胸腺内供体脾细胞注射诱导大鼠皮肤移植免疫耐受

观察非紫外线处理供体脾细胞经胸腺途径诱导免疫耐受对同种异体移植皮瓣存活的影响。方法：将大鼠随机分成两组，每组１４只，对照组单纯作皮肤移植，实验组在移植前８ｄ作胸腺内脾细胞悬液注射。结果：实验组皮肤移植存活时间明显延长，红细胞免疫反应及迟发性超敏反应未见明显增强，与对照比较差异显著。     

胸腺注射供体脾细胞诱导移植心免疫耐受的实验研究

本实验采用大鼠腹部心脏移植模型，在移植２１天将供体脾细胞分别注射到受体的胸腺，脾脏，静脉，皮下，然后行异位心脏移植，术后１周每日腹腔注射环孢素Ａ１０ｍｇ／ｋｇ。胸腺注射供体脾细胞联合应用ＣｓＡＸＥＧ ＴＱＳＦＮＹ ＧＵＦＱ时间较其它组显著延长，受体对供体靶细胞没有出现细胞介导的细胞毒作用。     

供体MHC抗原胸腺注射诱导皮肤移植免疫耐受

为建立一种经胸腺诱导移植免疫耐受的动物模型。方法：从供体Ｃ５７ＢＬ／６小鼠脾细胞提取主要组织相容性复合体抗原，注射到异基因受体小鼠ＢＡＬＢ／Ｃ胸腺内，诱导成年小鼠对异基因供体皮肤移植物的特异性免疫耐受。结果：实验组移植皮片平均存活时间为８３天，对照组ＭＳＴ为１１天。第三供体组ＭＳＴ为１２天。结论：胸腺注射异基因小鼠脾细胞ＭＨＣ抗原，可能诱导特异性移植免疫耐受。皮肤移植模型是一种可靠易行的诱导耐受的     

心胸腺联合移植结合胸腺内注射供体胸腺细胞诱导大鼠同种异体心脏移植免疫耐受

目的：研究供体胸腺细胞经胸腺注射对大鼠心脏及胸腺移植的影响。方法：将SD大鼠的胸腺细胞注入Wistar大鼠胸腺内,2周后行心脏及心胸腺联合移植（SD→Wistar）,观察移植心存活时间和病理排斥反应,检测血中及移植心中IL-2及IL-4水平。结果：单纯心脏移植及心胸腺联合移植在环孢素短期（7d及14d）应用下,可延长移植心及胸腺的存活时间,但不能诱导耐受;经胸腺注射供体胸腺细胞后,行单纯心脏移植及心胸腺联合移植,在短期环孢素作用下,移植心及胸腺均获长期存活;在移植物长期存活组IL-4保持较高水平,而IL-2处于较低水平。结论：经胸腺注射胸腺细胞可以诱导对同种异体心脏及胸腺的耐受;胸腺移植有利于耐受的诱导和维持。     

混合胸腺移植诱导皮肤移植物免疫耐受的实验研究

目的通过建立混合胸腺移植模型,对混合胸腺移植诱导皮肤移植物免疫耐受及其机制进行初步研究.方法混合胎胸腺移植3个月后,进行异基因皮肤移植,观察异种皮肤移植物的存活情况,并利用流式细胞仪检测各组受体动物外周血中CD4 CD25 T细胞的百分率,利用免疫组化观察宿主骨髓源细胞在胸腺移植物内的分布情况.利用脾细胞过继转移,观察对异种供体抗原已产生耐受的受者脾细胞,能否将耐受状态过继转移至正常BALB/c小鼠.结果混合胸腺移植3个月后,受体外周血白细胞中CD4 CD25 T细胞的百分率为(2.83±0.20)% ,与正常BALB/c小鼠相比,相差不显著.免疫组化染色显示,在移植胸腺内宿主源MHC-Ⅱ分子阳性细胞主要位于髓质,并具有典型树突样外观.将对F344大鼠皮肤已产生耐受的脾细胞,过继转移至免疫健全的BALB/c小鼠,可特异延长胸腺供体来源的F344大鼠皮肤移植物的平均存活时间.结论通过胸腺移植诱导的免疫耐受,主要是以胸腺内的中枢排除机制以及调节性T细胞的免疫抑制作用为主,而且此种耐受具有一定的"可转传性".     

门静脉注射供体脾细胞诱导免疫耐受机制的研究

目的：利用大鼠异心脏移植模型,探讨门静脉注射供体脾细胞诱导免疫耐受的机制。方法：受体鼠移植术前经门静脉注射供体脾细胞并联合短期应用环孢菌素A。采用MTT法检测术后受体鼠脾淋巴细胞白细胞介绍2（IL－2）产生水平及NK细胞活性,采用ELISA法检测受体鼠γ-干扰素（γ-IFN）表达水平。结果：门静脉注射供体脾细胞显著抑制受体脾淋巴细胞IL－2、γ-IFN的表达及NK细胞活性,联合应用环孢菌素A抑制效应更显著。结论：抑制IL-－NK－γ－IFN免疫网络功能可能是门静脉注射供体脾细胞诱导免疫耐受的机制之一。     

胸腺内接种同种脾细胞诱导新生期大鼠免疫耐受的研究

为了诱导新生大鼠免疫耐受。方法：将 ２．５ ｘ １０７个 Ｗｉｓｔａｒ大鼠脾淋巴细胞通过胸腺途径注射给 新生ＳＤ大鼠,４－６周龄时取其脾淋巴细胞与Ｗｉｓｔａｒ大鼠脾淋巴细胞（２０ Ｇｙ照射）进行混合培养,作氚标记并测定 放射强度。结果：实验组放射强度平均为（１０．８５±２．５６）Ｂｑ;对照组为（２４．８２±５．４４）Ｂｑ,２组比较差异显著（Ｐ＜ ０．００１）。结论：新生期大鼠胸腺内接种同种脾淋巴细胞可以诱导其免疫耐受。     

小鼠胸腺内注射异基因抗原诱导移植免疫耐受临床意义

目的:探讨小鼠胸腺内注射异基因抗原在同种异体异基因坐骨神经移植免疫耐受中的作用。方法:自供体小鼠C57BL/6的脾细胞中提取MHC抗原注入受体鼠Balb/c小鼠胸腺内,于2后周移植供体鼠坐骨神经。48只Balb/c小鼠随机分为4组,A组(胸腺内注射组)、B组(自体神经移植组)、C组(冷冻异体神经移植组)、D组(异体神经移植加用免疫抑制剂组)。于3周后进行电生理学、组织学、免疫学检测。结果:运动神经传导速度,A组(38.23m/s)与D组(36.39I彬S)相比无显著性差异(p>0.05),组织学、电镜、免疫学(混合淋巴细胞培养及迟发性超敏反应)检测结果均证实B组分别优于A组、D组、C组。结论:胸腺内注射异基因MHC抗原可诱导对异体坐骨神经移植的特异性免疫耐受。     

胸腺注射供体脾细胞诱导移植心免疫耐受的实验研究

本实验采用大鼠腹部心脏移植模型，在移植前21天将供体脾细胞分别注射到受体的胸腺、脾脏、静脉、皮下，然后行异位心脏移植，术后1周每日腹腔注射环孢素A（CsA）10mg／kg。胸腺注射供体脾细胞联合应用CsA组移植心平均存活时间较其它组显著延长，受体对供体靶细胞没有出现细胞介导的细胞毒作用．结果表明：胸腺注射洪体脾细胞联合应用CsA能成功诱导免疫耐受，胸腺内特异性T细胞克隆消除可能与免疫耐受的形式有关．     

同系或同种胸腺与异种胸腺混合移植诱导T细胞免疫耐受的实验研究

目的 探讨同系或同种胸腺与异种胸腺混合移植诱导移植免疫耐受而不发生自身免疫性疾病的可行性。方法 BALB／c裸小鼠的肾包膜下植入胸腺建立异种、同系与异种混合、同种与异种混合胸腺移植模型。4个月后，用流式细胞仪技术检测受者裸小鼠外周血中CD3^＋CD4^＋T细胞，用单向混合淋巴细胞培养了解受者T细胞对ConA以及同种异种淋巴细胞的反应性，异基因皮肤移植观察皮肤移植物存活期。用ELISA法检测受体血清中抗DNA自身抗体。结果 胎胸腺移植4个月后，受者裸小鼠中CD3^＋CD4^＋T细胞重建良好；T细胞对ConA以及无关的SD鼠异种淋巴细胞的反应性强，而对移植胸腺供体来源的淋巴细胞不发生增殖反应；受者对移植胸腺供体来源鼠皮肤移植物不发生排斥，而对无关的SD鼠皮肤移植物发生排斥。异种胸腺移植组发生消耗性疾病死亡高，抗DNA自身抗体明显高于混合胸腺移植组。结论 同系或同种异种胎胸腺混合移植可诱导受者T细胞对供者移植物的免疫耐受。     

CD25mAb及联合供体脾细胞诱导心脏移植免疫低反应性

目的观察静脉应用CD25mAb及联合应用供体脾细胞对移植心脏生存时间的影响。方法建立大鼠异位心脏移植模型，术中应用CD25mAb及联合应用供体脾细胞。术后通过腹壁触诊判断移植心脏存活情况。结果CD25mAb组移植心脏生存时间为12．10±4．04天，与未用药组（8．5±2．42天）相比差异有显著性意义（P〈0．05）。CD25mAb＋供体脾细胞组移植心脏生存时间为12．80±3．61天，与单独应用CD25mAb组相比没有明显差异（P〉0．05），但比单独用脾细胞组（8.40±3．50天，P〈0．05）和未用药组有明显延长（P〈0．05）。结论静脉应用CD25mAb及联合应用供体脾细胞均可以延长移植心脏生存时间。     

受体血预先经门静脉输入供体诱导移植肝浸润细胞凋亡

目的探讨受体血预先经门静脉输入供体对大鼠肝移植免疫排斥反应的作用。方法采用LEW和ACI大鼠作为肝移植的受体和供体。实验分为4组,Ⅰ组,无处理组;Ⅱ组,移植前7d将受体血1ml经阴茎静脉输入供体;Ⅲ组,移植前7d将非受体大鼠血(BN大鼠)1ml经门静脉输入供体;Ⅳ组,移植前7d将受体血1ml经门静脉输入供体。移植后观察大鼠生存时间;检测血清γ干扰素(IFN-γ)浓度;检测移植肝内树突状细胞数量,进行肝组织学观察;检测移植肝内浸润淋巴细胞的凋亡。结果移植前7d受体血经门静脉输入供体组的生存时间显著延长,为(33.7±2.6)d,无处置组为(10.1±0.7)d。移植前7d受体血经门静脉输入供体组的血清IFN-γ显著升高,移植肝汇管区内的淋巴细胞浸润显著减少,移植肝内检测到多量供体来源的树突状细胞。移植前7d受体血经门静脉输入供体组的肝组织的浸润淋巴细胞凋亡数显著多于无处置组。结论受体血预先经门静脉输入供体,可以延长异系大鼠肝移植生存时间,移植肝内浸润淋巴细胞凋亡可能抑制排斥反应。     

紫外线照射的供体脾细胞预输注对大鼠同种异体神经移植的影响

目的：探讨大鼠尾静脉预输注经紫外线照射的供体脾细胞在同种异体坐骨神经移植中的作用。方法：20只雄性Wistar大鼠随机分为未经紫外线照射的供体脾细胞注射组（非照射组）、经紫外线照射的脾细胞注射组（照射组）两组，每组10只。未照射组注射未经紫外线照射的供体脾细胞，照射组注射经紫外线照射的脾细胞，7d后移植供体神经。术后7d行外周血T淋巴细胞亚群检查，术后8W行移植神经组织学检查。结果：照射组CD4^＋百分率、CD4^＋CD8^＋比值较非照射组明显降低（氏O．01，P〈0．05），CD8^＋百分率较非照射组明显升高（P〈0．01）。组织学检查显示，照射组的再生神经较非照射组多。结论：尾静脉内注射经紫外线照射的异基因脾细胞可诱导对异体神经移植的特异性免疫耐受。     

供者未成熟树突状细胞对大鼠皮肤移植免疫耐受的诱导

目的探讨供者未成熟树突状细胞 (dendritic cells,DC)对同种异体皮肤移植免疫耐受的诱导效果 ,为抗排斥反应治疗提供依据。方法以供者未成熟树突状细胞术前预处理受者 ,或术后联用环孢霉素 (CSA)。根据实验分组对皮肤移植术后移植皮片存活情况观察。结果对照组、未成熟 DC组、未成熟DC联用环孢霉素组 ,其受体存活时间分别为 6 .86± 1.34d、7.5 7± 1.99d、2 2 .4 3± 4 .4 6 d。未成熟 DC组与对照组之间差别无显著性差异 ,而与未成熟 DC联用环孢霉素组有显著性差异 (P<0 .0 0 1)。结论供者未成熟树突状细胞术前预处理移植受体 ,可明显延长移植物存活时间。     

同种移植激活的宿主树突状细胞能介导免疫耐受

目的 依据T细胞的发育机制理论。诱导针对移植物特抗原的异性免疫耐受。方法 先用致死剂量的γ射线，将受者的T细胞及干细胞去除，形成了一个不具干细胞、前T细胞和T细胞的受者模型，称受者模型Ⅰ。同时经同种皮肤移植制造正常的受者对供者器官的免疫排斥反应的模型，称模型Ⅱ。从模型Ⅱ中经免疫磁珠分选取得被供者抗原所激活的、具有抗原提呈功能的树突状细胞，与正常的事先准备好的受者骨髓细胞在体外混合后回输至受者模型Ⅰ中。受者Ⅰ完成免疫造血功能重建后。再对其行同种皮肤移植。分5组，分别观察移植皮片的存活时间。并常规病理组织切片和流式细胞分析检测。结果 由T细胞发育的上游诱导产生特异性的免疫移植耐受，比较对照组，实验组皮片存活时间显著延长（P〈0．005），流式细胞分析和病理组织学分析差异也有显著性。结论 在所建立的模型和系统中，能诱导移植物特异性的免疫耐受，也进一步验证了胸腺的阴性选择理论。     

异基因脾细胞诱导大鼠免疫耐受实验研究

目的比较异基因脾细胞经受体门静脉和口服两种途径输注诱导免疫耐受的效果。方法将供体SD大鼠的脾细胞经门静脉或经口服途径输注给受体Wistar大鼠,1周后把SD大鼠的皮肤移植到相应的Wistar大鼠上。观察术后移植皮肤的存活时间,受体外周血淋巴细胞CD25的表达水平和外周血T淋巴细胞亚群,以判断耐受水平。结果移植皮肤的平均存活时间(MST)在门静脉耐受诱导组为15·8±2·1天,口服耐受诱导组为13·0±1·3天,均较对照组长(P<0·01);组间MST比较门静脉耐受诱导组比口服耐受诱导组长(P<0·01);随各组移植皮肤存活时间的延长,外周血淋巴细胞的CD25表达水平呈下降趋势;外周血T淋巴细胞亚群呈现CD4+T细胞下降,CD8+T细胞上升,CD4/CD8比值减少的趋势。结论经门静脉途径输注异基因脾细胞诱导的免疫耐受效果比经口服途径好。     

IL-10基因修饰树突状细胞对大鼠皮肤移植免疫耐受的诱导

目的:探讨白介素10(IL-10)修饰的供体树突状细胞(dendriticcells,DC)对大鼠同种异体皮肤移植术后免疫耐受的诱导效果,为该基因治疗方法在皮肤移植的临床应用提供依据。方法:供体DC以humanIL-10基因修饰后,通过外周静脉输入受体体内,一周后行大鼠同种异体皮肤移植,根据实验分组观察受体移植皮肤存活情况。结果:对照组、未修饰DC组、hIL-10修饰DC组大鼠移植皮肤存活时间分别为(6.86±1.34)d、(7.57±2.45)d、(13.71±4.04)d,经统计学处理,未修饰DC组与对照组之间无显著性差异,而hIL-10修饰DC组与对照组之间有显著性差异(P<0.01)。结论:hIL-10修饰的供体DC预处理受体,可明显延长移植皮肤存活时间。