支气管哮喘患者外周血组蛋白去乙酰化酶9的表达及其意义

目的 探讨支气管哮喘(简称哮喘)患者外周血组蛋白去乙酰化酶9 (Histone Deacetylase 9,HDAC9)的表达特征及其与Th2、Th17、调节性T细胞的关系.方法 选择2010年3月至2011年6月上海瑞金医院呼吸科47例慢性持续期哮喘患者,分为间歇期哮喘组、轻度哮喘组和中重度哮喘组,各组均行肺功能检查和哮喘控制问卷调查哮喘控制情况.并选取20名健康人作为健康对照组.通过分离外周血单个核细胞(PBMCs),Trizol法抽提RNA,采用荧光实时定量方法检测转录因子GATA3、IL-4、HDAC9mRNA表达水平.ELISA检测血浆中Th17细胞分泌的主要细胞因子IL-17以及调节性T细胞分泌的主要细胞因子——转化生长因子( TGF)-β表达水平.结果 哮喘组PBMCs中GATA3、IL-4mRNA总体相对表达水平分别为28.12±7.57、743.6±312.8高于健康对照组相对表达水平(分别为0.56±0.22、0.7±0.8),差异有统计学意义(U值分别为16.00和37.00,P ＜0.01),HDAC9 mRNA在间歇期、轻度、中重度哮喘患者中的表达水平分别为3.20±0.50、89.6±18.0和323.0±65.3,呈逐渐上升趋势,各组间差异有统计学意义(H=11.32,P＜0.05).同时,哮喘患者总体血浆细胞因子IL-17表达水平为83±55,高于健康对照组的34±22(U=153.50,P＜0.01),而TGF-β表达水平下降趋势,组间无统计学差异.HDAC9 mRNA表达水平与GATA3 mRNA表达水平呈正相关(r =0.482,P＜0.05),与IL-4 mRNA表达水平呈正相关(r=0.432,P＜0.05),与IL-17水平呈现正相关(r=0.538,P＜0.05),与TGF-β表达水平呈负相关(r=-0.417,P＜0.05).在中重度哮喘患者中,HDAC9mRNA水平与肺功能FEV1占预计值％呈负相关(r=-0.657,P＜0.05).结论 哮喘患者PBMCs中HDAC9mRNA表达水平随病情严重程度逐渐升高,其升高不仅与哮喘发病相关的Th2细胞特征性转录因子GATA3、细胞因子IL-4 mRNA表达水平以及Th17、Treg分泌的细胞因子水平密切相关,且与哮喘患者FEV1占预计值％密切相关.     

哮喘患者外周血单个核细胞IL-23/Th-17轴及相关因子mRNA的表达与临床意义

目的:探讨哮喘患者外周血单个核细胞(PBMCs)中白细胞介素23(IL-23)、白细胞介素17(IL-17)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、转化生长因子β(TGFβ)、Foxp3(Foxp3)基因mRNA的表达及其临床意义。方法:以实时定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分别检测68例急性发作期哮喘患者及60例健康体检者PBMCs中IL-23、IL-17、TNFα、TGFβ、Foxp3基因mRNA的表达情况,并进一步分析其内在关联性。结果:与对照组相比,哮喘急性发作期患者PBMCs中的IL-23和TNFα mRNA表达水平显著增高(P0.05),TGFβ mRNA表达水平显著下降(P0.05);而IL-17、Foxp3 mRNA表达水平差异无统计学意义(P0.05);TNFα表达水平分别与IL-17、IL-23呈正相关性,而Foxp3与TGFβ呈正相关性;IL-23 mRNA水平与哮喘患者病程、疾病严重程度和疾病控制程度存在一定关联性。结论:IL-23/Th-17轴在哮喘炎症反应过程中可能发挥潜在的重要作用,IL-23与哮喘的严重程度密切相关,有望作为其治疗监测、预后转归的潜在生物评价指标。     

哮喘患者外周血单个核细胞NOD2 mRNA表达的研究

目的探讨外周单个核细胞NOD2 mRNA表达在哮喘发病机制中的作用以及与气道炎症的关系。方法将60例哮喘患者分为急性发作组和慢性持续期组,每组30人,经治疗症状体征好转后,作为临床缓解期组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法和酶联免疫吸附测定(ELISA)法分别检测哮喘各组及健康对照组30人外周血单个核细胞核内NOD2 mRNA的表达量及血清IL-6的含量。结果急性发作期哮喘患者的NOD2 mRNA的表达量及IL-6的含量均明显高于慢性持续期哮喘患者(P0.05)。急性发作期和慢性持续期哮喘患者的NOD2 mRNA的及IL-6的表达,均明显高于健康对照组(P0.05)。急性发作期和慢性持续期哮喘患者经治疗后的NOD2 mRNA及IL-6的表达较各自治疗前水平明显降低,且均高于健康对照组水平,具有统计学意义(P0.05)。哮喘患者外周血单个核细胞核内NOD2 mRNA表达随血清IL-6含量呈正相关,相关系数r=0.85,P0.05。结论 NOD2和IL-6都参与了哮喘的气道炎症反应,且与哮喘患者的严度程度呈正相关。     

IL-4、IL-8和IL-10在支气管哮喘和慢性阻塞性肺疾病中的对比研究

目的 比较支气管哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血IL4、IL-8和IL10的水平.方法 采用双抗体夹心法检测急性加重期和稳定期COPD患者各50例、急性发作期和缓解期哮喘患者各50例及50例健康志愿者血清中IL-4、IL-8、IL-10的水平.结果 两种疾病的急性发作期患者血清IL-4、IL-8水平均显著高于缓解期患者及对照组(P均＜0.05),血清IL-10水平显著低于缓解期患者和对照组(P均＜0.05).哮喘急性发作期患者血清IL-4水平显著高于COPD急性加重期患者(P＜0.05);IL-8和IL-10水平低于COPD急性加重期患者(P＜0.05).哮喘缓解期患者血清IL-10水平低于COPD缓解期患者(P＜0.05).结论 IL-4、IL-8和IL10参与了哮喘和COPD的气道炎症反应,IL4在哮喘的气道炎症形成中起重要的作用,而IL-8和IL-10为COPD的主要炎症因子.     

参麦注射液对支气管哮喘患者外周血Th17/Treg细胞的影响

目的 探讨参麦注射液对支气管哮喘(简称哮喘)患者外周血Th17/Treg细胞的影响及其意义.方法 选取山西医科大学第一医院呼吸科急性发作期、缓解期哮喘患者各25例,选取山西医科大学第一医院体检中心肺功能正常、激发或者舒张试验阴性的健康人25例作为对照组,分别使用1640培养液及参麦注射液进行干预处理.抽取晨起空腹静脉血5 ml,运用流式细胞仪对各组外周血Th17细胞、Treg细胞分别占CD4+的比例及Th17/Trcg细胞的比值进行比较,同时检测血清中IL-10因子的水平.结果 ①各组间干预前CD4+ Th17细胞/CD4+T细胞、CD4+ Th17细胞/CD4+ Treg细胞的比值,急性发作期组(3.05±1.27、1.49±1.78)高于缓解期组(2.38±0.93、0.61±0.24)及对照组(1.19±0.39、0.30±1.14),差异有统计学意义(P＜0.05),缓解期高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);CD4+Treg细胞/CD4+T细胞的比值,对照组(5.20±3.26)高于缓解期组(3.99±0.90)及急性发作期组(2.76±0.93),差异有统计学意义,(P＜0.05),缓解期组高于急性发作期组,差异有统计学意义(P ＜0.05).血清中IL-10因子的水平,对照组(5,28±1.31)高于缓解期组(4.46±0.83)及急性发作期组(3.90±0.64),差异有统计学意义(P＜0.05),缓解期组高于急性发作期组,差异有统计学意义(P ＜0.05).②同一组间CD4+ Th17细胞/CD4+T细胞、CD4+Th17细胞/CD4+ Treg细胞的比值,干预前高于干预后,差异有统计学意义(P＜0.05).CD4+ Treg细胞/CD4+T细胞的比值,干预后高于干预前,差异有统计学意义(P＜0.05).血清中IL-10因子水平,干预后高于干预前,差异有统计学意义(P ＜0.05).结论 哮喘患者外周血中存在Th17/Treg细胞失衡,参麦注射液可以改善哮喘患者的Th17/Treg细胞失衡.     

支气管哮喘患者血清白细胞介素18和33水平的变化及其临床意义

目的 检测支气管哮喘(简称哮喘)急性发作期患者糖皮质激素治疗前后血清IL-18和IL-33水平的变化,探讨IL-18和IL-33在哮喘发病机制中的作用.方法 选择2009年6月至2010年10月大连医科大学附属第二医院呼吸内科收治的中～重度哮喘急性发作患者30例作为哮喘组,体检中心的23例健康体检者作为对照组,两组受试者均无吸烟史.哮喘组患者均静脉滴注甲泼尼龙(40 ～80 mg/d)治疗3～5d,同时配合雾化吸入布地奈德治疗1～2周.分别检测哮喘组治疗前后及对照组血清IL-18和IL-33的水平,同时检测免疫球蛋白E(IgE)、嗜酸粒细胞(EOS)数量及肺功能[包括FEV1占预计值％(FEV1％)]等,比较哮喘组治疗前后IL-18和IL-33水平的变化及其与对照组之间的差异,分析其与IgE、EOS和FEV1％等指标的相关性.结果 哮喘组治疗前血清IL-18和IL-33水平[分别为(300±181)ng/L和(208 ±95) ng/L]均高于对照组[分别为(158±45) ng/L和(143±32) ng/L],差异有统计学意义(t值分别为3.67和3.51,均P＜0.05),与IgE和EOS变化一致(t值分别为5.76和5.24,均P＜0.05).哮喘组治疗后血清IL-18和IL-33水平[分别为(183±83)ng/L和(148±77) ng/L]均低于治疗前,差异有统计学意义(t值分别为5.42和12.09,均P＜0.05),与IgE和EOS变化一致(t值分别为11.87和4.56,均P＜0.05),但哮喘组治疗后FEV1％水平为(81±16)％,高于治疗前的(54±14)％,差异有统计学意义(t=-7.81,P＜0.05).Pearson相关分析显示,IL-18和IL-33分别与IgE和EOS呈正相关(均P＜0.05);而与FEV1％呈负相关(均P＜0.05).结论 IL-18和IL-33在哮喘急性发作过程中具有促进炎症反应的作用.     

支气管哮喘不同发作状态时人类白细胞抗原DPB1基因mRNA表达量的变化研究

目的应用实时荧光定量RT-PCR方法检测支气管哮喘急性发作期患者和缓解期患者人类白细胞抗原-DPB1(human leukocyte antigen-DPB1,HLA-DPB1)基因mRNA定量表达情况,探讨HLA-DPB1基因的表达量与支气管哮喘发作状态之间的相关性。方法抽取43例支气管哮喘急性发作期患者、17例支气管哮喘缓解期患者以及34例健康对照者外周血各2ml,Trizol试剂提取外周血白细胞总RNA,利用随机引物逆转录总RNA成cDNA,根据HLA-DPB1第二外显子序列设计序列特异性引物,实时荧光定量PCR检测其mRNA的定量表达情况,以人磷酸甘油醛脱氢酶(g1ucera1dehyde phosphatedehydrogenase,GAPDH)基因为内对照,统计分析三组间差异,P<0.05(双侧)表示差异有显著性。结果HLA-DPB1基因mRNA在支气管哮喘急性发作期、支气管哮喘缓解期以及健康对照组定量表达的情况经过单因素方差分析,其模板cDNA量对数值在支气管哮喘急性发作期患者组为4.243±0.957,支气管哮喘缓解期患者组为2.709±0.629,健康对照组为2.295±0.698。支气管哮喘急性发作期患者组HLA-DPB1基因mRNA表达明显高于健康对照组和支气管哮喘缓解期患者组(P<0.01);支气管哮喘缓解期患者组表达量与健康对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论HLA-DPB1基因在支气管哮喘急性发作期患者中表达明显增高,与支气管哮喘患病状态有相关性。     

支气管哮喘患者外周血巨噬细胞移动抑制因子的表达及意义

目的 观察巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)在支气管哮喘(简称哮喘)患者外周血中的表达水平及其意义.方法 应用酶联免疫吸附试验法和荧光定量PCR技术,测定56例哮喘患者(哮喘组)和34名健康对照者(正常对照组)外周血MIF的表达水平.根据临床症状和肺功能检查将哮喘患者分为发作期组和缓解期组,其中发作期组32例,缓解期组24例,并对结果进行统计学处理.结果 血浆MIF的浓度和外周血单个核细胞MIF mRNA的表达水平:哮喘组高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);哮喘发作期组高于缓解期组,差异有统计学意义(P<0.05);但缓解期组与正常对照组之间差异无统计学意义.结论 MIF可能参与哮喘的病理过程并发挥重要作用,哮喘患者发作期组血MIF mRNA表达及血MIF水平显著增高,其变化可反映疾病的活动性.     

粉尘螨抗原对支气管哮喘患者外周血单个核细胞T-bet和GATA-3及FOXP3 mRNA表达水平的影响

目的 对支气管哮喘(简称哮喘)患者外周血单个核细胞(PBMC)经粉尘螨刺激前、后T-bet mRNA、GATA-3 mRNA、FOXP3 mRNA的表达水平及相互关系进行研究.方法 选择25例哮喘患者和15名健康人为研究对象,每例受试者又分为变应原刺激组和未经变应原刺激的自体对照组,采用半定量-逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组受试者PBMC培养后T-bet mRNA、GATA-3mRNA、FOXP3 mRNA的表达水平.结果 哮喘患者PBMC中FOXP3、T-bet的表达水平分别为0.3±0.4、0.42±0.24,与健康人(0.4±0.3、0.39±0.37)比较差异无统计学意义(t值分别为0.78、0.38,P均＞0.05),哮喘患者GATA-3(1.0±0.3)的表达与健康人(0.8±0.3)比较差异有统计学意义(t=2.27,P＜0.05);健康人PBMC经变应原刺激后FOXP3的表达(0.72±0.61)与未经变应原刺激的自体对照组(0.27±0.21)比较差异有统计学意义(t=3.12,P＜0.01);而T-bet、GATA-3的表达分别为0.3±0.4、0.9±1.0,与未经变应原刺激的自体对照组(0.3±0.6、0.8±0.6)比较差异无统计学意义(t值分别为0.27、0.77,P均＞0.05);哮喘患者PBMC经变应原刺激后T-bet、GATA-3的表达分别为0.49±0.42、2.1±1.7,与未经变应原刺激的自体对照组(0.16±0.06、0.6±0.3)比较差异有统计学意义(t值分别为3.72、5.15,P均＜0.01);但哮喘患者PBMC中经变应原刺激后FOXP3的表达为0.5±0.4,与未经变应原刺激的自体对照组(0.4±0.4)比较差异无统计学意义(t=1.60,P＞0.05);经变应原刺激后哮喘患者PBMC中△T-bet、△GATA-3、△FOXP3的表达分别为0.33±0.39、1.58±1.44、0.11±0.32,与健康人(0.03±0.40、0.11±0.53、0.43±0.66)比较差异有统计学意义(t值分别为2.30、3.79、2.08,P分别＜0.05、＜0.01、＜0.05);哮喘患者△FOXP3与△GATA-3、△T-bet表达水平呈负相关(r值分别为-0.62、-0.46,P分别＜0.01、＜0.05).结论 哮喘患者经变应原刺激后,既存在Th2特定转录因子GATA-3的优势表达,也存在Th1特定转录因子T-bet的优势表达,同时还存在调节性T淋巴细胞(Treg)特定转录因子FOXP3的表达低下.     

诱导支气管哮喘患者痰中IL-25、TSLP指标改变的临床价值

目的 研究诱导支气管哮喘（简称哮喘）患者痰中IL-25、胸腺基质淋巴细胞生成素（thymic stromal lymphopoietin,TSLP）指标改变的临床价值.方法 选取2012年10月至2013年12月泰山医学院附属医院就诊的哮喘患者52例作为哮喘组,另取52例健康查体者为正常对照组.按照常规方法收集诱导痰标本,应用酶联免疫吸附法（ELISA）对两组痰中IL-25以及TSLP水平进行检测,对比两组的水平差异.同时对于哮喘组患者均行抗炎药物治疗15d左右之后,检测外周血单核细胞（PBMCs）中的CD40、CD80、CD86表达水平,进行治疗前后两组表达水平.结果 哮喘组患者诱导痰中TSLP以及IL-25水平分别为（2.49±0.46） μg/L,（294.38±79.84） ng/L,均显著高于对照组的（1.45±0.36） μg/L和（181.38土56.73）ng/L,差异均有统计学意义（P＜0.05）.哮喘患者治疗后PBMCs中CD40、CD80、CD86的表达分别为（18.9±3.6）,（30.9±2.9）及（38.7±4.5）,均显著低于治疗前的（29.1±4.7）,（30.9±2.9）及（38.7±4.5）,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 诱导哮喘患者痰中IL-25、TSLP指标改变的临床价值极高,为今后的哮喘治疗提供了新途径.     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

Lack of correlation of degree of villous atrophy with severity of clinical presentation of coeliac disease

BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.