哮喘患儿外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞与细胞因子的表达及意义

目的 探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞与细胞因子在哮喘儿童外周血中的比例改变,并探讨其临床意义。方法分离哮喘患儿和正常人外周血单个核细胞（PBMC）,用流式细胞仪分析CD4＋CD25＋调节性T细胞在外周血单个核细胞中的比例;酶联免疫吸附法（ELASA）检测外周血TGF—p和IL-10水平。结果急性发作期组患儿外周血CD＋CD25＋Tr及细胞因子水平明显低于缓解期组和正常对照组（P〈0．05）,而缓解期患儿与对照组无显著性差异（P〉0．05）。结论CD4＋CD25＋调节性T细胞和细胞因子可能参与了哮喘的发生与发展。     

哮喘患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的测定及临床意义

目的探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在哮喘患者外周血的变化及意义。方法采用流式细胞术检测60例哮喘患者和40例健康对照者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达量,同时测定20例急性发作期哮喘患者的肺功能。结果哮喘患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞的百分比明显低于健康对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）;急性发作期哮喘患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞明显低于非急性发作期患者,差异也有统计学意义（P〈0．01）。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞参与了哮喘的发生。     

急性发作期和缓解期哮喘患者外周血CD4^＋CD25^＋CD127^lo/-Treg的检测和意义

目的：通过检测健康人、急性发作期和缓解期哮喘患者外周血CD4^＋CD25^＋CD127^lo/-Treg细胞的表达水平,探讨该细胞表达水平的变化与哮喘患者病情严重程度的关系。方法：采集急性发作期、缓解期哮喘患者及健康人外周抗凝血,用流式细胞术检测其外周血中CD4^＋CD25^＋CD127^lo/-Treg细胞占CD4^＋T细胞的比例。结果：哮喘急性发作组和缓解组患者外周血中CD4^＋CD25^＋CD127^lo/-Treg细胞占CD4^＋T细胞的百分比低于健康对照组（P〈0.05）;哮喘急性发作期组CD4^＋CD25^＋CD127^lo/-Treg细胞占CD4^＋T细胞的百分比低于哮喘缓解组（P〈0.05）。结论：CD4^＋CD25^＋CD127^lo/-Treg细胞数量减少可能参与了哮喘的发病过程。     

哮喘患儿外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化及其与过敏体质和IgE水平的关系

目的探讨哮喘患儿外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Tr）的变化及其与过敏体质和IgE水平的关系。方法应用流式细胞术检测70例哮喘患儿的Tr细胞数变化,采用酶联免疫法（ELISA）检测血清中IgE含量。结果急性发作期组患儿外周血Tr水平[（6．17±1．72）％]明显低于缓解期组患儿[（7．56±1．48）％]和对照组儿童[（7．13±1．48）％]（均P〈0．05）;而缓解期患儿外周血Tr水平与对照组儿童比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。有过敏体质患儿外周血Tr水平[（5．53±1．18）％]明显低于无过敏体质患儿[（6．40±2．00）％]（P〈0．05）。哮喘组患儿外周血Tr水平[（6．17±1．72）％]与其外周血IgE水平[（144．86±14．74）IU／ml]呈负相关（rP=-0．435,P〈0．05）。结论外周血Tr水平在哮喘患儿发作期显著降低,而在有过敏体质的患儿更低,并与外周血IgE水平呈显著的负相关性。     

急性白血病儿童外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞和NK细胞的变化及其在白血病免疫中的意义

本研究观察急性白血病患儿外周血CD4^＋CCD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）及自然杀伤细胞（nature killer cell,NK）在不同病程阶段的变化,了解白血病患儿的免疫状态,以探讨CD4^＋CD25^＋Treg细胞及NK细胞在急性白血病肿瘤免疫中的意义。建立流式细胞术检测外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞和NK细胞的方法：检测急性白血病初诊患儿25例、完全缓解患儿28例及20例正常健康对照者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞及NK细胞的数量及比例。结果表明：初诊组、完全缓解组及对照组外周血CD4^＋CD25^＋CD127^＋占CD4^＋T细胞的比例分别为（9．55±2．41）％,（8．54±2．51）％和（6．25±0．85）％,在初诊患儿组和缓解患儿组高于正常对照组,且在初诊患儿组高于完全缓解组（P〈0．05）;同时,与正常对照组比较,急性白血病患儿的NK细胞数量减少,完全缓解后患儿组NK细胞数量仍低于正常对照（4．11±3．87％和10．41±7．20％w14．06±5．95％,P〈0．05）。结论：联合应用CD4、CD25及cDl27检测Treg细胞简便可行、重复性好、检测结果可靠、准确,CD4^＋CD25^＋CD127^＋T细胞可较好地反映CD4^＋CD25^＋Treg细胞的比例。急性白血病患儿外周血中Treg细胞数量升高,NK细胞数量降低,表明急性白血病患儿NK细胞免疫功能处于抑制状态。Treg细胞可能在白血病的发生、发展中起一定作用,参与NK细胞的调节可能是Treg细胞在白血病免疫中的一个环节。     

白三烯受体拮抗剂对毛细支气管炎外周血CD4^＋CD25^＋Treg的影响及疗效观察

目的探讨白三烯受体拮抗剂（孟鲁司特）对毛细支气管炎患）DJ＇b周血CD4^＋ CD25^＋ 调节性T细胞（Treg）的影响并观察其疗效。方法将48例毛细支气管炎患儿按入院顺序分成孟鲁司特干预组和常规治疗组,常规治疗组采取综合治疗,孟鲁司特于预组在综合治疗的基础上加用孟鲁司特4mg,每晚1次口服。检测2组患者治疗前后外周血中CD4^＋CD^25＋Treg的水平,并观察2组患者咳嗽、喘憋、肺部体征的持续时间。结果治疗前2组患儿外周血CD4^＋CD25^＋Treg占CD4^＋T细胞的百分比均明显低于健康对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）;治疗后孟鲁司特干预组外周血中CD4^＋CD25^＋Treg水平较常规治疗组显著上升（P〈0．05）,同时咳嗽、喘憋、肺部体征持续时间与常规治疗组比较有统计学意义（P〈0．01）。结论孟鲁斯特纳可缩短病程,提高毛细支气管炎患儿外周血CD4^＋CD25^＋Treg的水平,在毛细支气管炎的治疗中起重要作用。     

COPD病人外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞检测及意义

目的检测慢性阻塞性肺疾病（COPD）病人外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）的频率及血清γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）浓度,探讨Treg在COPD发病中的免疫调节作用。方法采用流式细胞仪检测45例COPD急性发作期病人、33例COPD临床缓解期病人以及25例健康人外周血中Treg亚群的频率,ELISA法检测血清中IFNγ-、IL-4浓度。结果 COPD病人急性发作期组IL-4浓度较临床缓解期组和健康对照组显著增高,临床缓解期组低于健康对照组,差异有统计学意义（F=192.86,q=11.63-27.66,P〈0.01）;COPD病人急性发作期组IFN-γ浓度高于临床缓解期组和健康对照组,差异有统计学意义（F=35.53,q=9.72、10.13,P〈0.01）,而临床缓解期组与健康对照组差异无统计学意义（q=1.13,P〉0.05）;临床缓解期组IFNγ-/IL-4比值最高,急性发作期组次之,健康对照组最低,差异有统计学意义（F=230.95,q=7.79-30.10,P〈0.01）;CD4^＋CD25^＋Treg频率在COPD急性发作期组高于临床缓解期组和健康对照组,而临床缓解期组低于健康对照组,差异有显著性（F=146.08,q=8.68-12.72,P〈0.01）。结论 COPD病人存在Th1/Th2动态变化,急性发作期以Th2免疫为主,临床缓解期则以Th1免疫为主;Treg在COPD的发生发展中担负着重要的免疫调节作用。     

慢性乙型肝炎患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的检测与意义

目的：探讨慢性乙型肝炎患者外周血CD4^＋CD25＋调节性T细胞（Treg）频率的变化及其意义。方法：分离20例慢性乙型肝炎（CHB）患者和10例健康者的外周血单个核细胞,以CD4、CD25、CD127单克隆抗体标记细胞后以流式细胞仪检测并分析Treg频率。采用实时荧光定量RT—PCR检测血清HBVDNA载量。结果：CHB组的Treg频率高于健康对照组（P〈0．05）,HBeAg阳性CHB组Treg频率高于HBeAg阴性CHB组（P〈0．01）,乙型肝炎肝硬化组Treg频率高于无肝硬化CHB组（P＜0．01）;CHB患者的Treg频率与HBVDNA载量成直线正相关（r=0．87,P＜0．01）。结论：慢性乙型肝炎患者外周血Treg频率明显升高,且与病毒复制和肝脏慢性病变程度有关。     

哮喘患儿外周血CD56,CD25检测的临床意义

目的：探讨哮喘息儿外周血分化群（CD）56、CD25水平检测的临床意义。方法：应用流式细胞仪（FCM）检测哮喘患儿外周血单个核细胞中CD56 、CD25 细胞数。结果：缓解期组CD56十细胞数百分比[（12.0±3．1）％］及CD25 细胞数百分比[（4．1±2．2）％]与正常对照组比较均无显著性差异（P＞0．05）；哮喘发作组CD56 细胞数百分比[（9、4±2．2）％]低于正常对照组[（11．9±3．2）％]及缓解期组（P＜0．01）；哮喘发作组CD25 细胞数百分比[（7.2±2．1）％]高于正常对照组[（4．1±1．8）％]及缓解期组（P＜0．01）。结论：CD56 、CD25 细胞数与小儿哮喘的发病过程有一定关系。     

手术前后肺癌患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的表达

目的：研究手术前后肺癌患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）的比例变化,探讨其与肿瘤免疫的关系。方法：采用流式细胞术检测38例手术前后肺癌患者和35例健康对照者外周血CD4＋CD25＋Treg占CD4＋T细胞的比例。结果：肺癌患者手术后外周血CD4＋CD25＋Treg占CD4＋T细胞的比例为（13．27±3．15）％,显著低于手术前的（19．76±3．42）％（P〈0．05）;手术前显著高于对照组（10．46±2．87）％（P〈0．05）,而手术后与对照组无明显差异（P〉0．05）。结论：肺癌患者手术切除肿瘤后,外周血CD4＋CD25＋Treg水平明显下调,有助于肺癌患者免疫功能的恢复,增强肿瘤的免疫应答和抗瘤作用。     

Foxp3^＋、CD4^＋、CD25^＋调节性T淋巴细胞与慢性阻塞性肺疾病相关性的研究

目的：探讨慢性阻塞性肺疾病（COPD）调节性T淋巴细胞（Treg）Foxp3^＋、CD4^＋和CD25^＋的变化及3种细胞因子白介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β（TGF-β）与CD4^＋Treg的相关性。方法：采用流式细胞术检测外周血CD4^＋Treg数量,采用酶联免疫法（ELISA）测定血清IL-10、TNF-α、TGF-β水平。结果：COPD急性加重期、缓解期外周血Foxp3^＋、CD4^＋、CD25^＋T淋巴细胞（CD4^＋Treg）占单核细胞百分比明显增高,与正常对照组相比差异有统计学意义（P〈0.05）,缓解期略高于急性加重期,两者相比无显著性差异;COPD急性加重期组患者血清IL-10水平低于正常对照组,缓解期组低于急性加重期组,3组比较有显著性差异（P〈0.01）。COPD急性加重期及缓解期组TNF-α水平明显升高,均高于正常对照组（P〈0.01）。COPD急性加重期血清TGF-β浓度高于缓解期及正常对照组,有显著性差异,但缓解期与正常对照组相比较无显著性差异。正常对照组IL-10与CD4^＋Treg成正相关（r值为0.655,P〈0.05）,COPD急性加重期TNF-α与CD4^＋Treg成正相关（r值为0.4,P〈0.05）。结论：CD4^＋Treg可能参与COPD的发病及急性加重过程。     

急性动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）水平的变化及临床意义

目的 测定急性动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）的水平的变化,并探讨其临床意义.方法 收集2012年2-12月在吉林大学中日联谊医院神经内科住院的发病7天内的急性期动脉粥样硬化性脑梗死患者（即梗死组）48例和同期住院健康体检者（即对照组）30例外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）水平,分别记录梗死组患者神经功能缺损程度、梗死病灶体积以及颈动脉内-中膜厚度.结果 ①梗死组不同神经功能缺损程度患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）百分比均较对照组显著降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中,重度组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）百分比低于中度组,中度组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）百分比低于轻度组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.②梗死组不同梗死病灶体积患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）百分比均较对照组明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中,大灶组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）百分比低于中灶组,中灶组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）百分比低于小灶组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.③梗死组患者均经颈动脉血管超声证实有颈动脉粥样硬化（CAS）,根据病变程度分为三组：颈动脉内膜增厚组（A亚组）、颈动脉斑块组（B亚组）、颈动脉狭窄组（C亚组）,三组患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）百分比均较对照组降低.其中,C亚组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）百分比低于B亚组,B亚组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）百分比低于A亚组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）水平在脑缺血急性期明显降低,与脑梗死后神经功能缺损程度、梗死灶体积、颈动脉粥样硬化程度有关.     

子痫前期发病中CD4＋CD25＋Treg细胞与Foxp3的检测及意义

[目的]研究CD4＋ CD25＋调节性T细胞（CD4＋ CD25＋Treg细胞）和Foxp3基因表达与子痫前期发病的相关性.[方法]选择住院确诊的妊娠期高血压孕妇12例（A组）、轻度子痫前期（MPE）孕妇14例（B组）、重度子痫前期（SPE）孕妇15例（C组）,30例正常妊娠晚期孕妇为对照组（D组）,应用流式细胞术检测并比较四组外周血中CD4＋ CD25＋ Treg和 Foxp3的表达水平.[结果]A组、B组和C组孕妇外周血CD4＋ CD25＋ Treg 和Foxp3表达水平均显著低于对照组（P〈0.05） C组外周血CD4＋ CD25＋ Treg和Foxp3表达水平显著低于A组和B组（P〈0.05）.[结论]子痫前期患者体内存在CD4＋ CD25＋ Treg细胞的异常,CD4＋ CD25＋Treg细胞的数量的减少和Foxp3表达的降低使CD4＋ CD25＋Treg细胞免疫抑制功能减弱,从而使母胎免疫耐受失衡,导致子痫前期的发生.     

外周血自然杀伤T淋巴细胞和CD4＋自然杀伤T淋巴细胞对哮喘患儿发病的影响

目的：探讨外周血自然杀伤T淋巴细胞（NKT细胞）和CD4＋NKT细胞对哮喘患儿发病的影响。方法选取2008年1月至2012年12月住院治疗的哮喘病患儿150例（哮喘组）,另选160例体检健康的儿童作为健康对照组。收集研究对象外周静脉血标本,采用密度梯度离心法分离获得外周血单个核细胞,应用免疫荧光标记和流式细胞术检测哮喘组和健康对照组儿童外周血NKT细胞和CD4＋NKT细胞的比例,并观察两类细胞与过敏指标总免疫球蛋白E（IgE）、嗜酸性细胞阳离子蛋白（ECP）的相关性。酶联免疫吸附试验检测外周血细胞因子白细胞介素（IL）‐4、IL‐10、干扰素‐γ（IFN‐γ）水平。比较两组间的差异。结果哮喘组患儿的NKT细胞和CD4＋NKT细胞比例均较健康对照组明显下降（P＜0．05）。NKT细胞、CD4＋NKT细胞的比例与总IgE、ECP均无明显相关性（P＞0．05）。外周血IL‐4水平较健康对照组明显升高（P＜0．05）,IL‐10水平明显下降（P＜0．05）,而IFN‐γ水平与健康对照组比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论NKT细胞和CD4＋NKT细胞数量降低下及所分泌细胞因子功能变化是导致哮喘发病的重要原因。     

青蒿素对支气管哮喘外周血Treg/Th17的调控机制

目的探讨青蒿素对支气管哮喘患者外周血Treg/Th17表达的调控机制。方法将随访的145例哮喘患者按照ACT评分分成完全控制组、部分控制组、未控制组,再从每组中按性别、年龄、BMI匹配随机分别抽取20例、21例、7例作为研究对象,入选同期于医院就诊的哮喘急性发作期患者18例和医院体检的健康成人19例作为对照组。流式细胞术检测各组CD4+T淋巴细胞Treg和Th17的表达,将CD4+T淋巴细胞用一定浓度的青蒿素干预共培养24 h检测对比。结果未控制组及急性发作期哮喘患者外周血CD4+T淋巴细胞Th17比例明显高于正常对照组、完全控制组及部分控制组哮喘患者(P<0.05),Treg比例明显低于正常对照组、完全控制组及部分控制组(P<0.05);完全控制组及部分控制组哮喘患者外周血CD4+T淋巴细胞Treg比例稍低于正常对照组(P<0.05),而Th17比例较正常组差异无统计学意义(P>0.05);与青蒿素共浴培养24 h后,未控制组哮喘患者CD4+T淋巴细胞中Th17较干预前明显减低(P<0.05),Treg较干预前明显升高(P<0.05);急性发作组哮喘患者Th17较干预前明显减低(P<0.05),Treg较干预前明显升高(P<0.05);部分控制组哮喘患者Th17较干预前差异无统计学意义(P>0.05),Treg较干预前差异无统计学意义(P>0.05);完全控制组哮喘患者Th17较干预前稍减低(P<0.05),Treg较干预前差异无统计学意义(P>0.05)。结论青蒿素在体外对支气管哮喘,尤其是难治性哮喘的外周血CD4+T淋巴细胞中Treg/Th17有一定的调控作用,并在一定程度上可改善难治性哮喘患者CD4+T淋巴细胞中Treg/Th17免疫失衡。     

骨髓中CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞与儿童急性B淋巴细胞白血病的相关性研究

目的通过检测急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿骨髓中叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA的表达及CD4+细胞中调节性T细胞(Treg)比例,探讨Treg与儿童B-ALL发生及预后的关系。方法用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测10名正常儿童、35例初发B-ALL患儿及68例临床缓解患儿骨髓中Foxp3mRNA水平;用流式细胞术检测上述骨髓标本中CD4+CD25highFoxp3+Treg的比例;利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测骨髓中细胞因子白细胞介素10(IL-10)的表达情况。结果骨髓中Foxp3 mRNA表达水平在B-ALL初发患儿组是对照组的4.44倍,微小残留病(MRD)阳性组是阴性组的2.39倍;B-ALL初发患儿骨髓中Treg占CD4+T淋巴细胞的比例[中位数(M)=12.77%]较对照组(M=8.09%)增高,差异具有统计学意义(P<0.01);MRD阳性组Treg比例(M=14.74%)与MRD持续阴性组(M=11.30%)比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后MRD阳性组骨髓中IL-10水平[(24.69±11.73)pg/mL]显著高于MRD持续阴性组[(9.19±5.82)pg/mL,P<0.05]。结论 B-ALL初发和MRD阳性患儿骨髓中Foxp3 mRNA水平和Treg比例显著增高,且骨髓中IL-10水平与Treg的比例变化趋势相一致。Treg可作为评价B-ALL患儿预后和复发的指标,Treg可能是通过分泌抑制性细胞因子IL-10而发挥其抑制作用。     

尿毒症患者血液透析前后CD4＋CD25＋CD127lo变化的意义

【目的】探讨透析前后调节性T细胞（Treg）的变化的意义。方法采用三色荧光染色通过流式细胞仪（FCM）分析外周血中CD4＋CD25＋CD127lo细胞水平。结果①血液透析前、后、CKDⅢ-Ⅳ组Treg较正常组显著减少（P〈0.01）;血液透析前后差值,TregP〉0.05;尿素氮（BUN）、血磷（P）,P〈0.01。②根据患者Kt/V、尿素氮下降率〉65%等,将患者分为透析充分与透析不充分组。BuN透析后2组有显著性差异P〈0.01。结论尿毒症毒素可导致Treg不足,Treg参与了尿毒症的发生和发展,透析后并不能改善Treg的不足。