Cyr61和WISP-3在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

背景与目的 Cyr61是非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)生长过程中的一个肿瘤抑制基因,Cyr61与WISP-3同属于CCN基因家族,具有极其明显的序列同源性.本研究通过检测Cyr61和WISP-3在NSCLC组织中的表达,探讨其临床意义.方法 应用免疫组化SP染色法检测54例NSCLC癌组织和癌旁正常肺组织中Cyr61和WISP-3的表达,并结合临床参数进行分析.结果 在NSCLC癌组织中Cyr61表达水平低于癌旁正常肺组织(P＜0.001),WISP-3表达水平高于癌旁正常肺组织(P＜0.001);NSCLC癌组织中Cyr61与WISP-3蛋白表达呈负相关(r=-0.395,P=0.003);Cyr61的表达与肿瘤的组织学分化程度、病理类型、临床分期、家族史、吸烟史和淋巴结转移有关(P＜0.05);WISP-3阳性表达率与肿瘤的组织学分化程度、临床分期和年龄有关(P＜0.05).结论 Cyr61和WISP-3可能是反映NSCLC进展、生物学行为、转移发生及预后的重要生物学标记物.     

Cyr61的表达与肿瘤的相关研究

Cyr61（cysteine rich61,Cyr61）是富含半胱氨酸的分泌性肝素连接蛋白,可与肝素和多种整联蛋白结合,刺激细胞增殖、趋化、黏附,诱导血管发生,参与炎症反应、伤口愈合和组织重塑过程,与多种肿瘤的发生发展有关。同时,cyr61与肿瘤的浸润、转移及预后有着密切的关系。本文就Cyr61的结构、功能及其与肿瘤关系的研究进展进行综述。     

非小细胞肺癌中MTAP蛋白及基因表达水平的检测

背景与目的 MTAP基因是一种肿瘤抑制基因,在多种肿瘤组织中存在表达异常现象。本研究旨在探讨MTAP在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织、癌旁组织以及边缘肺组织中的表达水平及临床意义。方法应用免疫组织化学方法及IPP图像分析软件观察52例NSCLC患者组织中MTAP蛋白的表达,采用实时荧光定量PCR及2-ΔΔCt法定量分析MTAP mRNA的相对表达量。结果 MTAP在NSCLC组织中的蛋白表达分别明显低于癌旁组织和边缘肺组织(t分别为10.283、10.940,均P<0.001),MTAP蛋白的表达与肺癌患者性别、年龄、吸烟史以及肿瘤的病理类型无明显关系,但与肿瘤的分化程度有密切关系(t=2.310,P=0.025)。NSCLC组织中MTAP mRNA相对表达量明显低于癌旁组织(t=9.902,P<0.001)。结论肺癌组织中存在MTAP mRNA和蛋白表达水平下调,可能与NSCLC的发生和进展有关。     

大肠癌组织A3AR蛋白表达及A3AR mRNA基因扩增临床意义的探讨

目的:检测大肠癌组织中A3AR蛋白表达和A3AR mRNA基因扩增,并探讨其与临床病理特征的关系.方法:分别用免疫组化和实时荧光定量PCR方法检测31例大肠癌组织和10例癌旁正常组织中A3AR蛋白表达及其A3AR mRNA扩增.结果:大肠癌及癌旁正常组织中A3AR的阳性率分别为61.29%(19/31)和10.00%(1/10).差异有统计学意义,P<0.05.大肠癌及癌旁正常组织中A3AR mRNA扩增分别是0.0348±0.0195和0.0214±0.0145,两组差异有统计学意义,P<0.05.两组的表达均与大肠癌的临床分期和淋巴结转移密切相关.结论:大肠癌组织A3AR在蛋白和基因水平均升高,与临床分期和淋巴结转移相关,提示可能参与了大肠癌的侵袭和转移.     

Cyr61在卵巢上皮性癌中的表达及其与血管生成关系的研究

目的 探讨高半胱氨酸蛋白61(Cysteine-rich 61,Cyr61)在卵巢上皮性癌中的表达及其与血管生成的关系。方法 用逆转录PCR的方法半定量检测40例卵巢癌及10例正常卵巢组织中Cyr61 mRNA的表达,用免疫组化方法检测该40例卵巢上皮性癌及10例正常卵巢组织中Cyr61蛋白及微血管密度(MVD)的表达。结果 卵巢上皮性癌中,Cyr61mRNA及蛋白表达均高于正常卵巢组织,MVD蛋白表达也高于正常卵巢组织,差异均有显著性,并与肿瘤浸润发展有一定相关性,且MVD随Cyr61表达增强而升高。结论 Cyr61的过度表达在卵巢上皮性癌的发生、发展、浸润过程中起重要的作用,而且生物学行为与血管生成密切相关。     

肺癌前病变、肺癌中FHIT基因表达的临床研究

背景与目的FHIT基因为近年发现的新的候选抑癌基因，位于3p14．2，跨越FRA3B易脆点，在包括肺癌在内的多种人类肿瘤中均存在异常表达。本研究旨在观察FHIT基因在人肺癌前病变、肺癌中的表达情况，探讨FHIT基因在肺癌发生、发展过程中的可能作用。方法采用免疫组化方法检测298例甲醛固定、石蜡包埋的标本（包括161例肺癌、51例肺癌前病变、30例正常肺组织、23例肺良性病变和33例肺癌转移淋巴结）中FHIT蛋白表达情况。结果FHIT蛋白在正常肺组织及肺良性病变组织中均无失表达，癌前病变组织和肺癌组织中失表达率分别为54．9％（28／51）和59．0％（95／161），肺癌转移淋巴结组织中失表达率为78．8％（26／33）；肺癌前病变、肺癌及转移淋巴结组织中FHIT蛋白失表达率显著高于正常肺组织及肺良性病变组织（P〈0．001）。肺癌组织中FHIT基因表达水平与肺癌组织学类型、肿瘤细胞分化程度、患者pTNM分期、淋巴结转移有密切关系（P〈O．05）。FHIT蛋白失表达组肺癌患者的术后5年生存率显著低于表达组（P〈0．01）。吸烟组患者FHIT基因失表达率69．1％显著高于无吸烟组49．5％（P〈0．01）。结论FHIT蛋白失表达可能是肺癌发生过程中的早期分子事件，与肺癌的发生、发展及预后有关；吸烟导致FHIT蛋白表达下降可能是诱发肺癌的原因之一。     

胰腺癌组织中CDC25B表达及临床意义的初步探讨

目的研究CDC25B基因在胰腺癌组织中的表达,探讨其在胰腺癌发病机制中的作用。方法利用实时荧光定量-PCR技术检测24例胰腺癌组织和4例正常胰腺组织中CDC25B基因的表达,PCR产物的定量方法采用比较Ct法,应用western blot检测其蛋白的表达水平。用Kaplan-Meier生存率曲线分析CDC25BmRNA与预后的关系。结果实时荧光定量-PCR发现CDC25B基因平均模板量在正常胰腺组织中为0.000635±0.000210,胰腺癌组织中为0.001988±0.000650;与正常胰腺组织相比,胰腺癌组织中CDC25B mRNA表达上调3.13倍(P<0.05),CDC25B mRNA升高5倍以上者生存时间缩短。胰腺癌组织中CDC25B蛋白也过度表达,正常胰腺组织CDC25B蛋白表达为1.22±0.33,胰腺癌组织为5.56±1.57,上调4.56倍(P<0.01)。结论CDC25B在胰腺癌组织中表达明显上调,CDC25B mRNA升高者预后差。     

肺癌组织中耐药相关基因的表达水平及其临床意义

目的 探讨肺癌组织耐药相关基因产物的表达水平及其临床意义。方法 采用免疫组化法S－P对60例肺癌组织及30例癌旁肺组织中Pgp,MRP,GST-π，TopoⅡ进行检测。结果 肺癌组织中Pgp,MRP,GST- π，TopoⅡ表达阳性率分别为40．0％（24／60）、61．7％（37／60）、45．0％（27／60）、81．7％（49／60），均明显高于癌旁肺组织（P＜0．01），上述耐药相关基因表达阳性率与肺癌TNM分期、病理类型、细胞分化程度、淋巴结转移状态均无显著关系（P＞0．05）。结论 肺癌在癌变发生过程中其耐药相关基因均有不同程度的过度表达，联合检测这些基因的表达水平有助于指导化疗。     

肺癌组织中HLA—DR抗原表达的临床意义

目的探讨HLA-DR抗原在肺癌中的表达及其临床意义.方法采用免疫组化ABC法检测57例原发性肺癌组织中HLA-DR抗原表达情况,并分析了该抗原表达与肺癌临床病理的关系.结果 57例肺癌组织中,腺癌、鳞癌和大细胞未分化癌的阳性表达率分别为72.0%、42.1%和28.6%,6例小细胞未分化癌(SCLC)和20例癌旁组织均未见阳性表达.腺癌的阳性率明显高于鳞癌和大细胞未分化癌(P<0.05).随着肿瘤进展,HLA-DR表达逐渐降低,Ⅰ期和Ⅱ Ⅲ期之间其阳性率差异有显著性(P<0.05),分化程度高的肺癌HLA-DR阳性表达率明显高于中、低分化程度的肺癌(P<0.01).HLA-DR表达与肺癌有无淋巴结转移无明显相关性(P>0.05).结论 HLA-DR异常表达可能是肺癌发生和发展过程中的标志物之一,对判断肺癌患者的生物学行为具有一定的意义.     

N-cadherin在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

据统计, 肺癌的发病率和死亡率逐年上升^[1], 肺癌的死亡率上升幅度居各类肿瘤之首^[2]。治疗失败和患者死亡的根本原因是肿瘤的侵袭和转移, 这是一个多步骤的复杂过程, 其中的许多环节都涉及到细胞粘附作用。 N-cadherin 是一种重要的细胞粘附分子, 具有介导细胞间粘附、信号传导、基因激活、细胞凋忘及细胞的增殖和迁移等多种功能。目前研究显示 N-cadherin 在多种肿瘤中存在突变与异常表达, 其与肿瘤的发生、发展与预后密切相关。关于 Ncadherin 在肺癌组织表达情况的研究鲜见报道, 结论也不一致。本实验应用 S-P 免疫组织化学方法检测 N-cadherin 在非小细胞肺癌 (NSCLC)组织中的表达, 并对 N-cadherin 的表达与临床病理特征的关系进行分析, 现将结果报告如下     

小细胞肺癌组织c-kit蛋白表达的临床分析

目的　探讨c kit蛋白在小细胞肺癌中的表达及其临床病理意义。方法　采用兔抗人c kit蛋白抗体、SP免疫组化方法检测 5 2例福尔马林固定、石蜡包埋的原发小细胞肺癌组织、10例正常肺组织和 2 0例非小细胞肺癌组织的c kit蛋白表达状况。结果　小细胞肺癌组织中c kit蛋白阳性表达率为 61.5 %( 3 2 /5 2 ) ,c kit蛋白表达定位于胞浆 ;其中强阳性者占 65 .6%( 2 1/3 2 ) ,弱阳性者占 3 4.4%( 11/3 2 )。 10例正常肺组织及 2 0例非小细胞肺癌组织c kit蛋白呈阴性表达。c kit蛋白表达与小细胞肺癌肿瘤大小 (P =0 .0 10 )及预后 (P =0 .0 0 0 1)有密切关系 ,但与性别、年龄及临床分期均无明显关系 (P >0 .0 5 )。结论　c kit蛋白表达可能与小细胞肺癌的预后相关。c kit蛋白的原位检测较为直观 ,有利于小细胞肺癌的临床病理诊断、靶向药物治疗和预后评估     

多重功能的CYR61： 肿瘤发生与发展中的重要角色

Cyr61是CCN家族成员之一，人的Cyr61基因位于染色体1q22.3，其编码的蛋白具有镶嵌型多模组结构，可与多种因子相互作用，是一种十分重要的细胞基质调节因子，在细胞的黏附、迁移与增殖以及血管生成、炎症反应和组织重构等重要生理、病理过程中发挥重要的调节作用。尤其重要的是，Cyr61参与肿瘤的发生发展过程，且在不同的肿瘤中其作用有所不同。Cyr61在乳腺癌、神经胶质瘤等肿瘤中起诱导肿瘤细胞增殖和迁移的促癌作用，而在非小细胞肺癌、子宫内膜癌等肿瘤中起到促进细胞凋亡等抑癌作用。Cyr61在不同细胞中的表达受多种信号通路的调控，可与多种整联蛋白结合激活不同的下游通路，调节Bax、Bad、p53和p21WAF1等分子的表达。作为细胞信号转导通路下游的一个重要角色，Cyr61可能成为未来肿瘤药物治疗中的重要靶点。     

P—gp、MRP、p53蛋白在肺癌组织中的表达及其意义

目的　探讨P gp、MRP、p5 3在肺癌中可能的临床意义及相互间的关系。方法　采用免疫组化法(IHC)检测 3 1例石蜡包埋的肺癌及相应远离肿瘤部位的正常肺组织中P gp、MRP、p5 3的表达情况 ,同时用流式细胞术 (FCM)检测其中 2 9例冻存的肺癌组织中P gp、p5 3水平 ,并与IHC结果比较。结果　IHC方法显示P gp、MRP、p5 3在正常肺组织中未见表达 ,在肺癌组织中阳性率分别为 61.3 %、5 4.8%、71.0 %。P gp与MRP表达有相关性 (P <0 .0 1) ,但P gp与p5 3、MRP与p5 3之间均无显著相关性。P gp和MRP阳性表达集中在NSCLC ,阳性率分别为 76%和 68% ,且肺癌细胞分化程度越低 ,P gp阳性率越低 (P <0 .0 5 )。p5 3阳性率在鳞癌 ( 10 0 % )明显高于腺癌 ( 3 3 .3 % ) (P <0 .0 1) ,在吸烟患者 ( 88.9% )明显高于不吸烟患者 ( 4 6.2 % ) (P <0 .0 5 ) ,而与各项病理特征无关。采用FCM测得P gp、p5 3阳性率分别为 65 .5 %和 79.3 % ,两种方法的符合率在P gp、p5 3分别为 62 .1%和 75 .9%。结论　P gp、MRP过表达在肺癌中可能具有一定的协同作用 ,而与p5 3异常无关。     

莱菔硫烷对A549细胞株CYR61基因表达的影响

 目的 探讨莱菔硫烷(sulforaphane, SFN)对A549细胞株CYR61基因表达的影响。 方法 用MTT法检测SFN对A549细胞的抑制效应。用real-time PCR检测SFN干预的A549肺癌细胞株CYR61表达水平。 结果 MTT结果显示：SFN从40 μM的浓度起开始出现细胞抑制效应,随着浓度的升高呈现剂量依赖效应,浓度越高抑制率越大;且40 μM、80 μM、100 μM和160 μM SFN等较大剂量在不同作用时间点具有时间效应关系,干预时间越长,抑制率越大。光镜下细胞形态： 细胞在培养32 h后, 25 μM的SFN处理组部分A549细胞皱缩、变圆,折光性上升;50 μM的SFN处理组皱缩细胞数目增多;75μM的SFN处理组细胞皱缩数目进一步增多,部分细胞漂浮,并可见细胞碎片。25 μM和50 μM浓度SFN干预组的CYR61基因表达量较高,25 μM SFN组与50 μM SFN组之间差异没有统计学意义,25 μM SFN组和50 μM SFN组与其他各组相比,差异有统计学意义。 结论 SFN在一定浓度下对A549细胞株起抑制作用,并对A549肺癌细胞株CYR61基因的表达有促进作用,可为食用十字花科类蔬菜预防肺癌提供依据。     

TLR4与TLR9在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的：检测TLR4和TLR9在非小细胞肺癌组织和正常肺组织中的表达，探讨其临床意义。方法：应用免疫组化方法检测TLR4和TLR9在51例非小细胞肺癌组织和20例癌旁正常肺组织中的表达，分析TLR4和TLR9与非小细胞肺癌病理分级、临床分期、淋巴结转移等的相关性。结果：非小细胞肺癌组织中TLR4和TLR9阳性率分别为56．9％和94．1％，均显著高于正常肺组织中的10％和15％（P〈0．05）。TLR4的表达与肿瘤的分级密切相关（P〈0．05）。TLR4和TLR9的表达呈正相关（P〈0．05）。结论：TLR4和TLR9在非小细胞肺癌组织中高表达，且TLR4表达与肿瘤分级有关，提示二者可能参与非小细胞肺癌的发生、发展过程；提示运用TLR4和TLR9的相关配体如OK-432、CpG-ODN作为免疫佐剂用于非小细胞肺癌的治疗成为可能。     

凋亡相关基因在Ⅰ、Ⅱ期非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

背景与目的:手术后Ⅰ、Ⅱ期非小细胞肺癌的预后与众多因素有关,凋亡基因在肿瘤的发生发展过程中发挥重要的作用。通过检测凋亡基因Survivin、Bcl-2、Bax和Fas在早期非小细胞肺癌中的表达,探讨其在早期非小细胞肺癌中的临床意义和预后价值。方法:利用免疫组织化学技术检测115例Ⅰ、Ⅱ期非小细胞肺癌及20例肺非肿瘤组织中Survivin、Bcl-2、Bax和Fas的表达,并进行5年生存率的多因素分析。结果:115例Ⅰ、Ⅱ期非小细胞肺癌组织中Survivin、Bcl-2、Bax、Fas的表达率分别为62.61%(72/115)、49.57%(57/115)、31.30%(36/115)和46.96%(54/115),与其在肺非肿瘤组织中的表达分别为10.00%(2/20)、15.00%(3/20)、65.00%(13/20)、80.00%(16/20),差异有显著性(P<0.05);患者5年生存率的多因素分析:TNM分期与Survivin蛋白的阳性表达是Ⅰ、Ⅱ期非小细胞肺癌患者独立预后因素(P<0.01),Survivin阳性组的术后生存时间[(33±7)个月]与阴性组术后生存时间[(52±9)个月]差异有显著性(P<0.05)。结论:在Ⅰ、Ⅱ期非小细胞肺癌中,凋亡相关基因可能对肿瘤的发展与预后产生一定的影响;TNM分期与Survivin基因的阳性表达是Ⅰ、Ⅱ期非小细胞肺癌术后患者的独立预后因素。     

脂肪酸合成酶及其mRNA在肺癌中的表达及临床意义

目的:本研究同期观察脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)及其 mRNA在肺癌中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学EnVisionTM法和逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)对67例肺癌组织进行FAS及其 mRNA的检测和分析,并与癌旁组织,正常肺组织进行对照研究。结果:FAS蛋白表达在肺癌组织中阳性率为41.8%(28/67),显著高于癌旁组织19.5%(8/41)和正常肺组织6.25%(2/32)(P<0.01)。FAS mRNA在肺癌组织中表达阳性率为67.2%(45/67),显著高于癌旁组织34.1%(14/41)和正常肺组织25.0%(8/32)(P<0.01)。半定量法测定发现FAS mRNA在阳性表达的肺癌组织中为0.975±0.326,显著高于癌旁组织0.475±0.167和正常组织0.261±0.050(P<0.01)。FAS蛋白和 mRNA的表达与患者性别,年龄,肿瘤部位,病理类型,分化程度无关(P>0.05);与肿瘤分期,淋巴结转移(P<0.01)有相关性。结论:FAS蛋白和 mRNA在肺癌组织中表达增强,提示在肿瘤的形成与演变的过程中可能存在着同步的脂肪酸代谢改变;FAS可能作为肺癌诊断的指标,同时也可为肺癌的治疗提供新的靶位。