来曲唑与三苯氧胺对人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP生长及耐药的影响

目的:研究来曲唑(letrozole,LTZ)与三苯氧胺(tamoxifen,TAM)对人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP生长及耐药的影响。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法,比较不同浓度的LTZ、TAM、LTZ+TAM对SKOV3/DDP细胞生长及对顺铂(cisplatin,DDP)耐药的逆转作用。结果:①不同浓度(1×10-9mol/L～1×10-4mol/L)LTZ或低浓度(1×10-9mol/L～1×10-7mol/L)TAM对SKOV3/DDP细胞生长无抑制,不能逆转DDP引发的耐药。高浓度(1×10-6mol/L～1×10-4mol/L)TAM能抑制SKOV3/DDP细胞的生长且能逆转DDP引发的耐药,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。②1×10-6mol/L TAM与各浓度(1×10-9mol/L～1×10-4mol/L)LTZ联合用药,对该细胞的生长抑制作用及逆转DDP引发的耐药较单用1×10-6mol/L TAM无明显增强,差异无统计学意义(P>0.05);(1×10-5mol/L～1×10-4mol/L)TAM与各浓度(1×10-9 mol/L～1×10-4 mol/L)LTZ联合用药,在LTZ为(1×10-6 mol/L～1×10-4 mol/L)时,两药联合对该细胞的生长抑制作用与单用TAM(1×10-5mol/L～1×10-4mol/L)及组间相比差异有统计学意义(P<0.01);在LTZ为(1×10-5mol/L～1×10-4mol/L)时,两药联合逆转DDP引发的耐药与单用TAM(1×10-5mol/L～1×10-4mol/L)逆转及组间相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:高浓度TAM可以逆转SKOV3/DDP细胞对DDP的耐药性;高浓度LTZ与TAM联合可使TAM逆转SK-OV3/DDP细胞对DDP耐药的作用增强。     

番茄红素对人胃癌细胞生长的抑制作用

目的通过体外试验研究番茄红素对人胃癌(SGC)-7901细胞生长的作用。方法将番茄红素作用于人胃癌SGC-7901细胞,四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法测定半数抑制浓度(IC50),细胞计数法和集落形成试验检测细胞生长抑制率,3H胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入试验测定对细胞DNA合成的影响,倒置显微镜下观察人SGC-7901的形态变化。结果番茄红素作用于人SGC-7901细胞后,细胞生长明显受到抑制,24,48,72,96,120,148和172 h的IC50分别为1.0×10-4,9.2×10-5,2.6×10-5,4.8×10-5,3.5×10-5,4.3×10-5和3.1×10-5mol/L。0.3×10-4,0.5×10-4,10-4mol/L的番茄红素对人SGC-7901 7 d的抑制率分别为64.75%,79.02%,87.13%,SGC-7901的集落形成率分别为(30.2±1.9)%,(22.0±2.1)%,(16.9±2.0)%。番茄红素作用于人SGC-7901 48 h的3H-TdR掺入量分别为(3757.06±114.27),(3148.24±190.23),(2408.32±155.83)cpm,显著低于阴性对照组的(5470.25±217.16)cpm(P<0.01)。不同剂量的番茄红素处理后的细胞变圆,变小,脱落,排列稀疏,部分细胞内出现大小不等的空泡。结论番茄红素在体外能明显抑制人SGC-7901细胞增殖,且存在剂量-效应关系。     

不同价态锰对SH—SY5Y细胞凋亡作用的影响

[目的 ]探讨不同价态锰对SH SY5Y细胞凋亡的作用。 [方法 ]采用流式细胞技术和透射电镜技术 ,选用多巴胺能神经细胞SH SY5Y细胞作为体外测试体系 ,观察Mn2 和Mn3 ( 0 5～ 2mmol/L)对细胞凋亡的诱导作用及对多巴胺 (DA)含量的影响。[结果 ]Mn2 与细胞作用 48和 72h后 ,可见明显的凋亡峰 ;而Mn3 作用 2 4h后 ,便可出现明显的凋亡峰。电镜下可观察到细胞质空泡化 ,胞浆内质网扩张 ;Mn3 对细胞结构的破坏程度较Mn2 的大。Mn3 ,Mn2 均可降低SH SY5Y细胞的DA含量 ,Mn3 组降低的程度更为明显。 [结论 ]Mn3 对SH SY5Y细胞的毒性高于Mn2 。     

溴氰菊酯对原代培养大鼠星形胶质细胞存活率和胞内游离钙浓度的影响

目的　观察溴氰菊酯 (DM)对原代培养大鼠神经星形胶质细胞存活率及胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)的影响。方法　以锥虫蓝染料排斥试验检测细胞染DM后存活率的变化 ;以Fura 2 /AM为荧光指示剂 ,RF 5 30 1PC荧光分光光度计测定细胞内 [Ca2 + ]i的变化。结果　 1× 10 -5mol/L组染毒DM 72h后细胞存活率下降为 91.9% ,与对照组的差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,1× 10 -4mol/L组DM染毒4、12、4 8、72h后细胞存活率分别为 89.0 %、84 .8%、81.2 %和 79.2 % ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;1× 10 -7、1× 10 -6、1× 10 -5mol/L组DM染毒 5min后胞内 [Ca2 + ]i分别上升至 (45 1.4± 4 2 .3)、(5 36 .9± 4 7.5 )、(870 .9± 10 0 .5 )nmol/L ,与染毒前及对照组比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。以后各染毒组胞内 [Ca2 + ]i逐渐下降 ,15min时 1× 10 -8、1× 10 -7、1× 10 -6、1× 10 -5mol/L染毒组胞内 [Ca2 + ]i分别降至 (12 4 .3± 6 .0 )、(131.3± 19.1)、(118.9± 1.4 )、(136 .6± 3.8)nmol/L ,与染毒前及对照组比差异均有显著性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论　DM在体外可降低神经胶质细胞的存活率并短时升高胞内 [Ca2 + ]i。     

蔬菜粉提取物和β-胡萝卜素对人肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 :　探讨蔬菜粉脂溶性提取物 ( FEVP)、β-胡萝卜素对人肺癌细胞 YTMLC- 90增殖和凋亡的影响。方法 :　采用体外培养 ,细胞毒 ( MTT法 )试验、形态学、DNA凝胶电泳、流式细胞术等方法。结果 :　高、中、低浓度 FEVP(分别为相当于 β-胡萝卜素 2 .5× 1 0 -6、2 .5× 1 0 -7、5× 1 0 -8mol/L )和高、中浓度β-胡萝卜素 ( 1× 1 0 -4和 1× 1 0 -5mol/L)能显著抑制 YTMLC- 90细胞增殖。高、中浓度 FEVP和高浓度 β-胡萝卜素可显著抑制 YTMLC- 90细胞核分裂。高、中浓度FEVP、高浓度 β-胡萝卜素组细胞出现细胞核固缩 ,染色质凝聚 ;典型 DNA断裂梯状条带 ;细胞凋亡峰。这些现象符合细胞凋亡的特征。结论 :　蔬菜、β-胡萝卜素可能通过抑制细胞核分裂、诱导凋亡抑制人肺癌细胞增殖 ,有剂量反应关系 ,且蔬菜的作用比 β-胡萝卜素的作用强。     

叶酸在体外对人肝癌细胞株生长的影响

目的研究叶酸的抑癌防癌作用,用叶酸在体外对人肝癌细胞SMMC-7721进行处理.方法采用生长曲线法、MTT法研究叶酸对细胞的增殖和功能的影响;采用FCM进行细胞周期分析研究叶酸对细胞凋亡的影响.结果提示在叶酸浓度达13.5×10-5mol/L和40.5×10-5mol/L时对人肝癌细胞株的增殖和功能有抑制作用,40.5×10-5mol/L时引起的凋亡率可达27.3%.结论叶酸对脐静脉内皮细胞无抑制作用,表明叶酸对正常人体细胞无不良影响而对癌细胞有抑制作用.     

三邻甲苯磷酸酯对人成神经瘤SH-SY5Y细胞calpain活性的影响

目的研究三邻甲苯磷酸酯(TOCP)对人成神经瘤细胞(SH-SY5Y)calpain活性的影响。方法用全反式维甲酸诱导SH-SY5Y细胞分化,用不同浓度的TOCP(0、0.25、0.5、1.0mM)染毒未分化或分化的SH-SY5Y细胞不同时间(12、24、48h),用20μM盐酸维拉帕米(verapamil)和100μM二苯基硼酸-2-氨基乙酯(2-APB)预处理细胞15min后染毒TOCP 1.0mM 48h,采用荧光分光光度法测calpain活性。结果随着染毒浓度和时间的增加,TOCP活化未分化与分化的SH-SY5Y细胞calpain活性(P0.05),钙通道抑制剂verapamil和2-APB预处理细胞能抑制TOCP引起的calpain活性升高(P0.05)。结论 TOCP通过SH-SY5Y细胞内钙紊乱而活化calpain活性。     

蔬菜粉提取物对人肺癌细胞端粒酶活性的影响

目的 :　探讨蔬菜粉脂溶性提取物 (FEFVP)、β-胡萝卜素 (β-Car)对云锡矿工肺癌细胞YTMLC-90端粒酶活性的影响。方法 :　用 3∶ 7丙酮 -石油醚提取蔬菜粉 ,体外培养人肺癌细胞YTMLC-90 ,采用反转录 -聚合酶链反应 (RT-PCR)、聚合酶链反应端粒重复序列扩增法 (PCR-TRAP)检测端粒酶活性。结果 :　证实云锡肺癌细胞端粒酶阳性 ;高浓度的 FEFVP(相当β-胡萝卜素 2 .5× 1 0 - 6 mol/L)和 β-胡萝卜素 (1× 1 0 - 4mol/L)处理 48h,显著抑制 YTMLC-90细胞端粒酶活性 (P<0 .0 5 )。结论 :　高浓度的蔬菜粉脂溶性提取物和 β-胡萝卜素可抑制 YTMLC-90细胞端粒酶活性。     

苯并[a]芘对血管内皮细胞一氧化氮合酶表达的影响

目的　探讨苯并 [a]芘 (BaP)对内皮细胞一氧化氮合酶 (NOS)表达的影响。方法　培养猪主动脉血管内皮细胞 ,分别以不同浓度的BaP (0 ,0 1× 10 -6,0 5× 10 -6,1× 10 -6,5× 10 -6,10× 10 -6mol/L)染毒2 4h ,用Westernblot法检测诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)和内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)的改变。结果　基础状态下 ,主动脉血管内皮细胞iNOS有微量表达 [蛋白质条带扫描定量的光密度 (A)为 1 0 87],随BaP浓度 (0 1× 10 -6,0 5× 10 -6,1 0× 10 -6,5 0× 10 -6mol/L)的升高 ,iNOS表达量逐渐升高 (A值分别为2 0 784 ,19 4 15 ,33 714 ,5 5 2 19) ,iNOS表达水平与BaP浓度呈一定的线性剂量 -反应关系。而eNOS (A值为 7 6 2 5 )在基础状态下的表达水平高于iNOS ,随BaP浓度 (0 1× 10 -6,0 5× 10 -6mol/L)的升高eNOS表达量也逐渐升高 (A值分别为 8 5 36 ,17 2 5 3) ,在BaP浓度为 1 0× 10 -6mol/L时eNOS的表达呈高峰 (A值为4 9 2 4 2 ) ,然后随BaP浓度 (5 0× 10 -6,10 0× 10 -6mol/L)增高而快速降低 (A值分别为 33 16 3,14 4 2 4 ) ,其表达水平与BaP浓度呈“偏峰”型。结论　BaP可激活NOS ,iNOS表达水平与BaP浓度呈一定的剂量 -反应关系 ,高浓度BaP抑制eNOS的表达。     

硒对氧自由基引起大鼠脑线粒体损伤的影响

目的探讨硒对氧自由基引起的大鼠脑线粒体损伤的影响.方法采用Fe2+-半胱氨酸(Cys)为氧自由基生成系统,在体外模仿脑出血或脑外伤引起的氧自由基损伤模型,观测不同浓度(5.0×10+-5～5.0μmol/L)亚硒酸钠对Fe+2+-Cys致损伤脑线粒体的肿胀程度、膜流动性、MDA含量以及线粒体形态结构的影响.结果低浓度硒(5.0×10+-4～5.0×10+-2μmol/L)可明显防止氧自由基对线粒体的损伤,高浓度硒(0.5～5.0μmol/L)则产生毒性作用,二者均至剂量-效应关系.结论低浓度硒有利于延缓衰老和防治某些神经系统疾病.     

三邻甲苯基磷酸酯对人成神经瘤SH-SY5Y细胞分化的影响

目的观察三邻甲苯基磷酸酯（Tri-ortho-cresyl phosphate,TOCP）对人成神经瘤SH-SY5Y细胞形态分化的影响,为更全面的了解TOCP的毒性提供依据。方法选用人成神经瘤细胞SH-SY5Y为细胞模型,以全反式维甲酸（ATRA）为诱导分化工具药物,在诱导中以及诱导后以不同浓度TOCP作用,动态观察SH-SY5Y细胞形态学变化,台盼蓝拒染法检测死亡细胞百分比。结果 ATRA对SH-SY5Y细胞作用7 d可导致细胞出现长出较长突起的分化特征,在诱导分化过程中及诱导分化后以不同剂量TOCP作用于细胞,各剂量组与对照组相比,无论是突起长度还是分化细胞比例差异均有统计学意义（P〈0.05）,其中,0.6 mmol/L组抑制效果最强。结论 TOCP可抑制SH-SY5Y细胞的分化,并呈现一定时间和剂量依赖关系。     

7-硝基吲唑对氟致SH-SY5Y细胞凋亡及一氧化氮合成酶含量的影响

目的探讨神经元型一氧化氮合成酶(nNOS)抑制剂7-硝基吲唑(7-nitroindazole,7-NI)对氟致体外培养细胞生长、凋亡保护作用的机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,在培养液中加入不同浓度Na F(0、0.02、0.2、2.0、4.0 mmol/L),分别培养24、48、72 h,同时在各组细胞培养液中联合应用7-NI(10~(-4)、10~(-3)、10~(-2) mmol/L);于倒置显微镜下观察细胞生长,以CCK-8试剂盒方法检测细胞存活率,以比色法和硝酸还原酶法测定细胞培养液中NO含量及NOS活力,以流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果与对照组比较,氟浓度为0.2 mmol/L(低氟组)和2.0 mmol/L(高氟组)时,24、48、72 h后细胞存活率分别下降至(83.76±1.04)%,(70.27±1.20)%,(54.40±0.98)%和(52.17±1.07)%,(40.60±1.11)%,(29.50±1.40)%。10~(-4)mmol/L 7-NI可刺激细胞增殖,24 h细胞存活率为(105.96±3.44)%;10~(-3) mmol/L 7-NI处理细胞24 h后的细胞存活率为(100±2.30)%;10~(-2) mmol/L 7-NI可使细胞存活率下降,24 h细胞存活率为(88.64±4.75)%。10~(-4)、10~(-3)、10~(-2) mmol/L 7-NI处理细胞24 h后细胞培养液中NO含量、NOS活力均降低,分别为(1.156±0.356)、(0.958±0.074)、(0.672±0.188)μmol/L和(0.403±0.089)、(0.398±0.010)、(0.103±0.076)U/ml。高剂量(10~(-2) mmol/L)7-NI组的SH-SY5Y细胞凋亡指数升高至(8.7±2.3)%,高于对照组(P0.05);低剂量(10~(-4)、10~(-3) mmol/L)7-NI组的凋亡指数分别为(0.6±0.4)%和(1.0±0.2)%,与对照组差异无统计学意义(P0.05);低剂量7-NI组凋亡指数低于高剂量组,差异有统计学意义(P0.05)。染氟24、48、72 h后细胞培养液中NO含量及NOS活力升高,低氟组的NO含量、NOS活力分别为(3.074±0.160)、(5.604±1.374)、(10.173±1.307)μmol/L和(0.743±0.122)、(0.959±0.054)、(1.446±0.12)U/ml,高氟组分别为(8.974±0.919)、(14.729±1.241)、(20.976±0.712)μmol/L和(1.086±0.024)、(1.728±0.130)、(2.583±0.192)U/ml,高于对照组[(1.320±0.280)、(2.420±0.658)、(2.867±0.662)μmol/L,(0.452±0.012)、(0.517±0.072)、(0.607±0.013)U/ml],差异有统计学意义(P0.05)。与氟单独处理组相比,NaF联合应用7-NI后,各组NO含量及NOS活力均下降,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,氟可使SH-SY5Y细胞凋亡指数升高,差异有统计学意义(P0.01),并随着氟染毒剂量及时间的增加,细胞凋亡指数随之增加;联合应用7-NI后,各组细胞凋亡指数下降,差异有统计学意义(P0.01)。氟可使SH-SY5Y细胞数量减少,形态变为圆形、不规则形,细胞存活率降低;低剂量(10~(-4)、10~(-3) mmol/L)7-NI组在相同视野下细胞数增加,高剂量(10~(-2) mmol/L)7-NI组细胞数明显减少,大部分细胞呈圆形或不规则形。结论氟中毒所致细胞凋亡可能与NOS活力和NO含量升高有关,7-NI可降低细胞凋亡指数。     

大豆异黄酮和玉米赤霉烯酮对卵巢癌细胞株PEO4增殖的影响

目的 通过观察大豆异黄酮(genistein,GS)和玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)对卵巢癌细胞(PEO4)增殖的影响探讨其雌激素效应。方法 雌激素受体阳性卵巢癌细胞株PEO4在达克尔培养基(DMEM,含小牛血清10％)中采用开放式单层贴壁培养,于加受试物5d前将细胞用磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤后改在无酚红高糖DMEM(含活性碳-葡聚糖苷处理过的胎牛血清5％)中培养,实验设溶剂对照、雌激素对照、抗雌激素对照和2种受试物各4个剂量组,采用噻唑蓝法、^3H—TdR掺人法及流式细胞术对PEO4细胞的增殖情况进行分析。结果 与溶剂对照组相比较,96μmol/L对PEO4处理24h,可明显抑制PEO4细胞增殖和细胞DNA合成,并将细胞周期阻滞在G2／M;随着培养时间延长至48h,32μmol/L GS也能明显抑制PEO4细胞增殖,在浓度低于8μmol/L时,GS有促进细胞增殖的趋势。ZEA对PEO4增殖的影响与雌二醇类似,96nmol/L ZEA对细胞处理24h可明显促进PEO4细胞增殖和细胞DNA合成,并将细胞周期由G0／Gl向S期推进,提高细胞分裂增殖指数。结论 ZEA具有较强的雌激素效应,在较低的浓度条件下(8nmol/L,92h)即可促进雌激素受体阳性细胞PEO4的增殖作用;GS对PEO4细胞的影响作用比较复杂,较低浓度的GS(＜10nmol／L)促进细胞的增殖作用,而在高浓度的处理条件下则抑制细胞的增殖作用。这些资料提示高剂量的GS有抗卵巢癌的作用,而ZEA具有雌激素样效应。     

二(噁)英对成骨肉瘤细胞的凋亡及胰岛素样生长因子结合蛋白6表达的影响

目的 探讨二(噁)英(TCDD)对调控成骨肉瘤细胞(SaOS-2)凋亡和胰岛素样生长因子结合蛋白6(insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6)基因表达的影响.方法 应用1×10-9、1×10-8、1×10-7 mol/L浓度的TCDD作用于SaOS-2细胞株,采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测TCDD对SaOS-2细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测SaOS-2细胞株细胞凋亡率,采用对硝基酚磷酸盐法测定SaOS-2细胞内碱性磷酸酶(ALP)的活力,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量分析SaOS-2中IGFBP-6 mRNA的表达,采用Western印迹杂交鉴定SaOS-2中IGFBP-6蛋白的表达.结果 在1×10-9、1×10-8、1×10-7 mol/L TCDD浓度下SaOS-2的增殖指数分别为18.4±4.5、22.5±3.6、29.4±4.2,SaOS-2 ALP的活力分别为1.12±0.28、1.58±0.14、1.96±0.17 U/mg Pro,均高于对照组;且1×10-7、1×10-8 mol/L组与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);1×10-7 mol/LTCDD浓度组的细胞凋亡率明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).3个不同浓度组的mRNA表达和1×10-7 mol/L TCDD组蛋白的表达均明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 低浓度的TCDD对SaOS-2的凋亡代谢具有拮抗作用.TCDD对SaOS-2内IGFBP-6基因表达的抑制效应,可能是TCDD参与骨肿瘤发生及生长的作用机制之一.     

三种增塑剂对乳腺癌细胞株MCF-7增殖的影响

目的　观察对 壬基酚 (NP)、双酚A(BisA)和邻苯二甲酸酯二丁酯 (DBP)对乳腺癌细胞株MCF 7增殖的影响。方法　将MCF 7细胞在达尔克 (DMEM)培养液 (含 10 %小牛血清 )中采用开放式单层贴壁培养 ,开始实验前将培养细胞用磷酸盐缓冲液 (PBS)洗涤后改在无酚红DMEM (含 5 %胎牛血清 )中培养继续 4d以耗尽其内源性雌激素。实验设溶剂对照、雌激素对照、抗雌激素对照及 3种受试物各 4个剂量组 ,采用噻唑蓝 (MTT)法、3 H TdR掺入法及流式细胞术对MCF 7细胞的增殖情况进行分析。结果　与对照组相比 ,NP、BisA和DBP对细胞处理 2 4h ,分别在 96× 10 -7mol/L、96× 10 -7mol/L、96× 10 -6mol/L可促进MCF 7细胞增殖和细胞DNA合成 ,并推进G0 /G1期细胞进入S期 ,提高细胞增殖指数 ;随着培养时间延长至 96h ,3种化合物在较低浓度条件下也表现促进细胞增殖的效果。结论　对 壬基酚、双酚A和邻苯二甲酸酯二丁酯可促进雌激素依赖性乳腺癌细胞MCF 7的增殖 ,可能具有雌激素样作用。     

磷酸三邻甲苯酯诱导少突胶质细胞空泡样变及突起变性损伤

目的研究磷酸三邻甲苯酯（tri-ortho-cresyl phosphate，TOCP）处理是否对培养鸡少突胶质细胞产生直接损伤。方法利用细胞培养结合四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）试验，观察TOCP不同剂量处理鸡大脑皮质少突胶质细胞形态及突起的时间-效应关系。结果TOCP能导致培养成熟少突胶质细胞突起出现空泡状膨出、不连续继而逐渐消失，最后胞体周围只见点状颗粒沉积，胞体开始出现空泡样变，继而被多个空泡状结构占据。在0．5～1．5μg／ml浓度范围内存在明显的剂量-效应关系。MTT试验结果表明，TOCP能剂量依赖性抑制少突胶质细胞代谢速率。结论TOCP能直接作用于少突胶质细胞，引起突起变性损伤，胞体空泡样变；提示少突胶质细胞损伤可能与TOCP的迟发性神经病理损伤（OPIDN）发病机制有关。     

氟中毒对神经母细胞瘤细胞株尼古丁受体蛋白和基因表达的影响

目的 观察氟中毒对神经细胞中尼古丁受体亚单位蛋白和基因表达水平的影响及氟中毒引起尼古丁受体功能改变的发生机制。方法 体外培养人脑神经母细胞瘤细胞,在培养液中加入不同浓度的氟化物或加入抗氧化剂,培养48h后测定细胞3-4,5-二甲基噻唑-2,5-二酚基四唑溴化物(MTT)和蛋白氧化水平;用蛋白印记方法测定α3和α7尼古丁受体亚单位蛋白水平;用逆转录-聚合酶链反应方法测定尼古丁受体亚单位mRNA水平。结果 经氟处理的神经细胞中MTT水平降低,高浓度氟组比对照组低49％;蛋白氧化水平升高,高浓度氟组比对照组高72％;高浓度氟组神经细胞中α3和α7尼古丁受体亚单位蛋白含量分别比对照组减少51％和47％,但mRNA表达水平未见改变;用抗氧化剂处理可减弱氟中毒对尼古丁受体的损害。结论 氟中毒可引起神经母细胞瘤细胞受损,降低尼古丁受体蛋白水平,其机制与该受体的基因表达水平无关,但与自由基的损害有关。     

Neurotoxicity of organophosphorus and dithiocarbamate compounds

The neurotoxicity of organophosphorus compounds (OPs) including leptophos, TOCP and triphenyl phosphite and dithiocarbamate compounds were reviewed in this study. The major neurotoxicities of OPs were acute toxicity produced by the acetylcholine esterase (AChE) inhibiting action of OPs and delayed neurotoxicity produced by such OPs as leptophos and TOCP. The direct action of OP on the muscarinic and/or nicotinic acethylcholine receptors in the synaptic membranes have lately attracted attention in relation to acute toxicity. Delayed neurotoxicity is a delayed onset of prolonged locomotor ataxia resulting from a single or repeated exposure to an OP. Although neurotoxic esterase (NTE) inhibition might be related to the onset of organophosphate-induced delayed neurotoxicity (OPIDN), the precise mode of action is not yet clear. The effect of dithiocarbamates on the nervous system is also mentioned, because the compounds are currently suspected not only for neurotoxicity, but also as endocrine-disrupting chemicals. Although dithiocarbamates showed weak neurotoxicity in adult animals, we need to pay more attention to developmental neurotoxicity.     

PCB153对PBDE-47致SH-SY5Y细胞DNA损伤和修复基因表达的影响

目的探讨PCB153和PBDE-47单独及联合染毒对SH-SY5Y细胞DNA损伤及其修复基因表达的影响。方法设DMSO溶剂对照组,1、5、10μmol/LPBDE-47(低、中、高)单独染毒组和与5μmol/L PCB153联合染毒组及相应的抗氧化剂组(N-乙酰-L-半胱氨酸NAC100μmol/L),分别对SH-SY5Y细胞染毒24h。用单细胞凝胶电泳试验测定DNA损伤情况,用RealTime PCR检测DNA损伤修复酶XRCC1及XRCC3mRNA表达情况。结果中、高剂量单独染毒组和中、高剂量联合染毒组细胞尾部DNA百分率、Olive尾距均显著高于对照组(P<0.05),且呈现明显的剂量-效应关系,中、高联合染毒组细胞尾部DNA百分率、Olive尾距均显著高于相应的PBDE-47或PCB153单独染毒组(P<0.05),加入抗氧化剂后其细胞尾部DNA百分率及Olive尾距均明显下降(P<0.05),高剂量联合组对细胞DNA损伤具有交互作用(F=23.74,P<0.01);高剂量染毒组及中、高剂量联合染毒组XRCC1mRNA表达与对照组相比均明显下降(P<0.05),加入抗氧化剂后其XRCC1mRNA表达上升(P<0.05);高剂量单独和联合染毒组XRCC3mRNA表达与对照组相比均明显上升(P<0.05),加入抗氧化剂后可使XRCC3mRNA表达明显下降(P<0.05)。相关分析结果表明,细胞DNA损伤与XRCC1mRNA的表达呈负相关,与XRCC3mRNA的表达呈正相关(r分别为0.74,0.76,P<0.05)。结论一定剂量的PBDE-47可导致DNA损伤和影响DNA损伤修复基因的表达,PCB153可增强PBDE-47对细胞DNA的损伤作用,氧化应激可能在PBDE-47致DNA损伤过程中发挥了重要作用。     

氟化钠对成骨样细胞功能表达影响的研究

目的探讨氟对成骨样细胞功能表达的影响.方法用细胞生长曲线和四唑盐比色(MTT)法测定细胞增殖,对硝基苯基磷酸二钠盐比色(PNPP)法检测碱性磷酸酶(ALP)活性及放免法测定骨钙素分泌量,研究不同浓度(10-7mol/L～10-3mol/L)氟化钠(NaF)对成骨样细胞UMR106增殖和分化功能的影响.结果NaF对UMR106细胞增殖及早期分化呈双向调节作用,主要表现为低浓度促进,高浓度抑制.染氟一定时间后,与对照组相比10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L NaF组细胞增殖及ALP活性均增加(P＜0.05),而10-4mol/L、10-3mol/L NaF组则表现为抑制细胞增殖及ALP活性(P＜0.05).但是,NaF对UMR106细胞晚期分化呈单一作用,上述不同浓度的NaF均可促进骨钙素分泌,与对照组相比有统计学意义(P＜0.05).而且,随NaF浓度升高骨钙素分泌量增加.结论NaF对成骨样细胞的增殖呈双向调节,但对其分化因暴露时间和浓度不同而呈多样性.