葡萄籽原花青素对人卵巢癌裸鼠移植瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨葡萄籽来源的原花青素对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤增殖和凋亡的影响和机制.方法 建立24只人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,分成3组(n=8):原花青素高浓度组(200 ms/kg)、原花青素低浓度组(100 mg/kg)、空白对照组.观察各组裸鼠皮下移植瘤生长情况,HE染色观察肿瘤细胞形态,流式细胞分析细胞凋亡,RT-PCR,Westernblot检测肿瘤细胞Bax,Caspase-3在RNA及蛋白水平的表达情况.结果 原花青素处理组皮下移植瘤抑瘤率分别为34.303%、28.594%,与对照组相比差异具有显著性(P<0.05);治疗组肿瘤细胞出现明显的凋亡形态学变化,流式细胞检测治疗组肿瘤细胞凋亡率分别为67.965%,24.650%;原花青素还可以明显增高Bax、Caspase-3 RNA和蛋白的表达,且呈浓度依赖性.结论 葡萄籽原花青素对卵巢癌皮下移植瘤生长有抑制作用,并促进其凋亡,其作用可能通过增强Bax、Caspase-3的表达而实现.     

三氧化二砷对结肠癌作用的实验研究

目的探讨三氧化二砷在体外、体内对结肠癌的抗癌作用。方法Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测三氧化二砷诱导结肠癌细胞HT-29凋亡情况;建立HT-29细胞裸鼠皮下移植瘤模型,监测给药后肿瘤体积的变化,并通过对肿瘤组织标本K i67染色和TUNEL染色检测肿瘤细胞增殖和凋亡情况。结果流式细胞术结果显示,三氧化二砷体外可抑制结肠癌细胞的增殖、诱导凋亡,与对照组相比,差异显著P0.05。在体内,三氧化二砷可抑制HT-29裸鼠皮下移植瘤的生长,抑制肿瘤细胞的增殖,诱导细胞凋亡,与对照组相比,差异显著,P0.05。结论在结肠癌中,三氧化二砷通过抑制增殖,诱导凋亡而发挥抗癌作用,是结肠癌治疗的良好药物。     

散结抗瘤方体内和体外抑瘤作用的实验研究

目的 探讨散结抗瘤方体内和体外抗肿瘤的可能机制。方法体内实验：对荷瘤小鼠（SRS-82瘤株）用散结抗瘤方煎剂灌胃,计算抑瘤率,电镜下观察肿瘤细胞形态,并提取肿瘤细胞DNA做琼脂糖凝胶电泳。体外实验：传代培养SRS-82细胞,用散结抗瘤方含药血清干预细胞后,检测活细胞数、细胞凋亡率、Bcl-2蛋白MMP-2mRNA的表达强度。结果与空白对照组比较,散结抗瘤方组瘤重显著减轻,电镜下可见肿瘤细胞出现凋亡特征性改变;细胞活力明显降低．细胞凋亡率明显升高,细胞Bcl-2蛋白的表达强度降低。结论散结抗瘤方在体内有明显的抑瘤作用。在体外对肿瘤细胞也有明显的抑制增殖作用。该方抑瘤作用可能与其诱导肿瘤细胞凋亡密切相关,机制可能与下调抑制凋亡基因Bcl-2的表达有关。散结抗瘤方对肿瘤细胞MMP-2的表达没有影响。     

人结肠癌移植瘤小鼠模型的建立及初步研究

目的利用中等分化的人结肠癌细胞建立小鼠皮下和原位移植瘤模型,以研究中国人种结肠癌特有的生物学特性,并为结肠癌的防治研究提供有用的实验工具。方法人新鲜结肠癌标本接种于BNX小鼠皮下,体内反复传代,待模型稳定后再转入BALB／c-nu／nu裸小鼠体内继续传代,使之生物学性状保持稳定,从而建立人结肠癌小鼠皮下移植瘤模型。比较人结肠癌标本在两种不同免疫缺陷动物体内的生长情况,并绘制生长曲线。采用组织块法建立人结肠癌原位移植瘤动物模型,观察原位成瘤、生长及转移等情况。组织病理学检测皮下移植瘤与人结肠癌标本的组织学差异,免疫组织化学检测皮下移植瘤中ESA、CEA、C-erbB-2、P53的表达情况,流式细胞技术检测移植瘤的细胞周期,并进行DNA倍体分析。结果通过体内反复传代筛选成功建立了中等分化的人结肠癌皮下移植瘤模型,利用皮下瘤成功建立了人结肠癌原位移植瘤模型,成瘤率达到5／8（62．5％）,但肝脏、腹腔、淋巴结等未见明显转移。移植瘤组织切片观察显示肿瘤为腺癌Ⅰ-Ⅱ级,与人结肠癌组织标本相似。免疫组化显示ESA和CEA呈阳性至强阳性表达;C-erbB-2和P53呈阳性表达。流式细胞术检查发现肿瘤细胞处于G0-G1期的比例为67．50％±5．59％,G2-M期为4．47％±2．31％,S期为28．02％±7．13％,分析DNA倍体为1．74±0．02。结论本实验利用恶性程度较低的中等分化人结肠癌组织成功建立了结肠癌皮下及原位移植瘤模型,该模型生物学特性稳定,保持了人结肠癌标本的生物学特点。     

亚砷酸对裸鼠宫颈癌移植瘤模型的干预研究

目的 建立宫颈癌移植瘤模型,研究亚砷酸的体内干预效果及机制.方法 将Hela细胞注射于裸鼠皮下接种,成瘤后腹腔分别连续注射亚砷酸、卡铂及生理盐水14 d,观察肿瘤大小和裸鼠精神状态,用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡和细胞周期.结果 亚砷酸组小鼠精神状态良好.与对照组比较,亚砷酸组治疗7 d后肿瘤生长速度减慢;治疗14 d肿瘤重量显著性降低(P<0.05),抑瘤率达到35.8%,高于卡铂组的27.9%;治疗14 d肿瘤细胞的凋亡率显著升高(P<0.01),增殖指数(PI)显著降低(P<0.01),处于G0/G1周期的细胞明显增多(P<0.01),处于G2/M周期的细胞明显减少(P<0.05).结论 亚砷酸具有抑制宫颈癌移植瘤生长的作用,且未见明显毒副作用,其抑瘤的机理可能与诱导肿瘤细胞凋亡、干扰肿瘤细胞生长周期和抑制肿瘤细胞增殖有关.     

羟基红花黄色素A对裸鼠人胃腺癌BGC-823移植瘤抑制作用的研究

目的 从整体水平研究羟基红花黄色素A(HSYA)对抗人胃腺癌细胞株BGC-823裸鼠皮下移植瘤的作用机制.方法 培养人胃腺癌细胞株BGC-823,细胞活力和数量符合接种要求时,接种至30只裸鼠右前肢腋部皮下,建立裸鼠人癌移植瘤模型.随机分为模型组,环磷酰胺对照组,HSYA大、中、小剂量组(1.40、0.70、0.35 mg/kg).给药20 d剥离肿瘤,光镜及透射电镜观察瘤组织的病理及超微结构改变,流式细胞术检测瘤细胞的凋亡及细胞周期.结果 模型组移植瘤生长明显较HSYA 小剂量组、环磷酰胺对照组快;模型组瘤重亦明显高于此2组(P<0.05);HSYA 小剂量组可导致瘤细胞凋亡,其凋亡率与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01),但对细胞周期无明显影响;HSYA小剂量组光镜下可见瘤组织病理恶化程度低于模型组,电镜下可观察到瘤细胞出现凋亡小体.结论 适当浓度的HSYA对肿瘤有一定的抑制作用,诱导肿瘤细胞的凋亡可能是其抗肿瘤作用的机制之一.     

替泊沙林对裸鼠结肠癌移植瘤的抑制作用

目的通过动物体内实验研究环氧合酶-2/5-脂氧合酶双重抑制剂（替泊沙林）对人结肠癌的抑制作用。方法 10只裸鼠皮下接种HT-29人结肠癌细胞建立人结肠癌模型,随机分为治疗组和对照组。治疗组以替泊沙林与5%羧甲基纤维素钠溶液制成的混悬液给药,对照组不作任何治疗。治疗期间观察裸鼠皮下瘤体的生长情况,测算肿瘤体积。治疗结束后处死裸鼠并取瘤,测量肿瘤质量,检测环氧合酶-2/5-脂氧合酶在肿瘤组织中的表达,用免疫组化方法检测肿瘤微血管密度,用脱氧核糖核苷酸末端转移法酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）检测肿瘤细胞凋亡情况。结果 10只裸鼠全部成瘤,实验过程中无裸鼠死亡。实验结果显示：替泊沙林可抑制HT-29人结肠癌细胞的生长,可降低环氧合酶-2/5-脂氧合酶在人结肠癌细胞所致肿瘤组织中的表达水平,对诱导人结肠癌细胞诱导的裸鼠皮下移植瘤具有促进肿瘤细胞凋亡及抑制肿瘤微血管生成作用。结论环氧合酶-2/5-脂氧合酶双重抑制剂替泊沙林可能通过促进结肠癌细胞的凋亡、抑制肿瘤微血管生成,从而抑制结肠肿瘤的生长。     

平消胶囊抗肺癌的分子生物学机制

目的 探讨平消胶囊对人肺癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制.方法 采用人肺腺癌A549细胞株进行裸鼠移植瘤实验.通过移植瘤生长曲线、终末瘤重计算抑制率观察平消胶囊对人肺癌裸鼠移植瘤的抑制作用.采用免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达、微血管密度,TUNEL检测凋亡指数,探讨其作用机制.结果 实验组用药后移植瘤生长缓慢,实验结束时,实验组瘤重及瘤体积明显低于对照组(P<0.05),抑瘤率为51-35%.实验组移植瘤组织微血管密度及VEGF蛋白表达明显低于对照组(P<0.01),实验组癌细胞凋亡指数高于对照组(P<0.01).结论 平消胶囊对裸鼠肺腺癌移植瘤生长有抑制作用.其机制可能与降低移植瘤促VEGF的表达、抑制新生血管的形成和促进肿瘤细胞凋亡有关.     

HP-10对结肠癌LoVo细胞体内外增殖的影响

目的通过体内外实验检测六肽分子HP-10的细胞内转导能力和抗LoVo细胞增殖活性。方法MTT法观察75、37.5、18.75μmol/LHP-10对人结肠癌LoVo细胞增殖的影响,运用激光共聚焦显微术和流式细胞仪分别检测HP-10的LoVo细胞内转导能力以及对LoVo细胞周期和凋亡的影响;建立LoVo细胞裸鼠皮下移植瘤模型,验证750、375、75μmol/LHP-10在体内的抗结肠癌生长作用。结果75、37.5、18.75μmol/LHP-10对LoVo细胞体外增殖有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性抑制(P<0.05);HP-10能直接跨膜进入LoVo细胞并促进LoVo细胞凋亡发生,但对其周期无明显影响;在结肠癌模型上HP-10能显著地抑制肿瘤生长(P<0.05)。结论HP-10是一种无需穿膜肽引导可直接进入细胞的寡肽,在体内外对LoVo细胞具有明显的抑制生长作用,这种作用是通过诱导细胞凋亡产生的。     

咖啡酸锗抗肝癌作用及其机制的实验研究

目的:探讨咖啡酸锗对H22肝癌小鼠的体内抗肿瘤作用及其诱导细胞凋亡的机制。方法:采用H22肝癌小鼠模型观察咖啡酸锗的体内抗肿瘤作用,透射电镜观察肿瘤细胞超微结构改变,免疫组化方法检测肿瘤组织中bax、bcl-2蛋白表达。结果:咖啡酸锗对小鼠H22移植瘤的生长具有明显抑制作用,高、中浓度组抑瘤率分别为57.0%、40.4%(P<0.01),电镜下可见典型的细胞凋亡形态特征。咖啡酸锗处理后肿瘤组织中bax蛋白表达明显增强,bcl-2表达降低(P<0.05)。结论:咖啡酸锗对H22肝癌小鼠具有明显的体内抗肿瘤作用,同时能够促进肿瘤组织中bax蛋白表达,抑制bcl-2蛋白表达,从而诱导肿瘤细胞凋亡。     

附子的现代药理研究与临床新用

目的:总结附子的药用原理,扩展其临床应用范围.方法:总结、归纳近年来的相关文献,用现代药理理论研究附子的医用价值与临床新用手段.结果:附子回阳救逆、补阳助火的功效,用现代医学的理论来说,与强心、抗心律失常、扩张血管、增强肾上腺皮质系统的作用直接相关;而散寒作用可以理解为与增强免疫系统、镇痛、增加血氧等作用相关.附子的药效主要体现在其化合物对神经膜蛋白和激素受体的作用,由于二者的作用机理复杂,交互环节很多,难以用单一化合物的药理来解释附子的作用.结论:附子的药理作用复杂,单一成分的作用还有待进一步研究.     

熊果酸体内抗肺癌作用机制探讨

目的：探讨熊果酸对人肺癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制。方法:采用人肺腺癌A549细胞株进行裸鼠移植瘤实验。通过移植瘤生长曲线、终末瘤重计算抑制率观察熊果酸对人肺癌裸鼠移植瘤的抑制作用,采用免疫组化法检测VEGF蛋白表达、微血管密度,TUNEL检测凋亡指数,探讨其作用机制。结果:实验组用药后移植瘤生长缓慢,实验结束时,实验组瘤重及瘤体积明显低于对照组（P＜0.05）,抑瘤率为51.35％。实验组移植瘤组织微血管密度及VEGF蛋白表达明显低于对照组（P均＜0.01）,实验组癌细胞凋亡指数高于对照组(P＜0.01)。结论:熊果酸对裸鼠肺腺癌移植瘤生长有抑制作用,其机制可能与降低移植瘤促血管生成因子VEGF的表达、抑制新生血管的形成和促进肿瘤细胞凋亡有关。     

CDH17 对那可丁耐药性结肠癌细胞 裸鼠移植瘤模型的影响

目的 研究下调肝肠钙黏连蛋白（CDH 17）基因对那可丁耐药的结肠癌细胞裸鼠移植瘤模型的 影响。方法 以结肠癌细胞为研究材料,复制结肠癌细胞裸鼠移植瘤模型。同时构建干扰质粒,从基因和 蛋白水平对CDH17 进行干扰,成功构建慢病毒载体。通过转移酶介导的末端标记法（TUNEL）检测下调 CDH 17 基因对结肠癌细胞的影响。结果 实时聚合酶链反应和Western blot 检测证实成功构建CDH17 的干 扰表达载体;TUNEL 检测表明下调CDH 17 基因可以促进对那可丁耐药的结肠癌细胞裸鼠移植瘤模型细胞凋 亡。结论 下调CDH 17 基因可以促进那可丁耐药性结肠癌细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖。     

塞来昔布抑制荷人肺癌裸鼠肿瘤的实验研究

【目的】研究塞来昔布对荷人肺癌裸鼠肿瘤的抑制作用。【方法】采用人肺癌A549细胞系体外培养后进行裸鼠移植瘤实验。通过移植瘤重、微血管密度和癌细胞凋亡指数比较,观察塞来昔布干预对荷人肺癌裸鼠肿瘤的抑制作用。【结果】对照组瘤重平均(2.1567±0.9750)g,实验组平均(0.9783±0.5423)g,两组有显著性差异(P<0.05),抑瘤率为54.64%;移植瘤微血管密度对照组为(42.82±10.25)个/HP,实验组为(22.24±5.62)个/HP(P<0.05),癌细胞凋亡指数对照组为1.58±0.61,实验组9.50±2.51(P<0.05)。【结论】塞来昔布对荷人肺癌裸鼠肿瘤有抑制作用,其作用与抑制肿瘤血管生成和促进肿瘤细胞凋亡相关。     

消癌解毒方对结肠癌的抑制作用及对Treg细胞的影响

目的?探讨消癌解毒方对结肠癌的抗肿瘤作用及作用机制。方法?皮下注射结肠癌细胞CT26于BALB/c小鼠右腋下,建立荷瘤小鼠模型,连续灌胃给药14?d后,处死小鼠,分离外周血单核细胞,流式细胞仪检测消癌解毒方对Treg细胞分布的影响,免疫组化检测消癌解毒方对肿瘤组织内Foxp3蛋白表达的影响。结果?消癌解毒方可以显著抑制结肠癌荷瘤的增长,降低CD4+Foxp3+Treg细胞在外周血及脾脏的分布,减少Foxp3蛋白在肿瘤组织内的表达。结论?消癌解毒方具有显著抑制结肠癌增殖的作用,其机制可能与减少外周血内Treg细胞的分布及肿瘤组织中Foxp3的表达进而影响其下游信号通路传导相关。      

重组人内皮抑素腺病毒联合顺铂对小鼠结肠癌肺转移治疗作用研究

目的观察重组人内皮抑素腺病毒(Ad-hE)联合顺铂(Cis)对小鼠结肠癌肺转移的治疗作用、不良反应,并初步探讨其作用机制,探索抗血管基因治疗联合化疗的可行性。方法 6~8周龄BALB/c小鼠每只尾静脉注射接种1×105CT26细胞,建立小鼠CT26结肠癌肺转移模型,随机分成5组,分别予Ad-hE和Cis单独及联合注射,以生理盐水及空腺病毒注射为对照,观察肿瘤抑制效应、肿瘤血管生成、肿瘤细胞凋亡情况和可能发生的毒副反应。结果与对照组相比,Ad-hE和Cis单药及联合治疗组小鼠肺转移瘤数量明显减少,且联合治疗组生存期延长。各治疗组肿瘤血管生成减少,肿瘤细胞凋亡增多,均以Ad-hE联合Cis组最明显。各组均未观察到明显不良反应。结论重组人内皮抑素腺病毒和顺铂联合应用可增强对小鼠结肠癌肺转移的抑制作用,其机理可能是通过抑制肿瘤新生血管形成和诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用。     

蒿甲醚对胰腺肿瘤细胞的抑制作用

目的观察蒿甲醚(ART)在体外对人胰腺癌SW-1990细胞的杀伤作用和对细胞增殖和凋亡的影响,以及在体内对荷瘤裸鼠移植瘤的抑制作用。方法采用MTT法检测ART对SW-1990细胞的杀伤作用;采用流式细胞仪检测ART对SW-1990细胞周期和凋亡的影响。建立人胰腺癌裸鼠移植瘤模型,通过测量裸鼠体质量、移植瘤瘤径和瘤质量,计算肿瘤体积和抑瘤率,观察ART在体内的抗肿瘤活性。结果MTT结果显示,ART对SW-1990细胞的杀伤作用与时间-剂量呈正相关(P<0.05);流式细胞仪检测显示,ART使SW-1990细胞阻滞于G0/G1期,并诱导细胞凋亡;荷瘤裸鼠体内实验显示,中、高剂量的ART(4、8 mg)对裸鼠移植瘤的生长抑制效果显著(P<0.05),抑瘤率分别为48.10%和53.51%。结论ART在体外及荷瘤裸鼠体内对SW-1990细胞有明显的抑制作用;其抑制作用与阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡有关。     

藤梨根提取物对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的抑制作用

目的研究藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的生长抑制及凋亡诱导作用,并探讨其作用机制。方法建立肺癌A549细胞裸鼠移植瘤模型,观察藤梨根乙酸乙酯提取物的作用,设置对照组、治疗组(低剂量组、高剂量组)。通过测量移植瘤体积变化绘制生长曲线,根据终末瘤质量比较计算抑制率,采用TUNEL法检测移植瘤凋亡指数,采用免疫组化法检测移植瘤Survivin蛋白表达、增殖指数,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测移植瘤Survivin mRNA变化。结果各治疗组经藤梨根乙酸乙酯提取物治疗后移植瘤生长缓慢,治疗结束时治疗组移植瘤质量及瘤体积明显低于对照组,高、低剂量组的瘤质量抑制率分别为69.00%和45.09%。各治疗组移植瘤组织凋亡指数则明显高于对照组,而Survivin mRNA及蛋白表达较对照组明显减少,高剂量组尤其明显,各组间上述指标比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论藤梨根乙酸乙酯提取物在体内对肺癌A549细胞生长有抑制作用,可以诱导移植瘤细胞发生凋亡,促进癌细胞凋亡并下调瘤细胞Survivin蛋白和mRNA表达。     

二甲双胍通过mTOR信号通路促进结肠癌细胞凋亡的实验研究

目的 探讨二甲双胍对结肠癌细胞增殖以及凋亡的作用及其潜在机制。 方法 将HCT8细胞随机分为4组:对照组和二甲双胍组(5、10以及20 mM),对照组不接受任何干预措施。MTT法观察4组细胞增殖及对结肠癌细胞的抑制率,AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒观察细胞凋亡情况,同时应用PCR以及Western-blot检测mTOR通路相关基因与蛋白的表达量。 结果 与对照组比较,不同浓度二甲双胍对HCT8均有抑制作用,并且呈剂量依赖性,20 mM二甲双胍对结肠癌HCT8细胞抑制作用最明显,与5、10 mM以及对照组差异均有统计学意义(P<0.05)。另外,随着时间的增加,二甲双胍对结肠癌HCT8的抑制作用增加,72 h后抑制率与24 h以及48 h抑制率差异均有统计学意义(P<0.05)。凋亡结果显示5、10以及20 mM二甲双胍作用于结肠癌HCT8细胞后凋亡率分别是(3.16±0.16)%、(5.12±0.39)%以及(6.11±0.15)%,均高于对照组凋亡率(1.5±0.28)%,各组之间凋亡率差异均有统计学意义(P<0.05)。二甲双胍干预后结肠癌细胞4EBP1、S6K1以及mTOR的mRNA表达量以及蛋白表达量均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 二甲双胍通过抑制mTOR信号通路抑制结肠癌细胞增殖以及促进结肠癌细胞凋亡。