实时荧光定量PCR检测丙型肝炎病毒

目的探讨实时荧光定量PCR（FQ—PCR）技术检测丙型肝炎病毒（HCV）RNA载量与抗-HCV及丙氨酸氨基转移酶（ALT）异常的相关性。方法用FQ—PCR检测115份疑似HCV感染的病人血清HCV—RNA，ELISA法检测抗-HCV，全自动生化分析仪测定ALT。结果以80拷贝／ml血清为标准，115份标本中HCV—RNA阳性率为54．8％（63／115）；抗-HCV阳性率为53．9％（62／115）；ALT异常率为40．9％（47/115）。HCV—RNA载量与抗-HCV（＋）例数呈正相关（r=0．986，P〈0．01）。HCV—RNA载量与ALT异常例数（r=0．94，P〈0．01）、含量（r=0．624，P〈0．01）呈正相关。结论HCV—RNA载量升高，抗-HCV阳性率相应增加，ALT高于正常值（40U／L）的异常率和浓度也增高，均呈正相关。FQ—PCR法可作为临床检测丙型肝炎的确诊方法之一。     

丙型肝炎病毒RNA含量与抗-HCV及ALT的关系探讨

目的 了解丙型肝炎病毒核糖核酸（HCV RNA）与抗丙肝病毒抗体（抗-HCV）及丙氨酸氨基转移酶（ALT）的关系。方法 83份确诊为丙肝的住院患者样本作观察组,95份健康体检人群样本作对照组,用荧光定量逆转录聚合酶反应（FQ-RT-PCR）检测这两组样本的HCV RNA含量,并同时采用ELISA法检测抗-HCV,用全自动生化检测仪测定ALT水平。结果 观察组HCV RNA含量高于80copy／ml者67份,抗-HCV阳性者64份．经进一步相关性分析,两者有很好的相关性（r=0．587,P=0．002）;83份病例中有58份ALT异常,其异常率随HCV RNA含量的升高而增加。经统计学分析,ALT异常例数和正常例数差异有显著性（P〈0．01）;ALT水平和HCV RNA含量无相关性（r=0．175,P=0．095）;而ALT异常率与HCV RNA含量呈正相关（r=0．903,P=0．036）。结论 HCV RNA含量与抗-HCV同时检测可提高临床对丙型肝炎的诊断。HCV RNA是反映HCV复制的可靠指标,结合ALT的结果可帮助临床了解HCV在体内的复制状况及肝脏的炎症状态。FQ-RT-PCR法检测HCV RNA具有非常好的临床应用价值。     

丙型肝炎患者HCV RNA与转氨酶的关系

目的了解丙型肝炎病毒核糖核酸（HCVRNA）与天冬氨酸转移酶（AST）及丙氨酸氨基转移酶（ALT）之间的关系。方法对119例（自2008年1月～2009年5月）来自湖南省人民医院住院和门诊丙型肝炎患者进行HCVRNA、抗-HCV及AST、ALT检测。采用荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测标本中的HCVRNA,同时采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测抗-HCV,用全自动生化检测仪测定AST、ALT水平。分析分别在HCVRNA大于临界值组和HCVRNA小于临界值组的病人血清中转氨酶与其的关系。结果本研究的119例标本中有116例抗-HCV均为阳性,其中HCVRNA高于上限值（≥1000copies/mL）87例,二都有很好的相关性;共有70例存在ALT异常,73例存在AST异常,ALT、AST水平与HCVRNA含量对数值无显著相关性,但ALT、AST阳性率与HCVRNA大于临界值有一定的吻合关系。结论HCVRNA是反映HCV复制的可靠指标。结合AST、ALT结果可帮助临床了解HCV在体内的复制状况及肝脏的损伤情况。RT-PCR法检测HCVRNA具有非常好的临床应用价值。     

丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核酸含量与丙型肝炎病毒抗体和丙氨酸氨基转移酶的相关性

[目的]探讨丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核酸(HCV RNA)含量与丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)间的相关性.[方法]采用实时荧光定量PCR检测302例丙型肝炎患者血清中HCV RNA含量,同时采用ELISA法检测抗-HCV水平,利用全自动生物化学检测仪测定ALT水平.[结果]302例丙型肝炎患者血清标本中,抗-HCV均呈阳性,其中199份标本HCV RNA含量高于检测上限(103 U/mL),2种检测方法的符合率为65.9%.ALT异常率随HCV RNA含量的增高而升高,两者呈显著正相关(r=0.155,P<0.05);而ALT水平变化与HCV RNA含量无相关性(r=0.001,P>0.05).[结论]HCV RNA含量与抗-HCV水平是诊断HCV感染的重要指标,HCV RNA含量结合ALT水平测定可帮助临床了解HCV在体内复制的状况及肝脏损伤情况.     

丙型肝炎HCV RNA检测的临床意义

目的：探讨丙型肝炎病毒（HCV）RNA检测在HCV单独感染和HCV、乙型肝炎病毒（HBV）合并感染中的临床意义。方法：对135例HCV感染者检测抗-HCV、HCVRNA,并对其中的HCV、HBV合并感染（HBV＋HCV组,30例）和HBV单独感染患者（HBV组,50例）检测HBVDNA。结果：135例中,抗-HCV和HCVRNA同时阳性91例,抗-HCV阳性而HCVRNA阴性38例．抗-HCV阴性而HCVRNA阳性6例。肝硬化和肝癌组HCVRNA阳性率（80．0％）较慢性肝炎组（64．2％）升高（P〈0．05）。在HCV和HBV合并感染组,HCVRNA阳性率（50．0％）低于单纯HCV感染组（76．5％）,差异有统计学意义（P〈0．05）,HBVDNA阳性率（26．7％）低于单纯HBV感染组（76．0％）,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：在以HCVRNA为重要检测指标诊断HCV时,应联合检测分析抗-HCV、HBVDNA,这对HCV感染的临床诊治有重要的指导意义。     

116例血清中HCV RNA定量检测与抗-HCV结果对比分析

目的探讨丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)和HCVRNA定量检测阳性结果对丙型肝炎诊断治疗的临床意义。方法采用第三代ELISA夹心法检测抗-HCV，荧光定量PCR法检测HCVRNA检测116例血清抗-HCV或HCVRNA阳性标本。结果在116例标本中，抗-HCV( )／HCVRNA( )双阳性者83例，抗-HCV( )／HCVRNA(-)者12例，抗-HCV(-)／HCVRNA( )者21例)。两者阳性符合率为71．6％(83／116)。在HCVRNA定量阳性结果中，则有104例为HCV感染，其中抗-HCV的阳性检出率为80．0％(83／104)。随着血清HCVRNA滴度的增高，抗-HCV的阳性率也增加，两者变化趋势一致。结论抗-HCV检测，HCVRNA荧光定量PCR法检测均有一定的局限性，同时应用抗-HCV和HCVRNA检测对临床上完善HCV诊断、评价抗病毒疗效更为准确。     

外周单个核细胞感染对慢性丙肝患者的意义

目的 探讨外周单个核细胞（PBMC）的丙型肝炎病毒（HCV）感染在丙型肝炎中的作用。方法 采用套式聚合酶链反应（PCR）检测61例慢性丙肝患者血清及外周单个核细胞（PBMC）中HCV RNA。结果 血清HCV RNA阳性41例，PBMC中HCV RNA阳性36例（Х^2=23．835，P=0．000〈0．05）；但其中3例血清阴性患者PBMC中HCV RNA阳性。结论 PBMC可能是肝外HCV贮存和复制的另一场所，PBMC中HCV RNA存在不完全依赖于血清HCV RNA。     

荧光定量PCR在丙型肝炎病毒感染检测中的应用

目的　观察荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)在丙型肝炎病毒 (hepatitisCvirus ,HCV )感染检测中的临床应用情况。方法　用FQ PCR检测 3 15份怀疑HCV感染的临床血清标本 ,并同时采用酶联免疫吸附测定法 (ELISA)检测抗HCV ,用生化仪测定血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT)水平 ,了解样本中HCV RNA含量与抗HCV及ALT的相关性。结果　 3 15份标本中有 2 2 5份HCV RNA含量高于 80拷贝·ml-1,2 5 0份抗HCV阳性 ,14 5例ALT异常 ,HCV RNA含量与抗HCV阳性率间有显著的相关性 (r =0 .682 ,P =0 .0 0 2 ) ;HCV RNA含量与ALT异常率间也有显著的相关性 (r =0 .92 3 ,P =0 .0 3 2 )。结论　FQ PCR技术检测HCV RNA特异性强 ,灵敏度高 ,具有良好的临床应用价值。     

PCR法与ELISA法检测丙型肝炎病毒及乙型肝炎病毒比较5

目的：探讨PCR与ELISA2种方法检测丙型肝炎病毒和惭型肝炎病毒的差异和临床意义。方法：随机抽取无偿献血者标本300份，分为ALT升高组和ALT正常组，用ELISA法检测抗－HCV和HbsAg，用RT－PCR检测HCV－RNA和HBV－DNA。结果：抗－HCV阳性标本26例阳性率为8．7％，经RT－PCR检测，HCV－RNA均为阳性，抗HCV阴性的标本中有2例HCV－RNA为阳性。HCV－RNA的阳性率为16％，2种方法检测结果差异有统计学意义（P＜0．01）；300份标本中HBsAg阳性和HBV－DNA阳性比率分别为11．3％和12．7％，两者无明显差异（P＞0．05）。结论：ELISA方法检测丙型肝炎病毒存在一定的漏检现象，应用RT－PCR检测HCV－DNA利于早期诊断，也是筛选献血员是否携带丙型肝炎病毒的较可靠方法。     

实时荧光PCR定量检测丙型肝炎病毒核酸的临床价值

目的探讨实时荧光PCR定量检测丙型肝炎病毒核酸（HCV-RNA）的临床价值。方法采用实时荧光PCR技术对180例可疑丙型肝炎病毒（HCV）感染患者的血清行HCV-RNA定量检测,同时采用酶联免疫法检测抗-HCV含量,酶法检测ALT水平,分析HCV-RNA定量与后两者的相关性。结果180例患者中HCV-RNA阳性率为46．7％,抗-HCV阳性率为49．4％,ALT异常率为46．7％;HCV-RNA阳性患者中抗-HCV阳性率及ALT异常率与HCV-RNA阴性患者差异均有统计学意义（均P〈0．01）;HCV-RNA含量与抗．HCV滴度、ALT异常率及水平之间呈正相关。结论实时荧光PCR定量检测HCV-RNA的临床价值较大,结合抗．HCV及ALT柃测有利于提高丙型肝炎的诊断水平。     

Chronic HCV histology is predictable from HCV RNA and IgM anti HCV results

The aim of this study was to determine if knowledge of both the serum HCV RNA and serum anti core IgM antibody status enabled one to predict the histological severity in chronic hepatitis C. We studied 45 female patients with chronic hepatitis C infection. The presence or absence of IgM antibodies to HCV and HCV RNA by PCR in each patient's serum was determined. Liver biopsies performed were scored according to a modified Desmet's histological activity index. Negative HCV RNA patients had least histological change. HCV RNA positive patients who were also IgM antibody positive had lower scores than their IgM negative counterparts. The grade of histological severity is more accurately predictable from knowledge of both the HCV RNA and IgM anti HCV status of the patient.     

一滴血最易感染丙肝

1000人在看病的时候,遇到来自丙肝、艾滋病、乙肝患者的针孔一滴血,从感染几率来说,最可能患上的是什么病?肝病著名专家魏来教授认为,他们中的300人会感染丙肝,30人会感染艾滋病,3人会感染乙肝。前不久,全球最大规模的肝病学术大会上,作为我国"十五"攻关计划丙型肝炎项目的负责人,魏来教授呼吁,我国肝病防控要把重心慢慢转     

丙型肝炎病毒基因型与慢性丙型肝炎患者预后的相关性研究

目的 探讨丙型肝炎(HCV)病毒基因型与慢性HCV患者经抗病毒治疗实现持续病毒学应答(sustained virological response,SVR)之间的关系.方法 选取慢性HCV患者45例,根据治疗后患者是否实现SVR分为SVR组(n=14)和非SVR组(n=31).采用线性探针反向杂交法(INNO-LiPA)检测HCV基因型,两组患者经聚乙二醇干扰素(PEG-IFN)联合利巴韦林(RBV)治疗后检测SVR,分析HCV基因型与SVR之间的相关性.结果 非SVR组中HCV基因1型患者显著多于SVR组,差异具有统计学意义(P＜0.05);HCV基因型与PEG-IFN联合RBV治疗响应有显著相关性,HCV基因2、3型是与治疗反应相关的最强因素,且独立于其他变量之外,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 HCV基因型是慢性HCV感染患者经PEG-IFN联合RBV治疗预后的一个重要独立预测因素,可用于患者最佳抗病毒治疗方案的选择.     

应用荧光定量PCR检测血清中HCV RNA

目的 :探讨荧光定量PCR(FQ PCR)法检测血清中丙型肝炎病毒 (HCV)含量的敏感性、特异性。方法 :采用FQ PCR和逆转录巢式PCR同步检测 76份HCV抗体阳性血清标本 ,并对两种方法的检测结果进行对照比较。结果 :FQ PCR定量HCVRNA拷贝数在 10 2 ～10 6拷贝·μl-1,其中低于 10 3 拷贝·μl-1占 2 0 .93 % ,10 3 ～ 10 5拷贝·μl-1占 60 .47% ,高于 10 5拷贝·μl-1占 18.60 %。 76份HCV抗体阳性血清中 ,巢式PCR检测阳性为 45份 ,FQ PCR检测阳性为 43份 ,二者相对符合率为 97.3 7%。结论 :FQ PCR检测HCVRNA与常规定性巢式PCR特异性、敏感性基本一致。     

DAAs治疗HIV/HCV共感染患者HCV的疗效分析

目的 观察HIV/HCV共感染患者使用DAAs治疗HCV的疗效及安全性.方法 53例患者根据HCV基因分型结果 1 b、6 a亚型使用Sofosbuvir+Ledipasvir治疗, 3 a、3 b亚型及不能分型使用Sofosbuvir+Daclatasvir治疗, 诊断肝硬化患者均加用利巴韦林, 疗程均为12周.结果 53例患者均完成抗HCV治疗, 总体DAAs治疗SVR率98.1% (52/53) 失败率1.9% (1/53) ) , 无肝硬化患者DAAs治疗SVR率100% (41/41) , 肝硬化患者DAAs治疗SVR率91.7% (11/12) , 失败率8.3% (1/11) .DAAs治疗患者ALT、AST水平均较治疗前下降 (P<0.05) , 治疗后患者CD4水平较治疗前有所提高 (P<0.05) .主要不良反应有:消化道症状12例 (22.6%) , 恶心、呕吐6例 (11.3%) , 腹泻4例 (7.6%) , 轻度皮疹1例 (1.9%) , 血清总胆红素升高5例 (9.4%) .结论DAAs治疗HIV/HCV共感染患者HCV的总体SVR率高 (98.1%) , 适应症广泛肝硬化患者也可使用, 可有效改善患者肝功能及CD4水平.全口服、疗程短、安全性高, 毒副反应轻微、患者耐受性好.     

昆明地区HIV和HCV共感染者丙型肝炎病毒基因型特征

目的分析昆明地区人类免疫缺陷病（HIV）和丙型肝炎病毒（HCV）共感染者丙型肝炎病毒基因型分布。方法对204例经逆转录聚合酶链反应检测HCV病毒栽量,核酸为阳性的样品,利用反向点杂交技术进行HCV基因分型检测,其中60例经免疫印迹试验（WB）确认的HIV感染者,对共感染和非共感染组的丙型肝炎病毒基因型分布进行分析。结果204例HCV患者中3b型85例（HCV感染率最高,为41．6％）;1b型HCV感染在HIV／HCV共感染组中的感染率（30．0％）明显高于单纯HCV感染组感染率（20．0％）（P〈0．05）。而3b型HCV感染在HIV／HCV共感染组中的感染率（35．0％）明显低于单纯HCV感染组感染率（44．2％）（P〈0．05）。1b型,3a型和3b型HCV合并HIV感染的发生率较高;2a型和6a型HCV合并HIV感染的发生率较低。不同丙肝基因型HIV／HCV共感染者间感染途径以静脉药隐为主,其次是性接触。结论昆明地区共感染纽中的HCV流行的基因亚型有1b,3a,3b,6a共4种,1h为流行的主要基因亚型3a,3b和6a型均占相当比例,初步说明昆明地区HCV流行的基因亚型呈现多样性．     

南宁市102例HIV/HCV共感染者HCV基因型特征分析

目的了解南宁市静脉注射吸毒人群(IDUs)中HIV/HCV共感染者HCV基因亚型流行情况。方法收集2012—2014年间南宁市静脉注射吸毒人员HIV/HCV共感染者血浆样本总共108份,设计特异性引物,通过巢式PCR对HCV NS5B区域长339 bp的片段进行扩增并测序,构建系统进化树对HCV进行基因分型。结果 108份血浆样本中巢式PCR成功扩增基因片段102份,系统进化分析显示检出4种HCV基因型含6种基因亚型,各基因亚型所占样本比例为6a 34.31%(35/102)、3b 33.33%(34/102)、1a 20.59%(21/102)、1b 6.87%(7/102)、3a 3.92%(4/102)和2a 0.98%(1/102)。在不同人口学特征时102份样本HCV基因型组成差异无统计学意义(P0.05)。结论南宁市IDUs人群HIV/HCV共感染者中至少存在6种HCV基因亚型流行,6a、3b和1a为主要流行亚型。