类叶升麻苷对谷氨酸损伤PC12细胞的保护作用

目的研究类叶升麻苷对谷氨酸诱导的PC12细胞损伤的影响。方法将PC12细胞分为正常对照组、模型对照组、阳性药组和类叶升麻苷给药组。除正常对照组外,其余各组均以1.5 mmol·L-1谷氨酸处理24 h,再分别以10μmol·L-1维生素E和15.625,31.25,62.5,125,250μmol·L-1类叶升麻苷作用。通过倒置显微镜观察细胞形态,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞存活率,酶标法试剂盒测定乳酸脱氢酶(LDH)活性,硫代巴比妥酸(TBA)法试剂盒测定丙二醛(MDA)含量,WST[2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯基)-2氢-四唑盐,二钠盐]法试剂盒测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,酶联免疫吸附法(ELISA)检测胞内活性氧(ROS)含量。结果与模型对照组比较,除类叶升麻苷Ⅰ组(15.625μmol·L-1AS)以外,其余各类叶升麻苷给药组均可明显改善PC12细胞形态,提高细胞存活率和SOD酶活性(P<0.01),抑制LDH活性及MDA和ROS生成(P<0.01或P<0.01)。结论类叶升麻苷对谷氨酸诱导的PC12细胞损伤具有保护作用。     

类叶升麻苷对MPTP诱导帕金森病模型小鼠的神经保护作用及其机制

目的:探究类叶升麻苷(ACT)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)模型小鼠的神经保护作用及其机制。方法:采用腹腔注射MPTP构建PD模型小鼠,实验动物随机分为对照组、模型组和100 mg·kg^-1 ACT给药组,通过灌胃(ig)的方式连续给药14 d,给药完成后,行为学评价和生化学检测评价ACT对PD小鼠的神经保护作用。采用双向电泳技术、质谱分析技术和Western blot检测进一步对ACT抗PD机制进行探究。结果:ACT预防性给药后明显缩短MPTP诱导PD小鼠的爬杆时间,提高游泳测试评分,延长悬挂持续时间,并降低后肢张力测试评分和圆柱体实验评分。ACT可以有效改善MPTP诱导PD小鼠黑质纹状体组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,并降低丙二醛(MDA)的含量。双向电泳和Western blot检测发现胆绿素还原酶B(biliverdin reductase B,BLVRB)在MPTP诱导PD小鼠的黑质纹状体中的表达升高,而ACT给药后显著降低此蛋白的表达。结论...     

HPLC法测定独一味中类叶升麻苷

目的 建立藏药独一味中类叶升麻苷的测定方法.方法 采用HPLC法.色谱条件:Diamonsil C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-甲醇-1%醋酸水溶液(10:15:75)为流动相;体积流量为1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长334 nm.结果 类叶升麻苷在0.227 2～1.363 2μg呈良好的线性关系,r=0.999 2,加样回收率、精密度、稳定性和重现性试验结果均符合要求.结论 该方法专属性强、灵敏度高、精确度与重现性好,适用于独一味中类叶升麻苷的测定.     

类叶升麻苷大鼠安全性评价

目的 通过单次给药和重复给药毒性试验,初步评价类叶升麻苷的安全性,为深入全面开展其安全性评价奠定了基础。方法 单次给药毒性试验,SD大鼠随机分为溶媒对照组和给药组(5 000 mg·kg^-1),经口单次给药,观察并记录14 d内大鼠一般临床症状、死亡情况、体重;对主要脏器进行肉眼观察。重复给药毒性试验,SD大鼠随机分为溶媒对照组,类叶升麻苷低(100 mg·kg^-1)、中(500 mg·kg^-1)、高(2 000 mg·kg^-1)剂量组,每组30只,连续给药28 d,恢复28 d,观察并检测一般临床症状、体重、摄食量、尿常规等相关指标。结果 单次给药毒性试验中各动物无死亡、无异常、与溶媒对照组相比,体重差异无统计学意义(P> 0.05),脏器组织无肉眼可见病变。重复给药毒性试验中,与溶媒对照组相比,大鼠体重、摄食量、凝血指标、脏器湿重及系数差异无统计学意义(P>0.05);对血液学、肝功能和肾功能无毒理学影响,高剂量组脏器组织未见明显给药相关组织病理学改变;高剂量组雌性动物尿常规中出现白...     

类叶升麻苷对APP/PS1双转基因小鼠抗炎及抗氧化作用的研究

目的：探讨类叶升麻苷（Acteoside，AS）对APP/PS1双转基因小鼠炎症因子及氧化应激因子变化的影响。方法：健康APP/PS1转基因小鼠90只，对照B6C3雄鼠16只，雌雄各半，连续90 d灌胃给药，给药76 d进行Morris水迷宫实验，87 d进行跳台实验，解剖后检测血清、海马和皮层中炎症及氧化应激相关因子。结果：模型组小鼠血清中IL6、TNF-α含量显著高于正常组，模型组小鼠海马中IL1-β、IL6、IFN-γ、ROS含量显著高于正常组，模型组小鼠皮层中IL1-β、ROS含量显著高于正常组，IL6、TNF-α、IFN-γ含量与正常组无明显差异。AS可显著降低皮层中IL1-β、IL6、IFN-γ、ROS含量。结论：AS可通过降低痴呆小鼠致炎因子含量以抑制炎症反应，从而对机体产生免疫调节作用，保护神经细胞并改善脑部损伤，进而发挥其神经保护及改善学习记忆的作用。同时，AS可显著降低ROS含量，说明AS可通过抑制氧化应激损伤达到改善小鼠学习记忆功能的作用。     

类叶升麻苷对MPTP所致帕金森病小鼠模型的神经保护作用

目的研究类叶升麻苷在MPTP诱导的C57小鼠的帕金森病(PD)模型中的神经保护作用及机制。方法通过自主活动实验和滚筒实验研究动物的行为表现,通过高效液相电化学检测方法观察脑纹状体多巴胺的变化,通过脑黑质酪氨酸羟化酶(tyroxinehydroxylase,TH)免疫组化染色观察多巴胺能神经元的损伤程度。并对黑质纹状体进行α-突触核蛋白(α-synuclein)的免疫印迹分析以探讨药物作用机制。结果①经MPTP诱导的C57小鼠,其自主活动次数、滚筒运动潜伏期均低于对照组(P<0·01);纹状体多巴胺含量明显降低(P<0·01);多巴胺能神经元数量明显减少;黑质纹状体α-synuclein蛋白水平下降。②经类叶升麻苷(10、30mg·kg-1)预处理后能明显改善MPTP诱导的C57小鼠的行为学表现,增加脑内多巴胺递质的含量,增加多巴胺能神经元的数量,增加黑质纹状体α-synuclein蛋白水平。结论类叶升麻苷具有神经保护作用,能对抗MPTP诱导的C57小鼠PD模型中的神经损伤。其机制可能与上调α-synuclein蛋白水平有关。     

山药多糖对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的 探讨山药多糖对卡介苗(BCG)与脂多糖(LPS)致小鼠免疫性肝损伤的保护作用.方法 将昆明种小鼠分为对照组、模型组、山药多糖高、中、低剂量保护组,第1天,模型组与保护组均尾iv BCG,保护组每天分别按体重30、60、120 mg·kg~(-1)山药多糖ig-次,第12天末次ig 2 h,模型组与山药多糖高、中、低保护组经尾iv LPS.16 h后取小鼠称重,于眼球取血,测定小鼠血清中ALT、AST活性;处死小鼠,计算肝指数和脾脏指数;制备肝匀浆,测定肝组织中MDA、GSH含量及SOD和GSH-Px活性.结果 与模型组比较山药多糖各剂量可降低小鼠肝指数、脾脏指数及降低血清ALT、AST活性(P<0.05);降低MDA的含量,增加GSH含量和GSH-Px活性.结论 山药多糖对BCG和LPS诱导的小鼠免疫性肝损伤有保护作用.     

云芝多糖对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的：探讨云芝多糖（CVP）对免疫性肝损伤的保护作用及其机制。方法：昆明种小鼠随机分为5组,分正常对照组;病理造模组;CVP保护组分高、中、低三组。造模第一天,除正常对照组外,其余各组小鼠经尾静脉注射2．5mg卡介苗（BCG）;CVP低、中、高保护组每天分别按体重100mg／kg、200mg/kg、300mg／ksCVP灌胃1次,正常对照组和模型组用生理盐水同样处理,第十二天用CVP灌胃给药2h后,模型组和CVP各保护组从尾静脉注射7．5μg,只脂多糖（LPS）;16h后称取小鼠体重,眼球取血分离血清测定丙氨酸转氨酶（ALT）;处死小鼠立即取出肝脏、胸腺称重,计算肝体指数和胸腺指数,制备肝匀浆测定丙二醛（MDA）,取相同部位的肝组织,制作病理切片,HE染色,光镜下观察肝组织损伤程度。结果：与模型组比较,CVP各保护组均可降低免疫性肝损伤小鼠肝体指数,增加胸腺指数;降低小鼠血清中ALT的活性和和肝匀浆中MDA的含量,减轻肝细胞气球样变性,点状、片状坏死及炎性细胞浸润。结论：CVP对小鼠免疫性肝损伤有保护作用。     

类叶升麻苷对鱼藤酮致SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的探讨类叶升麻苷对鱼藤酮致多巴胺能神经元SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用及其机制。方法采用MTT法检测细胞存活率,以荧光染料Hoechst33342染色分析细胞核的形态学变化,用流式细胞仪定量分析细胞凋亡峰,以2,′7′-二氢二氯荧光黄双乙酸钠(DCFH-DA)为标记探针检测细胞内活性氧的产生。结果①0.5μmol.L-1的鱼藤酮处理SH-SY5Y细胞48 h能引起细胞存活率的显著下降;诱导细胞发生凋亡,凋亡率达47.39%;大部分细胞胞体皱缩,突起缩短消失或断裂;染色质皱缩、浓缩、断裂及形成凋亡小体;细胞内活性氧水平上升。②预先用盐生肉苁蓉提取物类叶升麻苷(10,20或40 mg.L-1)处理细胞6 h,可提高细胞存活率;明显改善鱼藤酮引起的细胞形态学变化;流式细胞仪检测凋亡率分别降低到25.87%,23.97%,10.45%;以DCFH-DA为标记探针检测到20 mg.L-1类叶升麻苷可明显抑制鱼藤酮引起的细胞内活性氧产生。结论类叶升麻苷能抑制鱼藤酮诱导的多巴胺能神经元SH-SY5Y细胞凋亡,其神经细胞保护作用可能与降低细胞内活性氧水平有关。     

类叶升麻苷对东莨菪碱所致记忆获得性障碍的改善作用

目的　观察类叶升麻苷对小鼠学习记忆能力的影响。方法　用东莨菪碱致小鼠记忆获得性障碍模型 ,以行为学实验 (跳台法、水迷路法 )、大脑皮层和纹状体乙酰胆碱酯酶活性和M受体的最大结合力为指标观察类叶升麻苷的作用。结果　在东莨菪碱致小鼠记忆障碍模型中 ,类叶升麻苷可延长跳台实验的平台停留期 ,并显著减少错误次数 ;在水迷路实验中可提高正确反应百分率 ;并能拮抗东莨菪碱所引起的大脑皮层乙酰胆碱酯酶的增高及皮层、纹状体M受体最大结合力的降低。结论　类叶升麻苷对东莨菪碱所引起的小鼠学习记忆能力障碍有改善作用 ,其作用机制可能与抑制乙酰胆碱酯酶活性和激动M受体的作用有关     

毛蕊异黄酮对免疫性肝损伤的保护作用

目的: 研究毛蕊异黄酮对急性免疫性肝损伤小鼠肝脏的保护作用及机制。方法: 毛蕊异黄酮(4, 2, 1 mg·kg^-1)连续10 d预防性给药后,采用刀豆蛋白A(ConA)诱导小鼠急性免疫性肝损伤,12 h后摘眼球取血,比色法测定小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;处死小鼠分离肝脏、脾脏并称重,计算肝脾指数;制备肝脏匀浆比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量;HE染色观察肝脏病理组织学变化并进行病理分级;免疫组化法检测肝组织雌激素受体(ER)定位并进行半定量分析。结果: 毛蕊异黄酮可明显减轻由ConA所致的病理损伤,降低免疫性肝损伤肝脏的肝脾指数、ALT、AST活性及MDA含量,升高SOD活性,增加ER的表达。结论: 毛蕊异黄酮对ConA致急性免疫性肝损伤小鼠肝脏具有保护作用,可能与其抗氧化自由基作用及促进肝脏ER表达增强雌激素样作用有关。     

中国拟青霉对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的：研究中国拟青霉(CN-802)对小鼠免疫性肝损伤的保护作用及其对T淋巴细胞亚群的影响。方法：小鼠尾静脉注射卡介苗加脂多糖(BCG LPS)建立免疫性肝损伤模型，检测其肝、脾重量和转氨酶活性，并同时测定血清与肝组织中脂质过氧化物(LPO)含量及T淋巴细胞亚群数量。结果：CN-802连用10d后可减轻其增大的肝、脾重量指数，降低小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)水平，降低其血清与肝组织中LPO含量，并增加外周血中T细胞亚群CD4数量和CD4／CD8比值。结论：CN-802对小鼠免疫性肝损伤模型有保护作用，其作用可能与调节细胞免疫有关。     

丹参多糖对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的探讨丹参多糖对卡介苗（BCG）和脂多糖（LPS）诱导的小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法尾静脉注射BCG和LPS诱导小鼠免疫性肝损伤,对比小鼠脏器系数,检测血清谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、一氧化氮（NO）的水平以及比较肝组织匀浆中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）的含量。结果丹参多糖可显著改善免疫性肝损伤小鼠的胸腺、肝脏、脾脏系数,降低血清中ALT、AST、NO的活性以及肝组织匀浆中TNF-α、IL-1β的含量。结论丹参多糖对免疫性肝损伤具有显著的保护作用。     

N-乙酰半胱氨酸对小鼠免疫性肝损伤的影响

目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对卡介苗(BCG)与细菌脂多糖(LPS)引起小鼠免疫性肝损伤的影响。方法建立BCG/LPS引起的小鼠免疫性肝损伤模型。采用两种处理方式给予NAC:方式A,于LPS处理前4h和15min分别经腹腔注射给予NAC(预处理);方式B,于LPS处理后0h和4h分别经腹腔注射NAC(后处理)。LPS处理后8h剖杀动物,取血和肝脏,并检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性与一氧化氮(NO)水平、肝脏组织谷胱甘肽(GSH)与丙二醛(MDA)含量以及肿瘤坏死因子α(TNF-α) mRNA表达水平。结果与模型组比较,NAC预处理组小鼠血清ALT活性下降,肝脏TNF-α mRNA表达明显减少,而体内NO生成和肝脏脂质过氧化水平无改变;NAC后处理组与模型组相比,小鼠死亡率升高,血清NO生成增加,肝脏GSH含量进一步下降,而小鼠血清ALT活性未见明显改变。结论NAC对小鼠免疫性肝损伤有双重效应,NAC预处理对抗BCG/LPS引起的小鼠免疫性肝脏损伤,NAC后处理加重BCG/LPS引起的氧化应激并升高动物死亡率。     

褪黑素对免疫性肝损伤小鼠自由基和细胞因子的影响

目的　研究褪黑素对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法　在诱导BCG +LPS免疫性肝损伤模型的基础上 ,用分光光度法检测血浆中ALT、AST、NO水平和肝匀浆MDA、SOD含量 ;L92 9细胞株法检测血浆中TNF α的生物学活性 ;胸腺细胞增殖法测定血浆中IL 1活性。结果　在BCG+LPS诱导的免疫性肝损伤中 ,褪黑素 (0 2 5 ,1,4mg·kg-1)ig预防给药均明显降低免疫性肝损伤小鼠增高的血浆ALT、AST活性 ,且以 1mg·kg-1的剂量作用最明显 ;并能减少肝匀浆MDA含量 ,使降低的肝匀浆SOD活性升高 ,抑制免疫性肝损伤小鼠血浆NO、TNF α和IL 1的升高。结论　褪黑素对小鼠免疫性肝损伤具保护作用     

金银花总黄酮对免疫性肝损伤小鼠的影响

目的观察金银花总黄酮（LJTF）对卡介苗（BCG）联合脂多糖（LPS）所致小鼠免疫性肝损伤炎症因子的影响。方法采用BCG2．5mg静脉注射致敏小鼠,d10给予LPS7．5μg静脉攻击造成小鼠免疫性肝损伤模型,ig给予IJTF（100、200、400mg·kg。）连续10d。观察肝组织形态学改变,称量体重,肝脏、脾脏重量,计算肝、脾脏器指数,分光光度法测定肝匀浆中NO、iNOS的含量,免疫组化测定肝脏TNF—d的表达。结果LJTFig能提高免疫性肝损伤小鼠肝、脾脏器指数,改善免疫性肝损伤小鼠肝脏组织学改变,降低肝匀浆中NO、iNOS的水平,LJTF也能降低免疫性肝损伤小鼠TNF-α在肝脏中的强烈表达。结论LJTFig可以减少炎症介质的释放,对免疫性肝损伤小鼠有保护作用。     

老鹳草提取物对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的:考察老鹳草提取物对免疫性肝损伤小鼠的保护作用。方法:分别采用卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)、刀豆蛋白A(ConA)诱导建立小鼠免疫性肝损伤模型,灌胃给予老鹳草提取物(100,200,400mg.kg-1),观察小鼠血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性及血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、细胞因子γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)含量变化;检测肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;进行肝脏病理组织检查。结果:不同剂量老鹳草提取物均可明显降低小鼠血清中AST,ALT活性及肝组织匀浆MDA含量(P<0.05或0.01),并能使降低的SOD活性升高;中、高剂量老鹳草提取物(200,400 mg.kg-1)可不同程度降低血清中IFN-γ和IL-4含量及LDH活性(P<0.05)。不同剂量老鹳草提取物可使血清蛋白含量维持正常比例,肝组织损伤均有不同程度减轻。结论:老鹳草提取物对小鼠免疫性肝损伤具有一定的保护作用。     

甘草酸二铵磷脂复合物对小鼠慢性肝损伤的保护作用

目的：探讨甘草酸二铵磷脂复合物注射剂（DG-PC）对C57BL/6J小鼠慢性免疫性肝脏损害的保护作用。方法：复制C57BL/6J小鼠慢性免疫性肝脏损害模型,测定血清ALT、AST、蛋白和透明质酸（HA）,肝匀浆中超氧化物岐化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、I型胶原（C.I）,并对肝脏组织切片进行电镜观察。结果：DG-PC可以明显改善肝损小鼠AST水平、提高白蛋白（ALB）含量、升高白球比（A/G）、降低HA含量（P〈0.01）,提高肝损小鼠的SOD和GSH水平（P〈0.01）,治疗效果优于甘草酸二铵（DG）。小鼠肝组织透射电镜观察显示DG-PC可以保护肝细胞和细胞器,减轻纤维化程度。结论：DG-PC对于C57BL/6J小鼠慢性免疫性肝损伤均具有一定的保护作用,可能与抗氧化等活性有关。     

咪达普利在免疫性肝损伤大鼠体内的药动学特征

目的:探讨咪达普利在免疫性肝损伤大鼠体内的药动学特征。方法:采用腹腔注射卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)建立大鼠免疫性肝损伤模型。模型组和正常对照组分别灌胃给予咪达普利(10 mg·kg-1),于给药后不同时间点采血,采用LC-MS/MS法测定血浆中咪达普利代谢产物咪达普利拉的浓度,计算药动学参数。结果:与正常大鼠相比,免疫性肝损伤大鼠体内咪达普利拉的的AUC0-12h、AUC0-∞和Cmax显著降低(P<0.05)。结论:免疫性肝损伤状态下,咪达普利的水解代谢受到显著抑制,药动学发生明显改变,该作用可能与LPS抑制羧酸酯酶1(CES1)的活性相关。