绿豆衣提取物对大鼠肝微粒体CYP3A4活性的影响

摘 要 目的：研究绿豆衣提取物（MBSC）对大鼠肝微粒体中细胞色素P450 （CYP）3A4酶活性的影响。方法: 采用高效液相色谱法,以咪达唑仑为CYP3A4探针药物,建立检测咪达唑仑代谢产物1 羟基咪达唑仑在大鼠肝微粒体孵育体系中浓度的方法,对体外肝微粒体孵育体系中孵育时间、肝微粒体量、孵育时间进行优化,以优化后的条件先后评价绿豆衣提取物对CYP3A4活性的影响及其潜在作用机制。结果: MBSC初提物可显著抑制CYP3A4酶活性,其活性仅为对照组的38.14%（P<0.05）,且IC50值为489.7 μg·ml^-1,抑制机制为竞争 非竞争性抑制。结论: 绿豆衣提取物在体外对大鼠CYP3A4酶的活性具有抑制作用,尚需进一步应用体内模型评价其对CYP3A4活性的影响。     

高效液相色谱法测定大鼠肝微粒体CYP3A酶的活性

目的 以咪达唑仑为探针药用HPLC法测定大鼠肝微粒体CYP3A酶活性.方法 用ZORBAX SB-C18色谱柱分离;流动相为乙腈-水-0.1％三氟乙酸;流速为1 mL· min-1;柱温40℃;检测波长为230 nm.肝微粒体加入咪达唑仑孵育5 min后,用乙腈终止反应,加入内标溶液50 μL,混匀后离心10 min,取上清进行HPLC分析;计算Km和Vmax.结果 1-羟基咪达唑仑浓度在0.06～3.00 mg· L-1内线性关系良好;日内、日间精密度均＜10％,回收率＞75％.咪达唑仑羟化反应的Km =7.32μmol· L-,Vmax=0.59 nmol·min-1·mg-1 pro.结论 本方法稳定可靠,能准确反映CYP3A酶的活性.     

五味子甲素对大鼠肝微粒体CYP3A活性的影响

目的：通过体外药物代谢实验探讨五味子甲素对CYP3A活性的影响。方法：以大鼠肝微粒体为载体,选取咪达唑仑（MDZ）作为药物“探针”,建立高效液相色谱（HPLC）检测方法,体外给药测定五味子甲素对MDZ的IC50值以及相关酶动力学参数。结果：孵育体系内源性物质不干扰测定,方法快捷、稳定、灵敏度高。在肝微粒中,五味子甲素对MDZ的IC50浓度为6．26μmol／mL,相关酶动力学参数：Km=15．77μmol／L,K1=5．50μmol／mL。结论：五味子甲素对大鼠肝微粒体CYP3A活性具有抑制作用,其抑制作用为混合型,即：非竞争与反竞争抑制。     

五味子甲素对大鼠肝微粒体CYP3A活性的影响

目的：通过体外药物代谢实验探讨五味子甲素对CYP3A活性的影响。方法：以大鼠肝微粒体为载体,选取咪达唑仑（MDZ）作为药物“探针”,建立高效液相色谱（HPLC）检测方法,体外给药测定五味子甲素对MDZ的IC50值以及相关酶动力学参数。结果：孵育体系内源性物质不干扰测定,方法快捷、稳定、灵敏度高。在肝微粒中,五味子甲素对MDZ的IC50浓度为6．26μmol／mL,相关酶动力学参数：Km=15．77μmol／L,Ki=5．50μmol／mL。结论：五味子甲素对大鼠肝微粒体CYP3A活性具有抑制作用,其抑制作用为混合型,即：非竞争与反竞争抑制。     

天然维生素E对CYP3A4活性影响的体内研究

目的：阐明天然维生素E在体内对CYP3A4活性的影响。方法：12名健康男性志愿者,随机分两组,采用两阶段双周期交叉设计,一组口服天然维生素E600mg/d,另一组不服药,连续14d。在第15天两组均口服咪达唑仑7.5mg,在0、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、4、6、8、12、24h采外周静脉血5mL,洗脱4周交叉进行下阶段试验。采血后0.5h内进行离心和分离血浆,运用HPLC-MS-MS分别测定血浆中咪达唑仑总药物浓度、1-OH咪达唑仑药物浓度,分析比较不同处理组间药代动力学参数的差异。结果：天然维生素E服用组与对照组咪达唑仑及其代谢产物1-OH咪达唑仑的血浆药物浓度变化相近。天然维生素E服用组与对照组之间咪达唑仑及其代谢产物1-OH咪达唑仑的曲线下面积AUC0-24h和峰浓度Cmax数据相近（P〉0.05）。结论：在本试验中服用天然维生素E并未影响CYP3A4的体内活性。     

体外探讨五味子乙素对大鼠肝微粒体CYP3A的影响及其作用机制

目的通过体外药物代谢实验探讨五味子乙素对CYP3A活性的影响,并探讨其作用机制。方法以大鼠肝微粒体为载体,选取咪达唑仑为药物"探针",建立高效液相色谱法(HPLC)检测五味子乙素对肝微粒体代谢咪达唑仑的影响,体外给药测定其IC50值以及相关酶动力学参数,并推测其可能的作用机制。结果孵育体系内源性物质不干扰测定,方法快捷、稳定、灵敏度高。结果显示五味子乙素呈剂量依赖性抑制体外肝微粒体咪达唑仑代谢,其IC50为5.50g.L-1,据此计算其Ki为4.32mol·L-1。结论五味子乙素体外抑制大鼠肝微粒体CYP3A活性,其作用机制为可逆性抑制,属于非竞争性抑制类型。     

五味子甲素对CYP3A活性的影响及其体内外相关性研究

目的:通过"探针"法探讨五味子甲素体内、外对大鼠肝微粒体CYP3A活性的影响及其相关性。方法:选取咪达唑仑作为CYP3A探针,用高效液相色谱法测定五味子甲素体外孵育给药和体内灌胃给药后大鼠肝微粒体酶CYP3A活性,通过药动学参数K_m确定其体内、外作用的相关性。结果:体外试验结果表明,五味子甲素非竞争性抑制咪达唑仑的代谢,其K_i为5.5μmol·L^-1,体内试验亦证实了五味子甲素能显著抑制肝微粒体CYP3A酶活性（P<0.01）并呈剂量依赖性,其体内给药的K_i值为30.67 mg·kg^-1。体内外K_m值十分接近。结论:五味子甲素在体内和体外均可非竞争性抑制大鼠肝微粒体酶CYP3A活性,其对CYP3A影响的体内、体外结果具有良好的相关性。     

刺五加注射液对大鼠肝微粒体四种CYP450亚型酶活性的影响

目的:研究刺五加注射液在大鼠体外肝微粒体中对CYP2C9、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A4活性的影响,为临床合理联合用药提供参考。方法:在大鼠体外肝微粒体中分别加入四种亚型酶的探针药物甲苯磺丁脲(TB)、右美沙芬(DM)、氯唑沙宗(CLZ)、睾酮(TS)和低、中、高剂量的刺五加注射液,温孵后用HPLC法测定各空白对照组和不同剂量刺五加注射液给药组中各探针药物代谢产物的浓度并比较代谢率的差异,以评价刺五加注射液对各亚型酶活性的影响;中剂量组活性显著降低的亚型酶进一步考察抑制作用的强弱(即IC50和Ki值)。结果:与空白对照组比较,刺五加注射液低、中、高剂量给药组对CYP3A4活性的影响均有统计学意义(P<0.01),抑制率分别为10.22%、19.00%、30.29%,其IC50和Ki值分别为3.96%和2.74%(V/V);低、中、高剂量给药组对CYP2D6活性的影响均无统计学差异(P>0.05);低剂量给药组对CYP2C9、CYP2E1活性的影响无统计学差异(P>0.05),中、高剂量给药组对两个亚型的抑制作用有统计学差异(P<0.05),但中剂量给药组抑制率均小于8.50%,高剂量给药组抑制率均小于12.00%。结论:刺五加注射液对大鼠体外肝微粒体CYP3A4有抑制作用,且符合混合型抑制模型;对CYP2C9、CYP2E1抑制作用较弱;对CYP2D6活性无影响。     

雷公藤多苷片对大鼠药物代谢酶CYP2E1和CYP3A4活性的影响

目的:研究雷公藤多苷片对大鼠CYP450亚型酶CYP2E1和CYP3A4活性的影响方法:16只Wistar大鼠随机分成2组,每组8只,实验组给予雷公藤多苷片(1 mg·kg^-1·d^-1,ig,qd),对照组给予同体积的纤维素钠空白溶剂,连续给药10d后同时静脉给予探针药物氯唑沙宗(5 mg·kg^-1)和咪达唑仑(2 mg·kg^-1)。HPLC法测定两个探针药物的血药浓度,计算其药物动力学参数,评价CYP450亚型酶CYP2E1和CYP3A4的活性。结果:与对照组比较,实验组的氯唑沙宗主要药物动力学参数无明显变化（P>0.05）,而咪达唑仑的CL和AUC较对照组差异有统计学意义（P<0.05）。结论:雷公藤多苷片对大鼠的CYP2E1酶活性无明显影响,对CYP3A4酶活性有一定的抑制作用。     

探针药物法评价丁苯酞对大鼠体内CYP3A酶活性的影响

目的研究丁苯酞连续多次灌胃给药对大鼠CYP3A酶活性的影响。方法 40只Wistar大鼠随机分为4组。对照组灌胃给予橄榄油;实验组分为低、中、高3个剂量组,分别灌胃给予丁苯酞40、80、160 mg·kg^-1（以橄榄油溶解）。对照组和实验组均连续灌胃5 d,于第6日尾静脉注射探针药物咪达唑仑（4 mg·kg^-1）后由眼底静脉丛取血,高效液相色谱法测定血药浓度,以DAS 2.1.1药物动力学程序拟合药动学参数,以SPSS18.0软件对组间各参数进行统计分析。结果咪达唑仑在0.06～30μg·mL^-1内线性关系良好（r=0.999 4）;日内、日间RSD〈13%;绝对回收率为80.59%～96.5%。咪达唑仑单用及与低、中、高剂量丁苯酞合用比较,药动学参数AUC0～t、AUC0～∞、t1/2、CLZ、VZ没有显著性差别（P〉0.05）。结论丁苯酞对大鼠体内CYP3A酶活性没有影响。     

刺五加注射液对大鼠睡眠影响的实验研究

目的 探讨刺五加注射液对SD大鼠睡眠周期的影响.方法 将30只大鼠随机分为2组,刺五加组和对照组,分别连续7 d腹腔注射刺五加注射液和0.9%氯化钠溶液,通过记录大鼠的脑电及肌电活动,了解药物对睡眠周期的影响.结果 与对照组比较,刺五加组大鼠从第5天开始睡眠周期发生较显著的变化.总睡眠时间(TST)显著增加(P<0.05),其中以慢波睡眠(SWS)的增加最为显著(P<0.05),而异相睡眠(PS)的变化组间差异无统计学意义(P>0.05).第9天时作用最明显,深慢波睡眠(SWS2)、SWS和TST分别增加104.3%、27.3%和31.3%(P均<0.01);觉醒期(W)减少38.9%(P<0.01).注射后第13天睡眠开始恢复正常.结论 刺五加注射液能选择性增加睡眠周期中的SWS,在治疗睡眠障碍方面具有较大的优越性.     

鲎试剂法检测刺五加注射液中细菌内毒素

目的:建立一种刺五加注射液中细菌内毒素检查法。方法:根据《中国药典》2000年版二部收载的细菌内毒素检查法的要求进行实验。结果:鲎试剂法可用于检查刺五加注射液中细菌内毒素。结论:此法简便、灵敏、准确     

高效液相色谱法测定刺五加注射液的含量

的建立刺五加注射液中芦丁水解产物槲皮素的高效液相色谱法。方法以Alltima C     

生脉注射液联合刺五加注射液治疗冠心病心绞痛临床疗效分析

目的 :联合应用生脉注射液和刺五加注射液治疗冠心病心绞痛 ,观察疗效及不良反应。方法 :对 110例冠心病心绞痛病人随机分成两组 ,对照组 (A组 )给予抗心绞痛常规治疗 ,治疗组 (B组 )在常规治疗的基础上给予生脉注射液 30 ml+5 %GS2 5 0 ml和刺五加注射液 4 0 ml+5 % GS2 5 0 ml分步静滴 ,每日 1次 ,疗程 2周 ,观察两组患者用药前后心绞痛症状、心电图、血流变改变情况及不良反应。结果 :A组与 B组在改善心绞痛疗效总有效率分别为 76 .4 % ,94 .5 % (P <0 .0 1) ,心电图疗效分别为 5 6 .4 % ,81.8% (P <0 .0 5 ) ,对血液流变学的影响 B组优于 A组 (P <0 .0 1) ,未见副反应。结论 :生脉注射液联合刺五加注射液治疗冠心病心绞痛疗效显著 ,无不良反应     

刺五加注射液引发过敏性哮喘2例

2名女性,因患冠心病、心绞痛,均静脉滴注刺五加注射液60ml。滴注2～3min后,患者突然出现呼吸困难,口唇发绀,呼吸急促,双肺布满干鸣音。立即停药,给予吸氧、静脉注射糖皮质激素等对症治疗,症状逐渐缓解。     

103例刺五加注射液致不良反应文献调查

目的:了解刺五加注射液不良反应发生情况。方法:通过检索1994-2003年国内公开发表的医药学期刊中有关刺五加注射液不良反应的文献75篇,并对数据较完整的103例病例进行统计分析。结果:刺五加注射液引起的不良反应主要为过敏性休克(33.98%),其次为全身反应、皮肤及呼吸系统损害。结论:刺五加注射液引起的变态反应多见,应引起临床重视。     

高效液相色谱法测定刺五加注射液中紫丁香苷的含量

目的 :测定刺五加注射液中紫丁香苷的含量。方法 :采用反相高效液相色谱法 ,以梯度洗脱。色谱柱为ShimpackCLCC18柱 (15 0mm× 6mm ,5 μm ,日本岛津 ) ;流动相A为水 ,流动相B为甲醇 ,梯度条件为 0→ 40min ,A :0 %→ 30 % ;流速为 1mL·min-1,检测波长为 2 6 7nm。结果 :测得平均回收率为 10 0 1% ,RSD为0 77%。结论 :方法准确可靠 ,适合于刺五加注射液中紫丁香苷的含量测定。     

南京地区引种刺五加抗大鼠疲劳实验研究

目的观察南京地区引种刺五加与东北地产刺五加对大鼠疲劳模型血清丙二醛（MDA）含量、总超氧化物歧化酶（SOD）活力、血清乳酸（LD）含量及乳酸脱氢酶（LDH）活力改变的影响。方法大鼠采用力竭性游泳运动方式,观察力竭运动后大鼠的体重以及MDA含量、SOD活力、LD含量及LDH活力的变化。结果南京地区引种及东北地产刺五加（中剂量组、大剂量组）与模型组相比血清MDA含量明显降低（P〈0.05）,SOD活力明显升高（P〈0.05）。南京地区引种及东北地产刺五加（小、中、大剂量组）与模型组相比MDA/SOD比值及LD含量明显降低（P〈0.05）,LDH活力明显升高（P〈0.05）。结论刺五加可能是通过减少MDA及LD含量、提高SOD及LDH活性以减少机体自由基的产生,增强机体清除自由基的能力,减少代谢产物堆积,提高机体运动能力,发挥其抗疲劳作用的。南京地区引种刺五加与东北地产刺五加具有相似的抗疲劳作用。     

刺五加治疗急性脑梗死血液流变学变化的临床研究

目的对比观察刺五加注射液与复方丹参注射液治疗急性脑梗死患者的血液流变学变化。方法 6 4例患者随机分为实验组 (n =32 ,住院期间每日静脉滴注刺五加注射液 2 5 0ml,连续1 4d)和对照组 (n =32 ,住院期间每日静脉滴注复方丹参注射液 2 5 0ml,连续 1 4d) ,分别对上述两组患者治疗前和治疗后第 7d、1 4d作全血粘度 (CP)、红细胞压积 (HCT)、红细胞聚集指数 (RCI)、血小板聚集率 (PCR)检测。结果两组患者治疗前上述参数组间比较差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ;治疗后第 7d、1 4d ,两组上述参数均明显低于治疗前 (P <0 .0 5或P <0 .0 1 ) ;实验组CP、RCI和PCR明显低于对照组 (P <0 .0 5 )。结论在改善急性脑梗死患者血液流变学 ,促进脑部血液循环 ,降低死亡率等方面 ,刺五加注射液明显优于复方丹参注射液     

刺五加注射液对大鼠长期毒性试验的研究

目的：观察大鼠连续静脉/腹腔交替注射刺五加注射液产生的毒性反应与靶器官损害的可逆性。方法：通过血液学、血液生物化学和病理组织学检查,观察注射刺五加注射液对大鼠的毒性反应及程度。结果：连续静脉/腹腔交替注射刺五加注射液4周,动物全部存活,高、低剂量组动物未见明显毒性反应,停药后各剂量组均未见迟缓性毒性发生。结论：刺五加注射液连续静脉/腹腔交替注射对大鼠体重增长率、各主要器官脏器系数、血细胞和血液生化指标均无显著影响,病理组织学检查亦未见毒性病理改变,停药后2周亦未见延迟毒性,即刺五加注射液对大鼠无明显毒性。