卵巢癌个体性化疗方案的初步研究

目的评价卵巢癌细胞对8种化疗药物的敏感性,为临床卵巢癌患者个体性化疗方案的制定提供有用的研究模式.方法①应用MTT法检测8种化疗药物对卵巢癌细胞系HO-8910细胞和对照组不同时间、不同浓度化疗药物及其组合的细胞抑制率,筛选出抑制率最高的化疗药物并进行组合.②通过FCM法检测其诱导细胞凋亡的效果,采用Annexin-V-FITC结合PI染色和TdT介导X-dUTP缺口末端标记(TUNEL)法.结果①在MTT法定量检测中,8种化疗药物作用48h对HO-8910细胞系抑制率与对照组相比具有不同程度的差异性,其中以4PPC(32μg/ml)的CDDP与4PPC(0.12μg/ml)的As2O3效果最显著,此时H0-8910细胞系的抑制率分别为80.43%和73.37%,与对照组比较,差异显著(P=0.01)(2).MTT法定量检测21种化疗药物组合对HO-8910细胞系抑制率,筛选出抑制率最高的化疗药物组合:CDDP BLM 紫杉醇(抑制率94.44%),与对照组比较,差异显著(P=0.0125).(3).FCM法定量检测组合CDDP BLM 紫杉醇作用2、4、6、8、10、12、24、48h 8个时间段对HO-8910细胞系的细胞凋亡率,与空白对照组比较有不同程度的差异,其中以作用48h的细胞凋亡率最高(75.70%),差异显著(P=0.0136).结论①卵巢癌细胞的化疗敏感性与化疗药诱导的卵巢癌细胞凋亡密切相关.②细胞抑制率,早期细胞凋亡,晚期细胞凋亡,细胞凋亡率可作为制订卵巢癌个体性治疗方案的评价指数体系.③在细胞抑制率的基础上优选出相应的抗癌药物,再通过细胞凋亡率评价抗癌药物的优化组合方案,这一肿瘤个体性化疗方案制定程序具有可行性,为卵巢癌者个体性化疗方案的制定提供了一个有用的研究模式.     

紫衫醇与顺铂诱导卵巢癌SKOV_3细胞凋亡的研究

目的 :研究两种不同的抗癌药物诱导细胞凋亡的规律 ,为卵巢癌的化疗提供理论依据。方法 :紫衫醇与顺铂分别作用于体外培养的卵巢癌SKOV3 细胞系 ,通过组织细胞化学染色、荧光染色、电子显微镜、DNA凝胶电泳、流式细胞术等方法进行检测和观察。结果 :经两种抗癌药物处理的卵巢癌SKOV3 细胞出现典型的细胞凋亡特征 ,在顺铂处理 0～ 36小时内 ,细胞凋亡呈均一的持续性增强 ,在 5～ 2 5nmol ml剂量范围内呈依赖性增强 ,凋亡率最高达 72 %。紫衫醇诱导细胞凋亡亦具有时间和剂量依赖性 ,2 5nmol ml浓度处理 12小时 ,凋亡率最高达 5 5 % ;但时间过长 (>12小时 )或浓度过大 (>5 0nmol ml) ,凋亡率下降。结论 :紫衫醇与顺铂能有效地诱导肿瘤细胞凋亡 ,诱导细胞凋亡是化疗药物治疗癌症的重要机制之一     

索拉非尼联合顺铂抑制卵巢癌H08910细胞生长的体外研究

目的对索拉非尼联合顺铂抑制卵巢癌H08910细胞生长进行体外研究。方法探讨索拉非尼、顺铂单用以及索拉非尼与顺铂联合应用对卵巢癌H08910细胞增殖的抑制率、细胞凋亡率、细胞周期影响。检测细胞增殖的抑制率采用四甲基偶氮唑蓝方法,检测细胞凋亡率、细胞周期应用流式细胞仪。结果联合用药组对卵巢癌H0-8910细胞增殖抑制率明显高于单独用药组,两者能够诱导细胞凋亡及阻滞细胞周期,在联合应用时表现出协同作用趋势。结论索拉非尼能够将患者对化疗药物的敏感性提高,降低化疗药物应用剂量及毒副作用,可能成为化疗药物良好辅助用药。     

白黎芦醇联合TRAIL基因对胃癌SGC-7901细胞增殖与抑制作用的实验研究

目的:探讨白黎芦醉(Resveratrol,Res)联合肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(Tumor necrosis factor-related apoptosis indticing ligand,TRAIL)在体外对胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡作用及其机制,为将Res作为抗癌药物的临床应用提供理论和实验依据.方法:以人胃癌SGC-7901细胞株为研究对象,将Res与转染了 pBUD-TRAIL质粒的胃癌SGC-7901细胞共同培养,以MTT法检测细胞增殖抑制率;以FCM检测细胞凋亡率;以TUNEL法检测细胞凋亡等,观察联合应用埘肿瘤细胞的抑制作用.结果:MTT和FCM检测结果显示:TRAIL组肿瘤细胞抑制率为54.28%,凋亡率17.12%,Res联合TRAIL组抑制率和凋亡率均明显提高,分别为70%和22.03%,与对照组相比,具有显著性差异;TUNEL检测结果显示:TRAIL与Res联合组与对照组相比较,细胞核明显棕黄色深染,且阳性染色细胞数目明显增多,表明TRAIL与Res联合作用凋亡细胞明显增加.结论:Res联合TRAIL基因可显著抑制肿瘤细胞的增殖和促进肿瘤细胞的凋亡,说明Res可增强TRAIL促进肿瘤细胞凋亡,两者具有协同作用.     

细胞凋亡检测用于卵巢癌化疗药物敏感性试验及其与ATP法的比较

目的 探讨细胞凋亡检测用于卵巢癌化疗药物敏感性试验的可行性。方法 采用末端标记法直接检测顺氯胺铂等6种化疗药物诱导4例卵巢癌实体瘤细胞凋亡的结果。并与三磷酸腺苷生物发光法（ATP法）检测结果进行对比。结果 同一种化疗药物对不同来源的癌细胞的细胞凋亡诱导程度不同，与ATP法比较二者的检测结果存在一致性（P0=0.75)。结论 上述结果提示，细胞凋亡检测能直接用于 了解药物诱导肿瘤细胞凋亡的程度，若作为一种药物敏感性试验方法与ATP法组合应用，将有可能提高临床应用效果。     

姜黄素促卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP凋亡机制探索

目的研究姜黄素对耐药卵巢癌细胞的促凋亡作用及其可能的机理。方法用MTT法检测不同浓度姜黄素、化疗药物〔顺铂(DDP),紫杉醇〕及姜黄素联合化疗药物(姜黄素+顺铂,姜黄素+紫杉醇)作用于卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP细胞48h后各组的细胞抑制率,并用流式细胞仪检测上述各组细胞的凋亡率。RT-PCR技术检测姜黄素、顺铂、姜黄素+顺铂作用于COC1/DDP细胞48h后各组的磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基(PI3KCA)mRNA的表达。结果不同浓度姜黄素作用COC1/DDP 48h后,细胞的抑制率和凋亡率随着姜黄素浓度的升高相应增高,姜黄素联合化疗药物作用组比单用化疗药物组的细胞抑制率及细胞凋亡率高(P<0.05)。顺铂与姜黄素联合用药与顺铂单独作用相比PI3 KCA mRNA的表达降低(P<0.05)。结论姜黄素能够促进卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP的凋亡,这一作用可能与姜黄素和化疗药物协同诱导该细胞系的凋亡有关,其机制可能为降低PI3 KCA基因的表达。     

细胞凋亡检测用于卵巢癌化疗药物敏感性试验及其与ATP法的比较

目的　探讨细胞凋亡检测用于卵巢癌化疗药物敏感性试验的可行性。方法　采用末端标记法直接检测顺氯胺铂等 6种化疗药物诱导 4例卵巢癌实体瘤细胞凋亡的结果 ,并与三磷酸腺苷生物发光法 (ATP法 )检测结果进行对比。结果　同一种化疗药物对不同来源的癌细胞的细胞凋亡诱导程度不同 ,与 ATP法比较二者的检测结果存在一致性 (P0 =0 .75 )。结论　上述结果提示 ,细胞凋亡检测能直接用于了解药物诱导肿瘤细胞凋亡的程度 ,若作为一种药物敏感性试验方法与 ATP法组合应用 ,将有可能提高临床应用效果     

Bcl-2抑制剂S1诱导人卵巢癌细胞凋亡及其机制的研究

目的:以人卵巢癌细胞SKOV3为研究对象,探讨Bcl-2抑制剂S1诱导人卵巢癌细胞凋亡的机制。方法:通过MTT法检测S1作用下卵巢癌细胞的生存率;S1 10μmol/L作用不同时间,流式细胞术检测细胞凋亡率;Western Blot检测凋亡相关蛋白Mcl-1的变化。结果:与对照组相比S1能明显抑制SKOV3的生存率;流式细胞术结果显示,S1引起SKOV3细胞凋亡明显升高;蛋白水平检测S1作用8 h能明显抑制SKOV3细胞Mcl-1蛋白表达。结论:S1可能通过抑制Mcl-1蛋白诱导人卵巢癌细胞凋亡。     

三氧化二砷诱导卵巢癌细胞株SKOV3凋亡对端粒酶活性的影响

目的探讨三氧化二砷诱导卵巢癌细胞株SKOV3凋亡时对端粒酶活性的影响。方法不同浓度的As2O3溶液作用卵巢癌细胞SKOV3,在不同时间点收集细胞,MTT法检测细胞生长抑制率;FCM检测细胞凋亡率;TRAP-银染法观察端粒酶活性的变化。结果 As2O3溶液对SKOV3细胞有生长抑制和诱导凋亡的作用。As2O3作用SKOV3细胞24 h,端粒酶活性无明显下降,但有凋亡现象,凋亡率为6.15%。随着作用时间的延长,凋亡率逐渐上升,端粒酶活性逐渐下降。随着药物浓度的升高端粒酶活性也呈不断下降趋势,以至消失。结论 As2O3诱导SKOV3凋亡与端粒酶活性有一定相关性,但端粒酶活性的下降可能不是As2O3诱导细胞凋亡的早期事件。     

β1整合素与卵巢癌细胞凋亡关系的实验研究

目的 研究β1整合素及纤维黏连蛋白在人卵巢癌HO-8910细胞增殖、凋亡中的作用及其意义.方法 以培养在包被纤雏黏连蛋白底物上的人卵巢癌HO-8910细胞为靶细胞,用不同浓度抗β1整合素单克隆抗体阻断β1整合素与纤维黏连蛋白的相互作用.用MTT法测定细胞增殖抑制率;吖啶橙(acridine orange,AO)染色观察细胞凋亡的形态学变化;流式细胞仪检测细胞周期分布及细胞凋亡率.结果 抗β1整合素单克隆抗体能抑制人卵巢癌HO-8910细胞的增殖,并有明显的时间和剂量依赖性(P＜0.05).荧光显微镜观察到细胞凋亡的形态学改变;流式细胞术检测结果显示实验组S期上升,细胞凋亡率上升.结论 抗β1整合素单克隆抗体可抑制卵巢癌细胞的增殖,β1整合素抗体与卵巢癌细胞凋亡密切相关,阻断β1整合素与其特意配体纤维黏连蛋白的相互作用可诱导卵巢癌细胞凋亡.     

纤维胃镜消毒方法探讨

44份胃镜标本经胃镜自动洗消机与氧氯灵-1000(一种消毒剂)处理后,镜体表面含菌量减少了99.0～99.0％,而经人工三步法处理的47份胃镜标本,单位面积的细菌消除率均达99.9％以上。每种方法的处理结果经统计学分析,差异显著(P<0.05)。建议目前所用机器消毒纤维胃镜的方法还需进一步改进     

在药理学理论教学中进行因容施法

根据药理学不同教学内容的特点，选择适当的教学方法，如逻辑推理法、启发式教学法以及现代教学手段产物的多媒体辅助的直观教学法和网络教学法等，做到“因容施法”，使教学内容由繁入简，由抽象变具体，化难为易。不同的教学方法以其不同的形式调动学生学习兴趣和积极性。问卷调查显示：“因容施法”进行教学，授课质量明显提高。     

颅内脊索瘤及其手术治疗

报告21例颅内脊索瘤,按部位分为鞍区型、颅中窝型、颅后窝型和鼻咽型。20例分别经乳突后、枕下极外侧、前方颅底、鼻蝶、口腔、颞下等入路手术,肿瘤全切5例,次全或大部切除11例,部分切除3例,活检1例。无死亡。作者讨论了颅内脊索瘤的分型、诊断和治疗,重点介绍了手术入路的选择和前方颅底、枕下极外侧入路的基本方法。     

超选择性动脉内溶栓治疗急性期脑梗死临床分析

目的:探讨脑梗死急性期超选择性动脉内溶栓的治疗效果。方法:对13例急性脑梗死患者,进行全脑血管造影术,用尿激酶进行超选择性动脉内溶栓,观察疗效及其安全性。结果:13患者颈内动脉狭窄5例,治疗后再通5例;大脑中动脉狭窄3例,治疗后再通1例;椎-基底动脉狭窄4例,治疗后再通1例;1例颅内动脉未见异常,总再通率为69.2%。临床症状明显好转或好转7例;病情加重4例;2例无明显变化。结论:选择合适的急性脑梗死患者,急诊行动脉内溶栓是一种安全有效的治疗方法,能最大限度减少临床并发症。     

多糖微量元素络合物的安全性试验

本研究对多糖微量元素络合物进行了LD_(50)试验、Ames试验、微核试验、蓄积性试验、溶血性试验等安全性试验。其结果为:小白鼠口服的LD_(50)为870.1mgFe/g·BW(即3873.04mg多糖铁),其刺激性弱。多糖Fe、Cu、Zn、Mn混饲小白鼠20d,蓄积系数大于5。Ames试验及微核试验均为阴性,无溶血现象,注射剂热原检查符合《药典》规定。     

医药信息检索课程试题库的建设与应用

利用ACCESS2000数据库软件结合C 程序设计语言开发软件,建立医药信息检索试题库,可以提供课程创建、试题录入、修改、自动生成试卷、打印和数据库备份等基本功能。初步表明,利用信息检索课程试题库生成的试卷质量良好,值得推广使用。     

结核病的免疫学诊断方法

本文综述了当前临床常用的以及近期较广泛开展的结核病的免疫学诊断方法,主要介绍了皮肤结核菌素实验,几种检测结核分枝杆菌抗体的方法,r干扰素释放试验及它们的临床应用价值.     

浅谈湿温病下法

围绕湿温病是否应该禁下之问题,试从湿温病可出现的6个不同证候进行分析,并同伤寒论3个承气汤加以比较,进而有力的论证了湿温可下之征是必须有实邪阻滞这一论断。     

中医药治疗睑腺炎文献分析

目的：探析中医药治疗睑腺炎的处方,指导临床治疗。方法：通过中国期刊全文数据库检索相关文献,并用Excel对数据进行统计分析。结果：通过对数据的统计分析,总结出临床使用频率最高的药物和穴位。结论：中医药治疗睑腺炎处方用药多以清热解毒药为主,取穴常以耳穴刺络放血为主。     

人髁突软骨细胞培养方法探讨

目的探讨人胚髁突软骨细胞培养方法。方法分离出人胚髁突软骨组织,分别采用组织块培养法、传统两次酶消化法、改良酶消化法进行髁突软骨细胞原代培养,倒置相差显微镜下进行细胞形态学观察,甲苯胺蓝和HE染色鉴定软骨细胞。结果倒置相差显微镜观察发现,采用组织块培养法,未见细胞从组织块爬出;而传统的两次酶消化法可获细胞数为10^5／mL,但使用的胶原酶浓度高,消化时间较长;改良的Ⅱ型胶原酶消化联合胰蛋白酶法,对原代髁突软骨细胞分离取得了优良而稳定的效果,可收获细胞数为10^7／mL。结论改良的Ⅱ型胶原酶消化联合胰蛋白酶法是一种良好的人髁突软骨细胞培养的方法。