HPLC-MS/MS法测定人血浆中奥昔布宁和去乙基奥昔布宁的质量浓度

目的 建立HPLC-MS/MS法测定人血浆中奥昔布宁和去乙基奥昔布宁的质量浓度.方法 选用Waters-Atlantis dC18色谱柱,以0.01％甲酸溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,采用正离子多反应监测方式测定样品质量浓度.用于定量分析的离子对分别为m／z358.2→142.2(奥昔布宁),m/z330.2→96.2(去乙基奥昔布宁),m/z268.2→152.2(奥昔布宁D10),m/z 335.2→101.2(去乙基奥昔布宁D5).结果 血浆样品中,奥昔布宁在0.05～25 ng·mL-1线性关系良好(r=0.996 5),最低定量浓度为0.05 ng·mL-1;去乙基奥昔布宁在0.05～25 ng·mL-1线性关系良好(r=0.998 5),最低定量浓度为0.05 ng· mL-1.两者日内与日间RSD均＜15％,提取回收率＞75％,且稳定性均较好.结论 本方法简便快速、灵敏准确、特异性强,适用于奥昔布宁和去乙基奥昔布宁的体内药物动力学研究.     

高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中奥昔布宁的浓度

目的 建立一种用高效液相色谱-电喷雾离子化质谱联用技术测定奥昔布宁血药浓度的方法。方法 以0．0lmol／L乙酸铵水溶液-甲醇(15：85)为流动相，盐酸非洛普为内标，血浆样品经用环己烷萃取后上样，经C18柱分离后，以质谱为检测器，采用选择性离子检测(SIM)测定人体血浆中奥昔布宁的浓度。结果 线性范围0．2～50ng／mL(r=0．9948)，平均相对回收率在90％～110％之间，日内和日间精密度的RSD均小于10％，奥昔布宁的定量限为0．2ng／mL，提取回收率大于90％。结论 该方法快速、准确、灵敏，可用于奥昔布宁的药代动力学研究。     

大鼠血浆中人参皂苷化合物K的UPLC-MS/MS法测定

建立了超高效液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中的人参皂苷化合物K.采用BEH C18色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱,以乙酸泼尼松龙为内标,负离子电喷雾离子化,多反应监测,药物和内标的监测离子对为m/z 667→161和m/z 447→329.人参皂苷化合物K在2～2 000 ng/ml浓度范围内线性关系良好,日内及日间RSD均小于10%.     

HPLC法测定盐酸奥昔布宁片的含量

目的:建立HPLC法测定盐酸奥昔布宁片中盐酸奥昔布宁的含量.方法:采用KromasilC18色谱柱,甲醇-磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾1.94g与磷酸氢二钾2.48g,加水1000ml使溶解,用1m0l/L磷酸溶液调节pH值为6.8)(85:15)为流动相,检测波长为220nm.结果:测得线性范围0.025～0.2mg/ml(γ=1.0000),平均回收率为99.70%,RSD为0.3%(n=5).结论:方法简便、快速、准确,可用于测定盐酸奥昔布宁片的含量.     

UPLC-MS/MS法测定小鼠血浆及脑组织中马钱子碱浓度

目的建立小鼠血浆及脑组织中马钱子碱浓度的UPLC-MS/MS测定方法 ,用于小鼠马钱子碱药动学研究。方法色谱柱为Acquity UPLC BEHC18柱（2.1mm×50mm,1.7μm）。流动相为水（含0.1%甲酸）-甲醇（75：25,v/v）,流速0.25mL.min-1,柱温40℃。吗氯贝胺为内标,采用ESI＋模式,多重反应选择离子检测,马钱子碱m/z395→324,吗氯贝胺m/z269→182。样品处理采用液液萃取。结果马钱子碱在小鼠血浆中线性范围为5.016～5016ng.mL-1,脑组织中线性范围为3.009～725.4ng.g-1,日内精密度（RSD）均〈8.5%,日间精密度（RSD）均〈11.2%,方法回收率范围血浆中为91.7%～112.9%,脑组织中为95.6%～107.2%。结论本方法简单、灵敏、准确,适用于小鼠体内马钱子碱浓度测定及药动力学研究。     

UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中布洛芬的浓度

目的：建立超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）法测定大鼠血浆中布洛芬的浓度。方法：色谱条件为：色谱柱Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18（2.1 mm×50 mm,5 μm）,流动相A为 0.01%甲酸-0.05%甲酸铵水溶液,流动相B为乙腈,流速0.3 mL·min-1,柱温40 ℃,进样量5 μL。质谱条件为：电喷雾负离子多反应监测模式,雾化器压力：40 psi,干燥气流速：6.0 mL·min-1,干燥气温度：150 ℃,鞘气流速：10.0 mL·min-1,鞘气温度：175 ℃,气体为高纯氮气,离子源电压为3 800 V。结果：布洛芬在20.477 1～2 047.71 ng·mL-1浓度范围内线性关系良好,平均回收率为115%。结论：本法快速、简便、专属性好、灵敏度高,可以为布洛芬的质量标准研究提供理论依据。     

大鼠经皮给药血浆中多奈哌齐浓度的UPLC-MS/MS法测定

建立了超高效液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中的多奈哌齐.以氯雷他定为内标,液-液萃取处理血浆样品,采用ESI源正离子模式、多反应监测进行定量分析.监测离子对为m/z 380.3→m/z 243.2(多奈哌齐)和m/z 383.1→m/z337.1(氯雷他定).多奈哌齐在0.5～200 ng/ml范围内线性关系良好,方法回收率为94.1％～106.8％,日内、日间RSD均小于10％.     

UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中的豆腐果苷

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定大鼠血浆中的豆腐果苷.方法 蛋白沉淀法分离血浆样品;采用BEH C18色谱柱,0.1％甲酸-乙腈-水为流动相,梯度洗脱,离子化方式为负离子电喷雾,多反应监测,药物的监测离子对为m/z329→121.结果 豆腐果苷浓度在2～1000 ng/mL范围内线性关系良好,日内及日间精密度均小于15％,基质效应小于15％.结论本研究建立的方法 可应用于豆腐果苷药动学和生物利用度研究.     

UPLC-MS/MS法测定人血浆中丙硫氧嘧啶的含量

目的 建立UPLC-MS/MS法测定人血浆中丙硫氧嘧啶的含量,为临床治疗药物监测（TDM）和生物等效性试验（BE）提供方法学基础。方法 采用Agilent SB-C₁₈柱（4.6 mm×150 mm,5 μm）,流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液（80∶20,V/V）,等度洗脱。质谱采用AJS-ESI源,多反应监测（MRM）正离子模式,检测离子对为：丙硫氧嘧啶m/z 171.1→112.1、内标（丙硫氧嘧啶-D5）m/z 176.1→117.0。结果 血浆中丙硫氧嘧啶在10~5 000 ng/ml范围内线性关系良好,r=0.999 3;批内和批间的精密度和准确度良好（RSD<10%,RE<±10%）;不同浓度的基质效应均<110%,变异系数<5%;不同浓度的平均回收率为101.60%~113.56%,符合方法学要求。结论 该方法快速简便、灵敏准确,适用于血浆中丙硫氧嘧啶的含量测定。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中替诺福韦的浓度

目的:建立大鼠血浆中替诺福韦浓度的测定方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法。取6只大鼠单次灌胃给予富马酸替诺福韦酯100mg.kg-1,检测给药45min后血浆中药物浓度,以恩替卡韦为内标,选用阳离子固相萃取柱除去血浆中的蛋白质。色谱柱为AcquitybenUPLC-C18,流动相为0.2%甲酸水溶液(含40mmo.lL-1醋酸铵)-乙腈=97:3,流速为0.25mL.min-1,柱温为40℃,电喷雾正离子(ESI+)源,监测离子对分别为质荷比(m/z)287.9→175.7(替诺福韦)和m/z277.9→151.7(恩替卡韦)。结果:替诺福韦检测浓度的线性范围为10～800ng.mL-1(r=0.9992),最低检测限为10ng.mL-1,回收率为(100.22±9.47)%～(102.76±4.99)%,日间、日内RSD均小于9.4%;给药45min后血浆样品中替诺福韦的平均浓度为819.2ng.mL-1。结论:该方法操作简便、专属性强、灵敏度高,可用于血浆中替诺福韦的浓度测定。     

UPLC-MS/MS快速测定大鼠血浆中盐酸美沙酮及其代谢产物含量

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）测定大鼠血浆中盐酸美沙酮及其代谢产物乙二胺二甲基次磷酸（2-ethylidene-1,5-dimethyl-3,3-diphenylpyrrolidine,EDDP）的含量。方法 以地西泮为内标,大鼠血浆用乙腈沉淀蛋白,运用UPLC-MS/MS检测大鼠灌胃盐酸美沙酮6 mg·kg^-1后血浆中美沙酮和EDDP的血药浓度,并对数据进行分析。结果 大鼠血浆中盐酸美沙酮和EDDP的定量限均为0.5 ng·mL^-1;线性相关系数r>0.999;日内精密度和日间精密度的RSD均<15%;绝对回收率均>85%,相对回收率在90%~110%之间;基质效应在92.80%~97.71%之间。主要药动学参数：美沙酮、EDDP在大鼠血浆中的消除半衰期（t_1/2）为（1.479±0.839）,（2.590±0.760）h;最高血药浓度（C_max）为（48.562±10.501）,（25.542±3.706）μg·L^-1;平均滞留时间（MRT_0-t）为（3.476±0.310）,（3.883±0.514）h;曲线下面积（AUC_0-t）为（204.036±61.145）,（86.031±15.287）μg·h·L^-1;清除率（CL）为（32.338±14.343）、（70.137±10.786）L·h^-1·kg^-1,各项药动学参数比较差异均有统计学意义。结论 该法专属性强、分离完全、快速灵敏,适用于大鼠血浆中盐酸美沙酮及其代谢产物EDDP的含量测定和药动学研究。     

UPLC-MS/MS测定大鼠血浆中胡蔓藤碱乙和胡蔓藤碱丁及其药动学与生物利用度研究

目的 建立一种检测大鼠血浆中蔓藤碱乙和胡蔓藤碱丁的UPLC-MS/MS法,并研究大鼠口服和舌下静脉给药方式下胡蔓藤碱乙和胡蔓藤碱丁的药动学差异。方法 大鼠分别灌胃和舌下静脉注射蔓藤碱乙和胡蔓藤碱丁,在一定时间内取血,离心获得血清;士的宁为内标,通过UPLC-MS/MS来测定血清中蔓藤碱乙和胡蔓藤碱丁的浓度,绘制药-时曲线,计算药动学参数。结果 经灌胃给药5 mg·kg^–1,胡蔓藤碱乙的t_1/2为(5.7±1.2) h,AUC_(0-t)为(59.6±20.1) ng·h·mL^–1,CL/F为(89.1±30.5) L·h^–1·kg^–1,C_max为(18.3±5.3) ng·mL^–1;经舌下静脉给药1 mg·kg^–1后,胡蔓藤碱乙的t_1/2为(1.5±0.3) h,AUC_(0-t)为(140.2±37.4) ng·h·mL^–1,CL为(7.6±2.3) L·h^–1·kg^–1,C_max为(114.9±36.0) ng·mL^–1。经灌胃给药5 mg·kg^–1,胡蔓藤碱丁的t_1/2为(4.7±4.1) h,AUC_(0-t)为(44.3±5.1) ng·h·mL^–1,CL/F为(100.3±11.7) L·h^–1·kg^–1,C_max为(13.0±4.0) ng·mL^–1;经舌下静脉给药0.1 mg·kg^–1后,胡蔓藤碱丁的t_1/2为(1.1±0.4) h,AUC_(0-t)为(72.9±19.1) ng·h·mL^–1,CL为(1.4±0.4) L·h^-1·kg^–1,C_max为(43.7±6.8) ng·mL^–1。胡蔓藤碱乙的生物利用度为8.5%;胡蔓藤碱丁的生物利用度为1.2%。结论 胡蔓藤碱乙、胡蔓藤碱丁吸收迅速,半衰期较短。     

UPLC-MS/MS测定大鼠血浆中紫花前胡素的血药浓度及其药动学研究

目的 建立UPLC-MS/MS测定大鼠血浆中紫花前胡素的血药浓度,并用于口服和静脉注射后紫花前胡素的药动学特征研究。方法 大鼠血浆样本采用乙腈沉淀法去除蛋白。使用地西泮作为内标,UPLC BEH C₁₈柱（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）为分离柱,以乙腈-0.1%甲酸为流动相,进行梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^-1,分析时间为4.0 min。用电喷雾离子源（ESI）,正离子检测,多反应监测方式进行定量分析,紫花前胡素m/z 329.0→229.0和内标m/z 285.1→193.3。结果 紫花前胡素在1~60 ng·mL^-1内线性关系良好,定量限为1 ng·mL^-1。日内、日间精密度RSD均<14%,准确度范围在88.5%~107.5%,回收率>93.3%,基质效应在89.3%~93.5%。结论 本方法具备灵敏、快速、选择性好的特点,可应用于紫花前胡素大鼠药动学研究。     

UPLC-MS/MS测定大鼠血浆中8-O-乙酰山栀苷甲酯浓度

目的 建立超高效液相串联质谱法快速测定大鼠体内8-O-乙酰山栀苷甲酯的浓度。方法 用乙腈沉淀蛋白方法处理血浆,色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C₁₈柱(50 mm×2.1 mm,1.7 μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸水,梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^-1;用正离子多离子反应监测(MRM)扫描,内标为槲皮素。结果 血浆中8-O-乙酰山栀苷甲酯的线性范围为2.5~500 ng·mL^-1(r=0.997 9),最低定量限为0.5 ng·mL^-1。低、中、高3个浓度(3, 45和450 ng·mL^-1)的质控样品的日内、日间精密度RSD均<10%,3个浓度的相对回收率分别为(103.59±4.75)%, (98.68±4.62)%和(97.06±5.64)%。结论 该方法操作简便、快捷,灵敏度高,适于大鼠血浆中8-O-乙酰山栀苷甲酯浓度的测定及其药代动力学研究。     

UPLC-MS/MS检测大鼠血浆中阿帕替尼的浓度及其药动学研究

目的 采用UPLC-MS/MS建立快速检测大鼠血浆中阿帕替尼浓度的方法,并应用于药动学研究。方法 大鼠血浆样本用乙腈沉淀蛋白,液质联用技术检测浓度,流动相为乙腈-水（含0.1%甲酸）,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^-1,柱温40℃,内标为氯唑沙宗;质谱条件：电喷雾离子化源（ESI）,负离子监测模式,检测离子对阿帕替尼为m/z 396.2→210.0和m/z 396.2→158.0,氯唑沙宗m/z 168.0→132.0。结果 阿帕替尼和内标氯唑沙宗的保留时间分别为1.07 min和1.40 min,线性范围为10~2 000 ng·mL^-1（r²=0.993）,检测限为1 ng·mL^-1,准确度为90.65%~111.50%,基质效应为89.14%~104.65%,平均回收率>86%,日内、日间精密度RSD均<10%。常温下放置24 h、冻融2次和-80℃冻存30 d的RSD均<10%。药动学研究结果显示,大鼠单次灌胃阿帕替尼76.5 mg·kg^-1,AUC_（0-t）为（6 114.41±645.99）ng·mL^-1·h,CL_z/F为（12.21±1.08）L·h^-1·kg^-1,V_z/F为（75.70±38）L·kg^-1,T_1/2为（4.23±1.94）h,T_max为（2±0.71）h,C_max为（1 377.7±284.54）μg·L^-1。结论 该法操作简便,重复性好,准确可靠,适用于大鼠血浆中阿帕替尼的浓度检测及其药动学研究。     

UPLC-MS/MS检测大鼠体内达卢生坦的血药浓度及其药动学研究

目的 建立一种快速、高灵敏度和高选择性的UPLC-MS/MS用于大鼠血浆中达卢生坦的测定。方法 通过蛋白沉淀法完成血浆样品处理。通过Acquity UPLC BEH C₁₈柱（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）色谱柱,流动相为0.1%甲酸水-乙腈,流速为0.4 mL·min^-1。采用ESI⁺方式检测,扫描方式为多反应离子监测方式检测。结果 达卢生坦血药浓度在0.01~2.5 μg·mL^-1内线性关系良好（R²>0.999 6）,定量下限（LLOQ）为0.01 μg·mL^-1。血浆中的达卢生坦平均回收率为87.613%~97.115%,日内及日间精密度RSD<7.71%,基质效应RSD<9.34%。结论 该方法灵敏高,快速高效,能成功应用于大鼠口服10.0 mg·kg^-1达卢生坦后的药动学研究。     

UPLC-MS/MS测定血浆中伊伐布雷定及其活性代谢产物的含量

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中伊伐布雷定及其活性代谢产物(N-去甲伊伐布雷定)的含量。方法 选用Waters Acquity BEH C₁₈(50 mm×2.1 mm,1.7 μm)色谱柱,流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱;流速为0.4 mL·min^-1;电喷雾离子源,多反应监测。伊伐布雷定：[M+H]⁺,m/z 469.3→177.2,N-去甲伊伐布雷定：[M+H]⁺,m/z 455.2→262.2,卡马西平：[M+H]⁺,m/z 237.1→194.2。结果 伊伐布雷定线性范围为0.2~100 ng·mL^-1(r=0.998 1),N-去甲伊伐布雷定线性范围为0.05~25 ng·mL^-1(r=0.993 1);两者日间、日内精密度均<15%,方法回收率>90%,稳定性较好。结论 该方法快速、灵敏、重复性好,适用于血浆中伊伐布雷定及其代谢产物含量测定。