胞有抑制作用,抑制率为(16.2±7.0)%。尼美舒利可使EC109细胞的细胞周期阻滞于G0/G1期,并诱导细胞凋亡,但对TE-1细胞无上述作用。非选择性COX-2抑制剂———阿司匹林在0~4 mmol/L浓度区间对EC109和TE-1均有抑制作用,并呈剂量依赖关系。阿司匹林作用后,EC109与TE-1的细胞周期均被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率分别为(10.55±0.01)%及(8.52±6.65)%。结论食管鳞癌(esophagealsquamous cell carcinoma,ESCC)细胞株中COX-2的表达水平影响了选择性COX-2抑制剂的抑制作用,而对非选择性COX-2抑制剂影响较小。阿司匹林可能通过非COX-2依赖途径从而发挥对肿瘤的抑制作用。     

塞来昔布对人肝癌细胞增殖的抑制作用

目的 观察塞来昔布对肝癌增殖的抑制作用.方法 以人肝癌细胞株SMMC-7721为研究对象,四唑氮蓝还原法(MTT)观察不同浓度和作用时间的塞来昔布对细胞增殖的抑制作用,流式细胞技术检测细胞周期,并用小鼠肝癌细胞株H22建立昆明鼠移植瘤模型,观察塞来昔布对移植瘤生长的抑制效果.结果 MTT显示塞来昔布对人肝癌细胞SMMC-7721生长有显著的抑制作用,且呈现出时间和剂量依赖性;塞来昔布(40 μmol/L)作用于SMMC-7721细胞36h后,G1期细胞比率由44.7%上升至49.9%,S G2/M期细胞比率由55.4%下降至50.1%,细胞增殖受抑制.在体动物实验表明,塞来昔布对移植瘤的生长和局部转移有显著的抑制效果.结论 环氧合酶-2抑制剂塞来昔布对不同来源的肝癌细胞株均有增殖抑制作用,可能是预防和治疗肝癌的重要候选药物之一.     

白藜芦醇上调BATF2表达及抑制肝癌细胞增殖的研究

目的 初步探讨白藜芦醇对BATF2表达的调控作用及对肝癌细胞(HepG2)增殖能力的影响.方法 用不同剂量的白藜芦醇(终浓度分别为20、40、80 μmol/L)处理HepG2细胞,进行逆转录PCR (RT-PCR)、实时定量PCR (Real-time PCR)、Western blot检测碱性亮氨酸拉链转录因子2(BATF2) mRNA和蛋白水平表达的变化,并采用细胞增殖检测试剂(CCK-8)实验检测对细胞增殖能力的影响.结果 在HepG2细胞中,白藜芦醇能剂量依赖性地诱导BATF2在转录和翻译水平的表达,并抑制细胞的增殖(P＜0.05);基因检测发现白藜芦醇显著诱导BATF2启动区活性,-244～-152区域存在白藜芦醇的可能结合位点.结论 白藜芦醇能增强HepG2细胞中BATF2的表达并抑制细胞的增殖,提示上调BATF2的表达可能是白藜芦醇抑制肝癌细胞增殖的机制之一.     

FEZ1基因在食管鳞癌组织中的表达及其意义

目的 探讨肿瘤抑制基因FEZ1在食管鳞癌组织中的表达及其意义.方法 采用RT-PCR法检测50例食管鳞癌及及50例正常食管组织中FEZ1 mRNA的表达情况,分析其与食管鳞癌患者各临床病理指标的关系.结果 FEZ1 mRNA在食管鳞癌组织中的阳性表达率(48.0%)及表达水平(0.994±0.094)均显著低于正常食管组织(84.0%,1.071±0.181),并且其在食管鳞癌组织中的阳性表达率及表达水平与淋巴结转移密切相关(P＜0.05).结论 在食管鳞癌组织中存在FEZ1基因的失表达,并且这种表达与食管鳞癌的淋巴结转移有关.