microRNA在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床应用研究

摘要:目的：探讨microRNA（miRNA）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其临床意义。 方法：用实时荧光定量PCR技术检测40例NSCLC患者癌组织与癌旁组织中miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222、miR-223、miR-145、miR-126的表达变化。 结果：NSCLC患者癌组织中miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222较癌旁组织呈高表达（P<0.05）,而miR-223、miR-145、miR-126呈低表达（P<0.05）。随着病情进展,miR-21、miR-222表达升高,miR-126表达下降。 结论：miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222、miR-145、miR-126、miR-223在NSCLC癌组织中表达存在差异,且miR-21、miR-222和miR-126与NSCLC病情的恶化发展相关,有助于预后判断。     

Lunx mRNA的表达与非小细胞肺癌外周血微转移的相关性研究

目的 研究Lunx mRNA的表达与非小细胞肺癌外周血微转移的相关性.方法 采用RT-PCR(逆转录PCR)技术分别对实验组及对照组外周血Lunx mRNA的表达进行检测分析.结果 NSCLC 患者外周血微转移与病理类型、细胞分化程度及 TNM 分期均存在密切关系(P＜0.05);NSCLC患者外周血微转移与年龄、性别、吸烟史、原发肿瘤部位无密切关系(P＞0.05).结论 Lunx mRNA是一种检测 NSCLC 外周血微转移新型的、较好的特异性标记物,对判断病程发展和指导临床治疗具有重要意义.     

MRP在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

非小细胞肺癌(NSCLC)包括鳞癌、腺癌、大细胞癌,与小细胞型肺癌相比,其癌细胞生长分裂较慢,扩散转移相对较晚,手术治疗是最主要、最有效的手段,但多数患者就诊时已失去手术时机.化疗仍是该类疾病治疗的重要手段,不过临床疗效尚难以令人满意,肿瘤细胞对抗癌药物的耐药是其因素之一.作者对NSCLC组织中相关耐药基因的表达进行研究,现报告如下.     

ADGRD1抑制非小细胞肺癌细胞增殖和转移的作用及其分子机制

目的 探讨黏附G蛋白耦联受体D1(ADGRD1)在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）的发生发展中的作用及其分子机制。方法 通过肿瘤基因图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库分析ADGRD1在NSCLC中的表达,以及与NSCLC患者预后的关系;利用定量聚合酶链反应（quantitative polymerase chain reaction,qPCR）检测ADGRD1在肺癌及其癌旁正常组织中的表达;在不同的肺癌细胞系中过表达或敲减ADGRD1后利用CCK-8(Cell Counting Kit-8)、细胞克隆形成和迁移实验分别观察ADGRD1对NSCLC细胞增殖和迁移能力的影响;利用western blot实验检测其下游通路探究ADGRD1发挥作用的潜在机制。结果 TCGA数据库分析结果显示,ADGRD1基因在肺癌组织中的表达明显低于癌旁正常组织（P <0.05）,且与患者的不良预后相关（P <0.01）;20例临床肺癌样本qPCR结果显示,ADGRD1mRNA水平较其癌旁正常组织显著降低（0.56...     

Stat3与PCNA在非小细胞肺癌中的表达

目的 观察癌基因Stat3及增殖细胞核抗原(PCNA)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况,并分析其在非小细胞肺癌发生发展中的作用.方法 应用免疫组织化学SP法检测45例NSCLC中Stat3蛋白及PCNA蛋白的表达.结果 45例NSCLC中32例Stat3蛋白阳性表达,阳性表达率为71.1%,NSCLC不同组织学分级、有无淋巴结转移Stat3的表达差异有显著性(P＜0.05),肿瘤不同大小及不同组织学分型间表达差异无显著性(P＞0.05);Stat3与PCNA蛋白的表达呈正相关(r=0.531,P＜0.01).结论 Stat3在NSCLC中异常表达,促进细胞增殖,Stat3可能促进NSCIC侵袭和转移.     

LncRNA LOC344887在非小细胞肺癌组织中的表达及对非小细胞肺癌细胞生长的影响

目的 探讨长链非编码RNA LOC344887在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及对NSCLC细胞生长的影响。方法 利用ENCORI数据库中的基因芯片结果分析NSCLC组织和正常肺组织中LOC344887的表达水平。以肺鳞癌细胞系NCI-H2170为研究对象,采用干扰RNA法敲低细胞中LOC344887的表达,并采用实时荧光定量PCR法检测LOC344887的表达水平变化,克隆形成实验及CCK8法检测LOC344887对NCI-H2170细胞增殖的影响,流式细胞术分析LOC344887对NCI-H2170细胞周期的影响。最后利用T CGA数据库分析LOC344887表达水平与NSCLC患者总生存期的关系。结果 LOC344887在NSCLC组织中尤其是肺鳞癌的表达显著高于正常肺组织(P<0.05)。转染siRNA后NCI-H2170细胞中LOC344887的表达显著下调(P<0.05),LOC344887敲低组的细胞增殖能力明显低于对照组(P<0.05),且细胞周期阻滞于G1期(P<0.05)。LOC344887与NSCLC患者的总生存期显著相关,LOC3...     

过表达SOCS5对非小细胞肺癌增殖、迁移和侵袭的作用及机制研究

摘要：目的?分析细胞因子信号传导抑制因子5(SOCS5)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响，并探讨其可能的作用机制。方法?应用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析SOCS5在肺癌组织中的表达情况； western blot检测SOCS5在NSCLC细胞系PC-9、A549和SPC-A-1及正常支气管上皮细胞系16HBE中的表达水平；选择SOCS5表达水平最低的NSCLC细胞系进行SOCS5过表达质粒转染，实验设对照(NC)组和SOCS5过表达质粒转染(oe-SOCS5)组。采用MTS试验检测各组细胞增殖能力；划痕试验检测各组细胞迁移能力；Boyden试验检测各组细胞侵袭能力；western blot检测各组细胞中PI3K/Akt/mTOR信号通路活性。结果?TCGA数据库分析结果显示，SOCS5?mRNA在肺腺癌和肺鳞癌组织中的表达水平显著低于正常肺组织(P<0.05)。western blot结果显示，SOCS5蛋白在PC-9、A549和SPC-A-1细胞中的表达水平均低于其在16HBE细胞中的表达水平(P<0.05)；选择表达水平最低的PC-9细胞进行SOCS5过表达质粒转染，结果发现与NC组相比，oe-SOCS5组PC-9细胞增殖、迁移和侵袭能力均降低(P<0.05)；western blot结果显示，与NC组相比，oe-SOCS5组细胞pPI3K、pAkt和pmTOR蛋白的表达水平均降低(P<0.05)。结论?SOSC5在NSCLC中呈异常低表达，过表达SOCS5可抑制NSCLC细胞的增殖、迁移和侵袭能力，抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路的激活可能是作用机制之一。     

肿瘤相关巨噬细胞促进非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭的研究

目的研究肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)对非小细胞肺癌增殖、转移的影响。方法免疫组化方法分析肺癌组织中巨噬细胞浸润情况。CCK-8法和Transwell法分别检测单核巨噬细胞系THP-1(构建为M2型TAMs后)对肺癌细胞系A549细胞增殖和侵袭能力的影响。结果免疫组化结果显示,TAMs浸润数在肺癌组织中显著多于癌旁组织。激活诱导的TAMs细胞促进A549细胞的增殖和侵袭。结论巨噬细胞浸润增加造成的肿瘤周围炎症微环境可能是肺癌发展的机制之一。     

RT-PCR法检测非小细胞肺癌患者外周血Lunx mRNA的表达及临床意义

目的 探讨Lunx mRNA在非小细胞肺癌外周血中的表达及临床意义.方法 采用RT-PCR技术,检测NSCLC患者外周血中的Lunx mRNA的表达情况.结果 腺癌患者外周血微转移的阳性率66.7%,高于非腺癌患者36.1%(χ2＝4.506,P＜0.05);低分化癌的外周血微转移阳性率为 74.1%,而中分化15.0%、高分化28.6%,低分化组与高、中分化组比较,P＜0.05,差异显著;Ⅰ期和Ⅱ期的外周血微转移阳性率分别为20.0%和21.7%,Ⅲ Ⅳ期为85.7% K,与Ⅰ期和Ⅱ期比较,χ2＝21.886,P＜0.05;54例NSCLC患者外周血微转移阳性率与该患者的年龄、性别、吸烟史和原发肿瘤部位之间没有统计学差异,P＞0.05.结论 Lunx mRNA 是一种检测 NSCLC 外周血微转移新型的、较好的特异性标记物;NSCLC 患者外周血微转移与病理类型、细胞分化程度及 TNM 分期均存在密切关系;通过Lunx mRNA检测对判断病程发展和指导临床治疗具有重要意义.     

微小RNA-1180在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的 探讨微小RNA-1180(miR-1180)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清及组织中的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系及对疾病诊断、预后评估的价值.方法 选取NSCLC患者72例,另选取同期接受治疗的良性肺部疾病患者50例为研究对象.收集NSCLC患者、良性肺部疾病患者的空腹静脉血,另收集NSCLC患者...     

人转录激活因子5在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中转录激活因子5(ATF5)基因的表达及临床意义。方法采用免疫组化方法检测ATF5在57例NSCLC患者肺癌组织以及癌旁正常肺组织中的表达,并按照性别、年龄、吸烟、病理分型、病理分期、淋巴结转移及分化程度将其分组,分析ATF5在不同组间表达的差别以及ATF5与癌胚抗原(CEA)的相关性。结果 ATF5在NSCLC中的表达率显著高于癌旁正常肺组织(P0.01);ATF5在NSCLC中的表达与性别、年龄、吸烟与否、病理分期、有无淋巴结转移均无相关性(P0.05),而与肺癌的病理分型及分化程度有相关性(P0.05):ATF5在腺癌中的表达显著高于鳞癌,在低分化组中的表达显著高于高-中分化组;ATF5表达与CEA异常有关(P0.05)。结论 ATF5在NSCLC中的高表达可能与肿瘤的发生、发展有关。     

Yes相关蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨Yes相关蛋白(YAP)在非小细胞肺癌组织中的表达与临床病理特征的关系及其在非小细胞肺癌发生发展中的作用。方法采用实时定量反转录多聚酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学及Western blot方法,分别检测非小细胞肺癌患者的癌组织、正常肺组织中YAP蛋白的表达情况,采用SPSS 17.0统计软件包进行统计学分析,计数资料比较采用卡方检验,应用非配对t检验检测非小细胞肺癌组织和正常肺组织中YAP mRNA表达差异,以P<0.05为差异有统计学意义。结果非小细胞肺癌组YAP阳性率(65%)高于正常肺组织组(5%)(χ~2=43.2,P=0.000)。YAP阳性率与非小细胞肺癌的病理分级(高、中、低分化阳性率分别为35.9%、67.6%和87.2%)密切相关(χ~2=24.837,P=0.000);淋巴结转移者YAP的表达率(76.1%)与无淋巴结转移者(58.1%)相比差异也有统计学意义(χ~2=4.03,P=0.045)。YAP mRNA在非小细胞肺癌组织中的相对表达量(0.401 3±0.078 3)是正常肺组织(0.049 9±0.008 4)的8.04倍,差异具有统计学意义(t=3.21,P<0.001)。结论 YAP可能参与了非小细胞肺癌的发生和发展的过程;可能成为判断非小细胞肺癌发生发展和评价预后的有效参考指标之一,对于非小细胞肺癌的早期预测可能具有重要的临床意义。     

人类异常纺锤体样小头畸形相关蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者肿瘤组织和癌旁组织中人类异常纺锤体样小头畸形相关蛋白（ASPM）的表达情况及其与患者临床病理参数和预后的关系。 方法收集175例随访满5年的NSCLC患者术后石蜡标本,包括肿瘤组织和癌旁组织,采用免疫组织化学染色法检测各组织中ASPM的表达情况。比较ASPM不同表达水平患者的年龄、性别比、分化程度构成比、吸烟史、病理类型、肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期构成比;绘制Kaplan-Meier生存曲线,采用log-rank检验比较NSCLC患者的5年总生存率;采用Cox回归模型分析影响NSCLC患者预后的危险因素。 结果免疫组织化学染色结果显示,64.57%（113 / 175）的肿瘤组织标本中呈ASPM高表达,而癌旁组织中仅有22.29%（39 / 175）呈ASPM高表达,NSCLC患者肿瘤组织中的ASPM高表达占比显著高于癌旁组织（ χ² = 63.683,P < 0.001）。根据肿瘤组织标本染色结果,将175例NSCLC患者标本分为ASPM低表达组（62例）和ASPM高表达组（113例）。两组患者肿瘤大小（ χ² = 5.060,P = 0.024）、淋巴结转移（ χ² = 3.998,P = 0.046）及TNM分期构成比（ χ² = 5.427,P = 0.020）比较,差异均有统计学意义。Kaplan-Meier生存曲线结果显示,ASPM低表达组NSCLC患者5年总生存率显著优于ASPM高表达组（ χ² = 5.040,P = 0.025）。将肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期及ASPM表达纳入Cox回归分析,结果显示TNM分期[风险比（HR）= 3.883,95%置信区间（CI）（1.616,9.330）,P = 0.005]和ASPM表达[HR = 3.845,95%CI（1.795,8.236）,P = 0.008]是影响NSCLC预后的危险因素。 结论ASPM在NSCLC患者肿瘤组织中呈高表达,且其表达水平是影响NSCLC患者预后的危险因素。     

非小细胞肺癌组织中Snail、E-cadherin及N-cadherin的表达及临床意义

目的探讨指转录因子Snail、上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)及神经钙黏素(N-cadherin)在非小细胞肺癌组织中的表达及其之间的相关性。方法采用免疫组化法检测63例非小细胞肺癌(NSCLC)手术切除标本及30例癌旁组织中Snail、E-cadherin、N-cadherin蛋白的表达,并分析相互间关系及其临床意义。结果与癌旁组织比较,NSCLC组织中E-cadherin表达显著减少,N-cadherin和Snail表达明显增加(P<0.01)。NSCLC组织中,Snail的表达与N-cadherin呈明显的正相关(P<0.05,r=0.33),与E-cadherin呈显著负相关(P<0.05,r=-0.41),N-cadherinl的表达与E-cadheri也呈明显负相关(P<0.05,r=-0.56)。Snail表达阳性率与TNM分期和有无转移相关(P<0.05);E-cadherin表达阳性率与TNM分期和有无转移相关(P<0.05);N-cadherin表达阳性率与组织学分型、TNM分期和有无转移相关(P<0.05)。结论 NSCLC癌组织中Snail、E-cadherin和N-cadherin表达水平与肿瘤的浸润转移密切相关,可作为临床诊断和治疗靶点的参考指标。     

血清外泌体miR-744-5p在非小细胞肺癌中的表达水平及其临床意义

目的研究血清外泌体miR-744-5p在非小细胞肺癌中的表达变化及临床应用价值。方法回顾性研究。收集南方医科大学南方医院2016年11月至2018年2月就诊的92例非小细胞肺癌患者和91名健康对照者的血清,分离血清外泌体,同时进行RNA提取。应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清外泌体miR-744-5p的表达量,利用受试者工作特征(ROC)曲线评价外泌体miR-744-5p的诊断效能。结果非小细胞肺癌患者血清外泌体miR-744-5p的表达水平(0.0122±0.0197)较健康对照组(0.0936±0.0819)明显下调,差异有统计学意义(U=553.5,P<0.001)。在肺癌组中,早、晚期肺癌患者血清外泌体miR-744-5p的表达水平(0.0117±0.0139,0.0126±0.0212)与健康对照组相比,均明显降低(U=72.5,U=471.5,P均<0.001);肺腺癌外泌体miR-744-5p表达水平(0.0106±0.0203)低于肺鳞癌(0.0173±0.0178),差异具有统计学意义(U=394.5,P<0.001)。ROC曲线显示血清外泌体miR-744-5p能够有效区分非小细胞肺癌患者和健康人群,曲线下面积为0.9339(95%CI=0.8996~0.9681,P<0.0001);外泌体miRNA-744-5p能够有效诊断早期肺癌,曲线下面积为0.9431(95%CI=0.8837~1.0000,P<0.0001)。结论血清外泌体miR-744-5p有希望作为非小细胞肺癌非侵入性的分子诊断标志物,但尚需要进一步比较研究和扩大验证。     

Toll样受体-9与核因子-κB在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的:检测Toll样受体-9(TLR9)与核因子а-kB(N-κB)在非小细胞肺癌(non-small cell lungcancer,NSCLC)组织和正常肺组织中的表达情况,探讨其临床意义.方法:采用免疫组化方法检测TLR9与NF-κB在49例NSCLC组织和20例癌旁正常肺组织中的表达.分析TLR9和NF-κB与NSCLC病理分级、临床分期、淋巴结转移等的相关性以及TLR9和NF-κB之间的相关性.结果:TLR9和NF-κB在NSCLC组织中的表达阳性率分别为85.7%和69.4%,均显著高于正常肺组织中的20%和10%(P＜0.05).TLR9和N-kB的表达呈正相关(P＜0.05).同时还发现NF-κB在腺癌中的表达明显高于鳞癌(P＜0.05).结论:TLR9与NF-κB可能在NSCLC的发生、发展过程中起重要作用.     

乙酰肝素酶mRNA在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 探讨乙酰肝素酶(HPA)mRNA在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与NSCLC临床病理特征的关系.方法 采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)方法检测HPA mRNA在48例NSCLC癌组织、10例癌旁正常肺组织以及10例肺良性疾病肺组织中的表达水平.结果 HPA mRNA在NSCLC组织平均表达水平(8.244±5.314)明显高于癌旁(1.043±0.478)及良性疾病肺组织(1.025±0.465)(P<0.01);在NSCLC组织中HPA的高表达与肿瘤病理类型(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.05)和临床分期(P<0.01)有关,而与患者的年龄、性别、吸烟情况以及分化程度无关.结论 HPA在人肺癌组织中的表达量较正常肺组织明显上调并与非小细胞肺癌的侵袭、浸润以及转移有关.     

雌、孕激素受体在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的　探讨雌激素受体 (ER)、孕激素受体 (PR)在非小细胞肺癌组织中的表达情况。方法　应用S P免疫组化法检测石蜡包埋的肺癌标本中ER、PR。结果　ER、PR的阳性表达率分别为 4 5 .2 %、4 0 .4 % ,其中腺癌的表达明显高于其他组织类型 ;ER、PR的表达与患者的性别、年龄、临床分期、肿瘤细胞分化水平无关 ;1年和 3年术后ER与PR阴阳性患者的非肿瘤生存率差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论　肺癌组织中存在ER、PR ,将其作为激素辅助治疗的一个指标 ,有一定的应用前景。