匹伐他汀对稳定型冠心病患者巨噬细胞胆固醇外流功能的影响及机制研究

目的 研究匹伐他汀对稳定型冠心病(冠状动脉粥样硬化性心脏病)患者单核细胞来源的巨噬细胞的胆固醇外流功能的影响及其机制。方法 选取2019年1月至2021年1月北京积水潭医院心内门诊及病房的合并脂代谢异常的稳定型冠心病患者60例,采用简单随机化分组的方法分为匹伐他汀组和阿托伐他汀组(各30例),分别予以匹伐他汀2～4 mg/d或阿托伐他汀10～20 mg/d,治疗6个月。分别于治疗前及治疗6个月后抽取外周静脉血,测定血脂水平。分离单核细胞进行巨噬化培养,实时定量聚合酶链反应法测定三磷酸腺苷结合盒转运蛋白A1(ABCA1)及三磷酸腺苷结合盒亚家族G1抗体(ABCG1)的mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测ABCA1及ABCG1的蛋白表达水平。以³H标记胆固醇分别测定经载脂蛋白A1及高密度脂蛋白(HDL)介导的胆固醇外流率变化。结果 治疗6个月后,匹伐他汀组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平[(1.34±0.15)mmol/L比(1.21±0.18)mmol/L],载脂蛋白A1和HDL介导的胆固醇外流率[(11.4±2.2)%比(8.6±1.7)%、(17.7±1.7)...     

罗格列酮对糖尿病大鼠动脉硬化影响的机制

目的 探讨噻唑烷二酮类药物对糖尿病大鼠动脉硬化的影响及其相关机制。 方法 采用高果糖饲料喂养SD大鼠建立胰岛素抵抗模型,观察罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠血NO和内皮素的影响并分析可能的作用机制。 结果 与模型组相比,罗格列酮处理后的大鼠收缩压、FSI、TG、TC、HOMA-IR、内皮素显著降低,NO、NO合酶活性显著升高,内皮细胞和中层平滑肌细胞排列较规整,中膜细胞数明显减少。 结论 罗格列酮能改善血管内皮功能,恢复血管张力,阻止主动脉结构重塑。     

载脂蛋白嵌合模拟肽对巨噬细胞胆固醇流出的影响

目的观察载脂蛋白嵌合模拟肽Ac-hE-18A-NH2对RAW264.7巨噬细胞胆固醇流出的影响,并探讨其机制。方法 RAW264.7巨噬细胞种植于24孔板,用0.5μCi/孔3H-胆固醇和含50mg·mL-1氧化低密度脂蛋白共同孵育24h之后,给予不同浓度的Ac-hE-18A-NH2(0～100mg·mL-1)干预24h,收集细胞用液体闪烁计数法检测胆固醇流出。采用ELISA测定细胞内cAMP含量,采用实时荧光定量PCR及Westernblot检测ABCA1、LXRα和PPARγ的mRNA及蛋白表达。结果 Ac-hE-18A-NH2以浓度依赖方式介导胆固醇流出;50mg·mL-1Ac-hE-18A-NH2干预不同时间,其介导的胆固醇流出率分别为(10.86±1.46)%(6h),(13.43±1.55)%(12h),(20.58±1.34)%(18h),和(26.93±4.37)%(24h)。同时,Ac-hE-18A-NH2还以浓度依赖方式增加细胞内cAMP水平,上调ABCA1、LXRα和PPARγmR-NA和蛋白表达。加用cAMP刺激剂8-Br-cAMP,Ac-hE-18A-NH2介导的胆固醇流出率由26.93±4.37增加至35.81±2.73,ABCA1mRNA表达增加了66.67%。而加用PPARγ特异性抑制剂预处理细胞后,PPARγ的表达几乎完全抑制,ABCA1和LXRα的表达也受到一定程度抑制,Ac-hE-18A-NH2介导的胆固醇流出率明显减少。结论模拟肽Ac-hE-18A-NH2可以明显促进巨噬细胞胆固醇流出,其机制可能与cAMP-ABCA1和PPARγ-LXRα-ABCA1两种途径有关。     

二氢杨梅素对巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出的影响

摘要：目的 观察二氢杨梅素 （DMY） 对鼠源巨噬细胞性泡沫细胞胆固醇流出的影响并探讨其可能机制。方法 用 50 mg/L 的氧化低密度脂蛋白 （ox-LDL） 孵育鼠源性巨噬细胞 RAW264.7 经 48 h 诱导细胞泡沫化。将泡沫细胞分为对照组 （只加 RPMI 1640 的培养基培养） 和 DMY1~4 组 （分别用 10、 20、 40 和 80 μmol/L DMY 处理）, 培养 24 h。采用[ 3 H]标记的胆固醇检测细胞胆固醇的流出率, 高效液相色谱测定细胞内游离胆固醇 （FC）、 胆固醇酯 （CE） 和总胆固醇 （TC） 的水平, Western blot 检测细胞中三磷酸腺苷结合盒转运体 A1 （ABCA1） 的表达。结果 与对照组比较, 20、 40 和 80 μmol/L DMY 组细胞的胆固醇流出率均显著增加, 细胞内 FC、 TC 和 CE 水平及 CE/TC 的比值均显著减少, ABCA1 的表达显著上调, 均呈剂量依赖性 （均 P < 0.05）。与对照组比较, DMY （10 μmol/L） 组细胞胆固醇流出率,细胞内 FC、 TC 和 CE 水平,ABCA1 的表达差异均无统计学意义 （均 P > 0.05）。结论 DMY 促进了鼠源巨噬细胞性泡沫细胞胆固醇流出, 其机制可能与上调泡沫细胞中 ABCA1的表达有关。 ,     

Rolipram对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出和ABCA1表达的影响

目的　以THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象 ,探讨磷酸二酯酶抑制剂rolipram对THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达及细胞内胆固醇流出的影响。方法　用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出 ,运用逆转录 -多聚酶链反应和Westernblot印迹分别检测ABCA1mRNA与ABCA1蛋白的表达 ,采用低pH值EIA法测定细胞内cAMP水平。结果　实验显示PDE4抑制剂rolipram能引起THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞cAMP水平、ABCA1表达和apoA 1介导的胆固醇流出成平衡增加 ,而细胞内总胆固醇、游离胆固醇与胆固醇酯明显减少。结论　PDE4抑制剂rolipram增加THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达及细胞内胆固醇流出 ,这为防治动脉粥样硬化发生发展提供一个新的策略     

坎地沙坦对泡沫细胞胆固醇代谢的影响

目的观察坎地沙坦(CAN)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导急性单核白血病细胞(THP-1)源性泡沫细胞及对三磷腺苷结合盒转运子A1(ABCA1)表达水平的作用。方法 THP-1源性细胞加入160 nmol.L-1佛波酯,在RPMI-1640液中孵育48 h,将其诱导分化为巨噬细胞后随机分为3组,对照组加入50 mg.L-1ox-LDL培养液孵育48 h;血管紧张肽Ⅱ(AngⅡ)组加入1×10-6mol.L-1AngⅡ后再加入50 mg.L-1ox-LDL培养液孵育48 h;CAN组加入1×10-6mol.L-1CAN后再加入1×10-6mol.L-1AngⅡ孵育,然后以50 mg.L-1ox-LDL处理48 h。分别采用油红O染色观察细胞内脂滴变化,酶化学法测定总胆固醇和胆固醇酯含量,Western blotting法检测ABCA1蛋白表达水平。结果 AngⅡ作用后,细胞内脂滴明显增多,细胞内总胆固醇和胆固醇酯含量及胆固醇酯/总胆固醇比值明显升高,ABCA1蛋白表达水平降低(P<0.05)。CAN能减少泡沫细胞内脂滴形成,导致细胞内总胆固醇和胆固醇酯含量及胆固醇酯/总胆固醇比值明显降低,一定程度上调泡沫细胞转运蛋白ABCA1表达(P<0.05),促进细胞内胆固醇酯流出。结论 AngⅡ减少泡沫细胞中ABCA1的表达,CAN可通过阻断AngⅡ1型受体促进ABCA1的表达及胆固醇酯流出。     

罗格列酮对非糖尿病代谢综合症患者的影响

近年的研究表明,在糖尿病(DM)高危人群中,亚临床炎症与胰岛素抵抗(IR)相关[1].噻唑烷二酮类药物(TZD)-罗格列酮除了能改善2型糖尿病患者的IR和糖脂代谢外,还具有抗炎、抗动脉粥样硬化(AS)作用.     

穿心莲内酯对AS早期新西兰兔主动脉LDLR、ABCA1、ApoA1及SRB1表达的影响

目的探讨穿心莲内酯对动脉粥样硬化（As）早期新西兰兔主动脉低密度脂蛋白受体（LDLR）、三磷酸腺苷结合盒转运体（ABCA1）、载脂蛋白A1（ApoA1）以及清道夫受体（SRB1）mRNA表达的影响。方法SPF级新西兰家兔36只,雌雄各半,随机分为6组：空白对照组、模型对照组、非诺贝特组、穿心莲内酯高、中、低3个剂量组,除空白对照组给予普通饲料饲养外,其余各组给予高脂饲料50g,造模喂养4周,4周后按照分组继续进行高脂饲料喂养,各给药组按剂量灌胃给予相应药物。空白对照组、模型对照组同法灌胃给予等体积蒸馏水,连续给药4周。末次给药后1h取主动脉进行LDLR、ABCA1、ApoA1以及sRB1的mRNA表达。结果与模型组比较,穿心莲内酯不同剂量组新西兰兔主动脉LDLR、ABCA1、ApoA1、SRB1 mRNA表达都明显高于模型组,差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论穿心莲内酯有明显诱导LDLR、ABCA1、ApoA1、SRB1 mRNA表达的作用。     

罗格列酮联合阿托伐他汀对高胆固醇血症兔主动脉斑块面积和TNF-α的影响

目的：观察罗格列酮和阿托伐他汀单独或联合应用对高胆固醇血症兔主动脉斑块面积和TNF-α的影响。方法：24只雄性新西兰大白兔高胆固醇饮食8周后,随机加喂淀粉（淀粉组,n=6）或阿托伐他汀（阿托伐他汀组,5mg·kg-1·d-1,n=6）或罗格列酮钠（罗格列酮组,3mg·kg-1·d-1,n=6）或罗格列酮钠联合阿托伐他汀（联合组,阿托伐他汀钙5mg·kg-1·d-1、罗格列酮3mg·kg-1·d-1,n=6）喂养4周。以普通饲料喂养兔作为正常对照（对照组,n=6）。各组兔共喂养12周后,取兔主动脉测定内膜斑块面积,同时分离外周血单核细胞培养24h,采用酶联免疫吸附测定法检测血浆和单核细胞细胞培养上清液TNF-α。结果：与对照组相比,高胆固醇饮食各组兔血浆和外周血单核细胞1TNF-α水平升高（均P〈0．01）;与淀粉组相比,阿托伐他汀和罗格列酮体内干预都能降低高胆固醇血症兔主动脉斑块面积百分数、血浆和外周血单核细胞TNF-α水平,且二者联合干预降低程度更显著（P均〈0．01）;兔主动脉斑块面积与血浆／外周血单核细胞TNF-α水平呈显著正相关（均P〈0．01）。结论：阿托伐他汀和罗格列酮可能通过抑制外周血单核细胞分泌TNF-α发挥抗动脉粥样硬化（AS）作用,且二者联合应用效果更佳。     

罗格列酮对动脉粥样硬化大鼠血脂及血清炎症因子水平的影响

目的探讨罗格列酮对动脉粥样硬化(AS)大鼠血脂及血清炎症因子水平的影响。方法12周龄雄性W istar大鼠55只,随机分为3组:①正常对照组(N,n=20),②模型组(M,n=20),③治疗组(罗格列酮组,RSG,n=15)。其中N组大鼠喂食基础饲料12周;M组和RSG组大鼠喂食高脂饲料6周后,分别给予生理盐水(10 mL·kg^-1·d^-1)和罗格列酮(3 mg·kg^-1·d^-1)灌胃治疗6周,且在喂食开始时一次性腹腔注射维生素D₃40万IU·kg^-1。造模6周后,取N组和M组大鼠各5只处死,检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),ELISA法检测血清C反应蛋白(CRP)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、血管内细胞黏附分子-1(ICAM-1)表达;提取大鼠心脏,HE染色观察冠状动脉粥样硬化斑块的病理形态改变。灌胃治疗6周后,各组大鼠处死后按前述方法再次检测各指标变化及冠状动脉病理形态变化。结果造模6周后,M组大鼠血清TC,TG,LDL-C,CRP,MCP-1,ICAM-1水平均升高(P<0.05),HDL-C水平的变化没有统计学意义(P>0.05),光镜下观察可见冠状动脉粥样硬化斑块形成。灌胃治疗6周后,RSG组大鼠血清TC,TG,LDL-C,CRP,MCP-1水平较M组降低(P<0.05或P<0.01),但仍略高于N组(P<0.05),HDL-C,ICAM-1水平未见明显变化(P>0.05)。光镜下观察见RSG组大鼠AS病变较M组明显减轻。结论罗格列酮治疗6周能降低大鼠TC、TG、LDL-C水平,抑制血清炎症因子CRP、MCP-1的表达,这可能是其抗AS的机制之一。     

马来酸罗格列酮对肾缺血再灌注损伤模型小鼠的保护作用及其机制研究

目的:探讨马来酸罗格列酮对肾缺血再灌注损伤模型小鼠的保护作用及其机制。方法:小鼠30只随机分为假手术组(生理盐水)、模型组(生理盐水)和马来酸罗格列酮组(5 mg.kg-1.d-1),灌胃给予相应药物,连续10 d,末次给药40 min后除假手术组外建立肾缺血再灌注损伤模型,术后检测肾脏指数,血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肾组织中丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,常规HE染色观察肾组织病理变化。结果:与模型组比较,马来酸罗格列酮组小鼠肾脏指数降低(P<0.01),血清BUN、Cr、肾组织中MDA含量均减少(P<0.01),SOD和GSH-Px活力增加(P<0.01或P<0.05)。结论:马来酸罗格列酮对小鼠肾缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与减轻自由基引起的肾组织脂质过氧化反应有关。     

液质联用分析鉴定罗格列酮的检测方法研究

目的：建立降糖类中成药中非法添加化学药品罗格列酮的检测方法。方法：用十八烷基键合硅胶为填充剂色谱柱（柱头加装相同规格填料的预柱）;以20mmol·L^-1醋酸铵0．1％冰醋酸溶液一乙腈（40：60）为流动相;质谱仪装配电喷雾电离源（ESI）,源电压5KV,毛细管温度275℃,毛细管电压15V,鞘气流速1．05L·min^-1,辅助气流速0．15L·min^-1,正离子检测,采取一级全扫描及二级全扫描方式,质量范围100～1000。结果与结论：该方法选择性强,灵敏度高,可以作为分析检测中成药中非法添加罗格列酮的检测方法。     

苯溴马隆对罗格列酮在小鼠体内药动学的影响

目的:探讨罗格列酮在小鼠体内的药动学特征,并考察苯溴马隆对罗格列酮药动学的影响。方法:取小鼠随机分为单用组(罗格列酮0.2mg.kg-1)和联用组(罗格列酮0.2mg.kg-1+苯溴马隆5mg.kg-1)组,每组55只,灌胃给予相应药物,采用高效液相色谱-荧光法,检测给药后0.17、0.33、0.75、1.5、2.0、2.5、4.0、6.0、8.0、12.0、24.0h各组小鼠的罗格列酮血药浓度,采用3p97软件拟合药动学参数。结果:罗格列酮在单用组和联用组小鼠体内的药动学参数分别为cmax:253.1、649.5ng.mL-1,t1/2Ke:0.94、0.74h,AUC0～24h:511.3、1150.9ng.h.mL-1。其中联用组cmax、AUC0～24h与单用组比较明显升高(P<0.05)。结论:苯溴马隆可增强罗格列酮在小鼠体内的吸收。     

罗格列酮钠联合二甲双胍改善2型糖尿病患者糖脂代谢及机制研究

目的探讨罗格列酮钠联合二甲双胍治疗对2型糖尿病患者糖脂代谢及胰岛素抵抗改变及其作用机制。方法 42例确诊2型糖尿病患者经过二甲双胍及罗格列酮钠干预治疗12周。检测治疗前后空腹血糖(FBS)、餐后2h血糖(PBS)、空腹胰岛素(FINS)、血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)低密度胆固醇(LDL)等血脂全套,用HOMA公式计算胰岛素抵抗指数(IR)与正常对照组34例相比较。同时测定治疗前后血清游离脂肪酸(FFA)、C反应蛋白(CRP)。结果 2型糖尿病患者与对照组比,FBS、PBS、HbA1c、LDL、TC、TG、FFA、CRP、IR均显著增高。2型糖尿病组经干预治疗后,FBS、PBS、HbA1c、IR、FFA、CRP浓度均比治疗前显著下降(P<0.01)。LDL、TC、TG经治疗后亦有明显下降(P<0.01)。结论罗格列酮钠联合二甲双胍治疗肥胖2型糖尿病患者可通过降低CRP、FFA,改善IR从而改善糖脂代谢。     

An International Study of the Effects of Rosiglitazone plus Sulphonylurea in Patients with Type 2 Diabetes

Summary

This was an open-label, randomised 26-week study to determine the effects of adding 4mg rosiglitazone (Avandia?) daily to existing sulphonylurea (SU) therapy in patients with type 2 diabetes from India, Brazil, The Philippines, Thailand, Argentina and Tunisia. Of the 348 patients, 175 received 2mg rosiglitazone twice daily plus SU (RSG?+?SU) and 173 received SU alone (at their normal dose). The RSG?+?SU group showed a significant reduction in HbA1c (mean HbA1c 9.05% at baseline, 7.92% at 26 weeks, mean change ?1.13 (95% CI ?1.37, ?0.89)). Mean HbA1cessentially remained unchanged in the control group (8.9 to 9.0%). The RSG?+?SU group showed a significant decrease in fasting plasma glucose concentration

(FPG) (mean FPG 198.7?mg/dl at baseline, 160.3?mg/dl at 26 weeks, mean change ?38.4 (95% CI ?47.1, ?29.7)) while the controls showed a non-significant increase from 194 to 200?mg/dl. Significantly more patients in the RSG?+?SU group achieved FPG < 140?mg/dl, > 0.7% decrease in HbA1c, and > 30?mg/dl decrease in FPG between baseline and week 26 than the controls (p?=?0.0001 in each case). Adverse events were similar in both groups; more patients in the RSG?+?SU group reported hypoglycaemia, but most cases were mild. This study shows that adding rosiglitazone to existing SU treatment improves glycaemic control and is well-tolerated in patients with type 2 diabetes from a wide range of non-Western countries.     

罗格列酮延缓慢性肾病进展的机制研究

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动药罗格列酮对5/6肾切除肾衰竭大鼠的肾脏保护作用及可能作用机制.方法选用180～200 g健康雄性SD大鼠建立5/6肾切除肾衰竭模型,分为假手术组、模型对照组和罗格列酮组.第12周时采用断头法处死大鼠,并检测各组大鼠血清尿素氮、肌酐及24 h尿蛋白水平;取残余肾组织行病理检查,判断肾小球硬化、肾小管间质损伤程度;采用免疫组化方法观察PPARγ和神经型一氧化氮合酶(nNOS)在肾脏组织的分布;利用RT PCR和Western Blot检测PPARγ和nNOS 蛋白和mRNA的表达水平.结果与假手术组比较,模型对照组和罗格列酮组大鼠24 h尿蛋白、血清尿素氮及肌酐均显著升高(P＜0.01);但与模型对照组比较,罗格列酮组各指标则明显降低(P＜0.05).病理学检查示模型对照组大鼠肾组织有明显的肾小球硬化及肾小管间质损伤,肾小球硬化指数及肾小管间质损伤指数均较假手术组明显增高(P＜0.01);而罗格列酮组上述指标则较模型对照组明显降低(P＜0.05).免疫组化结果显示5/6肾切除大鼠PPARγ主要分布在肾小管上皮细胞、系膜细胞和浸润的巨噬细胞,nNOS主要定位在致密斑,内髓集合管也有表达.模型对照组PPARγ、nNOS蛋白和mRNA的表达较假手术组明显下降(P＜0.05),而罗格列酮组PPARγ和nNOS的表达则较模型对照组明显升高(P＜0.05).结论大鼠5/6肾切除后,给予罗格列酮可以明显减轻肾小球硬化和肾间质纤维化的程度,其作用机制可能与其上调PPARγ和nNOS基因的表达有关,且有明显的相关性.     

Role of the breast cancer resistance protein (ABCG2) in drug transport

The 72-kDa breast cancer resistance protein (BCRP) is the second member of the subfamily G of the human ATP binding cassette (ABC) transporter superfamily and thus also designated as ABCG2. Unlike P-glycoprotein and MRP1, which are arranged in 2 repeated halves, BCRP is a half-transporter consisting of only 1 nucleotide binding domain followed by 1 membrane-spanning domain. Current experimental evidence suggests that BCRP may function as a homodimer or homotetramer. Overexpression of BCRP is associated with high levels of resistance to a variety of anticancer agents, including anthracyclines, mitoxantrone, and the camptothecins, by enhancing drug efflux. BCRP expression has been detected in a large number of hematological malignancies and solid tumors, indicating that this transporter may play an important role in clinical drug resistance of cancers. In addition to its role to confer resistance against chemotherapeutic agents, BCRP actively transports structurally diverse organic molecules, conjugated or unconjugated, such as estrone-3-sulfate, 17beta-estradiol 17-(beta-D-glucuronide), and methotrexate. BCRP is highly expressed in the placental syncytiotrophoblasts, in the apical membrane of the epithelium in the small intestine, in the liver canalicular membrane, and at the luminal surface of the endothelial cells of human brain microvessels. This strategic and substantial tissue localization indicates that BCRP also plays an important role in absorption, distribution, and elimination of drugs that are BCRP substrates. This review summarizes current knowledge of BCRP and its relevance to multidrug resistance and drug disposition.     

罗格列酮对大鼠TGF-β1及TIMP-1的干预作用

目的观察罗格列酮对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾皮质中转化生长因子-β1(TGF-β1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、组织金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)表达的干预作用。方法将大鼠随机分为假手术组(SHAM)、手术组(UUO)、治疗组(UUO RGZ)。术后14d处死,观察大鼠血肌酐,右侧肾脏病理学改变,并用免疫组化方法测肾皮质中TGF-β1、PPARγ、TIMP?1的表达。结果与手术组相比,治疗组大鼠肾脏病理改变明显减轻,肾小管间质中TGF-β1、PPARγ、TIMP?1表达有不同程度减少。结论罗格列酮可通过调节细胞外基质降解作用,减轻单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质病变。