放线共生嗜血杆菌和核梭形杆菌在牙周炎中的混合感染

应用同一选择培养基从４０例牙周炎患者牙周袋内分离出放线共生嗜血杆菌１４株，核梭形杆菌１９株，其中二菌同时分离１１株，提示二菌不仅分别与牙周炎的感染有关，而且二菌的混合感染在牙周炎感染中更具意义。     

牙周炎和冠周炎的厌氧菌分离鉴定及体外药效学的研究

本文报告40例牙周炎和20例冠周炎的厌氧菌分离鉴定及体外药效学试验结果.87.5%的牙周炎标本中检出厌氧菌,以牙龈卟啉菌、产黑色素类杆菌、具核梭杆菌为多见.80.0%的冠周炎标本中检出厌氧菌,以厌氧消化链球菌和厌氧性链球菌较为多见.纸片药敏扩散法和MIC测定结果阿齐霉素(国产)、阿齐霉素(进口)、白霉素和罗红霉素的敏感率分别为97.4%、97.4?.8%和96.1,均无显著性差异(P>0.05),表明都有较好的抗厌氧菌作用.     

DNA探针鉴定伴放线放线杆菌及其与牙周炎临床参数的关系

目的 评估ＤＮＡ探针鉴定伴放线放线杆菌（Ａａ）的价值,探讨Ａａ与牙周炎临床表现间的相关性。方法 ３２例成人牙周炎患者５９个部位龈下菌斑经Ａａ选择性培养后,菌落分别用ＤＮＡ探针法及生化法鉴定,并根据探针法的检出率探讨Ａａ感染与牙周炎临床参数间的关系。结果 ＤＮＡ探针法与培养法有一致性（Ｐ〈０．０１,ｒ＝０．７８但探针法的检出率（２６／５９）明显高于培养法（１９／５９）（Ｐ〈０．０５）;Ａａ的检出率与     

产黑色素拟杆菌群与牙周病发病关系的临床研究——牙龈拟杆菌与成年人牙周炎

本文从临床筛选了46例成年人牙周炎患者牙周袋内标本和其中12例同一口腔内非牙周炎区龈沟内标本，以及进行了以局部治疗为主的19例综合治疗后同一牙周袋内标本，进行了厌氧菌检查，分离鉴定产黑色素拟杆菌群，又重点进行了牙龈拟杆菌的鉴定，分析了它们与成年人牙周炎的发病, 及与各种牙周状态的关系，并实验证明清除牙周袋内菌斑及局部病灶的疗法是最重要的牙周治疗手段。     

放线共生放线杆菌的分离鉴定及其与牙周炎关系的探讨

经选择分离培养,从14例青少年牙周炎(JP)患者和35例成人牙周炎(AP)患者的牙周袋中鉴定出放线共生放线杆菌(A.a)14株,其中12株为白细胞毒素株。结果表明:A.a 的感染与IP 和 AP 的发生有一定的关系,其白细胞毒株与临床关系尤为密切。     

双歧杆菌在儿童口腔中的分离及其分子生物学鉴定

目的：通过分离鉴定不同患龋情况儿童口腔中双歧杆菌的存在情况,奠定研究口腔双歧杆菌与儿童龋病发生关系的基础。方法：选取18例3-6岁高龋患儿为实验组,15例3-6岁无龋健康儿童为对照组,采集两组儿童龈上混合菌斑和口内非刺激性唾液,采用双歧杆菌特异性选择培养基对其进行专性厌氧分离培养;采用双歧杆菌特异性引物对培养后形成的单菌落进行分子生物学鉴定。结果：双歧杆菌特异性选择培养基上形成典型菌落,部分菌落通过革兰氏染色后光镜观察可见典型的Y或V状分又,也有棍棒状和匙状;实验组双歧杆菌检出率为83．3％,对照组检出率为0,两组双歧杆菌检出率的差异有统计学意义（P〈0．05）;实验组检出双歧杆菌的样本中通过随机挑取单菌落行PER扩增后测序,其结果为：实验组菌斑60个菌落中齿双歧杆菌占83.3％、殊形双歧杆菌占10％、栖牙双歧杆菌占6．7％;唾液样本60个菌落中齿双歧杆菌占90．0％、殊形双歧杆菌占6．7％、栖牙双歧杆菌占3-3％。结论：高龋儿童双歧杆菌的检出率均高于无龋儿童;口腔双歧杆菌中含有的菌种主要为齿双歧杆菌、殊形双歧杆菌、栖牙双歧杆菌;齿双歧杆菌在口腔双歧杆菌中所占比例最大,是高龋儿童口腔中的活跃菌种。     

产黑色素拟杆菌群与牙周病发病关系的临床研究——牙龈拟杆菌与成年人牙周炎

本文从临床筛选了46例成年人牙周炎患者牙周袋内标本和其中12例同一口腔内非牙周炎区龈沟内标本,以及进行了以局部治疗为主的19例综合治疗后同一牙周袋内标本,进行了厌氧菌检查,分离鉴定产黑色素拟杆菌群,又重点进行了牙龈拟杆菌的鉴定。分析了它们与成年人牙周炎的发病关系,以及与各种牙周状态的关系。并实验证明清除牙周袋内菌斑及局部病灶的疗法是最重要的牙周治疗手段。     

具核梭杆菌与牙周炎关系的研究进展

牙周炎是由多种微生物引起的感染性疾病。具核梭杆菌在牙周炎中有高检出率,两者有强相关性。具核梭杆菌可借助多种黏附素共聚致病菌、黏附侵入上皮细胞,利用毒力因子和代谢产物等破坏牙周组织,并可诱导宿主产生免疫反应,促进牙周疾病甚至全身系统性疾病的发生发展。但目前临床上辅助牙周基础治疗的药物并不能针对具核梭杆菌等特定牙周致病菌,可能会导致菌群失调或耐药等问题。具核梭杆菌致病机制的研究为牙周炎的预防及治疗提供了新的思路,研发针对具核梭杆菌黏附素、毒力因子、代谢产物或切断各个致病通路的材料、药物、益生菌产品,抑制其在深牙周袋中的增殖和炎症反应,保持与其他口腔微生物及宿主的动态平衡,有利于牙周炎的控制。     

人牙周膜干细胞的分离培养及初步鉴定

目的 体处分离培养人类牙周膜干细胞并对其生物学性状进行初步鉴定.方法 采用有限稀释法进行牙周膜干细胞克隆筛选,获得单细胞克隆来源细胞,检测其克隆形成率,并采用免疫组织化学染色、碱性磷酸酶染色、免疫荧光染色等方法鉴定牙周膜干细胞的组织来源及生物学特性.结果 有限稀释法获得的牙周膜干细胞克隆株呈簇状生长,排列紧密,细胞呈圆形或椭圆形,细胞较小,排列形成紧密的团块状.免疫组化染色显示细胞波形蛋白阳性,角蛋白阴性;碱性磷酸酶染色阳性;早期间充质干细胞的标志物STRO-1荧光染色显示细胞发出明亮的红色荧光,表达阳性.结论 牙周膜中存在具有高增殖能力的干细胞,克隆化分离培养的人牙周膜干细胞具有强克隆形成能力,具有间充质干细胞表型和生物学特性.     

具核梭杆菌ATCC25586脂多糖的提纯和鉴定

作者采用热酚水法提取了具核梭杆菌ATCC25586的脂多糖(LPS),并用苯酚一氯仿—石油醚(PCP)和电透析对脂多糖进一步纯化,结果得到了高纯度的内毒素脂多糖。其蛋白质和核酸含量分别低于1.5％。氨基葡萄糖含量为81.4μg/mg。总磷含量为30.2μg/mg。用薄层层析对糖成分进行分析发现其多糖区域存在着2—酮—3—脱氧基—D—甘露醇辛酮糖酸(KDO)。鲎试剂凝集最低剂量为3.125pg。     

慢性牙周炎栖牙密螺旋体和牙周袋内硫化物水平的相关性研究

目的 研究慢性牙周炎病人牙周袋内栖牙密螺旋体和牙周袋内硫化物水平的关系。方法 临床上选取17例诊断为慢性牙周炎的病人,采用金刚探针/牙周诊断仪检测牙周袋内硫化物水平,记录牙周袋探诊深度、临床附着丧失以及探诊出血相关牙周指标。同时,采用16S rRNA PCR检测相同位点的栖牙密螺旋体。结果 慢性牙周炎病人栖牙密螺旋体检出率为88.2%,硫化物阳性位点和硫化物阴性位点中栖牙密螺旋体的检出率分别为68.5%和43.2%。硫化物阳性位点与阴性位点中牙周附着丧失（clinical attachment loss, CAL）平均值分别为（2.84±2.33）mm和（1.83±1.60）mm,两者差异有统计学意义（P<0.01）。硫化物阳性位点与阴性位点牙周探诊深度（probing depth, PD）平均值分别为（4.20±1.57）mm和（3.83±1.30）mm,两者差异无统计学意义(P＞0.05)。硫化物阳性位点中牙周探诊出血（bleeding on probing, BOP）阳性检出为率92.5%,大于硫化物阴性位点（75.8%）,两者差异有统计学意义（P<0.01）。结论 慢性牙周炎病人牙周袋内的硫化物水平能反映牙周栖牙密螺旋体分布情况,与牙周附着丧失存在相关性。     

不同基因型变异链球菌临床分离株的分离和鉴定

目的 分离鉴定变异链球菌临床分离株。方法 收集高龋患者和无龋健康人口腔中牙菌斑标本进行厌氧培养,通过细菌形态学观察、生物化学鉴定、自动微生物分析系统分析、聚合酶链反应（PCR）扩增变异链球菌基因的特异性片段表面蛋白抗原Ⅰ/Ⅱ（spaP）、葡糖基转移酶B（gtfB）和葡聚糖酶（dexA）以及基因分型等方法对获得的变异 链球菌临床分离株进行鉴定。结果 从32例临床受试者口腔中分离获得46株变异链球菌临床分离株,经生物化学, 自动微生物分析系统,变异链球菌的特异性基因spaP、gtfB和dexA的PCR扩增均鉴定为变异链球菌,基因分型发现 其中5株临床分离株的基因型与其他菌株相同。结论 获得41株不同基因型变异链球菌临床分离株。     

人腮腺液富组蛋白的分离提纯和鉴定

作者应用Ｂｉｏ Ｇｅｌ Ｐ－２柱层析法从５００ｍｏ刺激性腮腺液中分离提纯出一族富组蛋白，重约３０ｍｇ。该族蛋白经阳离子聚丙烯酰胺凝胶电泳可见７条蛋白带，且谱带成对出现；其分子量在２０００￣６０００ｄａｌｔｏｎ；其氨基酸组成富含Ｈｉｓ，Ａｒｇ和Ｌｙｓ；其双抗体夹心型ＥＬＩＳＡ呈阳性反应确证所提蛋白是唾液富组蛋白。     

人颌下腺唾液粘蛋白的分离,提纯和鉴定

目的：分离,提纯,鉴定人类颌下腺唾液粘蛋白。方法：收集成人颌下腺唾液,经十六烷基三甲基溴化胺沉淀,Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２００凝胶过滤,用ＰＡＧＥ电泳判定纯化本的纯度,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳测定了分子量,分析样本的免疫电泳、化学成分、氨基酸组成。结果：ＰＡＧＥ和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示有两条蛋白带,分子量分别为１０００ｋＤａ和２５０ｋＤａ,样本含１８％的蛋白质,７１％的碳水化合物。免疫电泳显示一条沉淀线     

放线共生放线杆菌的分型和基因鉴定方法

放线共生放线杆菌（Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｕｓａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ,Ａａ）是革兰氏阴性、兼性厌氧的球杆菌,它在牙周炎患者的牙周袋中检出率较高,有报告９０％‘以上青少年牙周炎的牙周损害部位有此菌定居［１］,因此,被认为是与牙周炎,...     

粘放菌5519I型菌毛兔抗血清的分离及鉴定

本实验在纯化粘性放线菌５５１９Ｉ型菌毛的基础上，以粘放菌Ｉ型菌毛蛋白作为抗原，采用多途径免疫方法进行了兔抗Ｉ型菌毛抗血清的分离和提取，并以免疫扩散和琼脂凝胶免疫电泳进行了鉴定。实验结果显示，粘放菌５５１９Ｉ型菌毛蛋白的分子量大部分为５４ＫＤ，少量为３８ＫＤ，抗体效价可达１：３２，具有粘放菌５９５１Ⅱ型菌毛无交叉反应出现。     

小型猪乳牙牙髓干细胞体外分离培养及鉴定

目的体外分离培养小型猪乳牙牙髓干细胞,并对其进行生物学鉴定。方法采用滤纸片法挑取单克隆小型猪乳牙牙髓细胞,免疫组织化学染色检测,体外比较单克隆牙髓干细胞及混合牙髓干细胞向矿化组织、脂肪细胞、及神经细胞诱导分化能力。结果分离培养的小型猪乳牙牙髓干细胞呈集落状生长,克隆形成率2．74％。波形丝蛋白、间充质于细胞表面标志STRO-1染色阳性,神经干细胞特异性标志nestin染色阳性。矿化诱导结果显示单克隆牙髓干细胞及混合牙髓干细胞,均为Von-kossa染色阳性,ATJP表达明显,两者无明著差异。单克隆牙髓干细胞及混合牙髓干细胞经IBMX、胰岛素、消炎痛和氢化可的松诱导3周后,可分化为脂肪细胞,两者成脂率均较低。单克隆乳牙牙髓干细胞向神经细胞诱导分化后免疫荧光鉴定β-tubulin III表达阳性,STRO-1表达阴性。混合牙髓干细胞无明显神经元样细胞分化。结论单克隆分离培养的小型猪乳牙牙髓干细胞具有很强的克隆形成能力及多向分化潜能,其矿化能力与混合的乳牙牙髓干细胞无明显差异。     

人成牙本质细胞的分离和鉴定

目的:分离并鉴定完整的成熟人成牙本质细胞。方法:收集人健康恒牙,采用胶原酶和蛋白酶联合消化法分离出成牙本质细胞,并对分离出的细胞进行细胞形态学和免疫组织化学鉴定。结果:实验分离出的细胞为柱状或立方状,有较长的细胞突起,具有典型的成牙本质细胞形态,免疫组化染色显示细胞表达Ⅰ型胶原、DMP1和DSP蛋白。结论:本研究分离得到了完整的成熟人成牙本质细胞,为后期研究成牙本质细胞的分化、功能及特点奠定基础。     

人静脉畸形内皮细胞的分离培养和鉴定

目的 建立一个稳定的人血管畸形内皮细胞体外培养体系。方法 取人静脉畸形组织块接种于铺有明胶底层的培养瓶中进行原代及传代培养。通过早期去除组织块、机械刮除及酶消化法纯化内皮细胞。对培养的细胞进行形态学观察及免疫组化染色等一系列细胞定性研究。结果 获取的内皮细胞可连续传代4－5代,成活40－50d;生长于玻璃、塑料上的细胞呈铺路石状;生长于明胶底层上的细胞可形成毛细血管样结构;电镜下可见细胞具有Weiber-Palade小体特征性超微结构;CD34及vWF免疫组化染色阳性,α－SMA染色阴性。结论 应用此培养方法可获得纯化的血管畸形内皮细胞,且细胞可连续传代培养。培养的血管畸形内皮细胞可用于体外研究血管畸形的生物学行为。     

犬牙周膜干细胞体外分离培养和鉴定的实验研究

目的体外分离培养犬牙周膜干细胞,并对其进行生物学鉴定。方法采用有限稀释法进行犬牙周膜细胞克隆筛选,获得单细胞克隆来源细胞,检测其克隆形成率,并采用免疫组织化学染色、碱性磷酸酶染色、苏木精-伊红染色以及生长因子分化诱导等方法观察其生物学特性。结果1）克隆化分离培养的犬牙周膜干细胞呈集落状生长,增殖快,克隆形成率为0.95％。2）苏木精-伊红染色见细胞呈成纤维样,体积小、核大,有较多的双核细胞。3）碱性磷酸酶染色阳性。4）细胞表型组化鉴定波形丝蛋白、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原阳性,间充质干细胞表面标志STRO-1染色阳性,角蛋白染色阴性。5）在含β-磷酸甘油钠、维生素C、地塞米松的矿化液中,细胞被诱导分化为成骨细胞,碱性磷酸酶活性增强,Ⅲ型胶原染色阴性,能形成矿化结节,细胞表达成骨细胞特异的骨涎蛋白,在含β-羟基乙醇的培养液中,被诱导分化为神经细胞样细胞。结论克隆化分离培养的犬牙周膜干细胞具有很强的克隆形成能力,具有间充质干细胞表型和多向分化潜能。