卵巢癌个体性化疗方案的初步研究

目的评价卵巢癌细胞对8种化疗药物的敏感性,为临床卵巢癌患者个体性化疗方案的制定提供有用的研究模式.方法①应用MTT法检测8种化疗药物对卵巢癌细胞系HO-8910细胞和对照组不同时间、不同浓度化疗药物及其组合的细胞抑制率,筛选出抑制率最高的化疗药物并进行组合.②通过FCM法检测其诱导细胞凋亡的效果,采用Annexin-V-FITC结合PI染色和TdT介导X-dUTP缺口末端标记(TUNEL)法.结果①在MTT法定量检测中,8种化疗药物作用48h对HO-8910细胞系抑制率与对照组相比具有不同程度的差异性,其中以4PPC(32μg/ml)的CDDP与4PPC(0.12μg/ml)的As2O3效果最显著,此时H0-8910细胞系的抑制率分别为80.43%和73.37%,与对照组比较,差异显著(P=0.01)(2).MTT法定量检测21种化疗药物组合对HO-8910细胞系抑制率,筛选出抑制率最高的化疗药物组合:CDDP BLM 紫杉醇(抑制率94.44%),与对照组比较,差异显著(P=0.0125).(3).FCM法定量检测组合CDDP BLM 紫杉醇作用2、4、6、8、10、12、24、48h 8个时间段对HO-8910细胞系的细胞凋亡率,与空白对照组比较有不同程度的差异,其中以作用48h的细胞凋亡率最高(75.70%),差异显著(P=0.0136).结论①卵巢癌细胞的化疗敏感性与化疗药诱导的卵巢癌细胞凋亡密切相关.②细胞抑制率,早期细胞凋亡,晚期细胞凋亡,细胞凋亡率可作为制订卵巢癌个体性治疗方案的评价指数体系.③在细胞抑制率的基础上优选出相应的抗癌药物,再通过细胞凋亡率评价抗癌药物的优化组合方案,这一肿瘤个体性化疗方案制定程序具有可行性,为卵巢癌者个体性化疗方案的制定提供了一个有用的研究模式.     

体外化疗药敏实验与临床卵巢癌化疗

卵巢癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,手术和化学治疗是主要的治疗方法。目前用于卵巢癌化疗的药物有、20余种。有60％～70％的病人对首次传统经验化疗方案有良好反应。然而卵巢癌（尤其是晚期卵巢癌）的预后仍然很差。多数病人在治疗过程中出现耐药。人们期待能够通过体外药物敏感实验进行有选择性的个体化治疗（tailor treatment）。现将卵巢癌药敏试验研究及其临床意义进行回顾性分析。     

MTT体外药敏试验在指导恶性肿瘤化疗中的作用

近年来 ,通过肿瘤化疗药敏试验指导个体化疗的研究 ,受到国内外广泛重视。我们采用ＭＴＴ法体外药敏试验 ,对大肠癌、肺癌及胃癌化疗药物敏感性进行了临床分析和观察 ,现将结果报告如下。1　临床资料1 .1　标本来源1 1例标本来自我院外科手术新鲜肿瘤组织。其中大肠腺癌 6例 ,肺鳞癌 3例。胃腺癌2例 ,均经病理证实。1 .2　制备肿瘤细胞悬液在无菌条件下 ,去除肿瘤的纤维组织及坏死部分 ,置入细胞滤器中 ,用目铜网过滤 ,Ｄ -Ｈａｎｋ氏液冲洗 ,台盼兰染色活细胞 >90 % ,用1 64 0双抗液制备成 2～ 5× 1 0 5/ｍｌ细胞悬液。1 .3　化疗药物液的…     

脑胶质瘤化疗药物的体外敏感性试验研究

目的 探讨采用MTT法检测肿瘤化疗药对脑胶质瘤细胞的敏感性.方法 分离临床实体瘤标本(原代脑胶质瘤组织)制备单细胞悬液,包括U87细胞进行体外培养,将临床上常用的8种肿瘤化疗药5-氟尿嘧啶(5-Fu)、卡铂(CBP)、顺铂(DDP)、阿霉素(DOX)、甲氨蝶呤(MTX)、依托泊苷(VP-16)、丝裂霉素(MMC)、长春新碱(VCR)配成3种不同的浓度(5-Fu的终浓度为250、500、750 μg/mL,其他肿瘤化疗药终浓度50、100、150 μg/mL),采用MTT法检测,计算各肿瘤化疗药物对肿瘤细胞的抑制率.结果 8种肿瘤化疗药对原代脑胶质瘤的抑制效率依次为:ADM＞ MMC＞ DDP＞VCR ＞5-Fu＞ VP-16＞ CBP＞ MTX;其中ADM的敏感度最高(抑制率95.54％);其次是MMC和DDP(抑制率＞60％),MTX最不敏感(11.29％).7种化疗药物对U87细胞株的抑制率依次为:ADM＞ VP-16＞ CBP＞ MMC ＞5-Fu＞ DDP＞ MTX:ADM的抑制率最高(91.19％),最不敏感的是MTX,其次是DDP(二者＜30％).DDP对于U87细胞抑制率较低,属于耐受药,但作用于原代脑胶质瘤细胞时细胞毒作用较大,为敏感性化疗药物.结论 MTT法体外药敏试验为指导实体瘤患者的临床化疗方案提供了有效数据,可减少用药的盲目性,提高个体化治疗效果.     

ATP体外药敏试验指导的卵巢癌预见性化疗

目的　探讨ATP体外药敏试验指导临床卵巢癌化疗的价值。方法　 86例卵巢癌患者中 ,5 7例在化疗前接受了ATP体外药敏试验。其中ATP敏感组 49例 ,根据药敏结果指导化疗 ;ATP耐药组 8例和对照组 2 9例则凭经验化疗。结果　ATP敏感组有效率为 75 5 % (3 7/4 9) ,ATP耐药组和对照组有效率分别为 0 (0 /8)及 5 5 2 % (16/2 9) ,差异有显著意义(P <0 .0 1)。本研究体外药敏和体内疗效的总符合率为 78 9%〔(3 7+ 8) /5 7〕。结论　ATP体外药敏试验指导临床卵巢癌化疗是可行的 ,疗效也是满意的     

MTT法检测94例胃癌体外药敏

四唑盐比色法(MTT法)是一种测定细胞代谢和增殖活性的技术.其原理是利用活细胞内的线粒体脱氢酶将黄色可溶性的四唑盐[3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5二苯基四氮唑溴盐,简称MTT]还原为蓝紫色不溶性的甲臢(For-mazan),通过测定细胞内脱氢酶活性的改变可客观地反映细胞的变化.     

选择肿瘤化疗最佳方案的体外系列药敏实验法

实验证明,同一类肿瘤患者对化疗的敏感度不同,临床上治疗方案常因人而异。如何在化疗一开始就选准较有效方案,能否象抗菌药敏一样做出肿瘤药敏,国外就此已有大量尝试。本文就我们近年试用的选择肿瘤化疗最佳方案的体外系列药敏实验法报道如下。 材料与方法 一、材料 1640培养基(日水制药株式会社,批号066412);小牛血清(上海东风试剂厂);甲基-[~3H]胸腺嘧啶(中科院上海原子核研究所,批号870327);临床常用抗     

细胞凋亡与肺癌细胞体外药敏试验的实验研究

目的 通过抗癌药物诱导肿瘤细胞凋亡预测抗肿瘤药物对肿瘤化学治疗的敏感性。方法 用原发住或转移性肺癌组织标本40份,包括组织块,胸水、淋巴结。采用Tunel方法观察抗肿瘤药物诱导肿瘤细胞凋亡。结果 5-Fu诱导肺癌细胞凋亡敏感性分别为高敏20％,中敏5％,低敏50％,不敏25％;CTX分别为10％,0.25％,65％,MTX分别为5％,20％,30％,45％;MMC分别为10％,30％,30％,30％;CDDP分别为15％,30％,30％,25％;CCNU分别为15％,15％,15％,55％;VP-16分别为15％,15％,40％,30％;VCR分别为5％,25％,20％,50％。结论 用细胞凋亡法预测肿瘤细胞对抗肿瘤药物敏感性经40份标本检测,结果与文献报告的MTT法,3H-TdR,HTCA相一致,但方法简单,误差小,费时短,设备要求低,无射线污染,值得推广应用。     

贲门癌细胞原代培养体外药敏试验研究

目的　探讨 (MTT)法体外药敏试验对贲门癌术后化疗的指导价值。方法　采用MTT法检测 31例贲门癌标本对临床常用的 5种化疗药物单独及联合应用的体外敏感性。结果　 5种抗癌药物单用时最敏感的药物为CPT和MMC ,χ2 值为 1 .35 ,P >0 .0 5 ,二者无统计学意义 ;联合用药组的总体敏感率明显高于单一用药组 (χ2 =2 9.0 5 3,P <0 .0 0 1 )。结论　MTT法体外药敏试验对指导贲门癌术后的化疗具有一定的指导意义     

MTT体外药敏指标下消化道肿瘤化疗的临床应用

目的：筛选化疗药物，提高肿瘤化学治疗的预见性。方法：采用ＭＴＴ法检测３５例手术切除的消化道恶性肿瘤组织对几种常用化疗药物的敏感性，根据其结果选择果选择化疗药物，指导临床化疗，并与经验化疗组进行比较，结果：ＭＴＴ指导组总有效率为７７．１％，经验化疗组总有效率４２．２％，两组比较，差异有非常显意义（Ｐ〈０．０１），结论：ＭＴＴ体外药敏试验指导恶性肿瘤化疗方法可行，疗效满意。     

直肠癌体外药敏试验与临床疗效的相关性研究

目的研究直肠癌体外药物敏感性与临床疗效的相关性,为临床肿瘤个体化化疗提供依据。方法将同期98例直肠癌,分别分为MTT试验组和对照组。接受MTT药敏实验者,根据药敏结果分为敏感组和不敏感组,敏感组根据药敏结果指导化疗,不敏感组和对照组采用常规化疗方案化疗,观察各组临床近期疗效和3年生存率。结果56例直肠癌组织对5种化疗药物的体外敏感性顺序依次为:丝裂霉素、羟基喜树碱、5-氟尿嘧啶、顺铂、阿霉素,与临床实践不完全一致。MTT敏感组、不敏感组与对照组近期临床有效率分别为:75.0%(30/40)、14.3%(1/7)和51.4%(18/35),差异存在显著性(P<0.05)。MTT敏感组、不敏感组与对照组的3年生存率分别为65.7%(23/35)、0%(0/6)和47.1%(16/34),差异存在显著性(P<0.05)。结论MTT药敏试验结果有助于临床的个体化治疗和化疗效果的预测,有助于提高直肠癌患者的远期存活率。     

喉癌和鼻咽癌体外药敏试验AgNOR法的实验及临床研究

目的：用嗜银蛋白检测技术（AgNOR)分析喉癌和鼻咽癌对8种常用化疗药物的敏感性。方法：从56例喉癌和鼻咽癌患者获取新鲜肿瘤组织标本，采用单纯机械分离法制备单细胞悬液。加入抗癌药物后培养36h，细胞悬液涂片，银染，计数银染颗粒后计算均值下降率；12例患者同期行化疗。结果：51例肿瘤获得实验成功，可评价率为91.1%，AgNOR颗粒均值下降率从0-63%，在8种单一药物中，对DDP的敏感率最高，其它较为敏感的药物为VCE、T-FU、PYM；鼻咽癌对抗癌药物的敏感性显著于喉癌对抗癌药物的敏感性；体外药敏与体内疗效的总符合率为80%。结论：AgNOR技术简便易行，与临床相关性好，是一种有应用前景的体外药敏筛选方法。     

ATP生物发光法与MTT法检测卵巢癌体外化疗敏感性的比较

目的比较ATh法与MTT（四唑蓝）法对卵巢癌细胞体外化疗敏感性的预测价值。方法分别以ATP法和MTF法检测5种化疗药物对卵巢癌3AO细胞株的抑制作用。结果（1）ATP法与MTT法相关性良好（r＝0．9031）。（2）ATP法更加灵敏、稳定。ATP法在80个细胞时即可测出发光强度的改变;而MTT法细胞数达300时才能测出OD值变化。试验所需细胞浓度,ATP法与MTT法分别为1×104－5×104个／ml和1×106-5×106个／ml,ATP法比MTT法低得多。结论ATP法作为检测卵巢癌细胞体外化疗敏感性的手段优于MTT法。     

体外药物敏感试验ATP-TCA在肝癌化疗中的应用

目的：探讨体外三磷酸腺苷生物荧光法化疗药物敏感试验（ATP—TCA）在肝癌化疗中的应用价值。方法：用ATP—TCA法检测6种化疗药物对37例肝细胞癌标本的敏感率和耐药率。结果：37例肝癌标本中,ATP—TAC的可评估率为89．19％,6种化疗药物的敏感率分别为：更生霉素（ACTD）84．85％;长春瑞滨（NVB）78．79％;丝裂霉素C（MMC）75．76％;羟基喜树碱（HCT）42．42％;长春新碱（VCR）39．39％;吡柔比星（THP）36．36％。各试验药物的敏感率与肿瘤的大小、血清甲胎蛋白（AFP）无显著相关性（P〉O．05）,ACTD在P53蛋白阴性时敏感性较好,而ACTD、HCT、THP对Ⅰ、Ⅱ级肝癌的敏感率高于Ⅲ、Ⅳ级。结论：ATP—TCA法在检测肝癌化疗药物敏感性时稳定可靠,可作为肝癌化疗药物筛选的方法之一。     

MTT比色分析法检测卵巢癌药物敏感性

目的:探讨四氮唑蓝比色分析法(MTT法)用于指导临床个体化化疗药物选择的实用性,为卵巢癌临床化疗用药提供参考.方法:采用常用的12种化疗药物对65例卵巢癌进行MTT法药物敏感试验.结果:不同类型的卵巢癌及同一类型的不同个体对化疗药物的敏感性差异较大.卵巢癌对紫杉醇、表阿霉素、卡铂和顺铂中度敏感,平均抑制率分别为(67.3±4.6)%、(54.5±4.8)%、(52.0±4.3)%和(50.8±4.5)%;对鬼臼乙叉甙、烃基喜树碱和长春地新低度敏感,平均抑制率分别为(39.6±3.8)%、(39.3±4.3)%和(30.7±2.6)%;而对丝裂霉素C、噻替哌、5氟尿嘧啶、长春新碱和氨甲喋呤则耐药,平均抑制率均小于30%.结论:卵巢癌化疗敏感性个体差异较大.MTT法是一种简便而快速的肿瘤体外药物敏感实验方法,可为卵巢癌临床个体化化疗方案的选择提供客观依据.     

大肠癌个体化化疗方案的实验研究

日的:探讨大肠癌个体化疗方案。方法:大肠癌原代培养,MTT法进行药敏试验。结果:发现5一Fu和MMC有效率最高,MMC次之。结论:大肠癌的化疗中,在缺乏药敏实验的情况下,建议采用5一Fu+MMC的联合化疗方案。     

L-BSO对人肺腺癌细胞A549化疗增敏的体外研究

目的 研究L-BSO对人肺腺癌细胞A549体外化疗增敏的机制及效果。方法 采用酶循环法检测A549细胞内谷胱甘肽（GSH）含量，MTT比色法体外观察L-BSO对A549细胞化疗增敏作用，流式细胞仪检测细胞内Dau荧光强度变化。结果 L-BSO能有效抑制A549细胞内GSH合成，并能明显增加A549细胞对顺铂、阿霉素化疗敏感性，但不增加细胞内药物的聚集。结论 L-BSO是一种较好的化疗增敏剂。     

Assessment of pancreatic carcinoma cell chemosensitivity using a three-dimensional culture system

Background Monolayer cell culture models are the traditional culture models used for in vitro research of pancreatic carcinoma chemosensitivity. However, these models neglect the interactions between tumor cells and the impact of the tumor microenvironment. Such tumor cell monolayers poorly mimic the solid tumor microenvironment. The present study aimed to investigate the chemosensitivity characteristics of pancreatic cancer cells in a three-dimensional culture system by analyzing the differences in drug sensitivity between a scattered cell culture model and a multicellular spheroid culture model. Methods Three pancreatic cancer cell lines （SW1990, ASPC-1 and PCT-3） were cultured in three-dimensional collagen gels as well as in traditional two-dimensional monolayers. The chemosensitivities of the pancreatic carcinoma cells to 5-fluorouracil （5-FU）, gemcitabine, and oxaliplatin in vitro were detected by both the Cell Counting Kit-8 test and the collagen gel droplet-embedded culture drug-sensitivity test. Results In the two-dimensional culture model, differences in the chemosensitivities of the cloned pancreatic carcinoma cells and scattered cells existed for some concentrations of 5-FU, gemcitabine and oxaliplatin. In the three-dimensional culture model, there were significant differences in the chemosensitivities of the pancreatic cancer cells between the scattered cells and multicellular spheroids （P 〈0.05）. Conclusion Pancreatic carcinoma cells exhibit multicellular resistance in three-dimensional cultures.     

人卵巢上皮癌的体外培养及耐药株的诱导

目的研究人卵巢上皮癌体外培养的方法及其耐药株的诱导方法。方法取卵巢上皮癌患者的卵巢癌实体瘤、囊内液及腹水,分别用直接培养法,胰酶消化培养法和胶原酶消化培养法体外培养。检测细胞对顺铂和环磷酰胺的药物敏感性,选择适当的药物和浓度诱导卵巢上皮癌耐药株。并比较耐药株与诱导前的母株间克隆形成率和耐药蛋白表达的差异。结果腹水和囊内液直接培养较实体瘤培养易成功。实体瘤培养以胶原酶消化培养法获得细胞数最多,混杂细胞最少。取腹水来源的稳定传至30代的卵巢癌细胞用环磷酰胺诱导耐药株成功。检测其克隆形成率和耐药蛋白表达均高于诱导前。结论本实验探讨了人卵巢上皮癌体外培养的多种方法,成功培养一株卵巢黏液性囊腺癌细胞,达建系要求,并成功诱导其耐药株。可用于卵巢上皮癌发生及复发机制和治疗及预防方面的研究。