一种用来进行姐妹染色单体交换区别染色的特制高压汞灯

在姐妹染色单体交换(SCE)与姐妹染色单体区别染色(SCD)中,在使用市售高压水银荧光灯的基础上我们设计了一种高压水银灯。用以照射经用5—溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记之染色体标本。照射前标本如先用 Hoechst—33258处理,照射时间只需10—15分钟。如直接照射,则要延长至25—30分钟。再进行 Giemsa 染色。这种方法的优点在于灯具备光源与热源之作用,从而简化了用普通紫外线灯照射外加水浴或其它加温方法的 SCD 步骤;节省时间;提高 SCD 效果;易于防护;设备简单和价钱便宜等。     

快速姐妹染色单体区别染色法(摘要)

在改进姐妹染色单体区别染色(SCD)法的研究中,我们继用普通高压水银荧光灯代替国外使用的太阳灯后,制成了高压汞灯。在此基础上,我们对荧光加Giemsa(FPG)法作了较大的改进。即将Hoechst 33258染色与灯照步骤合在一起同步进行。其方法是将Brdu标记好的染色体标本载玻片置于铺锡纸的容器上。滴加4滴Hoechst 33258溶液(用磷酸盐缓冲液配成5μg/ml与25μg/ml溶液),加盖盖玻片。用高压汞灯照射3—20分钟,灯下部距离照射面3.5cm。照毕将盖有盖玻片的一面朝下,放入装有磷酸盐缓冲液的平皿中,     

改进姐妹染色单体交换检查法中细胞制备及区别染色方法的初步探讨

在筛试环境致突变物和致癌物中,姐妹染色单体交换(SCE)检查法是一种反映生物体去氧核糖核酸(DNA)受损的较敏感的方法。为了在遗传毒理学的研究中更好地应用这一方法,本文介绍了单用高压水银荧光灯代替紫外线灯照射加水浴等加温样本玻片的方法,并取消了常规法固定时间等,以简化姐妹染色单体区别(SCD)技术。     

预处理对姐妹染色单体分化染色形式的影响

本文报告了紫外线照射、胰蛋白酶处理及酸抽提方法对姐妹染色单体分化染色(SCD)的影响。标本经紫外线照射(80℃30分钟)后用姬姆萨或硷性品红染色都显示正向SCD。用0.001％胰蛋白酶、pH4.0的磷酸二氢钠、20％高氯酸及5N盐酸抽提均呈反向SCD。标本经紫外线和酸双重处理,其SCD 的效应取决于先处理的手段。文章探讨了正、反向姐妹染色单体分化染色的可能机制并分析了紫外线和磷酸二氢钠处理的最佳实验条件。     

姐妹染色单体差别染色效果相关因素的研究与改进

目的探讨影响姐妹染色单体差别染色效果的因素,明确作为课堂实验教学项目的可行性。方法用常规外周血淋巴细胞培养、染色体制备技术制备染色体标本片,细胞培养过程中分别加入新配制和-20℃保存10年的BrdU溶液。标本制备后分别取新鲜(1 d龄)和-20℃冻存1,2,3,4,5周龄的染色体片用紫外线照射,照射条件为50,56,60℃三种温度,10,20,30 min三个时间,然后Giemsa染色10 min。根据姐妹染色单体着色效果与色差评价各因素对差别染色的影响。结果在-20℃冻存10年的BrdU与新鲜配制的BrdU掺入DNA后的染色效果无显著差异,终浓度以10μg/ml为佳。新制备和-20℃保存1-5周的染色体标本片,在50-60℃的片温范围内,紫外照射10-30 min均获得良好的差别染色效果。结论BrdU溶液在-20℃长期冻存不影响DNA掺入效果;姐妹染色单体差别染色对相关因素容差性较强,改进后作为课内教学实验项目具有很好的可行性。     

阿米巴苏木素快速染色

阿米巴的染色主要用苏木素,染色效果良好。对细胞核的构造上,尤其显示出特异的优越性。应用于阿米巴染色上的方法很多,不过大多时间较长。在用苏木素染色的方法当中以黑登汉氏(Heidenhain)法较常应用、因其不但有很好的染色效果,而且能长久保存作为永久标本。但所需时间由5小时甚至10小时以上。此后蒋遜氏(JohnSon)染色法时间大大缩短,全部染片过程需90分鐘左右。富氏(Faust)改用快速染色法,时间更为缩短,仅需35—40分钟。阿米巴染     

姊妹染色单体互换BUdR—GIEMSA检测技术

1974年Korenberg等人在前人的基础上,首先应用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridine,简称BUdR)观察姊妹染色单体互换(SCE)以来,为深入研究染色体开辟了简便而有效的新途径。他们改进的姊妹染色单体差别染色(SCD),     

75%酒精湿敷配合理疗灯照射产后会阴切口疗效观察

目的 探讨治疗会阴切口的效果方法.方法 对300例会阴切口肿胀疼痛产妇随机分为两组,每组150例.对照组给予以硫酸镁湿敷配合理疗灯照射治疗.观察组在以上治疗方法基础上加用75%酒精热敷切口5分钟.观察两组患者治疗疗效.结果 对照组和观察组的治疗显效率比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 硫酸镁湿敷配合理疗灯照射加用75%酒精湿敷会阴切口疼痛减轻、肿胀治疗效果明显.     

对疟原虫血片染色的一点改进

<正> 疟原虫常规临床检查法,是用患者的外周血制成厚片或薄片,干后用蒸溜水或皂素溶解红细胞后,再用美蓝伊红染色液(瑞氏染色液)或姬姆萨染色,水洗干后镜检。笔者对上述常规染色法作了一些改进。首先配制5%的染色液;用5毫升美蓝伊红染色液或瑞氏姬姆萨染色液,加入蒸溜水95毫升即成(视临床上用量大小配制总量多少而定)。把染色液置入染色缸内,把制成的血片依次编号置染色架上,后置入染色液中染色10-15分钟,取出染色架置流水处冲洗,干     

两种LsAB染色标记方法及其抗原修复方法的比较

目的 比较两种标记生物素链亲和素法(LsAB),并探讨抗原修复的最佳方法。方法 采用碱性磷酸酶(AP)LsAB法和辣根过氧化物酶(HRP)LsAB法染色肺癌合并慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺组织石蜡切片中类胰蛋白酶(tryptase)的抗肥大细胞类胰蛋白酶抗体(AA1,小鼠抗人),并比较染色效果;用高压、胰蛋白酶和微波三种方法进行抗原修复,比较修复效果。结果 AP-LsAB法染色比HRP-LsAB法背景清晰、颜色对比鲜明;高压修复效果优于胰蛋白酶和微波修复。结论 在肺组织免疫组化染色中推荐使用AP-LsAB法,并采用高压修复抗原。     

非特异性酯酶染色实验条件探讨

目的：探讨非特异性酯酶染色的实验条件。方法：用10％甲醛生理盐水，40％甲醛和甲醛蒸气对非特异性酯酶染色固定条件进行了测定，同时用1／14mol／L、1／15mol／L、1／20mol／L的磷酸盐缓冲（pH7．4）配制的基质液分别在45、60、90分钟的染色条件进行了测定。结果：是选择甲醛固定5分钟染色结果最好。三种不同浓度的磷酸盐缓冲液和三个不同的孵育时间的染色结果经多因素方差分析，P〈0．05，结果有统计学意义。结论：最佳染色条件为甲醛蒸气固定5分钟，用1／15mol／LpH7．4磷酸盐缓冲液配制的基质液。染色孵育60分钟。本法帮助鉴别诊断急性单核细胞白血病和急性粒细胞白血病有较大的实用价值。     

正常成人姊妹染色单体互换率的观察

姊妹染色单体差别染色技术(SCD)用于检测姊妹染色单体互换(Sister chr-omatid exchange, SCE),能灵敏地反映出DNA的变化。国内外已将这一技术广泛用于疾病的研究和致癌、致突变物的分析。本文介绍我们实验室这一技术的方法和32例正常成人姊妹染色单体互换的观察     

人类第9号染色体姊妹染色单体互换研究

人类第9号染色体在人群中表现出高频率的结构性重排(如臂间倒位发生率高达1%),为了探讨其发生机理,我们通过姊妹染色单体交换(SCE)分析对此进行了研究,同时探讨9号染色体上 SCE 的频率和分布规律。我们参考 Bobrow 等的 Giemsa-11染色方法和 Alves 等的碱性溶液直按 SCD 法,摸索建立了同时显示 G—11染色和姊妹染色单体差别染色的新方法,对10名正常人、五名 inv(9)(P11,q13)携带者、二名 dup(9)(q1200→q2100)携带者、一名9qh 携带者进行了 SCE 分析。     

姐妹染色单体互换BUdR—Giemsa检测技术

姐妹染色单体差别染色(SCD),是近几年继分带技术后发展起来的检验染色体变化的更灵敏的新技术。此项新技术的发展,已为遗传、病因、环境保护、体内外突变、致癌剂的筛选、计划生育和遗传毒理学等方面的研究和应用提供了重要的实验手段。同时,利用SCD不仅能观察染色体水平的变化,而且还能检测单个基因位点的变化。可以预期,它将在DNA复制理论和细胞分裂周期的基因调控研究中起重要作用。本文介绍一种SCD效果良好、结果稳定的新方法及为获得优质标本所需的各种实验条     

针刺对穴配合TDP灯照射治疗妊娠剧吐56例

笔者近10年来,采用针刺对穴配合神阙穴TDP灯照射治疗妊娠剧吐56例,取得满意疗效,现总结如下。资料与方法56例均为24~30岁的初产妇,B超确认宫内早孕,孕周为6~12周,其中脾胃虚弱者28例,肝胃不和者18例,痰饮内停者10例。治疗方法:患者平卧,情绪放松,穴位常规消毒,用华佗牌0.3mm×60mm灭菌针灸针,根据辨证分型,脾胃虚弱者取中脘、足三里(双);肝胃不和者取建里、内关(双);痰饮内停者取太白(双)、丰隆(双)。以上各穴均直刺0.5~1.5寸,得气后留针,每10分钟运针1次,同时配合神阙穴TDP灯照射,以局部温热舒适感为宜,每次治疗30分钟,日1次,5日为1个疗…     

冠心病猝死鉴定中VEGF的免疫组化染色观察

目的:探讨血管内皮生长因子(Vascular EndothelialGrowth Factor,VEGF)在人体冠心病猝死(sudden coronarydeath,SCD)尸检心肌组织中的表达及其意义,从而提高SCD法医学鉴定的可靠性和准确性。方法:运用改良的免疫组织化学方法观察20例冠心病猝死组和20例非冠心病猝死对照组尸检心肌组织中VEGF的表达情况。结果:20例SCD组中有3例VEGF染色为阴性,另17例心肌梗死局部均有VEGF阳性表达,而20例非冠心病猝死组仅4例局部散在VEGF弱阳性表达,其余16例均为阴性表达。SCD组VEGF阳性表达率明显高于对照组。结论:VEGF的表达可作为法医病理学诊断SCD较为客观的病理形态学指标之一。     

快速冰冻切片染色的一种新方法

缩短冰冻切片及染色时间 ,提高冰冻切片质量 ,是病理医师进行准确诊断的重要环节 ,也是临床医师及时决定治疗方案的关键所在。为此 ,我们在工作实践中逐步摸索出一种更快速、更简便的冰冻切片及染色方法。这种方法是以 - 2 5℃直接冰冻切片标本 ,用苏木素、伊红的混合液染片 ,使整个冰冻制片过程仅在 1～2分钟内完成 ,染色效果鲜艳且稳定。1　材料及方法1.1　材料　进口或国产冰冻切片机。染液配制 :1固定液 :5 5 %乙醇 85 ml,4 0 %甲醛 10 ml,冰醋酸 10 m l。2苏木精∶伊红混合染液。复制伊红一份 ,Herry苏木精3～ 8份混合即可使用。1.2　…     

石蜡切片中幽门弯曲菌的几种染色方法应用

1984年Warren Marshall用Warthinstarry(WS)镀银法在胃粘膜内检出幽门弯曲菌(Campylobacter—Pyloriais,CP)之后,该方面研究受到了重视。虽尚未发现其与胃癌的发病有直接关系,但已观察到CP与嗜中性粒细胞浸润程度呈显著正相关。胃粘膜的炎症改变愈明显,CP的感染程度愈重。CP与乙型慢性萎缩性胃炎的发病有密切关系。为了加深该方面的研究,简化染色方法极为必要,本文试用了几种染色方法取得一定效果。取材为咬检人体胃粘膜组织,用10％福尔马林固定,常规石蜡切片4～5μm,组织切片行脱蜡、递度乙醇处理,冲水,用WS方法染色。 WS常规染色方法:在43℃条件下浸于1％硝     

激光照射治疗酒皶鼻二例

酒(查皮)鼻,俗名酒糟鼻,属于慢性皮肤病,目前临床尚无特效疗法。我们在临床上试用氦氖激光器(浙江大学制造,波长632.8nm,功率5毫瓦)直接照射患处和穴位(四白,素髎、迎香、颧髎)照射治疗二例,效果尚满意。 照射方法,病人取半坐位,直接照射患处的距离为30～50cm,时间10～15分钟;穴位照射距离为20～30cm,时间7～10分钟,每次选2～3穴。每日或隔日照射1次,10次为一疗程。治疗一个疗程后休息3～5天,然后再进行第二疗程。     

尿液革兰染色检查在尿路感染诊断中的价值

目的 对10Ll(特定金属环法)和50Ll(传统一滴尿法)未离心尿革兰染色显微镜检查诊断明显细菌尿的效果进行对比研究.方法 对500名可疑尿路感染患者的尿液标本进行特定金属环法(10Ll)和1滴(50Ll)非离心尿革兰染色涂片显微镜检查,同时用半定量尿液培养来作为参考检查方法 .结果 细菌培养的阳性率为24.8%(124.500),两种显微镜检查结果 完全一致,对500例尿液标本的培养和镜检结果 的相关性分析显示,8例样本结果 不一致,假阴性结果 5例(镜检阴性而培养阳性),假阳性结果 3例(镜检刚性而培养阴性).结论 特定金属环法(10Ll)可以代替常规一滴尿法(50Ll)用于诊断明显细菌尿的尿路细菌感染,并且10Ll金属环法具有快速简便的特点.