克霉唑抗大鼠肝缺血再灌注损伤机制研究

目的 研究孕烷X受体(pregnane Xreceptor,PXR)介导克霉唑抗大鼠肝缺血再灌注损伤作用及其机制.方法 SD大鼠随机分成4组,分别为假手术组、缺血再灌注组、克霉唑低剂量组和克霉唑高剂量组.以谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(G...     

谷胱甘肽对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响

目的探讨缺血前经门静脉注射还原型谷胱甘肽(GSH)对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法20只雄性SD大鼠建立部分肝脏缺血再灌注损伤模型,随机分2组,每组10只:缺血再灌注组(IR组),还原型谷胱甘肽预处理组(GPC组)。测再灌注末血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及GSH含量。结果肝脏缺血45min再灌注40min后,GPC组血清ALT、AST、LDH、MDA含量明显低于IR组(P分别<0.05,0.01,0.01,0.01),而GSH含量明显高于IR组(P<0.01)。结论缺血前经门静脉注射还原型谷胱甘肽预处理可以有效减轻肝脏缺血再灌注损伤程度。其机制可能为增加血循环中GSH,减少肝组织及血循环中自由基含量。     

雌激素预处理增强肝缺血再灌注损伤大鼠雌激素受体表达

目的探讨雌激素预处理对肝缺血再灌注(I/R)损伤大鼠雌激素受体(ERα)表达的影响。方法采用Pringle法阻断大鼠第一肝门制作95%肝I/R模型。肝缺血前1 h大鼠ip给予雌二醇4 mg·kg-1(雌二醇+I/R组)。分别取肝缺血前(0)、再灌注1,3,6和24 h共5个时间点的血液标本,检测血清谷丙转氨酶(ALT)水平;ELISA法测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;HE染色观察肝组织形态学变化,免疫组化方法检测肝核因子κB(NF-κB)和ERα的表达。结果与假手术组相比,I/R模型组和雌二醇+I/R组血清ALT和TNF-α水平、肝组织NF-κB和ERα表达明显升高(P<0.01);与假手术组相比,再灌注6 h,I/R和雌二醇+I/R组血清ALT水平分别升高了11.7倍和8.1倍(P<0.01),TNF-α水平分别升高5.2倍和3.2倍(P<0.01),但雌二醇+I/R组升高幅度明显低于I/R组(P<0.05);与假手术组相比,再灌注6 h I/R组和雌二醇+I/R组肝组织NF-κB表达分别升高了8.6倍和4.8倍,但雌二醇+I/R组升高幅度明显低于I/R组(P<0.01);ERα表达分别升高了4.2倍和7.4倍,雌二醇+I/R组升高幅度明显高于I/R组(P<0.01);雌二醇+I/R组肝组织损伤明显轻于I/R组。结论雌激素预处理可减轻I/R导致的肝组织损伤程度,此作用与增强ERα表达有关。     

钙通道阻滞剂抗肝缺血—再灌注损伤作用机制的实验研究

目的 探讨钙通道阻滞剂（ＣＣＥＢ）对肝缺血一再灌注损伤（ＨＩＲＩ）防治作用的机制。方法制备家兔ＨＩＲＩ模型,动态观察维拉帕米（ＶＰ）和地尔硫卓（ＤＴ）对肝组织及血中黄嘌呤氧化酶（ＸＯ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性及脂质过氧化物（ＬＰＯ）浓度的影响。结果 ＶＰ组和ＤＴ组ＯＸ活性及ＭＤＡ含量分别显著低于对照组（均Ｐ＜０．０１）,而ＳＯＤ活性与对照组比较均无显著性差异（均 Ｐ＞ ０．０５）。结论 ＣＣＥＢ抗 ＨＩＲＩ的机制与其降低 ＸＯ活性、抑制脂质过氧化反应密切相关。     

肢体缺血预处理对大鼠肝缺血-再灌注损伤的延迟性保护作用

目的观察肢体缺血预处理(LIPC)对大鼠肝缺血-再灌注(I-R)损伤的延迟性保护作用。方法雄性SD大鼠36只,随机分为对照组(S组),I-R组,LIPC组,每组12只。S组仅行开腹,不作其他处理;I-R组行肝缺血1h,再灌注3h;LIPC组先行双后肢缺血5min,反复3次24h后行肝缺血1h,再灌注3h。手术完毕,腹主动脉采血用于检测总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)、血清ALT与AST;切取肝组织,测定肝脏的湿干比(W/D),免疫组化检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达,同时光电镜观察肝组织显微、超微结构的变化。结果与I-R组比较,LIPC组T-SOD活性增加(P<0.01),MDA水平、ALT、AST、W/D值及TNF-α的阳性表达均明显降低(P<0.01),肝脏的显微及超微结构损伤减轻。结论 LIPC对大鼠肝脏I-R损伤有明显的延迟性保护作用。其机制可能与增加机体抗氧化能力、抑制肝脏炎症反应、减轻肝脏水肿、抑制TNF-α的表达和改善肝组织微循环有关。     

丹参对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用机制的研究

目的：探讨丹参对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法：雄性Wistar大鼠随机分为4组,假手术组,模型组（肾脏缺血再灌注损伤）,治疗1组（肾脏缺血再灌注损伤前24h给予药物）,治疗2组（肾脏缺血再灌注损伤后12h给予药物）。双侧肾动脉夹闭22min,制作动物模型;比色法测定血清肌酐和血清尿素氮;Westernblotting检测肾脏组织中,天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（caspase-3）的蛋白表达;TUNEL法检测肾脏上皮细胞凋亡。结果：模型组与假手术组比较,大鼠肾脏功能明显减退（P〈0.05）;肾脏组织中,caspase-3蛋白质表达显著增加（P〈0.05）,大量肾小管上皮细胞凋亡（P〈0.05）。再灌注前24h给予药物,能够显著改善肾脏功能（P〈0.05）,并且显著下调caspase-3的蛋白表达（P〈0.05）,减轻肾脏上皮细胞凋亡（P〈0.05）,再灌注后12h给药,不能改善肾脏功能,也不能显著下调caspase-3的蛋白表达（P〉0.05）。结论：再灌注前给予丹参,能够抑制肾脏缺血再灌注损伤诱导的肾脏上皮细胞凋亡,对肾脏缺血再灌注损伤具有保护作用。     

黄芪抗缺血再灌注损伤研究进展

缺血再灌注损伤发生在溶栓治疗、动脉搭桥术、体外循环心脏手术、器官移植和休克治疗等进程中。它可引起再灌注心律失常、心肌舒缩功能障碍及脑、肾、肝、肺、肠等多脏器损伤,是影响缺血治疗效果的一个重要因素。黄芪是豆科植物,蒙古黄芪和膜荚黄芪以及同属近缘植物的干燥根,味甘,性微温,是常用的“扶正固本,补中益气”的中药材。近年来研究发现,黄芪能有效地对抗脏器缺血再灌注损伤。本文就有关研究概述如下。     

参麦及缺血预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究参麦注射液及缺血预处理对肝缺血再灌注损伤的保护作用.方法:64只Wistar大鼠随机分成4组:假手术组(sham-operation,SO);缺血再灌注组(ischemia reperfusion,IR);缺血预处理组(ischemic preconditioning,IPC);参麦组(Shengmai injection,SM).建立肝脏缺血再灌注损伤模型.SO组行剖腹假手术;IR、IPC、SM组于再灌注60 min 、90 min时分别随机取8只大鼠检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和白细胞介素6(IL-6),同时取肝组织制成匀浆检测金属硫蛋白(MT),SO组于相应时点取样检测相同指标.分析比较各组计量资料.结果:SM组及IPC组在再灌注60 min、90 min时ALT、AST、LDH、IL-6水平均低于IR组(P＜0.01),而金属硫蛋白水平均高于IR组.结论:参麦及缺血预处理对肝缺血再灌注损伤具有保护作用.     

丹参抗脑缺氧缺血／再灌注损伤机制的实验研究进展

丹参在临床治疗上广泛应用于心、脑、肝缺血／再灌注损伤的保护、调节免疫应答、抗感染等。其已知的脂溶性成分有丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ-A、丹参酮Ⅱ-B等，具有清除自由基、抗炎和钙离子拮抗作用；水溶性成分有儿茶酚、丹参酚和丹参素等，具有抗氧化、改善微循环及抗凝等作用。近年来，丹参在脑缺氧缺血／再灌注损伤的神经保护作用机制     

巯甲丙脯酸对实验性高血压大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用

为探讨巯甲丙脯酸（ｃａｎｔｏｐｒｉｌ）对高血压肥大心肌缺血－丙灌注的影响,本实验以造成大鼠腹主动脉狭窄的方法复制高血压模型,观察了应用巯甲丙脯酸的高血压大鼠肉体心脏缺血－再灌注的变化。结果显示未用药的高血压大鼠,离体心脏在缺血－再灌注后出现心肌细胞乳酸脱氢酶的漏出和丙二醛生成增加及组织钙含量增加等损伤性变化,而预先应用巯甲丙脯酸处理的高血压大鼠,乳酸脱氢酶和丙二醛增高的情况明显减轻,避免了钙在心肌内过多积聚。表明巯甲丙脯酸具有抗高血压肥大心肌缺血－再灌注损伤的作用。     

通心络对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用

目的 探讨通心络对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用。方法 将60只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、通心络低、中、高剂量组(0.3,0.6,1.2 g·kg^-1),每组12只。线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型,于缺血30 min后再灌注,24 h后进行神经行为学评分,采用TTC法测量脑梗死体积,HE染色观察脑组织的病理改变,免疫组化法观察Fas蛋白的表达。结果 与模型组比较,通心络低、中、高剂量组均能显著改善大鼠的神经系统损伤症状,缩小脑梗死灶,明显下调Fas蛋白的表达(P<0.01);并且通心络高剂量组与低剂量组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 通心络可通过抑制Fas蛋白的表达,减轻脑缺血后神经功能损伤,从而保护脑组织。     

刺芒柄花素对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及其机制研究

目的 研究刺芒柄花素（formoononetin,FOR）对脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia-reperfusion injury,I/R）大鼠的保护作用,并探讨其可能的机制。方法 SD大鼠50只,♂,分为假手术组、I/R组、FOR高、中、低剂量组（100,50,20 mg·kg^-1）。连续灌胃给药7 d后,除假手术组外均采用MCAO法造成大鼠脑缺血模型,2 h后拔出线栓,再灌注24 h后进行神经功能评分;跳台法检测大鼠学习记忆能力;HE染色法观测脑组织病理形态;ELISA法检测血清中NO表达及NOS活性水平;Western blot法检测脑组织中caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果 与I/R组相比,FOR高、中、低剂量组能显著降低大鼠神经功能评分（P<0.01）、提高大鼠学习记忆能力（P<0.05或P<0.01）、改善脑组织形态、降低血清中NO表达水平及NOS活性（P<0.01）、降低caspase-3蛋白和Bax蛋白的表达水平并提高Bcl-2的表达水平（P<0.01）。结论 刺芒柄花素对I/R大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与抗氧化应激和抗凋亡有关。     

依托咪酯对缺血再灌注大鼠心肌损伤的保护作用

目的 本文探讨依托咪酯(Etomidate)对缺血再灌注大鼠心肌损伤的保护作用及其机制。方法 将大鼠随机分为5组：假手术组(Ctrl组)、模型组(I/R组)、I/R+ Etomidate (5 mg)组、I/R+ Etomidate (10 mg)组和I/R+ Etomidate (20 mg)组,采用冠状动脉结扎法建立缺血再灌注(Ischemia Reperfusion, I/R)模型。治疗组腹腔注射对应剂量的依托咪酯,假手术组和模型组给予等量生理盐水,每天给药1次,连续14天。对大鼠心肌组织进行HE染色,观察心肌损伤情况;Elisa检测血清样本中心损标记物肌钙蛋白(Cardiac troponin I, cTnI)、肌酸激酶同工酶(Creatine kinase-MB, CK-MB)和肌红蛋白(Myoglobin, Mb)表达水平,以及氧化应激指标丙二醛(malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase, LDH)的含量;TUNEL染色检测心肌凋亡情况;蛋白印迹法检测心肌组织凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达情况,P65磷酸化及下游靶基因IL-1β和TNF-α的蛋白表达水平。结果 依托咪酯能改善缺血再灌注大鼠心肌损伤程度,并剂量依赖性的降低cTnI、CK-MB和Mb表达(P＜0.05),增加SOD活性(P＜0.05)、降低LDH和MDA含量(P＜0.05),下调Bax(P＜0.05)、增加Bcl-2蛋白表达(P＜0.05),降低心肌凋亡水平(P＜0.05),抑制NF-κB p65的磷酸化(P＜0.05)及下游靶基因IL-1β、TNF-α的蛋白表达水平(P＜0.05)。结论 依托咪酯对缺血再灌注大鼠的心肌损伤起到保护作用,其机制与缓解氧化应激及抑制NF-κB p65的磷酸化相关。     

白细胞介素-32在大鼠肾脏缺血再灌注损伤中的作用及其机制

目的:探讨白细胞介素-32(Interleukin,IL-32)在大鼠肾缺血再灌注(ischemia-reperfusion injury,IRI)损伤中的作用及其机制。方法:80只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(S组,n=20)、缺血再灌注组(I/R组,n=20)、缺血前IgG抗体预处理组(IgG+I/R组,n=20)和缺血前IL-32抗体预处理组(Anti-IL-32+I/R组,n=20)。采用夹闭双侧肾蒂30min后恢复血供的方法制备肾脏缺血再灌注损伤模型,再灌注3h、6h、12h、24h分别处死大鼠收集血样和肾脏样本,自动生化分析仪测定血清中肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)浓度,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清IL-32、TNF-α、IL-1β的表达,化学比色法检测肾组织髓过氧化物酶(MPO)的活性。结果:与S组比较:1、血清Cr、BUN浓度,I/R、IgG+I/R组均显著升高(P0.05),Anti-IL-32+I/R组无显著性差异(P0.05);2、血清IL-32、TNF-α、IL-1β水平,I/R、IgG+I/R组均显著升高(P0.05),Anti-IL-32+I/R组无显著性差异(P0.05);3、肾组织MPO活性,I/R、IgG+I/R组显著增强(P0.05),Anti-IL-32+I/R组无显著性差异(P0.05)。结论:IL-32在肾脏缺血再灌注损伤后的大鼠血清中高表达,阻断IL-32能减少炎症因子释放、抑制中性粒细胞聚集,减轻肾功能损害。     

姜黄素对兔心肌缺血再灌注损伤的影响

目的:探讨姜黄素(curcumin)预处理对兔心肌缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)的影响。方法:将40只新西兰大白兔随机分为两组:处理组(20只)于术前2h将60mg/kg的姜黄素静脉注射;对照组(20只)静脉注射等体积的DMSO。"二线二结"法结扎心脏左前降支动脉30min,然后恢复心肌灌注。两组分别于结扎前与再灌注后1.0h从股静脉取血2ml,测定血浆心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)与超氧化物岐化酶(superoxide dismutase,SOD)含量。结果:再灌注1.0h后,兔血浆cTnI较结扎前明显升高(P<0.05),SOD含量较结扎前降低(P<0.05),处理组cTnI水平较对照组明显降低(P<0.05),SOD含量较对照组明显增加(P<0.05)。结论:姜黄素对兔心肌IRI有保护作用,其机制可能与提高SOD含量、减少氧自由基生成有关。     

乌司他汀对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨乌司他汀预处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法:取大鼠80只,随机分为0.9%氯化钠溶液预处理和乌司他汀预处理两组,观察肝脏缺血再灌注损伤引起的变化及抑肽酶给药后的影响。结果:乌司他汀给药组大鼠缺血再灌注损伤引起的血清ALT、AST活性及肝组织丙二醛(MDA)含量变化均显著低于0.9%氯化钠溶液组(P<0.01);肝细胞形态学异常改变也明显较0.9%氯化钠溶液预处理组轻。结论:乌司他汀预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有明显的防治作用。     

RP-HPLC法测定克霉唑溶液中克霉唑的含量

目的:建立RP-HPLC法测定克霉唑含量的高效液相色谱法.方法:采用Kromasil ODS-1 C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以十八烷基键合硅胶为填充剂,甲醇-磷酸氢二钾溶液(3:1)[1]为流动相,(磷酸氢二钾溶液:取磷酸氢二钾4.35 g以水溶解稀释至1 000ml),流速约为1.0ml·min-1,检测波长为260nm.结果:克霉唑在0.14～0.26 mg·ml-1的浓度范围内线性关系良好(r=0.999 0).克霉唑溶液的平均回收率为100.9%.结论:该法快速、简单、准确,可作为该制剂的质量控制方法.     

橙皮苷对缺血再灌注损伤模型大鼠心肌组织保护作用的研究

目的:研究橙皮苷对缺血再灌注损伤模型大鼠心肌组织的保护作用。方法:结扎大鼠左冠状动脉前降支复制心肌缺血再灌注损伤模型,60只Wistar大鼠均分为对照、模型和橙皮苷高、中、低剂量组。光镜下观察心肌组织病理变化,通过免疫组化法检测Fas、半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达情况。结果:光镜下对照组心肌组织无病理损伤;模型组心肌组织呈严重炎性细胞浸润,并见多处坏死;橙皮苷高、中、低剂量组心肌细胞变性坏死程度显著减轻。与对照组比较,模型组心肌组织Fas和Caspase-3蛋白表达显著增强(P<0.05);与模型组比较,橙皮苷高、中、低剂量组心肌组织Fas、Caspase-3蛋白表达均显著下降(P<0.05)。结论:橙皮苷预处理对大鼠冠状动脉结扎后再灌注心肌损伤具有一定的保护作用。