肿瘤坏死因子α反义寡核苷酸对鼠单疱病毒性视网膜炎的影响

目的观察不同部位注射肿瘤坏死因子α（TNF-α）反义寡核苷酸对实验性单疱病毒性视网膜炎的影响。方法BALB／c小鼠右眼前房注射单纯疱疹病毒-1（HSV-1）,同时左眼结膜下或玻璃体注射TNF-αASON治疗,观察其组织学变化并测定小鼠眼的TNF-α含量,比较2种治疗方式的效果。结果试验组小鼠眼TNF-α发生视网膜炎的几率及严重度明显减少;玻璃体注射组TNF-α含量更低。结论采用作用于TNF-α的反义寡核苷酸局部治疗小鼠单疱病毒性视网膜炎,能明显降低感染小鼠眼内细胞因子TNF-α的含量,减轻眼内视网膜炎症反应。结膜下注射给药也许是更好的方法。     

肿瘤坏死因子α反义寡核苷酸对内毒素诱导的葡萄膜炎的抑制作用

目的 观察局部使用肿瘤坏死因子α反义寡核苷酸(TNF-α-ASON)对内毒素诱导的葡萄膜炎(EIU)的影响.方法 将TNF-α-ASON(实验组)和PBS(对照组)于建立EIU模型前48 h和0 h注射于小鼠结膜下,建模后6、12、24 h通过手术显微镜对两组小鼠眼部的炎症病变进行临床评分;制作眼部组织切片并通过显微镜进行炎性细胞计数;利用ELISA试剂盒测定24 h眼内TNF-α含量.另外,观察结膜下注射的荧光素标记的TNF-α-ASON在眼内的分布.结果 与对照组相比,实验组葡萄膜炎临床评分显著降低(P＜0.01);前房、虹膜、睫状体及玻璃体内炎性细胞计数实验组较对照组显著减少(P＜0.01);注射TNF-α-ASON后实验组眼内TNF-α含量显著降低.结膜下注射7 d后,脉络膜和视网膜上仍然可以观察到TNF-α-ASON.结论 采用TNF-α-ASON可以显著降低EIU小鼠眼内TNF-α含量,减轻眼内葡萄膜炎反应.结膜下注射是一种安全有效的基因治疗给药途径.     

TNF-α反义寡核苷酸对马桑内酯刺激的星形胶质细胞的影响

为进一步探讨TNF-α在星形胶质细胞激活中的作用，用TNF－α反义寡核苷酸抑制由马桑内酯（coriaria lactone,CL)诱导的星形胶质细胞TNF－α的产生，观察NFκBq65核转位和IkBa降解的变化。在应用TNF－α反义寡核苷酸后，由CL刺激引起的TNFα生成在2、4、12、24h均显著减少，NFkBp65核转位在相同的4个时间点也均受到明显抑制，相应胞浆蛋白的IkBa降解也低于对照组。实验结果表明：由CL诱导产生的TNF－α在星形胶质细胞的激活过程中发挥重要作用。     

TNF-α反义寡核苷酸对颅脑爆炸伤后脑组织含水量的影响

目的：探讨TNF－α反义寡核苷酸对颅脑爆炸后脑组织含水量的影响。方法：18条犬随机分为人工脑脊液组（ACSF）、正义链组和反义链组,利用已建成的颅脑爆炸伤模型装置致伤,伤前经小脑－延髓池分别注入ACSF、TNF－α正义寡核苷酸和和TNF－α反义寡核苷酸,比较3组动物脑组织含水量的变化。结果：伤前经小脑－延髓池脑内局部应用TNF－α反义寡核苷酸组,颅脑爆炸伤后脑组织内含水量较ACSF组和正义链组明显减少（P＜0．05）。结论：TNF－α反义寡核苷酸可以减轻颅脑爆炸伤后脑水肿。     

肿瘤坏死因子受体实验研究

应用本室制备的肿瘤坏死因子生物素（ＴＮＦＢ），藉ＡＢＣ法对几种肿瘤细胞坏死因子受体（ＴＮＦＲ）进行定位分析，结果与文献报道的放射受体结合分析法一致，３株胃癌细胞ＴＮＦＲ存在情况与ＴＮＦ对这３株胃癌细胞的抑制率相吻合。应用荧光分光光度法测定胃癌细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ），ＴＮＦ可引起胃癌细胞ＦＧＣ－８５的［Ｃａ２＋］ｉ急性升高，提示ＴＮＦ对［Ｃａ２＋］ｉ有明显影响。     

紫外线辐射对小鼠分泌肿瘤坏死因子α的影响

目的：研究紫外线辐射对小鼠血清肿瘤坏死因子α（TNFα）水平和脾细胞TNFα mRNA表达的影响,从而探讨紫外线辐射所致免疫抑制的作用机制。方法：用酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中TNFα含量。一步法提取脾细胞RNA,逆转录聚合酶链反应检测其TNFα mRNA表达。结果：一定剂量的紫外线辐射不能使小鼠血清中出现可检测的TNFα（P＞0．05）,但可使诱生的TNFα水平下降（P＜0．01）,辐射剂量与TNFα的浓度呈直线负相关（P＜0．01）。脾细胞TNFαmRNA表达被抑制（Ｐ＜０．００１）２。结论：紫外线辐射可能是通过抑制具有分泌TNFα功能的淋巴细胞和（或）单核巨噬细胞的TNFα mRNA转录,进而抑制TNFα的分泌,调节机体的免疫反应。     

肿瘤坏死因子受体实验研究

应用本室制备的肿瘤坏死因子生物素（ＴＮＦＢ），藉ＡＢＣ法对几种肿瘤细胞坏死因子受体（ＴＮＦＲ）进行定位分析，结果与文献报道的放射受体结合分析法一致，３株胃癌细胞ＴＮＦＲ存在情况与ＴＮＦ对这３株胃癌细胞的抑制率相吻合。应用荧光分光光度法测定胃癌细胞内游离钙浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ），ＴＮＦ可引起胃癌细胞ＦＧＣ－８５的［Ｃａ＾２＋］ｉ急性升高，提示ＴＮＦ对［Ｃａ＾２＋］ｉ有明显影响。     

RNA干扰对活化的小鼠巨噬细胞肿瘤坏死因子α表达的影响

目的：观察靶向小鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）基因的小干扰RNA（siRNA）在体外对小鼠巨噬细胞系RAW264．7表达TNF-α的抑制作用。方法：采用化学法合成针对TNF-α mRNA不同位点设计的3条siRNA序列（siRNA1～3）和1条带有荧光标记的BLOCK—IT^TM荧光Oligo（修饰的荧光标记的dsRNA,siRNA4）通过脂质体包裹后将其分别转染至小鼠巨噬细胞系RAW264．7,同时设立1个无任何靶基因的siRNA作为阴性对照（siRNA4）。荧光显微镜下观察siRNA的转染效率;用实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附实验（ELISA）法分别检测siRNA对TNF-α的mRNA和蛋白表达的抑制作用。结果：内毒素刺激后6h,巨噬细胞表达TNF-α mRNA和合成分泌的TNF-α量均增加,于9～12h达高峰。利用荧光标记的Oligo观察到siRNA转染效率达72％～80％。siRNA1～4转染巨噬细胞后,siRNA2、3可见内毒素刺激的TNF-α mRNA（0．158±0．030、0．114±0．028）和TNF-α蛋白表达[（1355±348）pg／ml、（817±138）pg／m1]均明显少于未转染组[TNF-α mRNA0．294±0．147,蛋白（2104±32）pg／ml,均P〈0．05],其中siRNA3的抑制率非常显著,达61．2％（P〈0．01）。阴性对照siRNA4对细胞基因及蛋白表达无影响。结论：内毒素可刺激小鼠巨噬细胞TNF-α的合成。化学合成siRNA转染小鼠巨噬细胞能有效抑制TNF-α mRNA及蛋白的表达。     

小鼠巨噬细胞α-肿瘤坏死因子基因表达的调节

The expression of tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) mRNA in murine inflammatory peritoneal macrophages (M phi) was studied with a sensitive liquid hybridization method. Upon exposure to 10-1000 ng/ml of lipopolysaccharide (LPS), M phi were induced to express TNF-alpha mRNA in a dose-dependent manner. mRNA was detectable within 1 h after stimulation, peaked at about 2 h and then gradually declined. A 10 min treatment with LPS was enough to stimulate the maximal level of TNF-alpha mRNA, as determined in a 2 h period. Although calcium ionophore A23187 and macrophage activating factor (MAF) (both can activate M phi to mediate tumoricidal activity) did not induce TNF-alpha mRNA expression by themselves, they did act synergistically with LPS. Treatment of M phi with retinoic acid strongly inhibited LPS-induced TNF-alpha mRNA expression, whereas trifluoperazine had an opposite effect. Cycloheximide not only synergized with LPS but also induced TNF-alpha mRNA expression by itself. In contrast, actinomycin D completely blocked LPS-induced TNF-alpha gene activation. These findings indicate that LPS-induced TNF-alpha mRNA expression is not solely due to an increase in intracellular free calcium ion and is independent of the protein kinase C pathway of signal transduction. In addition, TNF gene activity may be regulated by short-lived protein repressor(s).     

siRNA抑制小鼠腹腔巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α的实验研究

0引言肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)是由激活的巨噬细胞分泌的炎性细胞因子,虽然TNF-a在免疫反应中起着非常重要的作用,但是当它过度表达和分泌的时候会引起一系列的疾病或病态体征,如中毒性休克、风湿性关节炎、急性坏死性胰腺炎。因此,抑制TNF-a的过度表达和分泌可能成     

肿瘤坏死因子-α与肺纤维化

肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α TNF-α）是一种细胞毒细胞因子，TNF有TNF-α和TNF—β二种，其中对TNF-α研究较多。它是由活化的单核巨噬细胞产生的一种活性多肽．它不仅参与介导抗肿瘤、免疫调节、炎症反应和组织损伤等病理生理过程，也参与组织损伤的修复和结缔组织代谢的调节。TNF-α在肺纤维化过程中的作用是近年来研究中的热点问题之一，其生物学特性、基因结构功能、临床应用及与疾病的相关性方面的研究都很深入，现将TNF-α的一般情况及其与肺纤维化的关系作一综述。     

放射线治疗对小鼠肾癌肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的:观察放射治疗对BALB/c小鼠肾癌抑制作用及对TNF-α表达的影响.方法:用Renca肾癌细胞制作BALB/c小鼠皮下移植瘤模型,放疗组小鼠在种瘤第12～16天,连续 5d 进行肿瘤局部放射,第28天处死小鼠,取肿瘤组织测量,分析治疗效果.体外培养2×106Renca肾癌细胞,经20Gy X射线单次照射培养24h后,收获细胞.提取细胞和肿瘤组织蛋白,免疫印迹法检测治疗后肿瘤组织和细胞中TNF-α蛋白的表达水平.结果:放射治疗组有效抑制肾癌细胞在BALB/c小鼠体内生长,局部放疗明显增加了肿瘤组织内TNF-α表达水平,体外培养的Renca肾癌细胞经放射线处理后TNF-α表达明显上调.结论:放射线能够促进肿瘤细胞分泌TNF-α,并且与肿瘤局部产生的TNF-α表达上调密切相关.     

癫痫患儿外周血单个核细胞分泌肿瘤坏死因子α及血清肿瘤坏死因子α的研究

目的 探讨癫痫与肿瘤坏死因子α(TNFα)的关系。方法 用放射免疫分析法(RIA)测定60例癫痫患儿(其中23例服用苯巴比妥，13例服用卡马西平，24例未服药)及20例对照组的外周血单个核细胞(PBMC)分泌的TNFα及血清TNFα。结果 癫痫患儿上述两项指标分别显著高于对照组。进一步研究发现，两项指标于各组癫痫患儿之间无显著性差异，且与癫痫患儿病程、脑电图是否有痫样放电无关。结论 癫痫患儿免疫调节网络处于失衡状态。细胞因子的改变可能是癫痫免疫功能损害的细胞分子学机制之一。     

放射线诱导内皮细胞分泌肿瘤坏死因子α的实验研究

目的 :观察照射后内皮细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF α)及地塞米松的影响。方法 :人脐静脉内皮细胞株ECV - 30 4细胞加或不加地塞米松 (10 μg/ml)γ射线照射后 ,取上清液以MTT法检测TNF α的细胞毒活性。结果 :内皮细胞受照射后 ,其培养液中可检测到TNF α的细胞毒活性增加 ,在 5Gy时活性最高〔(2 74.3± 2 .3)u/m〕 ,地塞米松存在时TNF α活性降低〔分别为 (3.6± 1.5 )u/ml,(2 74.3± 2 .3)u/ml,P<0 .0 1〕。结论 :γ射线可诱导内皮细胞分泌TNF α ,并被地塞米松抑制。     

肿瘤坏死因子单克隆抗体对小鼠肺炎链球菌感染的影响

给小鼠吸入肺炎链球菌同时在尾静脉注射肿瘤坏死因子单克隆抗体，动态检测感染后２４小时内血浆，气管肺泡灌洗液肿瘤坏死因子含量和肺病理的变化，发现肿瘤坏死因子单克隆抗体显著抑制血浆，气管肺泡灌洗液肿瘤坏死因子的升高，抑制白细胞降集，附壁，减轻白细胞对肺细胞的浸润，阻止肺实变的发生。肺炎链球菌及其产物可诱发肿瘤坏死因子释放，肿瘤坏死因子可能是肺炎链球菌感染组织损伤的主要介质。     

胆道梗阻及胆肠内引渡以对肿瘤坏死因子α影响的实验研究

以大鼠胆总管结扎及胆肠内引渡以模型，观察胆道酬金阻及早期胆肠内引渡以后血清肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）、肝功能及肝脏形态学的改变。结果显示：胆总管结扎后血清ＴＮＦα、ＧＰＴ值及肝组织羟脯氨酸含量升高，血清白蛋白水平及降低；早期胆肠内引流后血清ＮＴＦ０－α、ＧＰＴ值及肝组织羟脯氨酸含量下降，血清白蛋白水平升高；血清ＴＮＦ－α含量与血清ＧＰＴ、白蛋白及肝组织羟脯氨酸含量呈相关关系。结果表明ＴＮＦ－α与     

肿瘤坏死因子α对监测早产的意义

肿瘤坏死因子α对监测早产的意义潘颖张文颖李楷彬杨宝霞感染为早产的重要原因之一，而感染时肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）产生增加。我们通过检测ＴＮＦα的浓度，来说明其在早产监测中的意义。一、对象和方法１．对象：足月分娩孕妇（活跃期）４２例，年龄１７～３５岁，...     

肿瘤坏死因子α对正常大鼠胰岛素敏感性的影响

目的：探讨注射肿瘤坏死因子α(TNFα)对正常大鼠胰岛素敏感性及其相关状态的影响。方法：给正常大鼠注射小剂量TNFα后,以葡萄糖-胰岛素耐量试验(G-InsTT)检测其胰岛素敏感性的变化,并观察血浆胰高血糖素(GC)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、血脂水平及组织中糖原、三酰甘油(TG)含量的变化情况。结果：发现TNFα可致正常大鼠出现高胰岛素血症,G-InsTT的K值下降,血浆GC,ACTH和血脂水平升高,肝脏和红色股四头肌糖原含量减少,肝脏TG含量升高。结论：TNFα可致正常大鼠发生明显的胰岛素抵抗(IR),这可能与血中胰岛素拮抗激素水平升高或糖代谢、脂代谢紊乱有关。     

肿瘤坏死因子-α与糖尿病心肌病关系的实验研究

目的通过建立糖尿病模型,观察糖尿病心肌的病理及超微结构改变,并测定心肌肿瘤坏死因子的表达,探讨TNF-α在糖尿病心肌病发生发展中的炎症机制。方法Wistar大鼠实验组用1%的链脲佐菌素溶液腹腔注射制作糖尿病模型,对照组用等量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液腹腔注射。实验前及注射STZ72h后各组大鼠测体重、尿糖、尾静脉采血测血糖、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇。两组标准喂养8w后测体重,快取左心室心肌,制作切片分别行组织学观察心肌病理变化和电镜下观察心肌超微结构。结果实验组糖尿病大鼠光镜下可见明显的心肌纤维排列紊乱,心肌细胞肥大等,且冠状动脉分支无异常改变,电镜下可见心肌肌原纤维稀疏、断裂、走向紊乱,线粒体增多、肿大变性,嵴断裂、稀疏,糖原沉积,间质胶原增生等。结论糖尿病大鼠心肌中TNF-α的表达明显高于对照组,提示TNF-α可能参与了糖尿病心肌病的发生发展。