耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因型及耐药谱研究

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus ，MRSA）常引起医院感染的暴发流行。MRSA由于获得了外源性甲氧西林耐药决定子A（methicillin resistance determinant A，mecA），该基因编码青霉素结合蛋白2a，造成对所有β内酰胺类药物耐药。mec基因存在于葡萄球菌盒式染色体（Staphylococcal cassene chromosome mec，SCCmec）中，SCCmec是一种新型的可移动元件，不同于噬菌体和转座子，而且该元件还携带除mecA基因外的其他抗生素耐药基因，造成多重耐药。     

前MRSA的检测及mec复合体分析

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin—resistant Staphylococcus aureus，MRSA）的mecA基因的表达受到多种因素的影响，rnecR1-mec I-mecA调控系统发挥重要的作用。具有完整的mecR1-mec I-mecA调控系统及mec启动子的菌株，     

甲氧西林耐药葡萄球菌SCCmec研究

目的明确甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）和溶血性葡萄球菌（MRSH）所包含的葡萄球菌染色体mec盒（staphylococcal cassette chromosome mec，SCC mec）类型，并比较两者的差异。方法分别收集本院住院患者临床标本中分离的60株MRSA和88株MRSH。共设计10对引物，采用PCR法分别扩增mec复合体和ccr复合体的各个特征序列，分析其SCCmec类型。结果60株MRSA均为Ⅲ型SCCmec；88株MRSH中7株为V型SCCmec，1株为Ⅲ型SCCmec，其余均为新的组合或是无法分型。结论SCCmec在MRSA和MRSH中分布特点差别较大，MRSH中可能存在较多新的型别。     

抗耐药革兰阳性菌药物研究进展

近年耐药革兰阳性菌感染有增多趋势,如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNs）感染,近期报道的个别耐万古霉素金黄色葡萄球菌（VISA或GISA）及异质性耐万古霉素葡萄球菌（vancomycin hetero—resistance staphylococci）、耐万古霉索肠球菌（VRE）及耐青霉素肺炎链球菌（PRSP）感染等,引起了医药界关注,本文将简要介绍近年研究开发的抗耐药革兰阳性菌药物,供临床参考。     

部分医院MRSA菌耐消毒剂qacA、qacA/B基因检测

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA）是医院感染的主要病原菌。因MRSA具有耐多药特征，已成为临床抗感染治疗的难题。为进一步了解国内部分地区MRSA菌中耐消毒剂基因家族的存在状况，我们对分离自常州、湖州、杭州、南昌4家医院131株MRSA进行了qacA、qacA／B基因检测。     

婴幼儿耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染状况和耐药基因的研究

目的了解感染婴幼儿的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）耐药性和耐药基因,明确检测青霉素结合蛋白2a（PBP2a）和甲氧西林耐药基因（mecA）的临床价值。方法用金黄色葡萄球菌乳胶凝集试验和梅里埃鉴定金黄色葡萄球菌,同时用纸片扩散法完成12种常用抗生素的药敏试验。对头孢西丁的结果,按当年CLSI标准执行,用于判断菌株甲氧西林的耐药性。采用PBP2检测试剂盒检测PBP2a蛋白,PCR检测mecA基因。结果 2007-2009年婴幼儿共检出245株金黄色葡萄球菌,其中MRSA检出率为17.6%（43/245）。MRSA对庆大霉素、复方新诺明、克林霉素、红霉素、氯霉素的耐药性均显著高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（P〈0.05）,其余抗生素的差异无统计学意义（P〉0.05）,43株MRSA的PBP2a蛋白和mecA基因的检测结果全为阳性,阳性率为100%。结论用头孢西丁（30μg）能有效地筛查MRSA,检测PBP2a蛋白和mecA基因均能正确地确认MRSA。且检测PBP2a蛋白方便快捷,特异性好,值得临床推广。     

多重PCR对金黄色葡萄球菌杀白细胞素基因的检测

目的应用多重PcR检测含Panton-Valentine杀白细胞素（PVL）基因的金黄色葡萄球菌。方法收集我院2005年1月至2006年1月从临床多种标本中分离的金黄色葡萄球菌，用多重PCR同时检测葡萄球菌16SrRNA基因、mecA基因和lukS/F-PV基因。多重PCR检测MRSA的SCCmec基因型及亚型。结果195株金黄色葡萄球菌经多重PCR检测，121株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA），74株为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA），共检测到26株金黄色葡萄球菌lukS/F-PV基因阳性，阳性率为13．3％（26，195）。其中19株为MRSA，阳性率为15．7％（19／121）；7株为MSSA，阳性率为12．2％（7／74）。19株lukS/F-PV基因阳性的MRSA的SCCmec基因型分别为SCCmec Ⅲ型10株、SCCmecⅢA型4株、SCCmecⅣ型4株及SCCmecⅠ型1株。26株lukS/F-PV基因阳性的分离株有11株分离自脓液或创面分泌物，10株分离自痰标本，3株分离自血液标本，2株分离自尿液。结论在温州地区分离的MRSA和MSSA中都能检测到Panton-Valentine杀白细胞素基因，含Panton-Valentine杀白细胞素基因MRSA的SCCmec基因型主要为SCCmec Ⅲ，含PVL基因的金黄色葡萄球菌主要引起化脓性感染和肺部感染。     

在MRSA中鉴定出变异型SCCmec遗传元件

近年来，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin resistant Staphylococcus aureus，MRSA）所致感染的发生率无论在医院内或社区中都有很快的上升，给临床治疗带来极大的困难。我们应用PCR及多重引物PCR技术、脉冲场凝胶电泳分析和多位点序列分型（muhilocus sequencing typing，MIST）对8株临床分离的MRSA菌株进行SCCmec及ccr基因的分子分型，分析并了解本地区MRSA的主要型别特点及其遗传背景。     

MRSA mecI基因和mec启动子的多态性研究

目的 本研究的目的在于也解上海地区分离耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MESA）中mecI基因和mec启动子的多态性分布状况。方法 收集上海地区分离的金黄色葡萄球菌143株，用头孢西丁纸片扩散试验、苯唑西林MIC（最小抑菌浓度）测定和mecA基因检测等方法进行MRSA的筛选，RAPD法进行细菌的同源性分析，最后通过PCR和序列分析技术研究分布状况。结果 头孢西丁筛选试验、苯唑西林MIC试验与mec4基因PCR扩增相比有100％的一致性，均证实这些菌株为MRSA，RAPD法证实这些菌株分为4个型，在21株菌中有20株有mecI基因，所有的菌株有mec启动区，所有MESA都有mecI或mec启动子的改变，其中mecI的改变有mecI缺失、mecI43位碱基G→T和mecI202位碱基C→T。mec启动子的改变有G→T和C→A。结论 mecI或mec启动子突变在临床分离的MRSA中普遍存在，上海地区MBSA以mecl 202位碱基突变最常见。     

40株MRSA菌消毒剂及抗菌药物耐药基因研究

近年国外学者从金黄色葡萄球菌中检出耐消毒剂的菌株。为了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)的耐消毒剂和抗菌药物耐药基因状况 ,我们收集了 2 0 0 3年 12月～ 2 0 0 4年 5月苏州大学医学院附属第三医院分离到的 2 0株MRSA菌和解放军 98医院分离到的 2 0株MRSA菌 ,共 4 0株。对其进行了耐消毒剂基因 (qacA)和 β内酰胺类耐药相关基因 (mecA、TEM)、氨基糖苷类耐药相关基因 [aac(6′) /aph(2″)、aph(3′) Ⅲ、ant(3″) Ⅰ、ant(2″) Ⅰ、ant(6 ) Ⅰ ]、四环素耐药相关基因 (tetM)、红霉素耐药相关基因 (erm )、万古霉素耐药相…     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子生物学研究进展

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA)不仅对所有β-内酰胺类抗生素具有内在耐药性，而且通过获得其它耐药基因而呈现对多数其它类抗菌药的多重耐药性，给临床治疗带来严重问题。本从分子生物学水平就MRSA耐药决定因子(mec)与辅助基因(fem)在耐药性产生中的作用作一简要综述。     

检测耐甲氧西林葡萄球菌及其耐药性分析

为了解我院耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的感染情况及其耐药性,为临床治疗MRS感染提供实验室依据和有效的用药措施．用微生物鉴定仪检测了142株葡萄球菌对13种抗生素的MIC,对苯唑青霉素MIC＞2ug／ml的菌株,采用K－B纸片法,补充检测对苯唑青毒素纸片的耐药性,共筛选出80株MPS,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）20株,耐甲氧西林表皮葡萄球菌（MRSE）33株,其它耐甲氧西林葡萄球菌27株,说明感染我院的MRS种类不断增加,应引起重视．药散结果表明MRS对万古霉素（Van）100％敏感,对其他抗生素的敏感性明显低于对甲氧西林敏感的葡萄球菌（MSS）,因此,临床上应区分MRS与MSS,选择性地用药．     

ICU中MRSA耐药基因检测及其PFGE分型

目的对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）菌株进行分子分型,探讨ICU中MRSA医院感染的特点和流行规律。方法采用表型筛选和PCR扩增mecA基因方法鉴定MRSA菌株。脉冲场凝胶电泳方法（PFGE）进行分子分型。结果12株金黄色葡萄球菌表型筛选为MRSA,MRSA产生A型、B型、C型和D型4种耐药表型,优势耐药模式是A型（75．0％）,MRSA对苯唑西林、阿莫西林／克拉维酸和氨苄西林／舒巴坦等10种抗生素产生100％耐药性,11株MRSA携带mecA基因,携带率为91．7％,PFGE指纹图谱分两型,分别为R1型和R2型,11株MRSA为R1型（91．7％）,R1型各株间相似度为100％。结论ICU可存在MRSA爆发流行,MRSA产生多重耐药性（MDR）,MRSA携带mecA基因可表现为MDR,PFGE分型是理想的分子流行病学溯源手段。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型及药敏分析

目的 研究临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的SCCmec基因型及亚型并对其耐药性进行分析,为临床治疗和流行病学研究提供依据.方法 应用PCR法检测50株MRSAmeeA基因和SCCmec的基因型及亚型.用纸片扩散法进行药敏试验.结果 50株MESA mecA基因均为阳性.45株为SCCmecⅡ型,3株为SCCmecⅢA型,2株为SCCmec Ⅱ型.未见SCCmee Ⅰ和SCCmecⅣ型.携带SCCmecⅡ、SCCmecⅢ或SCCmecⅢA的菌株均为多重耐药株.结论 50株MESA为多重耐药菌株,以SCCmecⅢ型为主.     

耐甲氧西林金黄葡萄球菌的分子分型研究

耐甲氧西林金黄葡萄球菌(MRSA)是临床重要的致病菌之一,对除万古霉素外的几乎所有临床常用抗生素耐药,为临床治疗的难点.目前,葡萄球菌染色体mec盒分型(SCCmec)、脉冲场凝胶电泳分型(PFGE)、多位点测序分型(MLST)是常用的分型方法.     

金黄色葡萄球菌毒力基因检测及分子分型研究

目的：研究湖北省黄州区人民医院于2011—2013年分离的488株金黄色葡萄球菌的分子生物学特征及毒力基因分布情况。方法采用琼脂稀释法测定苯唑西林和头孢西丁对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度（ minimum inhibitory concentration ,MIC）, PCR方法进行SCCmec分型（ staphy-lococcal cassette chromosome mec）和多位点序列分析（multilocus-sequence typing, MLST）,多重PCR方法检测31个常见的毒力基因。结果488株金黄色葡萄球菌中共检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）227株,检出率为46．5％,227株MRSA 中 SCCmecⅢ型居多,占81．5％;其次为Ⅳ型,占10．1％。 MRSA菌株中,主要的克隆型为CC（clonal complex）8,占81．1％,其次为CC59和CC5,分别占4．8％和3．1％,261株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）中,主要克隆型为CC1,占34．1％,其次为CC398、CC121和CC59,分别占21．8％、14．9％和13．0％。109株MSSA（48．2％）同时携带≥15个毒力基因,明显高于MRSA菌株（28．2％,P＝0．002）,肠毒素基因（sed、sej和ser）的分布与CC8和CC5密切相关,表皮剥脱素基因（ eta, etb）和lukED基因仅在CC1中检测到,与其他CCs相比,CC1和CC59克隆中pvl基因检出率更高（P＜0．05）。结论本地区MRSA的流行率为46．5％,与全国平均水平基本一致,MRSA菌株主要流行克隆为ST239-MRSA-SCCmecⅢ型,占79．3％,医疗卫生部门应采取有效措施控制MRSA的传播。 MSSA菌株毒力基因检出率明显高于MRSA,并且不同的CCs克隆呈现不同的毒力基因谱,表明毒力基因的携带与遗传背景有关。     

医院和社区获得性金黄色葡萄球菌耐药性情况调查

目的了解临床分离的社区获得性和医院获得性金黄色葡萄球菌的耐药情况,为进一步指导临床治疗。更好地控制MRSA引起的感染提供依据。方法采用K-B纸片扩散法检测金黄色葡萄球菌对不同种类抗生素的敏感性。结果医院获得性甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（HA-MSSA）对头孢唑啉、庆大霉素和左氧氟沙星的耐药率显著高于社区获得性甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（CA-MSSA）（P〈0．05）;医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（HA—MRSA）对头孢唑啉、红霉素、克林霉素、四环素、庆大霉素、左氧氟沙星和利福平的耐药率显著高于CA-MSSA和HA—MSSA（P〈0．05）;HA—MRSA多重耐药菌株所占的比率为90．4％,显著高于CA—MSSA的20．0％和HA—MSSA的37．4％,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论医院获得性金黄色葡萄球菌耐药情况较严重．CA—MSSA和HA—MSSA药物敏感性明显高HA—MRSA,HA-MRSA呈现多重耐药性。     

一起耐甲氧西林金黄色葡萄球菌医院感染的调查

目的分析一起耐甲氧西林金黄色葡萄球菌医院感染的危险因素,探索有效的控制措施。方法查看病房环境、回归性病例分析,利用PFGE方法对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）菌株进行同源性分析。结果2007年6～7月MRSA感染9例,罹患率为15%;病房分布有聚集性;9份菌株药敏结果基本相同;5份菌株具有高度同源性;主要的危险因素有抗菌素的频繁使用、大面积的烧伤、与感染者同房、换床、陪护和探视等。结论合理使用抗生素,尽量减少侵袭性操作、严格隔离MRSA感染者、严格控制人员尤其探视人员进入、加强医护人员的手部卫生、加强器械及环境消毒、及时采样送检是预防和控制MRSA感染的关键。     

耐甲氧西林葡萄球菌的耐药状况分析

目的 分析耐甲氧西林葡萄球菌的耐药状况,了解葡萄球菌耐药的流行病学特征.方法 对251株临床分离的葡萄球菌进行耐药性检测,分析其药敏试验结果.结果 251株葡萄球菌中,金黄色葡萄球菌162株,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA) 62株,阳性率为38.3%;凝固酶阴性葡萄球菌89株,其中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(methicillin-resistant coagulase negative Staphylococcus,MRCNS) 63株,阳性率为70.8%;所有菌株对万古霉素均敏感.结论 耐甲氧西林葡萄球菌对抗生素的耐药状况较为严重;未分离出万古霉素耐药株.     

苏州地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的临床分布特点及耐药性分析

目的 探讨苏州高新区人民医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床分布特点及其耐药性,为临床治疗葡萄球菌属感染提供正确选药依据.方法 对2015年1月至2017年8月苏州高新区人民医院临床各科送检的各类标本中分离鉴定出的MRSA,采用MIC法进行药敏试验,并探讨其临床分布与耐药特点.结果 分离出的170株金黄色葡萄球菌中,MRSA有40株,占23.5%,以呼吸科病房为最多(20株),占50.0%、其次是重症监护病房(ICU)、儿科、神经内科;多重耐药的MRSA对所有β-内酰胺类高度耐药,对大环内酯类耐药率为67.5%;对克林霉素类耐药性较高,其中红霉素诱导的克林霉素耐药率为47.5%,提示该药在苏州地区已不能够用于MRSA 感染的治疗.对氨基糖苷类、氟喹诺酮类耐药率较低(耐药率<30%),磺胺甲噁唑、甲氧苄啶及利福平具有良好的活性,尚未发现耐糖肽类和利萘唑胺的菌株.结论苏州地区近3年来MRSA菌株检出率较低;对常用抗菌素呈多重耐药,尤其是对大环内酯-克林霉素抗菌药物耐药率高.因此应加强对MRSA耐药率的监测,合理选抗菌药物,从而减少MRSA 的产生和传播.