体液游离氨基酸反相高效液相色谱测定法

介绍了以异硫氰酸苯酯为柱前衍生剂，蛋氨酸砜为内标物，在反相高效液相色谱仪上测定体液２９例游离氨基酸的方法，线性范围在０．０１－１０．００μｍｏｌ／之间，最低检测浓度为μｍｏｌ／Ｌ氨基酸浓度与相对响应值之间的相关系数均在０．９９４以上，批内变异系数为１．５％－４．８％。批间变异系数为３．２％－５．１％。１５例健康者和１８例肾病患者血清游离氨基酸含量测定结果表明，两者必需氨基酸与非必需氨基酸比值之间的     

高效液相色谱荧光检测法测定尿雌三醇

报告用高效液用色谱（ＨＰＬＣ）测定孕妇尿内总雌三醇（Ｅ＿３）的方法。尿标本在酸水解后用乙醚提取Ｅ＿２，蒸干乙醚，残留物用流动相（甲醇／乙腈／水＝４０／１７／４３）重组。标本成分Ｃ＿８柱分离，以２８５ｎｍ波长激发，在６１０ｎｍ测定Ｅ＿３的自然荧光。本法批内ＣＶ为１２％～１．５％（ｘ＝３２．７～１２８．２ｕｍｏｌ／Ｌ），批间ＣＶ别为２．３％和４０％（分别是３８．４和９８．９ｕｍｏｌ／Ｌ）。本法在４．３３～１３８．７ｕｍｏｌ／Ｌ（１２５～４０．００ｍｇ／Ｌ）间呈线性，最低检出１．９ｕｍｏｌ／Ｌ（０．５２ｍｇ／Ｌ，信号／噪声比为３）。     

血清过氧化氢酶活活性比色测定法

介绍一种简便、快速的血清过氧化氢酶活性的比色测定方法。探讨了其比色波长的选择、Ｈ２Ｏ２、钼酸铵试剂浓度与吸光度的关系，溶血、脂血、黄疸标本对测定结果的影响，以及标本与试剂的存放等因素。本法精密度试验批内变异系数（ｃｖ）为４．６％，批间ＣＶ为５．０％。对４７例新生儿脐血清标本的过氧化氢酶活性测定平均值是：１４７．７±５９．９ＫＵ／Ｌ（４２．０～２３６．４）．测定了９７７例健康人的血清过氧化氢酶活性为：５２．７±１７．０ＫＵ／Ｌ（１５．２～１１８．２）。试验结果表明：男性血清过氧化氢酶活性较女性１６．６％，其结果有随年龄增长而增高的趋势。     

血液透析病人血浆游离肉碱测定及临床意义

目的建立血浆游离肉碱测定方法及探讨血浆游离肉碱测定的临床意义。方法用放射性同位素酶化学法测定血浆游离肉碱，然后检测健康献血员及血液透析（血透）患者各３０例，并与透析时间及透析并发症发生率作相关分析。结果同位素酶化学法血浆游离肉碱最小测定浓度为２．５μｍｏｌ／Ｌ，灵敏度为９４ｃｐｍ／μｍｏｌ／Ｌ，批内误差３．５％，批间误差４．１％，回收率９６．１％～１０５．９％。与３０名健康献血员血浆游离肉碱水平（５３．８±８．１μｍｏｌ／Ｌ）比较，血透患者透析前血浆肉碱水平显著降低（３３．５±１２．７μｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜０．０１），透析后更低。血浆肉碱水平与透析时间、透析低血压、肌痉挛和透析后无力发生率显著相关（ｒ分别为－０．９６５，－０．９５７和－０．９８９）。结论放射性同位素酶化学法测定血浆游离肉碱浓度灵敏、精确、可靠、重复性好，适于检测血透病人肉碱缺乏症和评价左旋肉碱疗效。     

酶偶联法测定红细胞谷胱甘肽过氧化物酶

根据酶偶联催化反应机理，通过二次作图法测定了过氧化物酶（Ｓ＿１）和Ｈ＿２Ｏ＿２（Ｓ＿２））的米氏常数（Ｋｍ），分别为０．０６９ｍｍｏｌ／Ｌ和０．１５ｍｍｏｌ／Ｌ。通过理论计算和实验分析确定Ｓ＿１的最适底物浓度为１．５ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｓ－２最适底物浓度为２．２５ｍｍｏｌ／Ｌ。实验证明指示酶（Ｇ·Ｒ）用量应＞０．２５Ｕ／ｍｌ反应液，本法采用０．３９Ｕ／ｍｌ反应液并就ｐＨ、温度、Ｈｂ干扰等因素对实验影响进行了系统研究，优选了最佳条件。本法批内变异系数为３．８％，批间变异系数为５．２％。     

高效毛细管电泳法快速测定血清中游离氨基酸

目的建立快速测定人血清中游离氨基酸的方法。方法用高效毛细管电泳法检测了４０例健康人，３２例肾病患者血清氨基酸。结果在８分钟内分离１６种氨基酸，线性在１０～７００μｍｏｌ／Ｌ范围，最低检出限为２．５～７．９μｍｏｌ／Ｌ，回收率为８６３％～１０７．４％，批内精密度为２．８％～１０．３％，批间精密度为３．５％～１１．６％。对３２例肾脏病患者血清中氨基酸测定结果与４０例正常人对照组氨基酸测定值进行统计分析。结论高效毛细管电泳法具有快速、准确、灵敏等特点，为临床及科研工作中测定氨基酸提供了一种有效的方法     

凝血酶法测定血浆肝素含量及其临床应用

为了保证肝素的疗效及降低出血的危险性，用试管法和仪器法研究了凝血酶时间（ＴＴ）与血浆肝系含量之间的关系，发现在一定浓度的凝血酶作用下，血浆肝素含量在相应范围内与凝固时间的对数值呈良好的线性关系（直线回归ｒ＝０．９７～０．９９），批内变异系数０．８％～２．８％，批间变异系数为１．６％～２．４％，其中凝血酶浓度为１００００Ｕ／Ｌ的工作曲线适应性较好，能满足各种剂量的检测，尚建立了同时测定患者原血浆与对     

血清无机磷的酶法测定

建立了一种酶偶联测定血清无机磷的方法，方法线性范围为０～３ｍｍｏｌ／Ｌ，变异系数批内ｘ＝１．０３ｍｍｏｌ／Ｌ，ｎ＝２０，ＣＶ＝１．２１％，批间：ｘ＝１．２８ｍｍｏｌ／Ｌ，ｎ＝２０，ＣＶ＝３．７％，与钼酸铵紫外光度法相关性为ｒ＝０．９９４２，Ｙ＝０．９５０９Ｘ＋０．０５４１，参考值范围为０．９８～１．５５ｍｍｏｌ／Ｌ。     

血液透析病人血浆游离肉碱测定及临床意义

目的 建立血浆游离肉碱测定方法及探讨血浆游离肉碱测定的临床意义，方法 用放射性同位素酶化学方法测定血浆游离肉碱，然后检测健康献血员及血液透析（血透）患者各３０例，并与透析时间及透析并发症发生率作相关分析。结果 同位素酶化学血浆游离肉碱最小测定浓度为２．５μｍｏｌ／Ｌ，灵敏度为９４ｃｐｍ／μｍｏｌ／Ｌ，批内误差３．５％，批间误差４．１％，回收率９６．１％～１０５．９％，与３０名健康献血员血浆游离肉碱     

胆红素氧化酶法测定血清结合胆红素

介绍使用国产胆红素氧化酶和二牛磺酸胆红素校准物建立血清结合胆红素测定方法。测定缓冲液为０．１ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸盐缓冲液（ｐＨ＝５．０），胆红素氧化酶浓度５００Ｕ／Ｌ，反应（终点）时间１５分钟。本法线性范围可达２４０μｍｏｌ／Ｌ，批内不精密度＜１０％，回收率为９８．３％～１０７．１％，与重氮方法比较，回归方程为Ｙ（酶法）＝０．９５６Ｘ（重氮法）－０．５１３。本法测定人血清结合胆红素参考值２．５７±２．５６μｍｏｌ／Ｌ（ｎ＝９５）。     

高效液相色谱法测定血浆肝素含量

为探讨高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法直接测定血浆游离肝素含量的可行性及其意义。用ＨＰＬＣ分离血浆普通肝素（ｕｎｆｒａｃｔｉｏｎａｔｅｄｈｅｐａｒｉｎ）钠、肝素钙以及低分子量肝素（ＬＭＷＨ），探讨ＨＰＬＣ法所选色谱方法为Ｃ－１８反相柱分离，流动相为甲醇与醋酸铵，外标法定量，紫外光吸收波长为２１５ｎｍ。回收率为９０．４％～９６．８％，血浆肝素含量在１００～６５００Ｕ／Ｌ之间呈良好线性关系，最低检测限为３０Ｕ／Ｌ批内与批间变异系数分别小于３．０％和４．７％。同时用ＨＰＬＣ法和凝血酶法检测一批血样（ｎ＝２９），结果相似。此法适宜于肝素含量高的血样检测。     

高效液相色谱检测胆红素及其临床应用

由于常规的血清胆红素检测方法不能灵敏、准确的测定结合胆红素。笔者参考国外文献采用国产填料和试剂建立了敏感和特异的高效液相色谱胆红素测定法，结果表明本法可对血清胆红素作出较为灵敏和准确的测定，未结合胆红素批内和批间变异系数（ＣＶ）值分别为９．８％～１０．９％和７．３％～１２．７％，结合胆红素批内和批间ＣＶ值分别为２．５％～９．２％和９．７％～１１．０％；未结合和结合胆红素的最低检出浓度分别为０．０５μｍｏｌ／Ｌ和０．０２μｍｏｌ／Ｌ。同时采用本法分析了部分肝病患者和健康人血清胆红素，并对其临床意义进行了初步探讨。     

血浆游离肝素的胶束动电毛细管电泳分析

目的探讨胶束动电毛细管电泳法（ＭＥＣＣ）测定血浆中游离肝素含量的可行性及意义。方法利用最新的高效毛细管电泳分离技术，用外标法定量，测定血浆中肝素；并对其回收率、线性范围、最低检测限、批内与批间变异系数进行实验，并与凝血酶进行比较。结果建立胶束动电毛细管电泳测定血浆中游离肝素含量方法，并进行了初步临床应用。该方法的回收率为９５．６％～９８．７％；血浆肝素含量在８０～７０００Ｕ／Ｌ之间呈良好的线性关系，最低检测限为２５Ｕ／Ｌ。批内与批间变异系数分别小于３．１％和４．５％。结论ＭＥＣＣ检测血浆中肝素是一种简单、快速的新方法。此法适宜于肝素含量高的血样测定     

胆红素氧化酶法测定血清结合胆红素

介绍使用国产胆红素氧化酶和二牛磺酸胆红素校准物建立血清结合胆红素测定方法。测定缓冲液为０．１ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸盐缓冲液（ｐＨ＝５．０），胆红素氧化酶浓度５００Ｕ／Ｌ，反应（终点）时间１５分钟。本法线性范围可达２４０μｍｏｌ／Ｌ，批向不精密度＜１０％，回收率为９８．３％～１０７．１％，与重氮方法比较，回归方程为Ｙ（酶法）＝０９５６Ｘ（重氮法）－０．５１３。本法测定人血清结合胆红素参考值２．５７±２．５     

3，5－二氯邻羟基苯磺酸钠的合成及其临床应用

目的制备３，５－二氯邻羟基苯磺酸钠（ＤＣＨＢＳ）以取代Ｔｒｉｎｄｅｒ′ｓ反应中所用的苯酚及四氯酚。方法２，４－二氯苯酚和浓硫酸在１００℃进行磺化反应，制得ＤＣＨＢＳ；将其和过氧化物酶、尿酸酶、４－氨基氨替比林等组成尿酸检测试液，进行灵敏度、精确度、回收率、干扰试验、稳定性考查，并与苯酚和四氯酚法及与进口试剂进行对比，作相关试验。结果ＤＣＨＢＳ使用浓度为６．０ｍｍｏｌ／Ｌ，检测波长为５１０ｎｍ，尿酸浓度在２４０ｍｇ／Ｌ范围内线性关系良好，检测极限５ｍｇ／Ｌ，高、中、低浓度的质控血清，其批内变异系数分别为１．１０％，１．６８％和２．３０％；批间变异系数分别为３．２０％，１．２０％和２．０７％。回收率为９９．８％～１００．７％，检测范围５～２４０ｍｇ／Ｌ，当血清中胆红素含量小于６１．８ｍｇ／Ｌ，维生素Ｃ小于１５ｍｇ／Ｌ时，用该试剂测定尿酸含量误差小于５％；该试剂与进口试剂相关试验γ＝０．９９４５。结论合成的ＤＣＨＢＳ试剂，完全可以替代苯酚和四氯酚，用于尿酸、胆固醇、甘油三酯等多种临床生化项目检测中     

酶联免疫吸附试验测定血清内源性哇巴因

目的建立血清内源性哇巴因（ＥＯ）浓度测定的酶联免疫吸附试验，促进对这一新的皮质类固醇激素的研究。方法利用外源性哇巴因免疫家兔制备哇巴因抗血清，用棋盘试验确定抗血清的稀释度及包被抗原的浓度；进行灵敏度、精密度、回收率、特异性试验。结果以抗血清稀释度为１：１００００、包被抗原浓度为１μｇ／ｍｌ时标准曲线最理想，灵敏度为０．２３μｇ／Ｌ，血清ＥＯ高（２．４μｇ／Ｌ）、中（１．２μｇ／Ｌ）、低（０．６μｇ／Ｌ）浓度的平均批内变异系数为４．７％，批间变异系数为１２．３％；高、低浓度的回收率分别为９６．３％和９１．４％；与肾上腺素、去甲肾上腺素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮、氢化可的松及地塞米松无交叉结合反应，与地高辛存在１．８％的交叉反应。用该法测定正常人（１０例）、孕妇（２３例）及原发性高血压患者（１０例）血清ＥＯ含量分别为０．５１±０．１７、０．８１±０．２６、０．７４±０．２０μｇ／Ｌ。结论该方法具有方便、快速、准确、特异和成本低的优点，可用于对内源性哇巴因的临床与实验研究。     

应用单一酶法测定血清镁的实验研究

本文对单一酶异柠脱氢酶法血血清Ｍｇ＾２＋的实验方法作了初步研究，结果表明，该法线性范围为０－１８ｍｍｏｌ／Ｌ，批内和批间ＣＶ分别为２．０４％和２．４８％，平均回收率９８．３％１５ｍｍｏｌ／Ｌ的Ｃａ＾２＋，５１４μｍｏｌ／Ｌ的胆红素，１２．４ｍｍｏｌ／Ｌ的甘油三酯，１．２ｇ／Ｌ的血红蛋白不干扰测定。０．６２ｍｍｏｌ／Ｍｎ＾２＋使结果升高红２０％，但生理浓度的Ｍｎ＾２＋对测定无干扰。试剂贮４℃可稳定一     

血清氯葡萄糖苷酶动力分析法

葡萄糖苷酶动力学测定血清氯，在７０－１４０ｍｍｏｌ／Ｌ间线性良好，精密度验批内变异数为２．１０％，批间变异系数为２．２６％；平均回收率为９９．２％；与电极法相关试验ｒ＝０．９５２５，Ｙ酶法＝３．４＋０．９８Ｘ电极法，差异不显著。ＴＢＩＬ８４μＭＯＬ／ｌ，ｔｇ２．１ｍｏｌ／Ｌ，Ｃｈｏ９．６ｍｍｏｌ／Ｌ对测定结果无影响，试剂在４℃冰箱保在保存１０ｄ内起始吸光度不高于０．１５０。     

连续监测法测定血清中异柠檬酸脱氢酶

采用连续监测法测定以ＮＡＤＰ为辅酶的异柠檬酸脱氢酶（ＩＣＤ），并对酶促反应条件进行了研究。以Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ为缓冲体系，酶促反应最适ｐＨ为７．５，Ｍｎ＾２＋为２ｍｍｏｌ／Ｌ，在最佳条件下测定ＩＣＤ的线性范围为０￣８５Ｕ／Ｌ，批内变异系数２．０６％￣５．８５％，批间变异系数为３．７１％￣８．７２％，１００例健康人血清参考范围为２．０￣１１．２Ｕ／Ｌ，初步临床应用表明各类肝炎及肝癌均显著升高，ＩＣＤ／     

增强化学发光免疫法检测乙型肝炎表面抗原的建立和评价

本法采用Ｌｕｍｉｎｏｌ－Ｈ２Ｏ２－ＨＲＰ系统建立了增强化学发光免疫法（ＥＬＥＩＡ）检测乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ），该发光信号的强度与血清中ＨＢｓＡｇ浓度呈线性关系，回归方程为：Ｙ＝０．４４４１Ｘ＋０．００６７，相关系数ｒ＝０．９９７１；批内变异系数为３．６％～９．３％、批间变异系数为１０．２％～１２．５％；回收率为８２．５％～１１５．０％；最小检测限为２０ｐｇ／ｍｌ；结果表明本法有灵敏性高，准确性和稳定性好的特点。