针刺手厥阴心包经穴对心肌缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的 :探讨针刺手厥阴经穴治疗心血管疾病的机理。方法 :电针大鼠心包经穴位 2 0min后 ,结扎左冠状动脉前降支 40min ,心电图 (ECG)监测 ,再电针穴位 2 0min ,松扎 ,恢复灌流 60min,摘取心脏 ,制成细胞悬液 ,流式细胞仪检测。结果 :模型组出现典型的细胞凋亡峰 ,凋亡率明显升高 ,针刺心包经穴组的凋亡率有明显降低 ,与模型组比较差异均有非常显著性意义 (P <0 0 1 )。结论 :针刺手厥阴经穴能有效地抑制心肌细胞的凋亡 ,从而减轻细胞凋亡导致的心肌损伤     

额尔敦-乌日勒预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的通过观察蒙药额尔敦-乌日勒预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)细胞凋亡及相关蛋白的影响,探讨额尔敦-乌日勒预处理对MIRI的保护机制。方法将60只健康雄性SD大鼠随机分为6组:假手术组、MIRI模型组、复方丹参滴丸组、额尔敦-乌日勒高、中、低剂量组,每组10只大鼠。给药组分别灌胃给予不同药物预处理。假手术组只穿线不结扎,其余各组大鼠通过结扎冠状动脉左前降支30 min,然后再灌注120 min的方法制作MIRI模型。采用末端标记(tunel)方法检测心肌细胞凋亡率;运用Western Blot技术检测大鼠心肌细胞中Bcl-2,Bax,Caspase-3蛋白表达。结果 (1)与假手术组比较,模型组大鼠心肌细胞凋亡率显著上升(P0.01);与模型组比较,额尔敦-乌日勒能降低MIRI大鼠心肌细胞凋亡率(P0.01),其中额尔敦-乌日勒中、低剂量组优于高剂量组(P0.01)。(2)与假手术组比较,模型组大鼠Bcl-2表达显著下调(P0.01),Bax、Caspase3表达明显上调(P0.01),Bcl-2/Bax比值下降(P0.01);与模型组比较,额尔敦-乌日勒能增加MIRI大鼠心肌Bcl-2表达,减少Bax、Caspase3蛋白的表达,提高Bcl-2/Bax比值(P0.01),其中以额尔敦-乌日勒中剂量组作用较明显(P0.01)。结论额尔敦-乌日勒可通过抑制心肌细胞凋亡对大鼠MIRI起到保护作用,其抗心肌细胞凋亡的机制可能与通过上调Bcl-2表达,下调Bax、Caspase3的表达,提高Bcl-2/Bax比值有关。     

针刺家兔内关穴对心肌缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的:探讨内关穴在心肌缺血再灌注损伤过程对心肌细胞凋亡的影响。方法:采用电针针刺家兔左右侧内关穴20min 后,结扎左冠状动脉前降支,ECG 监测,40min 后恢复灌流,再灌注1h,取心肌组织,透射电镜及原位末端标记(TUNEL)法观察凋亡细胞的变化。结果:缺血再灌注模型组出现典型的凋亡细胞,棕褐色标记产物广泛存在;针刺内关组染色质边集均不显著,棕褐色标记产物明显减少。结论:电针内关可降低缺血再灌注损伤的程度,对心肌细胞的凋亡有明显的抑制作用。     

苓桂术甘汤对大鼠心肌缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响

目的:观察苓桂术甘汤在大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)时对心肌细胞凋亡的影响。方法:40只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,辛伐他汀组,苓桂术甘汤组。辛伐他汀组药量为20 mg·kg-1·d-1,苓桂术甘汤组药量为50 g·kg-1·d-1,另2组给生理盐水1.0 mL·kg-1。采用结扎大鼠左冠状动脉前降支方法制备心肌缺血再灌注模型。缺血30 min、再灌注2 h后,采用流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况,采用免疫组化技术检测心肌细胞Smad3,Smad7蛋白表达的变化。结果:与假手术组相比,模型组心肌细胞的凋亡率明显增加(P<0.01),并且Smad3蛋白表达增加(P<0.01),Smad7蛋白表达减少(P<0.01);与模型组相比,苓桂术甘汤和辛伐他汀可明显降低心肌细胞的凋亡率(P<0.01);心肌细胞Smad3蛋白表达减少(P<0.05);Smad7蛋白表达增加(P<0.05)。结论:苓桂术甘汤可以抑制大鼠缺血再灌注损伤时心肌细胞凋亡,上调Smad7蛋白表达,下调Smad3蛋白表达,可能是其保护MIRI的作用机制之一。     

黄芩苷对大鼠心肌缺血再灌注时细胞凋亡的影响

目的:研究黄芩苷对大鼠心肌缺血再灌注时细胞凋亡的影响。方法:结扎大鼠左冠状动脉前降支复制心肌缺血再灌注损伤模型,黄芩苷100mg/kg于冠脉结扎前10min静脉注射后,再灌注结束后称重法检测心肌梗死面积,分光光度法测定组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)活性,原位末端标记(TUNEL)法和HE染色观察凋亡心肌细胞和组织病理学改变。结果:黄芩苷可明显抑制缺血再灌注所致心肌梗死面积增大,降低组织MDA、MPO含量,升高SOD活性,抑制心肌细胞凋亡和炎性细胞浸润。结论:黄芩苷可通过抑制心肌细胞凋亡而保护缺血再灌注心肌。     

基于FXR/SHP通路探讨电针预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌组织相关凋亡基因的影响

目的:观察电针预处理对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠法尼酯衍生物X受体(FXR)/小异二聚体配体(SHP)凋亡通路及凋亡诱导因子(AIF)和热休克蛋白70(HSP70)的影响,探讨电针预处理改善M IRI的作用机制.方法:Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、缺血再灌注组、电针预处理组,每组10只.采用结扎...     

血府逐瘀汤对大鼠缺血再灌注心肌损伤及心肌细胞凋亡的干预作用

目的：观察血府逐瘀汤对缺血再灌注致大鼠心肌损伤与细胞凋亡的干预作用。方法：采用结扎冠状动脉左前降支后再通的方法，复制家兔心肌缺血再灌注的动物模型，观察心肌的病变程度；DNA电泳及原位末端标记法检测心肌细胞凋亡。结果：血府逐瘀汤治疗组的梗死面积小于再灌注组；DNA电泳发现再灌注组呈凋亡的典型表现，血府逐瘀汤治疗组梯形条带中DNA含量较心肌缺血再灌注组明显减少TUNEL染色发现再灌注组有大量的阳性标记，且积聚成团，血府逐瘀汤治疗组较再灌注组明显减少。结论：缺血再灌注可诱导心肌细胞凋亡，血府远瘀汤可抑制缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡发生。     

地黄多糖对心肌缺血再灌注损伤模型大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的：观察地黄多糖对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法将大鼠按随机数字表法分为假手术组,模型组,地黄多糖低、中、高剂量组,复方丹参片组,每组20只。除假手术组外,其余各组大鼠采用夹闭冠状动脉30 min后松夹恢复血流的方法制备心肌缺血再灌注损伤大鼠模型。造模后,地黄多糖低、中、高剂量组大鼠分别灌胃地黄多糖溶液10、20、40 mg/kg,复方丹参片组灌胃复方丹参片混悬液260 mg/kg,假手术组和模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续给药4周。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色观察各组大鼠心肌梗死面积;采用原位细胞凋亡检测法观察心肌细胞凋亡状况并计算凋亡指数;通过免疫组织化学法检测心肌组织中B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2, bcl-2)、Bax和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)蛋白的表达并进行半定量分析。结果与模型组比较,地黄多糖中、高剂量组大鼠心肌组织梗死面积[(31.7±6.1)%、(22.8±5.5)%比(43.9±6.7)%]、心肌细胞凋亡指数[(44.6±6.7)%、(32.8±5.4)%比(59.4±9.0)%]降低(P＜0.05或 P＜0.01);心肌组织中 bcl-2蛋白[(0.40±0.09)、(0.45±0.08)比(0.26±0.05)]表达升高(P＜0.05或P＜0.01);Bax蛋白[(0.55±0.11)、(0.28±0.08)比(0.85±0.13)]、caspase-3蛋白[(0.11±0.03)、(0.08±0.02)比(0.16±0.03)]表达降低(P＜0.05或P＜0.01),bcl-2/Bax比值[(0.73±0.05)、(1.61±0.20)比(0.31±0.08)]升高(P＜0.05或P＜0.01)。结论地黄多糖对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡具有抑制作用,可提高 bcl-2/Bax 比值、下调caspase-3表达。     

Effects of acupuncture pretreatment on ischemic cardiac muscle cell apoptosis and gene expression in ischemia-reperfusion rats

目的：针灸预处理对缺血心肌具有保护作用。通过观察针刺预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡及HSP70mRNA表达的影响,探讨针刺预处理的心肌保护机制。方法：64只Wistar大鼠随机分为8组,即正常对照组,假手术组,缺血再灌注组,缺血预处理组,手捻针预处理日1次组,电针预处理日1次组,手捻针预处理日2次组,电针预处理日2次组。建立大鼠心肌缺血再灌注模型,采用原位杂交法测定心肌HSP70mRNA的表达,TUNEL法检测细胞凋亡。结果：与正常对照组、假手术组比较,缺血再灌注组细胞凋亡增加,HSP70mRNA表达增加;与缺血再灌注组比较,针刺预处理使心肌细胞凋亡减少、HSP70mRNA表达增加,且针刺预处理日2次组作用强于针刺预处理日1次组和缺血预处理组。结论：针刺预处理能够抑制心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡,上调心肌HSP70mRNA的表达。针刺预处理每日2次的作用强于针刺预处理每日1次。     

丹参饮预处理保护缺血/再灌注损伤模型大鼠心肌细胞实验研究

目的:研究丹参饮预处理对心肌缺血/再灌注损伤大鼠心肌细胞的保护作用。方法:将50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、丹参饮低剂量组、丹参饮中剂量组、丹参饮高剂量组,每组10只,采用前降支结扎法制备大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型。观察干预后各组大鼠心电图、心肌酶标志物、N-末端脑钠肽前体(NT-proBNP)变化情况; 应用TTC染色法测定心肌梗死面积、HE染色观察心肌病理学改变。结果:与模型组比较,丹参饮预处理的各组能降低大鼠血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)与NT-proBNP水平,缩小心肌梗死面积(均P<0.01),改善心肌病理学形态,且随丹参饮浓度增加,以上作用更为显著。结论:丹参饮预处理可明显降低缺血/再灌注损伤大鼠血清心肌酶学水平,缩小心肌梗死面积,减轻心肌细胞缺血/再灌注损伤,保护心功能,且存在剂量依赖关系。     

龙牙楤木总皂苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护机制的研究

目的:观察龙牙楤木总皂苷对缺血再灌注损伤心肌炎症因子ICAM-1表达及SOD的影响。方法:可逆性冠脉左前降支结扎缺血45min再灌注6h复制MI/R模型,Wistar雄性大鼠30只,随机分成模型组、龙牙楤木组、波立维组,每组10只。HE染色观察心肌病理学变化,测定心肌SOD活性,ELISA法测定血清sICAM-1的表达。结果:与模型组比较,龙牙楤木总皂苷、波立维均能显著降低缺血再灌注大鼠血清LDH含量,显著升高SOD的活性,缺血45min再灌注6h血清sICAM-1有明显表达,各组之间无统计学差异。结论:龙牙楤木总皂苷对MI/R有保护作用,可能是通过增加SOD的活力,对抗氧自由基对心肌细胞的毒害作用,减轻心肌细胞的损伤而实现的。     

针刺保肝护脑对脑缺血再灌注肝损伤大鼠SODmRNA表达的影响

目的:探讨针刺保肝护脑对脑缺血再灌注肝损伤大鼠SODmRNA表达的影响.方法:将40只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺对照组、针刺保肝护脑组.线栓法制作缺血再灌注大鼠模型,测试大鼠行为学、血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、SOD活性、肝组织SODmRNA含量.结果:模型组、针刺对照组和针刺保肝护脑组缺血2h(电针治疗前)时神经功能缺损评分无显著差异;经10次电针治疗结束后:与模型组比较,针刺对照组和针刺保肝护脑组神经功能缺损评分有极显著差异(P＜0.01);与针刺对照组比较,针刺保肝护脑组神经功能缺损评分变化更为显著(P＜0.05).电针治疗前,与假手术组、针刺对照组和针刺保肝护脑组比较,模型组血清ALT、AST水平显著增高(P＜0.01),而血清SOD、肝组织SODmRNA明显降低(P＜0.01);经10次电针治疗结束后:与模型组比较,针刺对照组和针刺保肝护脑组血清ALT、AST水平明显降低(P＜0.01),同时血清SOD、肝组织SODmRNA显著升高(P＜0.01);与针刺对照组比较,针刺保肝护脑组血清ALT、AST、SOD和肝组织SODmRNA各项变化更为显著(P＜0.05).结论:针刺保肝护脑对脑缺血再灌注大鼠的治疗效果较单纯头穴针刺更为显著,其治疗机制与促进肝脏SODmRNA表达相关.     

芪桂益脉灵对大鼠心肌缺血再灌注损伤基质金属蛋白酶9及c-Jun氨基末端蛋白激酶表达的影响

目的观察芪桂益脉灵对大鼠心肌缺血再灌注损伤基质金属蛋白酶9(MMP-9)和c-Jun氨基末端蛋白激酶(JNK)信号通路的影响。方法将50只健康雄性SD大鼠随机分为空白组(N)、假手术组(Sham)、单纯缺血再灌注组(I/R)、芪桂益脉灵高剂量组(QGYMLH)、芪桂益脉灵低剂量组(QGYML),每组10只,分别给予0.9%氯化钠注射液、芪桂益脉灵(高、低剂量),连续灌服7 d,结扎冠状动脉左前降支造成急性心肌梗死模型,腹主动脉采血,离心取上层血清,采用酶联免疫法检测MMP-9的表达;取心肌组织,用中性福尔马林固定,应用免疫组化法检测磷酸化c-Jun氨基末端蛋白激酶(P-JNK)表达。结果 Sham组MMP-9、P-JNK表达水平与N组比较差异无统计学意义(P0.05);I/R组、QGYMLL组、QGYMLH组MMP-9、P-JNK表达水平均高于N组(P0.05);QGYML组、QGYMLH组MMP-9、P-JNK表达水平均低于I/R组(P0.05);QGYMLH组MMP-9、P-JNK表达水平低于QGYMLL组(P0.05)。结论芪桂益脉灵对缺血再灌注损伤心肌具有保护作用,其机制与抑制心肌组织中JNK磷酸化程度及MMP-9表达有关,且与中药剂量相关。     

银杏达莫对缺血再灌注家兔心肌凋亡及左心室功能的影响

目的:探讨银杏达莫(GBE)对家兔缺血再灌注(I/R)心肌细胞凋亡、凋亡基因及左心室功能的影响。方法:24只家兔分为对照组、缺血再灌注组(I/R)及银杏达莫组(GBE)各8只,缺血再灌注180min后,TUNEL法观察心肌细胞凋亡,免疫组化观察bcl-2、caspase-3蛋白表达,半定量RT-PCR法检测caspase-3 mRNA、bcl-2 mRNA表达,超声测量家兔左心室Tei及LVEF值。结果:与对照组比较,I/R组和GBE组凋亡细胞灰度值、caspase-3表达、Tei值增高(P<0.05),bcl-2表达、LVEF值降低(P<0.05);与I/R组相比较,GBE组bcl-2表达、LVEF值增高(P<0.01,P<0.05),凋亡心肌灰度值、caspase-3表达及Tei值减少(P<0.01,P<0.05)。结论:GBE可减少I/R心肌凋亡,改善左心室功能,上调抑凋亡基因bcl-2,下调促凋亡基因caspase-3。     

不同时间窗电针对脑缺血再灌注大鼠脑组织中HSP70表达及神经元凋亡的影响

目的观察不同时间介入电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织热休克蛋白（HsP）70表达及神经元凋亡的影响。方法线栓法复制大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,分别于缺血后0．5h、2h、6h、12h介入电针。用免疫组化法检测缺血侧脑组织中HSP70的表达,用原位细胞凋亡法检测凋亡细胞,分别测定梗死侧皮质半暗带区和海马CAl区的平均光密度值、凋亡阳性细胞数。结果与模型组比较,各电针组HSP70表达显著升高,0．5h半暗带区及海马CAl区分别为（89．98±6．55）、（128．73±8．03）,2h分别为（90．96±6．38）、（132．25±8．78）,6h分别为（93．71±6．12）、（132．58±7．04）,12h分别为（96．19±7．30）,（133．57±6．19）。皮质半暗带区凋亡细胞数明显减少,0．5h（1．80±0．84）、2h（3．40±1．14）、6h（5．00±1．00）、12h（5．00±2．45）,但海马CAl凋亡细胞数仅在缺血后0．5h电针组显著减少（1．60±1．89）。结论电针可增强HSP70的表达,减少细胞凋亡。从而在脑缺血后神经元保护方面起到重要作用;电针疗法对于缺血再灌注大鼠发挥肯定的脑保护作用,电针应尽早介入缺血性卒中的治疗。     

针刺对大鼠颅脑损伤后轴突导向因子Slit2表达的影响

目的:观察神经导向因子Slit2在大鼠颅脑损伤后的表达变化,探讨针刺干预颅脑损伤后大鼠Slit2表达的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为针刺组、模型组、正常组,用改良Feeney打击法制成颅脑损伤模型,分别于损伤后48h、6d组取损伤局部脑组织,采用免疫组化法观察神经导向因子Slit2的表达变化,并进行统计学分析。结果:颅脑损伤后,模型组、针刺组颅脑损伤48h、6d后大鼠颅脑损伤脑组织中Slit2的表达均升高。与模型组相比较,针刺组Slit2表达显著升高,并有显著性差异(P<0.05)。针刺48h组与针刺6d组相比较,针刺48h组Slit2表达显著高于针刺6d组,有显著性差异(P<0.05)。结论:成年SD大鼠颅脑损伤后,针刺治疗对大鼠颅脑损伤后轴突导向因子Slit2表达具有明显的促进作用,并呈一定规律性,提示Slit2与颅脑损伤脑组织的修复相关。