阿胶酶解成分对贫血小鼠造血系统的保护机制

运用5-氟脲嘧啶制备的小鼠贫血模型研究降解分离后所得阿胶有效组分A、B的升高红、白血球的作用机制.结果显示:体外消化液中提取的A、B组分能促进贫血小鼠外周血白细胞和红细胞的升高,促进骨髓和脾造血干/祖细胞集落BFU-E,CFU-E,CFU-GM的增加,提高外周血GM-CSF,IL-6,EPO的含量,降低负相造血因子INF-γ、TGF-β含量,刺激肝和肾EPO和GMCSF mRNA表达.从而说明从体外模拟人胃、肠的消化系统分离的阿胶组分A、B能够刺激造血.该有效补血活性成分的升高红、白血球的作用机制可能与保护贫血小鼠造血微环境和造血干、祖细胞,刺激髓外造血器官相关造血细胞因子表达有关.     

高效液相色谱-串联质谱联用测定水产品中麻痹性贝类毒素

目的利用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）建立同时测定水产品11种麻痹性贝类毒素的快速分析方法。方法采用乙酸（0.1mol/L）提取贝类或鱼类中的麻痹性贝类毒素,经OASIS HLB固相萃取小柱净化后,以乙腈-乙酸铵溶液作为流动相,液相色谱柱分离,通过改变乙腈在流动相中的比例和流速,采用HPLC/MS/MS电喷雾电离（ESI）,阳离子模式,多反应监测（MRM）方式检测,外标法定量。结果 11种PSP在不同浓度下的平均加标回收率为90.7%～96.2%,线性相关系数均大于0.998,相对标准偏差（RSD）均小于9.3%,定量检出限在0.12～0.24ng/g。结论 HPLC-MS/MS法操作简便,灵敏度、精密度高,重现性较好,对水产品中痕量麻痹性贝类毒素具有良好的分析效果。     

细胞学结合串联质谱诊断多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症的价值

目的 研究应用串联质谱技术分析细胞培养液中不同链长酰基肉碱谱的变化对多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症（multiple acy-CoA dehydrogenase deficiency,MADD）的诊断价值.方法 取健康对照标本20例,MADD患儿皮肤成纤维细胞标本9例（包括Ⅰ型3例,Ⅱ型3例和Ⅲ型3例.在37℃培养条件下,用特殊培养底物即加入棕榈酸（C16酸）的培养液中培养成纤维细胞96 h,应用串联质谱分析相应培养液中的酰基肉碱谱.结果 与健康对照组比较,MADD患儿乙酰肉碱（C2）明显降低,而所有病人月桂酰肉碱（C12）、肉豆蔻酰肉碱（C14）、及棕榈酰肉碱（C16）等长链酰基肉碱均异常增高,与健康对照组相比中链酰基肉碱C6、C8、C10在重型（Ⅰ型）病例异常降低,而Ⅱ型与Ⅲ型中链酰基肉碱C6、C8、C10与健康对照比明显升高;其中棕榈酸酰基肉碱（C16）在Ⅰ型患儿中明显增高,肉豆寇烯酰肉碱（C14）及月桂酰肉碱（C12）在临床Ⅲ型和Ⅱ型病例增高更显著.结论 应用串联质谱酰基肉碱谱分析结合特定培养液培养皮肤成纤维细胞可用于MADD的诊断和临床分型.     

应用基质辅助激光解吸质谱的源内衰变及串联质谱技术测定重组人纽兰格林的C端序列

目的测定重组人纽兰格林的C端序列。方法用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI—TOF-MS）的源内裂解（ISD）及串联质谱技术（TOF—TOF,LIFT）,测定重组蛋白纽兰格林的C端序列。结果用该方法鉴定了重组蛋白纽兰格林C端序列的10个氨基酸残基。结论与现有的C-端序列测定方法比较,该方法简便快捷,可适用于部分重组蛋白药物的质量控制。     

优化超声提取酶解得到黄芩素的方法

目的:优化黄芩自身酶水解黄芩苷后,超声提取黄芩素的工艺条件。方法:以黄芩素含量为指标采用四因素三水平的正交实验分别对超声功率、乙醇浓度、超声时间、提取次数4个因素进行考察,优选提取工艺。结果:确定的提取工艺为将黄芩酶解物在300W的超声功率下,用70%乙醇超声20分钟、超声提取4次,提取得到的黄芩素含量为54.07%,转移率为89.77%。结论:采用超声提取黄芩素,方法简便可行,可以作为黄芩素的提取工艺。     

四角蛤蜊酶解肽抑制ACE活性与抗氧化活性研究

目的 评价四角蛤蜊酶解肽体外抑制ACE活性与抗氧化活性。方法 以胃蛋白酶和胰蛋白酶模拟在体过程对四角蛤蜊进行酶解获得酶解肽。利用高效液相色谱法测定四角蛤蜊酶解肽的抑制ACE的活性,以Fenton法检测四角蛤蜊酶解肽对羟自由基的清除作用。结果 胰蛋白酶酶解6 h的四角蛤蜊酶解肽抑制ACE活性最佳,IC₅₀=15.06 μg/mL。胰蛋白酶酶解2 h的羟自由基清除率最高,为93.78%。结论 四角蛤蜊酶解肽具有一定的抑制ACE活性与抗氧化活性。     

两相体系超声辅助酶水解法提取异黄酮苷元

目的建立两相体系超声辅助酶水解法转化提取异黄酮苷元的制备工艺。方法采用油相萃取一水相酶解两相体系,通过单因素与正交试验,考察超声时间、温度、酶量、pH值等因素对超声辅助酶水解法提取游离型异黄酮苷元效果的影响,筛选优化提取条件。结果两相体系超声辅助酶水解法提取异黄酮苷元的最佳工艺条件是：超声时间60min,超声温度45℃,酶量10U／100mL,水解液pH值为5。结论该工艺流程简便,溶剂使用量少,酶解时间短,游离型异黄酮苷元的转化率较高。     

超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱快速分析复方守宫散化学成分及血中移行成分

目的 采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱（ultra-performance liquid chromatography/quadrupole time-of-flight-tandem mass spectrometry, UPLC-Q-TOF/MS）对复方守宫散中化学成分及其血中移行成分进行定性分析,为该制剂的体内有效物质研究提供参考。方法 采用沃特世超高效液相色谱仪（ACQUITY UPLC）和沃特世高分辨质谱仪（Waters Synapt G2-Si QTOF）获得复方守宫散原药样品溶液、混合对照品溶液、空白血浆和含药血浆的液相色谱-质谱信息,再通过比对UNIFI（沃特世科学信息平台）质谱数据库中化合物信息以及部分对照品的提取离子流色谱图、质谱碎片裂解信息,鉴定出目标化合物。结果 共识别出复方守宫散中77个化学成分（主要有皂苷类25个、黄酮类13个、醌类12个）,采用对照品对其中6个成分进行了验证;通过比对空白血浆和含药血浆,发现复方守宫散中绿原酸、槲皮素、虎杖苷、人参皂苷Re等27个成分为入血成分。结论 具有高分辨率、高灵敏度的UPLC-QTOF/MS能够快速分析复方守宫散化学成分及其血中移行成分。     

基于超高效液相-四级杆-飞行时间串联质谱的白花蛇舌草注射液主成分分析

目的 探讨全国范围内白花蛇舌草注射液物质基础的差异性。方法 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱（UPLC-QTOF-MS）对16批样品进行测定，对采集的数据以保留时间和质荷比作为变量，进行主成分分析（PCA）。结果 通过PCA发现不同企业生产的样品自身差异较小，相互之间差异较大；通过载荷图分析筛选出对分组影响比较大的7种标记物。结论 全国范围内不同厂家生产的白花蛇舌草注射液不仅颜色差异较大，其内在的物质基础也存在明显的差异，这种差异主要体现在黄酮类和有机酸类成分的量上。     

高效液相色谱-质谱联用分析法测定血清全氟辛烷磺酸

目的全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonate,PFOS)是全氟表面活性剂,被广泛用于纺织、皮革、涂料、农药等生产中,具有较高的生物蓄积性和多种毒性,是目前最难降解的持久性环境有机污染物之一,由其造成的污染已经逐渐成为全球性的环境问题。建立高效液相色谱-质谱联用分析方法对于检测环境和生物体内的PFOS具有实际意义。方法样品经固相萃取、液相色谱分离后进行电喷雾质谱分析,在多反应监控(multiple reaction monitoring,MRM)模式下使用内标法测定PFOS。结果PFOS在质量浓度为0μg/L～120μg/L时有良好的线性关系,线性相关系数r=0.991039。由标准曲线计算PFOS的回收率为76.88%。结论用高效液相色谱-质谱联用内标法定量分析血清中PFOS的浓度灵敏度高,分析速度快,适于血清PFOS含量的测定。     

串联质谱分析在潍坊地区遗传代谢病诊治中的应用

目的 提高临床医师及家长对遗传代谢病的认识,通过串联质谱筛查技术做到早期诊断,积极治疗.方法 对2010年6月至2011年9月,在山东省潍坊医学院附属医院儿科病房及门诊疑有遗传性代谢病高危儿68例,男45例,女23例,年龄3天~12岁.手指采血,滴于专用采血滤纸上,送至山东省济南金域检验机构,采用干血滤纸片与含已知量的氨基酸、酰基肉碱同位素内标一起,经甲醇萃取,盐酸正丁醇衍生后,用串联质谱仪分析血片中氨基酸谱和酰基肉碱谱及其浓度.结果 在68例标本中,检出阳性标本7例(10.3%),其中甲基丙二酸血症2例,丙酸血症1例,戊二酸血症Ⅰ型1例,苯丙酮尿症1例,枫糖尿病1例,citrin蛋白缺陷症1例.结论 串联质谱对非特异性临床表现疑似遗传性代谢病的患儿检测有重要的价值.     

基于液相色谱-串联质谱结合多元统计分析盐胁迫下金银花代谢产物积累的变化

目的?探究盐胁迫下金银花中代谢产物积累的变化。方法?采用超快速液相色谱-串联三重四级杆飞行时间质谱（UFLC-Triple TOF-MS/MS）对金银花盐胁迫组与对照组样品进行分析,用主成分分析（PCA）、偏最小二乘法判别分析（PLS-DA）进行数据处理,找出潜在的差异代谢物;通过一级质谱精确质荷比和二级质谱碎片信息,结合质谱数据库搜索、标准品比对及相关文献进行差异成分鉴定。然后用超快速液相色谱-三重四级杆线性离子阱串联质谱（UFLC-QTRAP-MS/MS）对15个目标差异成分进行测定,并作灰色关联分析（GRA）。结果?金银花盐胁迫组与对照组的样品得到有效区分,筛选并鉴定31个差异成分;15个目标差异成分呈现不同的变化规律,GRA分析初步表明适度的盐胁迫可促进金银花中药效成分的合成与积累。结论?为盐胁迫下金银花的质量评价及提高金银花的药用价值提供了新思路。