丙泊酚预处理对大鼠脑缺血再灌注线粒体凋亡的影响及可能机制

目的 探讨丙泊酚预处理对大鼠脑缺血再灌注线粒体凋亡的影响及可能机制。方法 30只SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、局灶性脑缺血-再灌注大鼠模型组（CIRI组）和丙泊酚预处理组（P组）。再灌注24h后实行神经功能缺陷评分;HE染色观察脑组织损伤情况;免疫荧光检测观察MAP-2表达;TUNEL染色观察脑组织细胞凋亡情况;Western blot检测脑组织AIF、Cyt-C、cleaved caspase-3以及RhoA/ROCK2信号通路蛋白表达水平。结果 与Sham组比较,CIRI组和P组神经功能缺陷评分明显升高,脑损伤严重,MAP-2表达降低(P<0.05),细胞凋亡率升高,脑组织中AIF、Cyt-C、cleaved caspase-3,RhoA和ROCK2蛋白的表达水平均升高(P<0.05)。而与CIRI组比较,P组神经功能缺陷评分明显降低,并且脑损伤程度降低,MAP-2表达升高(P<0.05),细胞凋亡率降低,脑组织中AIF、Cyt-C、cleaved caspase-3、RhoA和ROCK2蛋白表达降低(P<0.05)。结论 丙泊酚通过抑制RhoA/...     

甲基莲心碱抑制NLRP3炎性小体的活化缓解脑缺血再灌注大鼠脑组织损伤和免疫紊乱

目的探究甲基莲心碱对脑缺血再灌注大鼠脑组织损伤和免疫紊乱的影响。方法建立脑缺血再灌注大鼠模型,将大鼠随机分为5组:假手术组(sham)、大脑中动脉闭塞组(MCAO)、甲基莲心碱低剂量组(Nef 5 mg/kg)、甲基莲心碱中剂量组(Nef 10 mg/kg)和甲基莲心碱高剂量组(Nef 20 mg/kg)。进行神经功能缺损评分;干/湿法检测脑含水量;HE染色检测脑组织病理损伤程度;TUNEL染色检测神经细胞凋亡;ELISA检测脑组织和外周血中IL-6、iNOS、IL-10含量;蛋白免疫印迹检测NLRP3、ASC、Caspase-1、Caspase-3蛋白表达水平。结果与Sham组相比较,MCAO组神经功能缺损评分升高,脑含水量升高,表现出明显脑缺血再灌注病理损伤,细胞凋亡率升高,脑组织和外周血中IL-6、iNOS含量升高,NLRP3、ASC蛋白水平和cleaved Caspase-1/Caspase-1、cleaved Caspase-3/Caspase-3比值升高,差异均有统计学意义(P0.05);与MCAO组相比较,Nef 10、20 mg/kg组神经功能缺损评分降低,脑含水量降低,病理损伤程度明显改善,细胞凋亡率降低,脑组织和外周血中IL-6、iNOS含量降低,IL-10含量升高,NLRP3、ASC蛋白水平和cleaved Caspase-1/Caspase-1、cleaved Caspase-3/Caspase-3比值降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论甲基莲心碱通过抑制NLRP3炎性小体的活化缓解脑缺血再灌注大鼠脑组织损伤和免疫紊乱。     

miR-17-5p调控PTEN对大鼠中动脉阻塞的神经保护作用研究

目的探究microRNA-17-5p(miR-17-5p)在中动脉阻塞(MCAO)中的神经保护作用及其可能机制。方法将60只清洁级雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(MCAO组)、MCAO+mimic组、MCAO+inhibitor组和MCAO+BPV组,每组12只。采用线栓法建立MCAO大鼠模型。建模24 h后,检测大鼠神经功能和脑组织含水量;HE染色观察大鼠脑组织病理学损伤;TUNEL染色检测大鼠脑组织神经元细胞凋亡情况;RT-PCR检测miR-17-5p和第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源蛋白(PTEN)的mRNA表达水平,预测两者是否存在连续的结合位点;Western blot检测脑组织通路蛋白磷酸化水平。结果MCAO+mimic组和MCAO+BPV组大鼠神经功能评分、脑组织含水量、神经细胞凋亡率、PTEN的mRNA和蛋白表达水平均低于MCAO组,差异有统计学意义(P<0.05);MCAO+mimic组和MCAO+BPV组脑组织病理学损伤明显改善,miR-17-5p和PTEN存在连续结合位点,而这2组的miR-17-5p表达水平、AKT和mTOR磷酸化水平高于MCAO组,差异有统计学意义(P<0.05);MCAO+inhibitor组神经功能评分、脑组织含水量、神经细胞凋亡率、PTEN的mRNA和蛋白表达水平高于MCAO组,差异有统计学意义(P<0.05);MCAO+inhibitor组脑组织病理学损伤加重,同时AKT和mTOR磷酸化水平低于MCAO组。结论miR-17-5p表达上调对MCAO大鼠神经具有保护作用,其功能发挥可能与介导调控PTEN信号通路相关。     

TREM2通过激活Th17细胞调节神经免疫炎症并保护局灶性脑缺血再灌注损伤北大核心CSCD

目的:探讨髓细胞触发受体2(TREM2)调节局灶性脑缺血再灌注损伤和神经免疫炎症的作用和机制。方法:对小鼠的大脑行中动脉闭塞术(MCAO)以建立局灶性缺血再灌注损伤模型,分为假手术组(sham组)和MCAO组(n=6)。小干扰RNA(siRNA)构建TREM2的沉默质粒(TREM2 siRNA组),构建TREM2过表达质粒(pcDNA-TREM2组),以及各自的阴性对照(CON siRNA)组和pcDNA组分别感染MCAO小鼠。采用IL-17抑制剂苏金单抗(SEC)联合pcDNA-TREM2处理MCAO组(MCAO+pcDNA-TREM2+SEC组)。qPCR和Western blot检测TNF-α、IL-1β、IL-17和TREM2表达;免疫荧光法检测脑部TREM2定位;TTC染色评价脑损伤程度;流式细胞术检测Th17细胞比例。结果:TREM2表达于小胶质细胞,且MCAO组TREM2表达均增加(P<0.05)。沉默TREM2诱导神经元细胞凋亡(F=206.971,P=0.001)、梗死体积和神经功能障碍评分升高(均P<0.05),TNF-α和IL-1β的mRNA水平升高,IL-10降低(均P<0.05)。过表达TREM2导致TNF-α、IL-1β表达降低,而IL-10和IL-17表达及Th17阳性细胞比例升高(均P<0.05)。与MCAO+pcDNA-TREM2组比较,MCAO+pcDNA-TREM2+SEC组的Th17细胞比例降低、神经元百分比降低,脑损伤程度增加,TNF-α、IL-1β表达升高,IL-10和IL-17表达降低(均P<0.05)。结论:过表达TREM2可通过激活Th17细胞并抑制神经炎症从而保护局灶性脑缺血再灌注损伤。     

甲基莲心碱对脑缺血再灌注脑损伤的调节作用

目的探讨甲基莲心碱(Neferine,Nef)对缺血再灌注脑损伤大鼠脑保护作用及其机制.方法线栓法建立大鼠脑缺血再灌注损伤(CI/R)模型.造模后对大鼠神经功能进行评分;HE检测病理损伤;检测血清MDA、SOD和LDH含量;TUNEL检测脑细胞凋亡;RT-PCR检测Caspase-3、-9 mRNA表达;免疫组化检测脑组织ICAM-1表达;ELISA检测IL-6、IL-18和IL-1β的含量;蛋白印迹检测TLR4、NF-κB P65(核)和MIP-2表达.结果甲基莲心碱能有效改善脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能(P<0.01),减少造模诱导的脑组织病理损伤;减少MDA和LDH含量(P<0.01),增加SOD活性(P<0.01);减少脑组织细胞凋亡率(P<0.01),下调凋亡相关蛋白Caspase-3、-9 mRNA表达水平(P<0.01);降低促炎因子(ICAM-1)、炎性因子(IL-6,IL-18,IL-1β)和炎性蛋白(TLR4,NF-κB P65,MIP-2)在脑组织中的表达水平(P<0.01).结论甲基莲心碱能对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织起保护作用,其机制与减少凋亡及抑制炎性反应有关.     

远隔缺血预适应通过激活HIF-1α/VEGF通路保护大鼠缺血性脑卒中

目的:研究远隔缺血预适应(RIPC)对大鼠脑缺血模型的保护作用及分子机制。方法:30只成年雄性SD大鼠随机分为4组：假手术组(sham)、RIPC组、缺血再灌注组(MCAO/R)组、RIPC+MCAO/R组;术前通过夹闭双侧股动脉给予相应组RIPC处理,利用大脑中动脉栓塞再灌注法(MCAO/R)制备大鼠缺血性脑卒中模型,神经功能评分检测大鼠的神经功能,用2,3,5-三苯四唑氯(TTC)对脑切片进行染色以评估脑梗死的程度。利用real time RT-PCR检测大脑皮质中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF) mRNA的表达。结果:与MCAO/R组大鼠相比,RIPC处理组大鼠神经功能缺损症状较轻(P<0.05),脑梗死体积缩小(P<0.01),皮质中HIF-1α和VEGF mRNA的表达表达明显升高(P<0.05)。结论:RIPC处理对减轻缺血性脑卒中大鼠具有保护作用,其分子机制可能与激活HIF-1α/VEGF通路有关。     

丁苯酞预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能缺损评分、氧化损伤和形态学的影响

目的探讨丁苯酞(NBP)预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能缺损评分、氧化损伤和形态学的影响。方法 90只雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(IR)、NBP预处理低剂量组(NBPⅠ)、NBP预处理中剂量组(NBPⅡ)和NBP预处理高剂量组(NBPⅢ),每组18只,制造模型前7d开始灌胃给药,1次/d。线栓法制作大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,缺血2h再灌注24h后进行神经功能缺损评分;2,3,-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察脑组织梗死的情况;苏木素-伊红(HE)染色显微镜下观察脑组织形态学变化;采用羟胺法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,化学比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,硫代巴比妥酸(TBA)法测定丙二醛(MDA)含量。结果 (1)Sham组神经功能缺损评分为零,脑组织无梗死情况发生,神经元形态规则,脑组织中SOD、GSH-PX活性和MDA含量正常。(2)与IR组比较,NBP预处理各组大鼠神经功能评分显著降低(均P0.01),NBPⅠ、Ⅱ、Ⅲ组神经功能评分依次递减(均P0.05)。(3)与IR组比较,NBP预处理各组脑组织梗死体积依次减小(均P0.05),神经元损伤减轻。(4)NBP预处理各组脑组织中SOD、GSH-PX活性明显升高,MDA含量显著减少(P0.01);NBPⅠ、Ⅱ、Ⅲ组SOD、GSH-PX活性依次递增,MDA含量依次递减(均P0.05)。结论丁苯酞预处理可上调SOD、GSH-PX活性,降低MDA含量,减小脑梗死体积,减轻神经元损伤,发挥对脑缺血再灌注损伤大鼠的预防性保护作用。     

葛根素预处理对大鼠脑缺血早期脑组织eNOS的影响

目的: 研究葛根素在脑缺血早期的脑保护作用是否与脑组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达有关。方法: 45只大鼠随机分为3个研究组:假手术组(S组)5只、脑缺血组(M组)20只和葛根素预处理组(P组)20只。其中,P组和M组又分别分为脑缺血0.5 h、1 h、2 h、4 h 4个亚组。除假手术组外其它大鼠制作大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,P组在手术前10 min腹腔注射葛根素(100 mg/kg),M组和S组在同样时点注射等量生理盐水。采用神经功能缺损评分、神经元尼氏体染色评价脑组织功能及形态变化;采用免疫组化和Western blotting方法检测脑组织eNOS,观察其分布和表达水平。结果: P组各亚组神经功能缺损评分较对应时点的M组减轻(P<0.05),神经元尼氏体溶解也较M组减少,其脑组织eNOS蛋白质的表达均明显高于对应时点的M组(P<0.05)。结论: 葛根素预处理对大鼠脑缺血早期的脑保护机制可能与其上调脑组织eNOS蛋白质表达有关。     

补阳还五汤通过SIRT1/NF-κB p65信号通路减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤

目的：探讨补阳还五汤（BYHWD）通过调控沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子κB p65(NF-κB p65)炎症信号通路减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤（CIRI）的作用机制。方法：SD大鼠随机分为假手术（sham）组、模型组（MCAO/R组）、BYHWD组、SIRT1抑制剂组（EX527组）和BYHWD+EX527组,每组15只。除sham组外,其余各组均构建大脑中动脉栓塞（MCAO）模型缺血2 h再灌注3 d并给予药物干预。采用Zea Longa评分标准进行神经功能缺损评分;TTC染色检测脑梗死体积百分比;HE染色观察脑组织病理学变化;Western blot检测SIRT1、乙酰化核因子κB p65(Ac NF-κB p65)、NF-κB p65、和白细胞介素6(IL-6)蛋白的相对表达量;免疫荧光检测NF-κB p65入核表达水平;免疫组化染色检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达水平。结果：与sham组相比,MCAO/R组神经功能学评分升高（P<0.05）;脑梗死体积百分比增加（P<0.05）;缺血侧脑组织皮质区病理损伤严重,神经细胞排列紊乱、细胞核固缩、碎裂;SI...     

针刺对脑缺血再灌注损伤模型大鼠海马细胞凋亡的影响

目的:探讨针刺对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠海马区细胞凋亡的影响及机制。方法:SD大鼠共75只，随机分为假手术组(sham)、脑缺血再灌注损伤模型组(CIRI)和针刺治疗组(CIRI+AC),利用大脑中动脉栓塞法制备CIRI大鼠模型，CIRI+AC组大鼠接受针刺“大椎”、“水沟”、“百会”穴治疗。Garcia评分法检测大鼠神经功能，TTC染色法检测大鼠脑梗死面积，免疫组织化学染色检测海马区caspase-3阳性细胞数量，Western Blot检测海马区caspase-9表达，TUNEL检测细胞凋亡。结果:针刺前，CIRI组和CIRI+AC组神经功能评分较sham组显著降低(P<0.01);针刺24、72 h后，CIRI+AC组神经功能评分较CIRI组显著升高(P<0.01),脑梗死面积比缩小(P<0.05),患侧脑组织细胞凋亡率降低(P<0.01);与针刺24 h后比较，72 h后CIRI组患侧脑组织细胞凋亡率及海马区caspase-3阳性细胞数量增加(P<0.05),CIRI+AC组患侧脑组织细胞凋亡率及海马区caspase-3阳性细胞数量明显降低...     

脑梗死大鼠脑组织生长分化因子-15 的表达及其与神经功能损害的关系

目的:研究脑梗死大鼠脑组织生长分化因子-15(GDF-15)的表达及其与神经功能及Smad2、Smad4、p21水平的关系,探讨GDF-15在脑梗死中的作用及可能机制。方法:45只大鼠根据随机数字法分为脑梗死组(线栓法建立脑梗死大鼠模型)、假手术组和正常对照组,每组15只。建模后1周,各组大鼠进行改良神经功能缺损(mNSS)评分,mNSS评分后取脑组织标本,采用苏木精-伊红(HE)染色观察脑组织病理学变化,采用Western blot法测定大鼠脑组织中GDF-15、Smad2、Smad4、p21蛋白水平,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定脑组织中GDF-15、Smad2、Smad4、p21 mRNA水平。结果:脑梗死组大鼠脑组织水肿,脑细胞排列紊乱,细胞核仁模糊,小胶质细胞数量增多,脑梗死平均面积为20.13%;假手术组大鼠脑组织未见明显异常。脑梗死组大鼠mNSS评分明显高于对照组(P0.05)。脑梗死组大鼠脑组织GDF-15、Smad2、Smad4蛋白水平高于假手术组(P0.05),p21蛋白水平低于假手术组(P0.05)。脑梗死组大鼠脑组织GDF-15、Smad2、Smad4 mRNA水平高于假手术组(P0.05),p21 mRNA水平低于假手术组(P0.05)。脑梗死大鼠脑组织GDF-15蛋白水平与mNSS评分、Smad2蛋白、Smad4蛋白水平呈正相关(P0.05),与p21蛋白呈负相关(P0.05),脑组织GDF-15 mRNA水平与mNSS评分、Smad2 mRNA、Smad4 mRNA水平呈正相关(P0.05),与p21 mRNA呈负相关(P0.05)。结论:脑梗死大鼠脑组织GDF-15水平升高,GDF-15水平与脑梗死大鼠神经功能关系密切,其机制可能与Smad信号通路及p21水平有关。     

hUCMSCs与VEGF联合移植对MCAO大鼠微血管密度的影响

目的将体外培养的人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)与血管内皮生长因子(VEGF)联合植入脑缺血(MCAO)模型大鼠脑内,观察缺血区血管新生和神经功能缺损修复情况。方法选择75只SD大鼠分为MCAO组、hUCMSCs组、VEGF组和hUCMSCs+VEGF组,观察在缺血前、缺血后7d、14d、28d4个时间点改良神经功能评分(mNSS)变化及7d、14d、28d3个时间点免疫组织化学法检测脑缺血区域微血管密度(MVD)。结果在缺血后7d、14d、28d3个时间点mNSS评分:shamhUCMSCsorVEGF>hUCMSCs+VEGF(P<0.05),hUCMSCs组、VEGF组、hUCMSCs+VEGF组的新生血管密度均高于MCAO组(P<0.05),其中hUCMSCs+VEGF组微血管密度最高(P<0.01)。结论 hUCMSCs联合VEGF移植入MCAO模型大鼠脑内,可促进其缺血区血管新生和神经功能的恢复。     

依达拉奉联合灯盏花素对局灶性脑缺血大鼠皮层神经元凋亡的影响

目的:探讨依达拉奉联合灯盏花素(简称灯盏花素)治疗对大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型大鼠局灶性脑缺血后大脑皮层神经细胞凋亡的影响。方法:将25只SD大鼠随机分为5组:假手术组、MCAO组、MCAO+依达拉奉组、MCAO+灯盏花素组、MCAO+依达拉奉+灯盏花素(n=5),应用微创开颅法制作大鼠MCAO模型,药物组于术前2 h,术后12、24、36、48、60 h经腹腔注射依达拉奉5 mg/kg,灯盏花素100 mg/kg,依达拉奉+灯盏花素(5 mg/kg+100 mg/kg)。假手术组和MCAO组均给予生理盐水。各组分别于术后1 d、3 d和7 d断头取脑,制备常规石蜡组织切片。应用神经功能缺损评分法评估大脑缺血后的神经功能。利用尼氏染色观察不同时间点脑缺血大鼠大脑皮层神经元的形态和数量变化。采用TUNEL方法显示脑缺血后细胞凋亡。应用免疫组织化学法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax在脑缺血大脑皮层中的表达变化。结果:(1)大鼠脑缺血后神经功能缺损评分结果显示:假手术组大鼠神经功能正常;MCAO组大鼠神经功能评分在不同点显著增高于假手术组(P0.05);MCAO+依达拉奉+灯盏花素组大鼠神经功能评分在10 d、14 d较依达拉奉组、灯盏花素组明显降低,与单药组相比差异有统计学意义(P0.05),但各时间点均高于假手术组(P0.05)。(2)假手术组大鼠脑缺血大脑皮层尼氏染色和TUNEI检测显示依达拉奉+灯盏花素组各时间点大脑皮层核固缩神经元及凋亡细胞与两种药物单独使用相比数量明显减少(P0.01)。(3)免疫组化结果显示:依达拉奉+灯盏花素组缺血侧大脑皮层Bcl-2阳性细胞表达显著增强,Bax阳性细胞表达明显减少、减弱,与单独用药相比差异有统计学意义(P0.01)。结论:依达拉奉联合灯盏花素治疗大鼠脑缺血可能通过增强/抑制神经元凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax的表达,提高Bcl-2/Bax的比值,抑制神经细胞凋亡和增强神经元的抗凋亡作用,对缺血脑组织发挥神经保护作用。     

脂肪来源的干细胞移植对大鼠脑缺血后神经细胞凋亡及Bcl-2、caspase-12表达的影响

目的:探讨脂肪来源的干细胞(ADSCs)移植对大鼠脑缺血后神经细胞凋亡的影响及其机制研究。方法:72只清洁级成年雄性Sprague-Darley大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、局灶性脑缺血组(MCAO组)、溶剂对照组(Vehicle组)和ADSC治疗组(ADSC组),每组18只,采用改良Zea-Longa线栓法制作大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,ADSC组于造模成功1d后经侧脑室注射入30μL的ADSC细胞悬液(内含1×106个细胞),分别于术后4d、7d和14d采用TUNEL法检测缺血区神经细胞凋亡,用免疫组织化学法和RT-PCR法检测脑组织Bcl-2、caspase-12表达的变化。结果:大鼠脑缺血后缺血周边区可见大量细胞凋亡,ADSC组较MCAO组和Vehicle组细胞凋亡明显减少(P<0.05);ADSC组术后4d、7d和14d脑组织中Bcl-2的表达水平较MCAO组和Vehicle组明显增高(P<0.05),而caspase-12的表达水平较MCAO组和Vehicle组明显降低(P<0.05)。结论:ADSCs移植减少脑缺血大鼠缺血区细胞凋亡,其机制可能与促进Bcl-2的表达和抑制caspase-12的表达有关。     

二甲双胍通过miR-29c调控SIRT1/PGC-1α通路减轻脑卒中大鼠神经损伤

目的:探究二甲双胍(MET)减轻脑卒中大鼠神经损伤的作用及其机制。方法:SD大鼠随机分为假手术(sham)组(n=15)、模型(model)组(n=30)、MET(100 mg·kg^?1·d^?1)组(n=30)、MET(100 mg·kg^?1·d^?1)+agomir-NC(40 nmol/d)组(n=30)和MET(100 mg·kg?1·d?1)+agomir(40 nmol/d miR-29c agomir)组(n=30)。采用改良Pulsinelli四血管阻断法制备全脑缺血脑卒中模型,sham组大鼠只分离血管,不夹闭总动脉。造模前1周,给予MET组、MET+agomir-NC组和MET+agomir组大鼠腹腔注射相应药物,而sham组和model组腹腔注射等量生理盐水,以上各组均每天1次,每次0.2 mL,连续7 d。分别于术后24、48和72 h检测各组大鼠神经功能缺损评分,HE染色观察海马组织形态学变化并计数存活神经元,RT-qPCR检测海马组织miR-29c、沉默信息调节因子1(SIRT1)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)的mRNA水平,Western blot法检测SIRT1和PGC-1α的蛋白表达水平。结果:在相同时点,与model组比较,MET组大鼠神经功能缺损评分显著降低,神经元存活率显著增加(P<0.05);与MET+agomir-NC组比较,MET+agomir组大鼠神经功能缺损评分显著升高,神经元存活率显著降低(P<0.05)。随着时间的延长,除sham组外,其余各组大鼠神经功能缺损评分呈升高趋势,神经元存活率呈降低趋势。术后72 h,与sham组比较,model组大鼠海马miR-29c表达水平显著升高,SIRT1和PGC-1α的mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与model组比较,MET组大鼠海马miR-29c表达水平显著降低,SIRT1和PGC-1α的mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与MET+agomir-NC组比较,MET+agomir组大鼠海马miR-29c表达水平显著升高,SIRT1和PGC-1α的mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:MET能够缓解脑卒中大鼠神经损伤,这可能与其下调miR-29c、促进SIRT1/PGC-1α通路激活有关。     

针刺通过PI3K-Ⅲ/Beclin-1通路抑制脑缺血-再灌注损伤大鼠的细胞凋亡

目的:利用大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)法制备大鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)模型，研究针刺对CIRI模型大鼠脑组织中Ⅲ型磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K-Ⅲ)/Beclin-1通路的影响。方法:利用MCAO/R方法制备SD大鼠CIRI模型，分别给予针刺和(或)自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)进行治疗。利用采用Garcia评分法检测大鼠神经功能，TTC染色法检测大鼠脑梗死面积，Western Blot法检测海马组织PI3K-Ⅲ、Beclin-1和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白的表达水平，TUNEL法检测细胞凋亡。结果:MCAO/R手术后大鼠神经功能评分降低(P<0.01),TTC染色观察到脑梗死，同时海马区PI3K-Ⅲ、Beclin-1和Bcl-2表达显著下调(P<0.01),脑皮质细胞凋亡增多(P<0.01)。针刺治疗不但提高了大鼠神经功能评分(P<0.01),并且减少了脑梗死面积(P<0.01);同时显著上调了海马组织中PI3K-Ⅲ、Beclin-1和Bcl-2表达(P<0.01),并减少了脑细胞凋亡(P<0.01)。3...     

右美托咪定激活PI3K/Akt信号通路对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨右美托咪定在大鼠脑缺血再灌注损伤的作用及可能机制。方法 采用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,随机将大鼠分为假手术组（Sham组）、模型组（MCAO/R组）和右美托咪定处理组（Dex组）;于术后24h对各组大鼠进行神经功能评分和组织病理学的检测;采用TUNEL染色法检测脑细胞的凋亡;采用ELISA检测IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10的水平;Western blot方法检测PI3K和p-Akt的表达。结果 与MCAO/R组相比,DEX能够显著提高脑缺血再灌注大鼠的神经功能评分,改善组织病理学损伤,显著降低脑细胞的凋亡,显著抑制IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平,促进IL-10的释放,显著上调脑缺血再灌注大鼠脑组织PI3K和p-Akt等蛋白的表达（P<0.05）。结论 右美托咪定改善脑缺血再灌注损伤与激活PI3K/Akt信号通路相关。     

miR-17-5p调控PTEN对大脑中动脉闭塞大鼠的神经保护作用

目的本文建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型大鼠,研究miR-17-5p(microRNA-17-5p)对模型大鼠的神经保护作用及其可能机制。方法大鼠随机分为5组:假手术组(Sham组)、模型组(MCAO组)、MCAO+mimic组、MCAO+inhibitor组和MCAO+BPV组。采用线栓法建立MCAO大鼠模型。建模24 h后,检测大鼠脑含水量和神经功能;HE染色观察大鼠脑组织病理学改变;TUNEL染色检测大鼠脑组织神经元细胞凋亡情况;预测miR-17-5p和PTEN是否存在连续的结合位点,RT-PCR检测两者mRNA表达水平;Western blot检测脑组织中PTEN、AKT和哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)的磷酸化水平。结果 miR-17-5p和PTEN存在连续结合位点。与模型组比较,MCAO+mimic组和MCAO+BPV组大鼠神经功能评分、脑含水量、神经细胞凋亡率、PTEN的m RNA和蛋白表达水平均显著降低(P0.01),脑组织病理学损伤也明显改善,而miR-17-5p、p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR表达水平显著增加(P0.01)。此外,MCAO+inhibitor组上述指标则正好相反(P0.05或P0.01)。结论 miR-17-5p表达上调对MCAO大鼠具有神经保护作用,其功能发挥可能与介导调控PTEN信号通路相关。     

眼针对脑缺血再灌注损伤72小时大鼠海马组织ICAM表达的影响

目的观察眼针对脑缺血再灌注模型大鼠海马组织细胞间黏附因子(intercellular adhesionmolecule,ICAM)表达的影响,探讨眼针对脑缺血再灌注损伤治疗的机制。方法应用线栓法复制脑缺血再灌注损伤大鼠模型,采用眼针治疗,于缺血再灌注后72h进行神经功能缺损评分,采用Western blot方法、实时荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR)方法测定海马组织ICAM蛋白及mRNA表达的变化。结果缺血再灌注损伤模型组分别与正常组和假手术组比较,大鼠神经功能缺损评分明显升高,且Western结果显示模型组ICAM蛋白量升高,mRNA的表达上调。与模型组比较,眼针组大鼠神经功能缺损评分明显下降,眼针组大鼠海马组织ICAM蛋白及mRNA表达明显下调(0.05)。结论眼针具有明显的改善大鼠脑缺血再灌注损伤的作用;其机制之一可能与下调海马组织ICAM表达有关。     

常压氧对缺血再灌注大鼠大脑皮层1型Na~+/H~+交换蛋白的影响

目的:研究常压氧(NBO)对缺血再灌注大鼠脑组织1型Na+/H+交换蛋白(NHE1)水平的影响。方法:采用线栓法构建大脑中动脉缺血(MCAO)大鼠模型,术后2 h进行神经功能评分。MCAO模型构建成功者进行再灌注,随机分为MCAO组和NBO组,NBO组于再灌注后给予常压氧治疗。各组大鼠分别在NBO治疗后0、2、4、6、12、24 h处死,取脑皮层组织进行HE染色后观察脑组织形态结构的改变,并采用免疫荧光法及Western Blot法检测脑组织NHE1蛋白和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的蛋白表达水平。结果:与假手术组相比,模型组神经功能评分显著增高(P 0. 05); HE染色结果显示MCAO组和NBO组大鼠缺血2 h时大脑皮层组织均无明显病理结构改变,随着再灌注时间的延长,MCAO组大鼠大脑皮层组织病理改变逐渐增加,NBO组大鼠的脑组织病理改变明显减轻;免疫荧光检查和Western Blot检测结果显示MCAO组和NBO组在起始2 h内,大脑皮层组织NHE1和HIF-1α蛋白表达水平没有明显变化,随着再灌注时间的延长,MCAO组NHE1蛋白和HIF-1α蛋白表达水平逐渐增加,NBO组NHE1蛋白和HIF-1α蛋白表达水平稍有增加,但是其表达水平明显低于MCAO组(P 0. 05)。结论:常压氧疗法可以下调缺血再灌注后大脑皮层组织NHE1蛋白和HIF-1α蛋白的表达,减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,促进大鼠神经功能恢复,具有脑损伤保护作用。