早期自然流产胚胎染色体数目异常行荧光原位杂交技术检测的研究

目的针对早期自然流产患者,研究分析荧光原位杂交技术对其胚胎染色体数目异常检测的效果分析。方法在我院的早期自然流产患者中抽取60例为研究对象,用荧光原位杂交技术(FISH)对患者胚胎绒毛的5条染色体:13、18、21和X、Y染色体进行快速检测。结果采用FISH检测,所有结果与常规染色体核型分析一致,检测率为100%,患者中出现染色体异常25例,占患者总数的41.7%。结论FISH检测技术用于早期自然流产胚胎染色体数目异常的检测具有方法简单、过程迅速等优点,有助于提高诊断的成功率。     

用荧光原位杂交检测人精子染色体非整倍体方法的建立

用荧光原位杂交检测人精子染色体非整倍体方法的建立郑履康邓丽霞张桥本课题由国家自然科学基金３９４７０６０８与中华医学基金（ＣＭＢ）资助中山医科大学遗传毒理研究室（广州５１００８９）已知非整倍体与流产、畸形及肿瘤的发生均有关系。为此，我们在国外研究基础上...     

荧光原位杂交技术在检测自然流产组织染色体数目异常中的价值和意义

目的探讨荧光原位杂交技术在对自然流产绒毛组织中的染色体异常的检出价值。方法选取2014年1月至2017年12月在我院自然流产检查的240例绒毛组织,采用荧光原位杂交技术对这些绒毛组织的13、16、18、21、22号和X、Y染色体数目进行检测,并根据孕妇的年龄、是否反复流产比较不同类型孕妇之间染色体异常的差异。结果在240例自然流产的绒毛组织中,检出染色体异常共计110例,异常率为45.83%,其中13-三体共计7例、16-三体共计27例、18-三体共计4例、21-三体共计8例、21单体共计4例、22-三体共计14例、X单体共计24例、三倍体共计8例、四倍体共计9例和5例其他异常。在高龄妊娠和非高龄妊娠孕妇中,异常率比较无差异(P>0.05);在反复流产与非反复流产孕妇中,其异常率比较无差异(P>0.05)。结论荧光原位杂交技术在对由染色体异常导致的自然流产的检测中,具有准确度高、操作简便等特点,能为快速诊断自然流产的病因提供准确的理论依据。     

应用荧光原位杂交技术对性染色体异常进行诊断

目的　评价荧光原位杂交技术 (FISH)在染色体异常核型分析中的应用价值。方法　应用 X着丝粒探针、Y染色体区域特异性探针 (PY3.4)对 8例外生殖器及第二性征发育不全、原 (继 )发闭经、无精子等病因前来就诊的患者及 2例正常男、女外周血进行 G显带分析及荧光原位杂交 ,杂交后用 Olympus BX6 0荧光显微镜观察玻片并照相。结果　 FISH结果与原 G显带核型一致 ,8例患者中 1例核型为 45 ,X0 ;1例为 46 ,XX/ 45 ,X0 ;1例为 45 ,X0 / 47,XXX;1例为 46 ,Xi(Xq) ;1例为 45 ,X0 / 46 ,Xi(Xq) ,诊断为先天性卵巢发育不全 ;2例核型为 47,XXY,诊断为先天性睾丸发育不全 ;1例生殖器为男性的患者核型为 46 ,XX,诊断为性反转。结论　 FISH技术可用于染色体异常的分析 ,能分析一些显带技术不易分辨的异常。由于 FISH技术在间期细胞中显示杂交信号 ,在极短的时间内可检测大量细胞 ,对于一些中期分裂相有限、分散不好的染色体以及那些不易发现的嵌合体等方面 ,有重要的应用价值。     

多重荧光原位杂交检测多发性骨髓瘤复杂核型异常

目的探讨多重荧光原位杂交（M-FISH）技术在多发性骨髓瘤（MM）复杂核型异常（CCAs）检测中的价值。方法对5例常规R显带具有CCAs的MM患者应用MFISH确定复杂染色体的重排及标记染色体的组成。结粜明确了常规核型（CC）分析中的所有异常,共检出20种结构异常,其中缺失2种,易位18种,均为不平衡易位。最常累及的为14号染色体、1q的不平衡易位及6号染色体。结论对伴有CCAs的MM患者,M-FISH技术可以明确CC分析中复杂染色体异常,并发现和纠正CC分析中漏检及误检的异常,为MM的染色体异常研究提供了一种理想的方法。     

荧光原位杂交技术检测急性淋巴细胞白血病异常17、18、21染色体

利用荧光原位杂交技术(FISH)及染色体G分带技术检测了38例初治急性淋巴细胞白血病及10例非肿瘤患者(对照组)的17、18和21号染色体,结果表明,大部分ALL患者存在异常三倍17、18和21号染色体,并发现FISH技术较染色体分带技术更为灵敏可靠。这些异常多倍染色体的存在同ALL患者外周血白细胞数、骨髓中原幼淋巴细胞数及免疫表型无直接关系。     

无培养羊水细胞染色体荧光原位杂交法初探

荧光原位杂交法 (ＦＩＳＨ)是一种快速、准确的染色体测定方法。为了引进ＦＩＳＨ技术用于产前诊断 ,我们抽取了中期妊娠引产妇女的羊水标本 ,用ＦＩＳＨ法对无培养羊水细胞间期的性染色体进行了检测。材料与方法一、标本来源 :16例中期妊娠引产病例 ,年龄 19～ 30岁 ,平均年龄 2 5岁。孕周 17～ 31周 ,平均 2 2孕周。全部病例无心、肝、肺、肾及内分泌疾病史 ,采用雷凡诺尔羊膜腔内注射引产术 ,在注入雷凡诺尔前先抽取羊水 ,若抽出羊水为血性或黄绿色 (胎粪污染 ) ,则此病例被排除。 16例全部抽取羊水 5ｍｌ,色澄清淡黄色 ,送实验室处理。…     

双色荧光原位杂交法检测锰作业工人精子染色体非整倍体率

目的探讨锰对精子性染色体数目畸变的影响。方法用X、Y染色体特异DNA探针与锰作业男工精子行双色荧光原位杂交,同时测定X和Y精子染色体非整倍体率。结果对6位锰作业工人共计数13203条精子与6位正常对照组工人共计数13032条精子进行比较,结果显示接触组精子X双体率、Y双体率、Xy双体率及总双体率均高于对照组（P〈0.05）。结论锰作业工人精子性染色体非整倍体率增加。     

荧光原位杂交技术的研究进展和应用

荧光原位杂交是现代分子生物学及基因工程中广泛应用的新技术,它可以鉴定核酸分子之间的同源性。荧光原位杂交技术(FISH)是在核酸分子杂交基础上发展起来的一门技术,染色体荧光原位杂交技术是随着绘制高分辨人类基因组图谱需求而出现的,FISH最初用于中期染色体,通过测定FISH所获得荧光信号相对于染色体短臂末端的位置来进行作图。此后FISH技术发展用于未克隆基因和遗传标记以及染色体畸形的研究,随着技术的不断改进,FISH技术还广泛用于基因定性、定量方面的研究。本文综述了染色体荧光原位杂交技术的原理、及其在相关领域的发展和应用前景。     

改良荧光原位杂交技术在产前诊断中的应用

目的探讨改良荧光原位杂交(FISH)技术快速产前诊断染色体异常的应用价值。方法改变FISH操作过程中杂交液用量,对258例孕妇羊水细胞进行FISH快速产前诊断和常规细胞培养核型分析。结果 258例羊水样本常规细胞培养结果与FISH检测常见的染色体数目与核型分析的结果符合率为100%。结论优化FISH技术能快速、准确检测常见的5种染色体数目异常,使用试剂量少、价廉,可作为经典染色体核型分析的辅助方法。     

荧光原位杂交技术在多发性骨髓瘤中的应用

目的 了解多发性骨髓瘤常见染色体异常情况,探讨其与临床分期及免疫学分型的关系。方法 对39例多发性骨髓瘤初诊患者进行1q21、RBl、D13S319、p53及IGH5种基因探针荧光原位杂交检测1q21扩增、13q14缺失、p53缺失以及IGH基因重排的发生率,统计分析染色体异常情况与临床分期及免疫学分型的关系。结果 1q21、RBl、D13S319、p53及IGH探针的阳性阈值分别为:7.2%、8.7%、7.9%、7.2%和9.8%。39例患者中,1q21扩增24例(61.5%);13q14缺失18例(46.2%),其中同时检出D13S319和RBl缺失15例;p53缺失8例(20.5%);IGH基因重排13例(33.3%)。除IGH重排与D-S分期之间(r=0.434,P=0.007)、p53缺失与IIS分期之间(r=-0.448,P=0.006)和D13S319缺失与免疫学分型之间(r=-0.335,P=0.040)呈显著相关性外,其余染色体异常与临床分期和免疫学分型均无相关性。结论 1q21扩增、13q14缺失、p53基因缺失及IGH重排是多发性骨髓瘤常见的核型异常,FISH检测技术有助于探索染色体异常与多发性骨髓瘤发展及预后的关系。     

荧光原位杂交检测宫颈细胞hTERC基因扩增及其临床意义

目的探讨端粒酶基因(hTERC)扩增与宫颈上皮内肿瘤(CIN)和宫颈癌发生发展的关系及临床意义。方法应用荧光原位杂交技术检测100例存在宫颈病变患者的宫颈脱落细胞中hTERC基因的扩增情况。结果 100例各类宫颈细胞病变中,hTERC基因扩增比例分别为:CIN1组13.3%(4/30),CIN2组71.0%(22/31),CIN3组和宫颈癌组均为100%(19/19,20/20),各组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论宫颈CIN和宫颈癌细胞hTERC基因均有扩增,且扩增率随病变的进展而增加;高级别CIN和癌的扩增率明显高于低级别CIN;检测hTERC基因扩增可以作为宫颈CIN和宫颈癌筛查及预后评估的重要指标。     

荧光原位杂交技术在绒膜绒毛间期细胞诊断中的应用

目的　探讨荧光原位杂交 (FISH)技术在绒毛间期细胞染色体分析中的应用价值。方法　应用地高辛标记的探针 p Y3.4以及生物素标记的探针 2 1q2 2 .3,对 10例流产绒毛进行荧光原位杂交 ,以绒毛染色体直接制备分析验证杂交结果。结果　 FISH杂交结果与绒毛染色体分析结果一致 ,诊断率达 95 %以上。结论　 FISH技术是一种非常有效的可用于产前诊断间期细胞染色体分析的手段     

骨髓增生异常综合征8三体频率的间期荧光原位杂交研究

目的应用间期荧光原位杂交(FISH)技术检测骨髓增生异常综合征(MDS)患者8号染色体三体(8三体)的发生率.方法采用荧光素SpectrumRed直接标记8号染色体着丝粒DNA探针,对66例MDS患者(病例具有连续性)和10例正常人的骨髓细胞进行间期FISH检测,并与常规细胞遗传学(CC)结果相比较.结果66例MDS患者中,间期FISH检测23例(34.8%)为阳性,而CC检测只发现其中15例为阳性.结论间期FISH在检测MDS患者8三体方面十分有用,是CC的一个重要补充.     

荧光原位分子杂交技术检测乳腺癌组织中HER-2基因的表达

目的荧光原位杂交(FISH)方法检测乳腺癌组织中人表皮生长因子2(HER-2)的扩增情况,并与免疫组化(IHC)结果相比较,优化乳腺癌HER-2检测方法。方法采用相关质控措施,利用FISH法及IHC法检测乳腺癌HER-2的表达,分析相关性。结果 FISH检测Her-2基因扩增40例,阳性率30.5%(40/131),在IHC(-)标本中,Her-2基因未扩增19例,阴性符合率为95.0%;在IHC(+)标本中,Her-2基因扩增7例,阳性符合率为20.0%;在IHC(++)标本中,Her-2基因扩增15例,阳性符合率26.8%;在IHC(+++)标本中,Her-2基因扩增17例,阳性符合率89.5%。结论 FISH检测准确率较高,IHC阴性和(+++)时与FISH结果一致性较好,可作为治疗依据,IHC(+)和(++)时仅能作初步筛查,明确Her-2情况仍需结合FISH检测。     

应用荧光原位杂交对相互易位携带者进行植入前遗传学诊断

目的建立荧光原位杂交技术对平衡易位携带者的胚胎进行植入前遗传学诊断(FISH-PGD)。方法对1例因男方为t(1q42;4q21)易位携带而妊娠过染色体异常胎儿的不孕夫妇,经激素超促排卵和卵胞浆内单精子注射(ICSI)进行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)。于受精后第3天进行胚胎活检及FISH分析,选择FISH结果为正常或平衡易位的囊胚予以冷冻,择期解冻移植。结果活检11个胚胎,均得到FISH结果。其中,对位(正常或平衡易位)胚胎2个(18.18%),邻位-1胚胎5个(45.45%),邻位-2胚胎为0,3∶1分离胚胎3个(27.27%),紊乱型胚胎1个(9.09%)。FISH诊断为正常或平衡易位的2个胚胎发育至第5天,1个形成囊胚冷冻备用移植,1个胚胎退化放弃冷冻。结论建立的FISH-PGD能够有效的选择正常或平衡易位的可移植胚胎,对解决相互易位携带者的生育障碍有重要价值。     

石蜡切片荧光原位杂交检测弥漫性大B细胞淋巴瘤BCL6基因异常

目的 建立石蜡包埋的淋巴瘤组织切片荧光原位杂交(FISH)技术平台,探讨其在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)诊断中的价值.方法 应用家用高压锅和水浴变性法在淋巴瘤石蜡切片上行FISH分析,BCL6双色断裂点分离探针FISH检测58例石蜡包埋DLBCL病例中BCL6基因易位和扩增.结果 通过优化实验条件,成功地建立了淋...     

间期荧光原位杂交技术检测慢性淋巴细胞白血病13q14缺失

目的探讨慢性淋巴细胞白血病（CLL）中13q14缺失[del（13q14）]情况。方法运用Spectrum Orange^TM标记的位于13q14的序列特异性DNA探针D13S319和间期荧光原位杂交（I—FISH）技术对83例初发的B细胞CLL（B-CLL）患者的细胞进行染色体13q14的检测。结果83例B-CLL中35例（42．2％）有del（13q14）,其阳性细胞率为22．0％～95．0%,其中6例（7．2％）纯合缺失。del（13q14）在不同Binet分期中分别为A期27／63（42．9％）、B期7／15（46．7％）、C期1／5（20．ooA）,各期之间无显著性差异（P〉0．05）。结论I-FISH是一种在分析CLL患者del（13q14）异常方面较为快速、准确和敏感的方法。del（13q14）在判断B-CLL预后方面的意义有待进一步探讨。     

内窥镜辅助单鼻孔直接蝶窦入路垂体瘤切除术

目的探讨经鼻内窥镜辅助下直接蝶窦入路显微外科垂体瘤切除术的可行性和优越性。方法回顾性分析126例经鼻内窥镜辅助下直接蝶窦入路显微外科垂体瘤切除手术。结果经鼻内窥镜辅助下直接蝶窦入路患者中有80例完全切除肿瘤组织。术后无脑脊液鼻漏和颅内感染,出现-过性尿崩症60例,经治疗后两周均治愈。结论内窥镜辅助下直接蝶窦入路垂体瘤显微切除术是一种安全有效、微创的方法。     

单鼻孔经蝶入路垂体瘤的显微手术治疗

目的 探讨单鼻孔经蝶人路显微手术切除垂体瘤的临床应用及手术技巧.方法 对21例垂体瘤采用经单鼻孔-蝶窦入路显微手术患者的临床资料及手术效果进行回顾性分析.结果 肿瘤全切除14例,次全切5例,2例部分切除;13例功能性垂体瘤术后内分泌功能恢复正常或好转,12例术前有视野缺损的术后均有不同程度改善,15例术后有尿崩症状,经治疗后恢复正常.结论 单鼻孔经蝶窦入路垂体瘤的显微手术治疗创伤小,恢复快,疗效满意,是治疗垂体腺瘤安全有效的方法.